Name: four-color fluorescence immunohistochemistry of t-cell subpopulations in archival formalin-fixed, paraffin-embedded human oropharyngeal squamous cell carcinoma samples
Uploaded: 2017-07-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinom

Simone Punt a été soutenu par la licence UL2010-4801 de la Dutch Cancer Society. Nous tenons à remercier tous les coauteurs de l&#39;article original selon lequel ce protocole JoVE est basé sur: Emilie A. Dronkers, Marij JP Welters, Renske Goedemans, Senada Koljenović, Elisabeth Bloemena, Peter JF Snijders, Arko Gorter et Sjoerd van Der Burg.

Les échantillons de patients ont été traités conformément aux directives éthiques médicales décrites dans le Code de conduite pour une utilisation secondaire appropriée du tissu humain de la Fédération néerlandaise des sociétés scientifiques biomédicales (www.federa.org). 1. Préparez des diapositives <ol><li> Obtenir des tissus réséqués (tout type de tissu) d&#39;un département de pathologie après avoir obtenu l&#39;autorisation d&#39;un comité d&#39;éthique médical...

<ol>
	<li>Westra, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+changing+face+of+head+and+neck+cancer+in+the+21st+century:+the+impact+of+HPV+on+the+epidemiology+and+pathology+of+oral+cancer.">The changing face of head and neck cancer in the 21st century: the impact of HPV on the epidemiology and pathology of oral cancer.</a> Head Neck Pathol. 3 (1), 78-81 (2009).</li><li>Rietbergen, M. 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Association of CD3+CD56+ cells with platinum resistance.</a> Gynecol Oncol. 106 (1), 75-81 (2007).</li><li>Gasparoto, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patients+with+oral+squamous+cell+carcinoma+are+characterized+by+increased+frequency+of+suppressive+regulatory+T+cells+in+the+blood+and+tumor+microenvironment.">Patients with oral squamous cell carcinoma are characterized by increased frequency of suppressive regulatory T cells in the blood and tumor microenvironment.</a> Cancer Immunol Immunother. 59 (6), 819-828 (2010).</li><li>Jordanova, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+leukocyte+antigen+class+I,+MHC+class+I+chain-related+molecule+A,+and+CD8+/regulatory+T-cell+ratio:+which+variable+determines+survival+of+cervical+cancer+patients?.">Human leukocyte antigen class I, MHC class I chain-related molecule A, and CD8+/regulatory T-cell ratio: which variable determines survival of cervical cancer patients?.</a> Clin Cancer Res. 14 (7), 2028-2035 (2008).</li><li>van Esch, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+classical+and+nonclassical+HLA+expression+in+recurrent+and+progressive+HPV-induced+usual+vulvar+intraepithelial+neoplasia+and+implications+for+immunotherapy.">Alterations in classical and nonclassical HLA expression in recurrent and progressive HPV-induced usual vulvar intraepithelial neoplasia and implications for immunotherapy.</a> Int J Cancer. 135 (4), 830-842 (2014).</li><li>Heeren, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+effect+of+different+PD-L1+expression+patterns+in+squamous+cell+carcinoma+and+adenocarcinoma+of+the+cervix.">Prognostic effect of different PD-L1 expression patterns in squamous cell carcinoma and adenocarcinoma of the cervix.</a> Mod Pathol. 29 (7), 753-763 (2016).</li><li>Punt, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+beneficial+tumor+microenvironment+in+oropharyngeal+squamous+cell+carcinoma+is+characterized+by+a+high+T+cell+and+low+IL-17(+)+cell+frequency.">A beneficial tumor microenvironment in oropharyngeal squamous cell carcinoma is characterized by a high T cell and low IL-17(+) cell frequency.</a> Cancer Immunol Immunother. 65 (4), 393-403 (2016).</li><li>Kirkwood, B. R., Sterne, J. A. 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G., Klein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Survival Analysis: A Self-Learning Text. , (2005).</li><li>Fabre, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Tumor+Microenvironment:+The+Protumor+Effects+of+IL-17+Related+to+Cancer+Type.">Targeting the Tumor Microenvironment: The Protumor Effects of IL-17 Related to Cancer Type.</a> Int J Mol Sci. 17 (9), (2016).</li><li>Feng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multispectral+imaging+of+formalin-fixed+tissue+predicts+ability+to+generate+tumor-infiltrating+lymphocytes+from+melanoma.">Multispectral imaging of formalin-fixed tissue predicts ability to generate tumor-infiltrating lymphocytes from melanoma.</a> J Immunother Cancer. 3 (47), (2015).</li></ol>

