Name: four-color fluorescence immunohistochemistry of t-cell subpopulations in archival formalin-fixed, paraffin-embedded human oropharyngeal squamous cell carcinoma samples
Uploaded: 2017-07-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinom

सिमोन पंट को डच कैंसर सोसायटी से UL2010-4801 अनुदान का समर्थन किया गया था। हम मूल पत्र के सभी सह-लेखक को धन्यवाद देना चाहेंगे कि यह जॉव प्रोटोकॉल निम्न पर आधारित है: एमिली ए। द्रोणकर, मारीज जेपी वेल्टर, रीन्सेक गोमेडेन्स, सेनदा कोलजेनोविक, एलिजाबेथ ब्लोमेना, पीटर जे एफ स्निज्डर्स, अरको गॉर्टर, और एसजोर्ड वैन डेर बर्ग

रोगी के नमूनों को डच फेडरेशन ऑफ बायोमेडिकल साइंटिक सोसायटीज (www.federa.org) के मानव टिशू के उचित माध्यमिक प्रयोग के लिए आचार संहिता में वर्णित चिकित्सा नैतिक दिशानिर्देशों के अनुसार संभाला गया। 1. स?...

<ol>
	<li>Westra, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+changing+face+of+head+and+neck+cancer+in+the+21st+century:+the+impact+of+HPV+on+the+epidemiology+and+pathology+of+oral+cancer.">The changing face of head and neck cancer in the 21st century: the impact of HPV on the epidemiology and pathology of oral cancer.</a> Head Neck Pathol. 3 (1), 78-81 (2009).</li><li>Rietbergen, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+papillomavirus+detection+and+comorbidity:+critical+issues+in+selection+of+patients+with+oropharyngeal+cancer+for+treatment+De-escalation+trials.">Human papillomavirus detection and comorbidity: critical issues in selection of patients with oropharyngeal cancer for treatment De-escalation trials.</a> Ann Oncol. 24 (11), 2740-2745 (2013).</li><li>Wallis, S. P., Stafford, N. D., Greenman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+relevance+of+immune+parameters+in+the+tumor+microenvironment+of+head+and+neck+cancers.">Clinical relevance of immune parameters in the tumor microenvironment of head and neck cancers.</a> Head Neck. 37 (3), 449-459 (2015).</li><li>Ye, J., Livergood, R. S., Peng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+and+regulation+of+human+Th17+cells+in+tumor+immunity.">The role and regulation of human Th17 cells in tumor immunity.</a> Am J Pathol. 182 (1), 10-20 (2013).</li><li>Amedei, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+analysis+of+pancreatic+cancer-infiltrating+T+lymphocytes+reveals+that+ENO-specific+Tregs+accumulate+in+tumor+tissue+and+inhibit+Th1/Th17+effector+cell+functions.">Ex vivo analysis of pancreatic cancer-infiltrating T lymphocytes reveals that ENO-specific Tregs accumulate in tumor tissue and inhibit Th1/Th17 effector cell functions.</a> Cancer Immunol Immunother. 62 (7), 1249-1260 (2013).</li><li>Whiteside, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+are+regulatory+T+cells+(Treg)+regulating+in+cancer+and+why?.">What are regulatory T cells (Treg) regulating in cancer and why?.</a> Semin Cancer Biol. 22 (4), 327-334 (2012).</li><li>Punt, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angels+and+demons:+Th17+cells+represent+a+beneficial+response,+while+neutrophil+IL-17+is+associated+with+poor+prognosis+in+squamous+cervical+cancer.">Angels and demons: Th17 cells represent a beneficial response, while neutrophil IL-17 is associated with poor prognosis in squamous cervical cancer.</a> Oncoimmunology. 4 (1), e984539 (2015).</li><li>Bamias, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Significant+differences+of+lymphocytes+isolated+from+ascites+of+patients+with+ovarian+cancer+compared+to+blood+and+tumor+lymphocytes.