Name: video tracking protocol to screen deterrent chemistries for honey bees
Uploaded: 2017-06-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить доктора Томаса Кухара за использование программного обеспечения и оборудования для визуального отслеживания. Мы благодарим Джеймса Уилсона и Скотта О&#39;Нила за их техническую помощь.

1. Подготовить сахар-агарозные кубики <ol><li> Взвесьте 8 г сахара и положите в колбу Эрленмейера емкостью 50 мл. </li><li> Заполните колбу Эрленмейера 20 мл деионизированной воды. Растворите сахар, закрутив колбу. </li><li> Взвесьте 170 мг агарозы и добавьте ее в раствор сахара. </li><li> Нагрейте раствор ?...

<ol>
	<li>Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissi&#232;re, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+valuation+of+the+vulnerability+of+world+agriculture+confronted+with+pollinator+decline.">Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline.</a> Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).</li><li>van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+historical+review+of+managed+honey+bee+populations+in+Europe+and+the+United+States+and+the+factors+that+may+affect+them.">A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and the factors that may affect them.</a> J Invertebr Pathol. 103, S80-S95 (2010).</li><li>Aizen, M. A., Harder, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Global+Stock+of+Domesticated+Honey+Bees+Is+Growing+Slower+Than+Agricultural+Demand+for+Pollination.">The Global Stock of Domesticated Honey Bees Is Growing Slower Than Agricultural Demand for Pollination.</a> Current Biol. 19 (11), 915-918 (2009).</li><li>Smith, K. M., Loh, E. H., Rostal, M. K., Zambrana-torrelio, C. M., Mendiola, L., Daszak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogens,+Pests,+and+Economics+Drivers+of+Honey+Bee+Colony+Declines+and+Losses.">Pathogens, Pests, and Economics Drivers of Honey Bee Colony Declines and Losses.</a> Ecohealth. 10, 434-445 (2014).</li><li>Mullin, C. A., Frazier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Levels+of+Miticides+and+Agrochemicals+in+North+American+Apiaries:+Implications+for+Honey+Bee+Health.">High Levels of Miticides and Agrochemicals in North American Apiaries: Implications for Honey Bee Health.</a> PLoS ONE. 5 (3), (2010).</li><li>Li, Y., Kelley, R. A., Anderson, T. D., Lydy, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+comparison+of+two+multi-residue+methods+for+the+analysis+of+select+pesticides+in+honey+bees,+pollen,+and+wax+by+gas+chromatography+-+quadrupole+mass+spectrometry.">Development and comparison of two multi-residue methods for the analysis of select pesticides in honey bees, pollen, and wax by gas chromatography - quadrupole mass spectrometry.</a> Talanta. 140, 81-87 (2015).</li><li>Kakumanu, M. L., Reeves, A. M., Anderson, T. D., Rodrigues, R. R., Williams, M. A., Williams, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honey+Bee+Gut+Microbiome+Is+Altered+by+In-Hive+Pesticide+Exposures.">Honey Bee Gut Microbiome Is Altered by In-Hive Pesticide Exposures.</a> Front Microbiol. 7, 1-11 (2016).</li><li>Katz, T. M., Miller, J. H., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+Historical+perspectives+and+new+developments.">Insect repellents: Historical perspectives and new developments.</a> J Am Acad Dermatol. 58 (5), 865-871 (2008).</li><li>Dickens, J. C., Bohbot, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mini+review:+Mode+of+action+of+mosquito+repellents.">Mini review: Mode of action of mosquito repellents.</a> Pestic Biochem Phys. 106 (3), 149-155 (2013).</li><li>Lawrence, K. L., Achee, N. L., Bernier, U. R., Mundal, K. D., Benante, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field+Evaluations+of+Topical+Arthropod+Repellents+in+North,+Central,+and+South+America.">Field Evaluations of Topical Arthropod Repellents in North, Central, and South America.</a> J Med Entomol. 51 (5), 980-988 (2014).</li><li>Collins, A. M., Rubink, W. L., Cuadriello Aguilar, ., I, J., Hellmich Ii, ., L, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+insect+repellents+for+dispersing+defending+honey+bees+(Hymenoptera+Apidae).">Use of insect repellents for dispersing defending honey bees (Hymenoptera Apidae).</a> J Econ Entomol. 89 (3), 608-613 (1996).</li><li>Brown, M., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+An+overview.">Insect repellents: An overview.</a> J Am Acad Dermatol. 36 (2), 243-249 (1997).</li><li>Teeters, B. S., Johnson, R. M., Ellis, M. D., Siegfried, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+video-tracking+to+assess+sublethal+effects+of+pesticides+on+honey+bees+(Apis+mellifera+L.).">Using video-tracking to assess sublethal effects of pesticides on honey bees (Apis mellifera L.).</a> Environ Toxicol Chem. 31 (6), 1349-1354 (2012).</li><li>Vallet, A., Cassier, P., Lensky, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+the+fine+structure+of+the+honeybee+(Apis+mellifera+L.)+workers+and+the+pheromonal+activity+of+2-heptanone.">Ontogeny of the fine structure of the honeybee (Apis mellifera L.) workers and the pheromonal activity of 2-heptanone.</a> J Insect Physiol. 37 (11), 789-804 (1991).</li><li>Free, J. B., Ja Pickett, ., Ferguson, a. W., Simpkins, J. R., Smith, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repelling+foraging+honeybees+with+alarm+pheromones.">Repelling foraging honeybees with alarm pheromones.</a> J Agr Sci. 105 (2), 255 (1985).</li></ol>