Pour le protocole décrit, l&#39;une des étapes les plus critiques est de déterminer la dilution correcte des anticorps primaires utilisés. La dilution des anticorps secondaires marqués était de 1: 200, comme recommandé par le fabricant de ces anticorps spécifiques à l&#39;Alexa. La dilution des anticorps primaires devrait ensuite être déterminée par une dilution en série, de préférence en utilisant deux échantillons différents du type de tissu souhaité (dans ce cas, OPSCC). La dilution de travail optim...

Les carcinomes à cellules squameuses opharyngées (OPSCC) sont un groupe hétérogène de cancers des cellules squameuses originaires de l&#39;oropharynx. Les facteurs de risque pour l&#39;OPSCC comprennent l&#39;infection par le papillomavirus humain (VPH) et l&#39;alcool et le tabagisme 1 , 2 . Le rôle de la réponse immunitaire et la façon de l&#39;utiliser dans un contexte clinique commencent à être explorés. Le micro-environnement de la tumeur est infiltré par des cellules immunitaires qui sont attirées par le site du cancer. Bien qu&#39;une fréquence cytotoxique élevée de lymphocytes T CD8 + ait été corrélée avec une survie améliorée chez les patients OPSCC 3 , le rôle d&#39;autres sous-ensembles de cellules T, y compris les cellules Treg et Th17, n&#39;est toujours pas clair 4 . Alors que les cellules Th1 et Th17 sont censées aider à la réponse immunitaire ciblant les cellules tumorales, les Treg sont bien connus pour leurs capacités à supprimer l&#39;activité d&#39;autres lymphocytes T 5 . Cependant, la présence de TOn a constaté que les regs étaient corrélés avec des réponses favorables et défavorables dans différents types de tumeurs 6 . Étant donné que toutes les cellules immunitaires présentes dans le sang infiltrent la tumeur dans la même mesure, l&#39;étude du micro-environnement local de la tumeur fournit la mesure la plus fiable de la réponse immunitaire dirigée contre la tumeur. L&#39;objectif de cette étude est de déterminer la corrélation entre les nombres et les types de cellules immunitaires et les résultats cliniques. Nous avons utilisé l&#39;imagerie IHC à fluorescence à quatre couleurs pour analyser le nombre et la localisation de diverses sous-populations de cellules T dans l&#39;OPSCC humain. Nous nous sommes concentrés sur les lymphocytes T totaux (CD3 + ), les cellules Th17 et les Tregs FoxP3 + immunosuppressifs, dont la voie de différenciation est étroitement liée aux cellules Th17. Les cellules Th17 se caractérisent par la combinaison de CD3 et d&#39;IL-17. La cytokine IL-17 peut également être produite par des cellules non T 7 . Nous avons déterminé la distribution de l&#39;intra-epitLes lymphocytes T de l&#39;hélium et du stromal, les cellules non T Tregs, Th17 et IL-17 + dans une grande série de cas OPSCC et ont analysé les corrélations avec la survie du patient. La fluorescence multicouche IHC a été utilisée pour identifier l&#39;expression de CD3, Foxp3 et IL-17, en combinaison avec un contre-tassement DAPI. Ce dosage a permis d&#39;identifier facilement et clairement les cellules tumorales (en utilisant la coloration nucléaire DAPI) et les populations de cellules T infiltrantes (en utilisant une combinaison de marqueurs différents). Après la préparation et la coloration des échantillons, un microscope fluorescent et un logiciel d&#39;imagerie ont été utilisés pour séparer les différentes couleurs fluorescentes utilisées et pour déterminer le nombre et le type de cellules présentes à la fois dans l&#39;épithélium tumoral et dans le stroma associé à la tumeur. Un autre essai pour quantifier et phénotype des populations de cellules immunitaires est l&#39;analyse de cytométrie de flux, ou la cytométrie par analyse de temps de vol (CyTOF), d&#39;échantillons de tumeurs ou de périphériques ( c.-à-d., Le sang ou l&#39;ascite). En utilisant ceciTechnique, toutes les informations sur la localisation et la répartition relative des différents types de cellules sont perdues. L&#39;utilisation et l&#39;analyse des échantillons périphériques ne fournissent pas non plus d&#39;informations sur les cellules susceptibles d&#39;infiltrer le micro-environnement de la tumeur. Les analyses de cellules immunitaires de sang et d&#39;ascite ont été montrées pour ne pas refléter le phénotype et la fréquence d&#39;infiltration de cellules immunitaires du tissu tumoral 8 , 9 . Une autre alternative est l&#39;utilisation de microscopie à champ brillant. Un avantage de cette technique par rapport à l&#39;imagerie par fluorescence est l&#39;absence d&#39;autofluorescence tissulaire. Bien que certains échantillons contiennent plus d&#39;autofluorescence, en particulier les érythrocytes, mais aussi d&#39;autres types de cellules, y compris les granulocytes neutrophiles, ces zones peuvent facilement être éliminées lors de l&#39;analyse de presque tous les échantillons. L&#39;immunofluorescence offre l&#39;avantage d&#39;analyser des marqueurs multiples dans un échantillon en utilisant un panel de fluorescence cibléeNt longueur d&#39;onde. Ceci est actuellement impossible dans la même mesure pour le microscope à champ brillant en raison de l&#39;absence d&#39;un nombre suffisant d&#39;étiquettes et d&#39;isotypes d&#39;anticorps disponibles dans le commerce pour un antigène particulier. La technique de fluorescence multicouche IHC décrite ici a été utilisée dans de nombreux types de cancer différents et des combinaisons d&#39;anticorps pour étudier différentes populations de cellules immunitaires, ainsi que des molécules exprimées par des cellules tumorales, telles que des antigènes de leucocytes humains (HLA) et PD-L1 10 , 11 , 12 . Le protocole a été établi et validé à l&#39;aide de différents types d&#39;échantillons et d&#39;anticorps.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1379">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Pathos Delta Ultra Rapid Tissue Processor</td>