+Association+of+CD3+CD56++cells+with+platinum+resistance.">Significant differences of lymphocytes isolated from ascites of patients with ovarian cancer compared to blood and tumor lymphocytes. Association of CD3+CD56+ cells with platinum resistance.</a> Gynecol Oncol. 106 (1), 75-81 (2007).</li><li>Gasparoto, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patients+with+oral+squamous+cell+carcinoma+are+characterized+by+increased+frequency+of+suppressive+regulatory+T+cells+in+the+blood+and+tumor+microenvironment.">Patients with oral squamous cell carcinoma are characterized by increased frequency of suppressive regulatory T cells in the blood and tumor microenvironment.</a> Cancer Immunol Immunother. 59 (6), 819-828 (2010).</li><li>Jordanova, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+leukocyte+antigen+class+I,+MHC+class+I+chain-related+molecule+A,+and+CD8+/regulatory+T-cell+ratio:+which+variable+determines+survival+of+cervical+cancer+patients?.">Human leukocyte antigen class I, MHC class I chain-related molecule A, and CD8+/regulatory T-cell ratio: which variable determines survival of cervical cancer patients?.</a> Clin Cancer Res. 14 (7), 2028-2035 (2008).</li><li>van Esch, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+classical+and+nonclassical+HLA+expression+in+recurrent+and+progressive+HPV-induced+usual+vulvar+intraepithelial+neoplasia+and+implications+for+immunotherapy.">Alterations in classical and nonclassical HLA expression in recurrent and progressive HPV-induced usual vulvar intraepithelial neoplasia and implications for immunotherapy.</a> Int J Cancer. 135 (4), 830-842 (2014).</li><li>Heeren, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+effect+of+different+PD-L1+expression+patterns+in+squamous+cell+carcinoma+and+adenocarcinoma+of+the+cervix.">Prognostic effect of different PD-L1 expression patterns in squamous cell carcinoma and adenocarcinoma of the cervix.</a> Mod Pathol. 29 (7), 753-763 (2016).</li><li>Punt, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+beneficial+tumor+microenvironment+in+oropharyngeal+squamous+cell+carcinoma+is+characterized+by+a+high+T+cell+and+low+IL-17(+)+cell+frequency.">A beneficial tumor microenvironment in oropharyngeal squamous cell carcinoma is characterized by a high T cell and low IL-17(+) cell frequency.</a> Cancer Immunol Immunother. 65 (4), 393-403 (2016).</li><li>Kirkwood, B. R., Sterne, J. A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Essential Medical Statistics. , (2003).</li><li>Kleinbaum, D. G., Klein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Survival Analysis: A Self-Learning Text. , (2005).</li><li>Fabre, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Tumor+Microenvironment:+The+Protumor+Effects+of+IL-17+Related+to+Cancer+Type.">Targeting the Tumor Microenvironment: The Protumor Effects of IL-17 Related to Cancer Type.</a> Int J Mol Sci. 17 (9), (2016).</li><li>Feng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multispectral+imaging+of+formalin-fixed+tissue+predicts+ability+to+generate+tumor-infiltrating+lymphocytes+from+melanoma.">Multispectral imaging of formalin-fixed tissue predicts ability to generate tumor-infiltrating lymphocytes from melanoma.</a> J Immunother Cancer. 3 (47), (2015).</li></ol>