Этот визуальный протокол отслеживания обеспечивает простой подход к экранированию химических сдерживающих факторов для медоносных пчел относительно быстро и просто. Нет рекомендуемых протоколов для лабораторных испытаний химических сдерживающих факторов для медоносных пчел. В пр?...

Европейская медовая пчела, Apis melliferaL. , Является экономическим и сельскохозяйственно важным насекомым, которое предоставляет услуги по опылению, которые оцениваются более чем на 200 миллиардов долларов во всем мире 1 . В Соединенных Штатах и ​​Европе число колоний пчел сокращается. Соединенные Штаты потеряли ок . 60% управляемых колоний пчелиных пчел с 1947-2008 гг., Тогда как Европа потеряла ок . 27% от 1961-2007 гг. 2 , 3 . Существует целый ряд факторов, которые могут быть причиной увеличения количества потерь колоний, включая, но не ограничиваясь ими, заражение паразитами, инфекции патогенов, методы пчеловодства и использование пестицидов 2 - 4 . Медоносные пчелы могут подвергаться воздействию пестицидов по двум основным путям. Воздействие пестицидов за пределами улья может произойти, когда люди, производящие корма, вступают в контакт с культурами, которыеБыли распылены химикатами для защиты от вредителей. Воздействие пестицидов в пределах улья может произойти, когда пчеловоды используют химические вещества для борьбы с вредителями и патогенами, имеющими место в кустах, такими как клещи, бактерии и микроспоридии. 4 . Остатки пестицидов были идентифицированы в образцах воска, пыльцы и медоносных пчел из 24 пасек в Соединенных Штатах и ​​Канаде 5 , 6 . Последствия контакта пестицидов с медоносными пчелами включают острую токсичность, а также сублетальные эффекты, такие как паралич, дезориентация и изменения поведения и здоровья 1 , 7 . Поскольку современное сельское хозяйство требует использования пестицидов для поддержания высоких урожаев, эти химические вещества будут по-прежнему опираться в будущем 2 . Для лучшей защиты медоносных пчел от воздействия пестицидов необходимо разработать новые протоколы и правила 5 .Одним из возможных подходов для защиты является использование репеллентов для уменьшения воздействия медоносных пчел на пестициды при кормлении в пищу. Репелленты для насекомых (IRs) обычно использовались в качестве индивидуальных мер защиты от укусов против векторов болезни членистоногих 8 . Наиболее широко используемым и успешным IR, разработанным более 60 лет назад, является DEET 8 , 9 . Он считается золотым стандартом для тестирования репеллента насекомых и используется Всемирной организацией здравоохранения и Агентством по охране окружающей среды в качестве позитивного контроля для нового репеллентного скрининга 10 . Кроме того, было обнаружено, что DEET рассеивает медоносных пчел от угрозы их колонии 11 . Текущие атрибуты, связанные с персональными IR, включают: (1) длительный эффект против широкого числа членистоногих; (2) не раздражает пользователя при нанесении на кожу или одежду; (3) без запаха илиПриятный запах; (4) не влияет на одежду; (5) отсутствие маслянистого внешнего вида при нанесении на кожу и выдерживание потоотделения, мытья и вытирания пользователем; (6) не влияет на обычно используемые пластмассы; И (7) химически стабильные и доступные для широкого использования 12 . Репелленту, используемому для медоносных пчел, понадобится лишь несколько из этих атрибутов, таких как длительные эффекты, не раздражающие аппликаторы, запах без запаха или приятный запах, химически стабильный и доступный для широкого использования и нетоксичный для медоносных пчел. Однако, прежде чем исследовать эти атрибуты в глубину, необходим метод скрининга соединений для отталкивания / сдерживания с высокой пропускной способностью. Здесь мы описываем протокол лабораторного анализа для скрининга соединений для сдерживания медоносных пчел, что является важным шагом в определении репеллентности. Следующий протокол модифицирован из предыдущего исследования, описывающего метод визуального отслеживания для оценки сублетальных эффектов пестицидов на медоносных пчел 13 . ХауVer, этот протокол отличается тем, что он предназначен для измерения эффектов репеллентов-кандидатов, которые могут удерживать пчел меда от обработанных пестицидами культур. Нет никаких рекомендуемых протоколов для лабораторных испытаний химических сдерживающих факторов для медоносных пчел, и, таким образом, этот протокол обеспечивает простой подход к экранированию таких соединений.