			<td style="width:167px;">Milestone and Histostar</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td style="width:696px;">Automated tissue processor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Histostar</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td style="width:696px;">Tissue block embedding machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Formaldehyde</td>
			<td style="width:167px;">Baker</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Xylol</td>
			<td style="width:167px;">Merck</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Ethanol</td>
			<td style="width:167px;">Merck</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">milliQ water</td>
			<td style="width:167px;">Elaga Purelab Chorus</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Paraffin wax/Paraclean</td>
			<td style="width:167px;">Klinipath</td>
			<td style="width:143px;">5079A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Microtome tissue holder&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Leica</td>
			<td style="width:143px;">RM225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flex IHC side</td>
			<td style="width:167px;">Dako</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td>Tissue slide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Tris</td>
			<td style="width:167px;">Merk-Milipore</td>
			<td style="width:143px;">1,083,821,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">EDTA</td>
			<td style="width:167px;">Baker</td>
			<td style="width:143px;">1073</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">PBS</td>
			<td style="width:167px;">Bio-Rad</td>
			<td>BUF036A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">BSA</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:143px;">A9647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Rabbit anti-CD3</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:143px;">ab828</td>
			<td>Titrate required antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Mouse IgG1 anti-FoxP3</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:143px;">ab20034</td>
			<td>Titrate required antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Goat IgG anti-IL-17</td>
			<td style="width:167px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:143px;">AF-317-NA</td>
			<td>Titrate required antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Rabbit Ig isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td>ab27472</td>
			<td>Use at same final concentration as anti-CD3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Mouse IgG1 isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td>ab91353</td>
			<td>Use at same final concentration as anti-FoxP3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Goat IgG isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">02-6202</td>
			<td>Use at same final concentration as anti-IL-17</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Donkey anti-rabbit IgG A546</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">A10040</td>
			<td>Dilute 1:200 in 1% BSA/PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Donkey anti-mouse-A647</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">A31571</td>
			<td>Dilute 1:200 in 1% BSA/PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Donkey anti-goat IgG A488</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">A11055</td>
			<td>Dilute 1:200 in 1% BSA/PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">VectaShield containing DAPI</td>
			<td style="width:167px;">Vector Laboratories</td>
			<td style="width:143px;">H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LSM700 confocal laser scanning microscope&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LCI Plan-Neofluar 25x/0.8 Imm Korr DIC M27 objective</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td>420852-9972-720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LSM Zen Software</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td>version 2009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LSM Image Browser</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td style="width:143px;">version 4.2.0.121</td>
			<td>Available to download at www.zeiss.com/microscopy/int/website/downloads/lsm-image-browser.html.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">SPSS</td>
			<td style="width:167px;">IBM Corp.</td>
			<td style="width:143px;">version 20.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">ImageJ</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:143px;">version 1.50i</td>
			<td>Available to download at http://rsb.info.nih.gov/ij.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