प्रोटोकॉल के लिए वर्णित है, सबसे महत्वपूर्ण कदमों में से एक में इस्तेमाल किया गया प्राथमिक एंटीबॉडी का सही कमजोर पड़ने का निर्धारण करना है। इन विशिष्ट एलेक्सा-लेबल एंटीबॉडी के निर्माता द्वारा सुझाए ?...

ऑरोफरीनजील स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा (ओपीएससीसी) ओरोफरीनक्स में होने वाली स्क्वैमस सेल कैंसर के एक विषम समूह हैं। ओपीएससीसी के लिए जोखिम कारक में मानव पपिलोमावायरस (एचपीवी) संक्रमण और शराब और तंबाकू का उपयोग 1 , 2 शामिल हैं । प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की भूमिका और यह कैसे एक नैदानिक ​​सेटिंग में उपयोग करने के लिए बस का पता लगाया जा रहा है। ट्यूमर माइक्रोएनेरमेंट, प्रतिरक्षा कोशिकाओं द्वारा घुसपैठ की जाती है जो कैंसर साइट से आकर्षित होते हैं। हालांकि एक उच्च CD8 + साइटोटोक्सिक टी सेल आवृत्ति OPSCC रोगियों 3 में बेहतर अस्तित्व के साथ जोड़ा गया है Tregs और Th17 कोशिकाओं सहित अन्य टी सेल सबसेट,, की भूमिका अभी स्पष्ट नहीं 4 है। जबकि टी 1 और थिए 17 कोशिकाओं को ट्यूमर कोशिकाओं को लक्षित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में सहायता करने के लिए माना जाता है, Tregs अन्य टी कोशिकाओं 5 की गतिविधि को दबाने के लिए उनकी क्षमताओं के लिए अच्छी तरह से जाना जाता है। हालांकि, टी की उपस्थितिविभिन्न ट्यूमर प्रकार 6 में अनुकूल और प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं के साथ सहसंबंध होना पाया गया है चूंकि खून में मौजूद सभी प्रतिरक्षा कोशिकाओं में ट्यूमर में घुसपैठ नहीं होती है, इसलिए स्थानीय ट्यूमर माइक्रोएनरिवेशन का अध्ययन करते हुए ट्यूमर के खिलाफ प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का सबसे विश्वसनीय उपाय प्रदान करता है। इस अध्ययन का उद्देश्य प्रतिरक्षा कोशिकाओं की संख्याओं और प्रकारों और नैदानिक ​​परिणामों के बीच के संबंधों को निर्धारित करना है। मानव OPSCC में विभिन्न टी-सेल उप-जनसंख्याओं की संख्या और स्थानीयकरण का विश्लेषण करने के लिए हमने चार-रंग प्रतिदीप्ति आईएचसी इमेजिंग का इस्तेमाल किया। हम कुल टी लिम्फोसाइट्स (CD3 +), Th17 कोशिकाओं, और प्रतिरक्षा को दबाने वाली Foxp3 + Tregs, जिसका भेदभाव मार्ग बारीकी Th17 कोशिकाओं से संबंधित है पर जोर दिया। Th17 कोशिकाओं को सीडी 3 और आईएल -17 के संयोजन के अनुसार दिखाया गया है। गैर-टी कोशिकाओं 7 द्वारा साइटोकिन आईएल -17 का भी उत्पादन किया जा सकता है। हमने इंट्रा-एपिट का वितरण निर्धारित किया हैओएलएससीसी मामलों की एक बड़ी श्रृंखला में हेलियल और स्ट्रॉमल टी कोशिकाएं, टे्रग्स, थिय 17 और आईएल -17 + गैर-टी कोशिकाएं और रोगी के अस्तित्व के साथ सहसंबंधों का विश्लेषण किया। मल्टीकोलोर फ्लोरोसेंस आईएचसी का उपयोग सीडी 3, फॉक्सपॉ, और आईएल -17 की अभिव्यक्ति की पहचान करने के लिए किया गया था, जिसमें डीएपीआई काउंटरस्टेन के साथ संयोजन किया गया था। इस परख दोनों ट्यूमर कोशिकाओं (डीएपीआई परमाणु धुंधला होकर) और घुसपैठ कर टी सेल आबादी (विभिन्न मार्करों के संयोजन का उपयोग करके) की आसान और स्पष्ट पहचान के लिए अनुमति दी गई है। नमूना तैयार करने और धुंधला होने के बाद, फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप और इमेजिंग सॉफ्टवेयर का इस्तेमाल विभिन्न फ्लोरोसेंट रंगों को अलग करने के लिए किया गया था और ट्यूमर एपिथेलियम और ट्यूमर से जुड़े स्ट्रोडा दोनों में मौजूद संख्या और प्रकार के कोशिकाओं को निर्धारित करने के लिए उपयोग किया गया था। ट्यूमर या परिधीय नमूनों ( यानी रक्त या जलोदरियों) की उड़ान (सीआईटीओएफ) के विश्लेषण के समय प्रवाह cytometry विश्लेषण या cytometry, प्रतिदीप्ति सेल आबादी का मात्रामान और phenotype करने के लिए एक वैकल्पिक परख है। इसका उपयोग करनातकनीक, विभिन्न सेल प्रकारों के स्थानीयकरण और रिश्तेदार वितरण के बारे में सभी जानकारी खो जाती है। परिधीय नमूनों का उपयोग और विश्लेषण भी जानकारी प्रदान नहीं करता है कि किस कोशिका के ट्यूमर माइक्रोएनेरमेंट को घुसपैठ करने में सक्षम हैं। रक्त और ऊपरी प्रतिरक्षा-कोशिका के विश्लेषण को ट्यूमर के ऊतक 8 , 9 के प्रसूति सेल घुसपैठ के phenotype और आवृत्ति को प्रतिबिंबित नहीं किया गया है। एक अन्य विकल्प उज्ज्वल क्षेत्र माइक्रोस्कोपी का उपयोग होता है प्रतिदीप्ति इमेजिंग पर इस तकनीक का एक फायदा ऊतक autofluorescence की अनुपस्थिति है। हालांकि कुछ नमूनों में अधिक autofluorescence- विशेष रूप से एरिथ्रोसाइट्स होते हैं, लेकिन न्युट्रोफिलिक ग्रैन्यूलोसाइट्स सहित अन्य सेल प्रकार, इन क्षेत्रों को आसानी से लगभग सभी नमूनों के विश्लेषण में हटाया जा सकता है। Immunofluorescence लक्षित प्रतिदीप्ति के एक पैनल का उपयोग करके एक नमूने में कई मार्करों का विश्लेषण करने का लाभ प्रदान करता हैएनटी तरंग दैर्ध्य यह एक विशिष्ट एंटीजन के लिए पर्याप्त मात्रा में लेबलों की कमी और व्यावसायिक रूप से उपलब्ध एंटीबॉडी आइसोटाइप की कमी के कारण उज्ज्वल क्षेत्र माइक्रोस्कोपी के लिए एक ही हद तक वर्तमान में असंभव है। वर्णित बहुरंगा प्रतिदीप्ति आईएचसी तकनीक का उपयोग विभिन्न प्रतिरक्षा सेल आबादी, साथ ही ट्यूमर सेल-व्यक्त किए गए अणुओं जैसे मानव लैकोसाइट एंटीजन (एचएलए) और पीडी-एल 1 10 , 11 , के अध्ययन के लिए कई अलग-अलग कैंसर प्रकारों और एंटीबॉडी संयोजनों में किया गया है । 12 कई विभिन्न प्रकार के नमूनों और एंटीबॉडी का उपयोग करके प्रोटोकॉल स्थापित और मान्य किया गया है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1379">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Pathos Delta Ultra Rapid Tissue Processor</td>