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">50 mL Erlenmeyer flask</td>
			<td style="width:71px;">Kimax</td>
			<td style="width:119px;">26500-50</td>
			<td style="width:167px;">used for making the sugar/agarose cubes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sugar</td>
			<td style="width:71px;">Kroger</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any similar product will sufffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Deionized water</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>acquired in house</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Agarose</td>
			<td style="width:71px;">Apex</td>
			<td style="width:119px;">20-102</td>
			<td>used for making the sugar/agarose cubes</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Mold for agarose cubes (Weigh Boat)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any mold that will provide the researcher with a 1.5 X 1.5 X 0.3 cm sugar/agarose cube will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">EthoVision XT</td>
			<td style="width:71px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>visual tracking software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">633 nm LEDs</td>
			<td style="width:71px;">Cyron</td>
			<td>HTP904E</td>
			<td>These lights were placed into a constructed light box to illuminate the arenas from below.&#160; The box was a simple wooden structure with a frosted plastic/plexi glass cover that allowed the light to disperse upwards without any glare.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Laptop or PC</td>
			<td style="width:71px;">Dell</td>
			<td style="width:119px;">Inspiron One 2305</td>
			<td>necessary for video tracking software. Any pc device capable of runnin tbe visual tracking software will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bee Keeping protective clothing</td>
			<td style="width:71px;">Dadant &#38; Sons Inc</td>
			<td style="width:119px;">V0126</td>
			<td>any protective hood and jacket will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Hive tool</td>
			<td style="width:71px;">Dadant &#38; Sons Inc</td>
			<td style="width:119px;">M00757</td>
			<td>used to open honey bee hive</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Container for honey bees</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any container suitable for housing and storing honey bees will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Featherweight forceps narrow tip</td>
			<td style="width:71px;">Bioquip</td>
			<td align="right" style="width:119px;">4748</td>
			<td>used to select individual honey bees</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">9 cm (diameter) petri dish</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">S01778</td>
			<td>arena used to contain individual honey bees during video tracking</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Recording Device (Camera)</td>
			<td style="width:71px;">Basler</td>
			<td style="width:119px;">acA-1300-60gm</td>
			<td>any device that can record the subject clearly and transfer the file to a computer will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">GraphPad Prism</td>
			<td style="width:71px;">Graphpad</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any statistical software package will suffice</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