four-color fluorescence immunohistochemistry of t-cell subpopulations in archival formalin-fixed, paraffin-embedded human oropharyngeal squamous cell carcinoma samples

La technique d&#39;immunohistochimie à fluorescence à quatre couleurs (IHC) est une méthode pour quantifier les populations cellulaires d&#39;intérêt tout en tenant compte de leur répartition relative et de leur localisation dans le tissu. Cette technique a été largement appliquée pour étudier l&#39;infiltration immunitaire dans divers types de tumeurs. Le microenvironnement tumoral est infiltré par des cellules immunitaires attirées par le site de la tumeur. On a constaté que différentes populations de cellules immunitaires jouent différents rôles dans le microenvironnement de la tumeur et ont un impact différent sur le résultat de la maladie. Ce manuscrit décrit l&#39;utilisation de la fluorescence multiparamétrique IHC sur le carcinome épidermoïde oropharyngé (OPSCC) à titre d&#39;exemple. Cette technique peut être étendue à d&#39;autres échantillons de tissus et types d&#39;intérêt cellulaire. Dans l&#39;étude présentée, nous avons analysé le compartiment intra-épithélial et stromal d&#39;une grande cohorte OPSCC (n = 162). Nous nous sommes concentrés sur les lymphocytes T complets (CD3 + ), le régulateur immunosuppresseur(Tregs, c&#39;est-à-dire FoxP3 + ) et T helper 17 (Th17) ( c&#39;est -à- dire IL-17 + CD3 + ) en utilisant un contre-cutané nucléaire pour distinguer l&#39;épithélium tumoral du stroma. Un nombre élevé de cellules T s&#39;est révélé être corrélée avec une survie sans maladie améliorée chez les patients avec un faible nombre de lymphocytes non-T IL-17 + intratumoraux. Cela suggère que les lymphocytes non-T IL-17 + peuvent être corrélés avec une mauvaise réponse immunitaire dans l&#39;OPSCC, ce qui correspond à la corrélation décrite entre IL-17 et une survie médiocre chez les patients cancéreux. Actuellement, de nouvelles techniques IHC de fluorescence multiparamètres sont développées en utilisant jusqu&#39;à 7 différents fluorochromes et permettront une caractérisation et une localisation plus précises des cellules immunitaires dans le microenvironnement tumoral.