			<td style="width:167px;">Milestone and Histostar</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td style="width:696px;">Automated tissue processor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Histostar</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td style="width:696px;">Tissue block embedding machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Formaldehyde</td>
			<td style="width:167px;">Baker</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Xylol</td>
			<td style="width:167px;">Merck</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Ethanol</td>
			<td style="width:167px;">Merck</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">milliQ water</td>
			<td style="width:167px;">Elaga Purelab Chorus</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Paraffin wax/Paraclean</td>
			<td style="width:167px;">Klinipath</td>
			<td style="width:143px;">5079A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Microtome tissue holder&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Leica</td>
			<td style="width:143px;">RM225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flex IHC side</td>
			<td style="width:167px;">Dako</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td>Tissue slide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Tris</td>
			<td style="width:167px;">Merk-Milipore</td>
			<td style="width:143px;">1,083,821,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">EDTA</td>
			<td style="width:167px;">Baker</td>
			<td style="width:143px;">1073</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">PBS</td>
			<td style="width:167px;">Bio-Rad</td>
			<td>BUF036A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">BSA</td>
			<td style="width:167px;">Sigma</td>
			<td style="width:143px;">A9647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Rabbit anti-CD3</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:143px;">ab828</td>
			<td>Titrate required antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Mouse IgG1 anti-FoxP3</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:143px;">ab20034</td>
			<td>Titrate required antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Goat IgG anti-IL-17</td>
			<td style="width:167px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:143px;">AF-317-NA</td>
			<td>Titrate required antibody dilution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Rabbit Ig isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td>ab27472</td>
			<td>Use at same final concentration as anti-CD3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Mouse IgG1 isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td>ab91353</td>
			<td>Use at same final concentration as anti-FoxP3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Goat IgG isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">02-6202</td>
			<td>Use at same final concentration as anti-IL-17</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Donkey anti-rabbit IgG A546</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">A10040</td>
			<td>Dilute 1:200 in 1% BSA/PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Donkey anti-mouse-A647</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">A31571</td>
			<td>Dilute 1:200 in 1% BSA/PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">Donkey anti-goat IgG A488</td>
			<td style="width:167px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:143px;">A11055</td>
			<td>Dilute 1:200 in 1% BSA/PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">VectaShield containing DAPI</td>
			<td style="width:167px;">Vector Laboratories</td>
			<td style="width:143px;">H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LSM700 confocal laser scanning microscope&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LCI Plan-Neofluar 25x/0.8 Imm Korr DIC M27 objective</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td>420852-9972-720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LSM Zen Software</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td>version 2009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">LSM Image Browser</td>
			<td style="width:167px;">Zeiss</td>
			<td style="width:143px;">version 4.2.0.121</td>
			<td>Available to download at www.zeiss.com/microscopy/int/website/downloads/lsm-image-browser.html.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">SPSS</td>
			<td style="width:167px;">IBM Corp.</td>
			<td style="width:143px;">version 20.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:375px;">ImageJ</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:143px;">version 1.50i</td>
			<td>Available to download at http://rsb.info.nih.gov/ij.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