video tracking protocol to screen deterrent chemistries for honey bees

Европейская медовая пчела Apis mellifera L. является экономически и сельскохозяйственно важным опылителем, который ежегодно генерирует миллиарды долларов. Число колоний пчелиных пчел снижается в Соединенных Штатах и ​​во многих европейских странах с 1947 года. В этом снижении роль играет ряд факторов, в том числе непреднамеренное воздействие медоносных пчел на пестициды. Для разработки новых методов и правил требуется сокращение воздействия пестицидов на эти опылители. Один из подходов - использование репеллентных химикатов, которые удерживают пчелы меда от недавно обработанной пестицидами культуры. Здесь мы описываем протокол, чтобы выявить сдерживание медоносных пчел, подверженных селективным химическим веществам. Медовые кормоуборочные комбайны собирают и голодают в течение ночи в инкубаторе за 15 часов до начала тестирования. Отдельные медоносные пчелы помещают в чашки Петри, которые имеют либо сахар-агарозный куб (контрольная обработка), либо куб сахар-агароз-компаунд (репеллентная обработка), помещенный вДо середины блюда. Чашка Петри служит ареной, которая помещается под камерой в светлом ящике, чтобы записывать движения локомотива с использованием программного обеспечения для отслеживания видео. В общей сложности 8 контрольных и 8 репеллентных обработок анализировали в течение 10 минут, при этом каждая обработка дублировалась новыми медными пчелами. Здесь мы демонстрируем, что пчелы меда убираются из кубиков сахар-агароза с комплексной обработкой, тогда как пчелы меда притягиваются к кубикам сахар-агароза без добавленного соединения.

Был разработан протокол визуального отслеживания для регистрации количества медоносных пчел, проведенных в целевой зоне, с сахара-агарозой (контрольная обработка) или кубом сахар-агароз-соединение (сдерживающее лечение). Записанное время было проанализировано с исп...

Watch this Scientific Journal Video about Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees at JoVE.com

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

Потеря колоний медоносных пчел представляет собой проблему для услуг по обследованию культур. Современные методы защиты опылителей требуют альтернативного подхода к минимизации контакта медоносных пчел с вредными пестицидами с использованием репеллентных химикатов. Здесь мы предлагаем подробные методы для визуального протокола отслеживания экранов для пчел.

Протокол отслеживания видеосигнала для фильтров сдерживающих устройств для медоносных пчел

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

Research

JoVE Journal

Environment

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect (Cryptococcus fagisuga Lind.)

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect Cryptococcus fagisuga Lind.

Методика экран американский Бук на устойчивость к Бук Scale насекомых (<em&gt; Криптококк fagisuga</em&gt; Линд.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The ...

Experimental Protocol for Manipulating Plant-induced Soil Heterogeneity

Экспериментальный протокол для работы с завод-индуцированной неоднородности почвы

Coexistence theory has often treated environmental heterogeneity as being independent of the community composition; however biotic feedbacks such as ...

A Protocol for Conducting Rainfall Simulation to Study Soil Runoff

Протокол по проведению Rainfall моделирование по изучению почвы стока

Rainfall is a driving force for the transport of environmental contaminants from agricultural soils to surficial water bodies via surface runoff. The ...

A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

Протокол Двухтактный уменьшить колонизацию птичье гнездо Коробки от медоносных пчел

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

A Protocol for Collecting and Constructing Soil Core Lysimeters

Протокол для сбора и построения Основных лизиметрах Почвы

Leaching of nutrients from land applied fertilizers and manure used in agriculture can lead to accelerated eutrophication of surface water. Because the ...

Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis

Протокол Microplastics Отбор проб на поверхности моря и анализа проб

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of ...

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

Оценка Влияние окружающей среды химических веществ на Honey Bee развития от личности до уровня колонии

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Experimental Protocol for Detecting Mitochondrial Function in Hepatocytes Exposed to Organochlorine Pesticides

Экспериментальный протокол для обнаружения митохондриальной функции в гепатоцитах, подвергшихся воздействию органохлорных пестицидов

This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function for a better understanding the cause of metabolic disorders caused by ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

В пробирке Воспитание одиночных пчёл: инструмент для оценки личиночной факторов риска

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Экспериментальный протокол для изучения поведенческих реакции профили в личинок рыб: Приложение к кофеину нейро стимулятор

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...