Une série d&#39;échantillons de tumeurs de prétraitement FFPE obtenues à partir de tumeurs oropharyngées primaires diagnostiquées dans le Centre médical de l&#39;Université de Leiden, à Leiden, aux Pays-Bas entre 1970 et 2011, sélectionnées comme décrit précédemment (n = 162), ont été colorées selon le protocole décrit 13 . Une ou quatre images aléatoires de chaque diapositive ont été analysées ( figure 1 ). Cert...

Watch this Scientific Journal Video about Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinom

Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

L&#39;immunohistochimie à fluorescence multiparamètre peut être utilisée pour évaluer le nombre, la répartition relative et la localisation des populations de cellules immunitaires dans le micro-environnement de la tumeur. Ce manuscrit décrit l&#39;utilisation de cette technique pour analyser les sous-populations de cellules T dans le cancer de l&#39;oropharynx.

Immunohistochimie à fluorescence à quatre couleurs des sous-populations de lymphocytes T dans des échantillons de carcinome épidermique humain ou opharyngé humain fixé à la formaline, à base de formaline

The four-color fluorescence immunohistochemistry (IHC) technique is a method to quantify cell populations of interest while taking into account their ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Un modèle pour périneural Invasion en tête et du cou Carcinome épidermoïde

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, ...

Recherche

Recherche en cancérologie

Therapy Testing in a Spheroid-based 3D Cell Culture Model for Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Vérifier dans un modèle de Culture cellulaire 3D basé sur l’ellipsoïde tête et cou, carcinome épidermoïde de la thérapie

Current treatment options for advanced and recurrent head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) enclose radiation and chemo-radiation approaches with ...

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrication de langue matrice extracellulaire et Reconstitution de langue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

In order to construct an effective and realistic model for tongue squamous cell carcinoma (TSCC) in vitro, the methods were created to produce ...

Determination of Protein Expression Level in Cultured Cells by Immunocytochemistry on Paraffin-embedded Cell Blocks

Détermination du niveau d’Expression de protéine dans des cellules cultivées par immunocytochimie sur des blocs de paraffine cellulaire

Immunofluorescent staining is currently the method of choice for determination of protein expression levels in cell-culture systems when morphological ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

Staining élastique sur les diapositives intégrées à la paraffine du tissu du cancer gastrique pT3N0M0

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Automated Multiplex Immunofluorescence Panel for Immuno-oncology Studies on Formalin-fixed Carcinoma Tissue Specimens

Automated panneau Multiplex Immunofluorescence pour des études sur des échantillons de tissus fixés au formol carcinome Immuno-oncologie

Continued developments in immuno-oncology require an increased understanding of the mechanisms of cancer immunology. The immunoprofiling analysis of ...

Evaluation of Biomarkers in Glioma by Immunohistochemistry on Paraffin-Embedded 3D Glioma Neurosphere Cultures

Évaluation de biomarqueurs dans les gliomes par immunohistochimie sur la paraffine 3D gliome Neurosphère Cultures

Analysis of protein expression in glioma is relevant for several aspects in the study of its pathology. Numerous proteins have been described as ...

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

Inoculation de cellules de carcinome épidermoïde chez les souris pour tumeur immunitaire profilage et évaluation de réponse traitement suffit

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Multidimensional Coculture System to Model Lung Squamous Carcinoma Progression

Système de coculture multidimensionnel pour modéliser la progression du carcinome pulmonaire

Tumor-stroma interactions play a critical role in the development of lung squamous carcinoma (LUSC). However, understanding how these dynamic interactions ...

Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

Élargir la compréhension du microenvironnement tumoral à l’aide de l’imagerie par spectrométrie de masse d’échantillons de tissus fixés au formol et incorporés à la paraffine

Advances in immune-based therapies have revolutionized cancer treatment and research. This has triggered growing demand for the characterization of the ...