four-color fluorescence immunohistochemistry of t-cell subpopulations in archival formalin-fixed, paraffin-embedded human oropharyngeal squamous cell carcinoma samples

चार-रंग की प्रतिदीप्ति इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आईएचसी) तकनीक एक ऐसी विधि है जो रुचि के सेल आबादी को मापने के तरीकों को अपने रिश्तेदार वितरण और ऊतक में उनके स्थानीयकरण को ध्यान में रखते हुए। इस तकनीक को विभिन्न ट्यूमर प्रकारों में प्रतिरक्षा घुसपैठ का अध्ययन करने के लिए व्यापक रूप से लागू किया गया है। ट्यूमर माइक्रोएनेरमेंट प्रतिरक्षा कोशिकाओं द्वारा घुसपैठ की जाती है जो ट्यूमर साइट से आकर्षित होते हैं। विभिन्न प्रतिरक्षा सेल आबादी ट्यूमर माइक्रोएनेरमेंट में विभिन्न भूमिकाएं निभाने और रोग के नतीजे पर एक अलग प्रभाव पाने के लिए पाए गए हैं। यह पांडुलिपि एक उदाहरण के रूप में ओरोफरीन्गल स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा (ओपीएससीसी) पर मल्टीपरैमेटर फ्लोरोसेंस आईएचसी के उपयोग का वर्णन करता है। इस तकनीक को अन्य ऊतक नमूनों और सेल प्रकार के ब्याज के लिए बढ़ाया जा सकता है। प्रस्तुत अध्ययन में, हमने एक बड़े ओपीएससी काउहर्ट (एन = 162) के इंटरेपिटेलियल और स्ट्रॉम्मल डिब्बे का विश्लेषण किया। हम कुल टी लिम्फोसाइटों (सीडी 3 + ), इम्युनोस्पॉस्प्रेज़ विनियमन पर केंद्रित थेस्ट्रॉमा से ट्यूमर एपिथेलियम को अलग करने के लिए परमाणु काउंटरस्टेन का इस्तेमाल करते हुए ओरी टी कोशिकाएं (टीग्स; यानी, फॉक्स पी 3 + ), और टी हेल्पर 17 (ते 17) कोशिकाओं ( यानी, आईएल -17 + सीडी 3 + ) इंट्राटमोलॉलिक आईएल -17 + गैर-टी कोशिकाओं की कम संख्या वाले रोगियों में बीमारियों से मुक्त रहने के साथ टी कोशिकाओं की एक बड़ी संख्या में सहसंबद्ध होना पाया गया था। यह पता चलता है कि आईएल -17 + गैर-टी कोशिकाएं ओपीएससीसी में एक खराब प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के साथ सहसंबद्ध हो सकती हैं, जो आईएल -17 और कैंसर के रोगियों में गरीबों के अस्तित्व के बीच वर्णित सहसंबंध के साथ एक समझौता है। वर्तमान में, उपन्यास multiparameter प्रतिदीप्ति आईएचसी तकनीकों 7 अलग fluorochromes तक का उपयोग कर विकसित किया जा रहा है और ट्यूमर microenvironment में प्रतिरक्षा कोशिकाओं के अधिक सटीक लक्षण वर्णन और स्थानीयकरण सक्षम हो जाएगा।

1 9 70 और 2011 के बीच नीदरलैंड के लीडेन विश्वविद्यालय के मेडिकल सेंटर, लीडेन, में निदान प्राथमिक ऑओफरीन्जियल ट्यूमर से प्राप्त एफएफपीई प्रीटाएटमेन्ट ट्यूमर के नमूने, (एन = 162) से पहले वर्णित चुना ग...

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Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

ट्यूमर माइक्रोएन्नेरमेंट में प्रतिदीप्ति प्रतिरक्षा सेल आबादी के नंबर, रिश्तेदार वितरण और स्थानीयकरण का आकलन करने के लिए मल्टीपार्मेटर प्रतिदीप्ति इम्यूनोहिस्टोकेमेस्ट्री का उपयोग किया जा सकता है। यह पांडुलिपि ऑओरोफेरीन्जियल कैंसर में टी-सेल उप-जनसंपर्क का विश्लेषण करने के लिए इस तकनीक के उपयोग का वर्णन करता है।

चार-रंग के प्रतिदीप्ति प्रतिरक्षकों में टी-सेल उप-जनसांख्यिकीय अभिलेखीय फॉर्मलिन-फिक्स्ड, पैराफिन-एम्बेडेड मानव ऑरोफरीन्गल स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा नमूने

The four-color fluorescence immunohistochemistry (IHC) technique is a method to quantify cell populations of interest while taking into account their ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

सिर और गर्दन के स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा में Perineural आक्रमण के लिए एक मॉडल

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, ...

Therapy Testing in a Spheroid-based 3D Cell Culture Model for Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

एक अंडाकार आकृति में चिकित्सा परीक्षण-सिर और गर्दन स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा के लिए 3 डी सेल संस्कृति मॉडल आधारित

Current treatment options for advanced and recurrent head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) enclose radiation and chemo-radiation approaches with ...

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

जीभ Extracellular मैट्रिक्स के निर्माण और जीभ स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा में से पुनर्गठन इन विट्रो

In order to construct an effective and realistic model for tongue squamous cell carcinoma (TSCC) in vitro, the methods were created to produce ...

Determination of Protein Expression Level in Cultured Cells by Immunocytochemistry on Paraffin-embedded Cell Blocks

आयल-एम्बेडेड सेल ब्लॉक्स पर Immunocytochemistry द्वारा कल्चरल सेल में प्रोटीन एक्सप्रेशन लेवल का निर्धारण

Immunofluorescent staining is currently the method of choice for determination of protein expression levels in cell-culture systems when morphological ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

pT3N0M0 गैस्ट्रिक कैंसर ऊतक के पैराफिन-एम्बेडेड स्लाइड पर लोचदार दाग

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Automated Multiplex Immunofluorescence Panel for Immuno-oncology Studies on Formalin-fixed Carcinoma Tissue Specimens

स्वचालित मल्टीप्लेक्स इम्यूनोफ्लोरेसेंस इंयूनो के लिए पैनल-Formalin पर ऑन्कोलॉजी अध्ययन-फिक्स्ड कार्सिनोमा ऊतक नमूनों

Continued developments in immuno-oncology require an increased understanding of the mechanisms of cancer immunology. The immunoprofiling analysis of ...

Evaluation of Biomarkers in Glioma by Immunohistochemistry on Paraffin-Embedded 3D Glioma Neurosphere Cultures

तंत्रिकाबंधार्बुद में Immunohistochemistry द्वारा आयल-एंबेडेड 3d तंत्रिकाबंधार्बुद Neurosphere संस्कृतियों का मूल्यांकन

Analysis of protein expression in glioma is relevant for several aspects in the study of its pathology. Numerous proteins have been described as ...

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

ट्यूमर प्रतिरक्षा Profiling और उपचार प्रतिक्रिया आकलन के लिए चूहों में स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा कोशिकाओं की intramucosal टीका

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Multidimensional Coculture System to Model Lung Squamous Carcinoma Progression

मॉडल फेफड़ों स्क्वैमस कार्सिनोमा प्रगति के लिए बहुआयामी सहसंस्कृति प्रणाली

Tumor-stroma interactions play a critical role in the development of lung squamous carcinoma (LUSC). However, understanding how these dynamic interactions ...

Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

फॉर्मलिन-फिक्स्ड और पैराफिन-एम्बेडेड ऊतक नमूनों के मास स्पेक्ट्रोमेट्री इमेजिंग का उपयोग करके ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट की समझ का विस्तार करना

Advances in immune-based therapies have revolutionized cancer treatment and research. This has triggered growing demand for the characterization of the ...