Name: laparoscopic technique for serial collection of liver and mesenteric lymph nodes in macaques
Uploaded: 2017-05-02T15:00:00
Duration: 11 min 6 s
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	<li>Peterson, L. W., Artis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+epithelial+cells:+regulators+of+barrier+function+and+immune+homeostasis.">Intestinal epithelial cells: regulators of barrier function and immune homeostasis.</a> Nat Rev Immunol. 14 (3), 141-153 (2014).</li><li>Jacobs, J. P., Braun, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+and+genetic+gardening+of+the+intestinal+microbiome.">Immune and genetic gardening of the intestinal microbiome.</a> FEBS Lett. 588 (22), 4102-4111 (2014).</li><li>Macpherson, A. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Liver+at+the+Nexus+of+Host-Microbial+Interactions.">The Liver at the Nexus of Host-Microbial Interactions.</a> Cell Host Microbe. 20 (5), 561-571 (2016).</li><li>Shuai, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+immunity+in+the+liver.">Adaptive immunity in the liver.</a> Cell Mol Immunol. 13 (3), 354-368 (2016).</li><li>Chun, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+HIV+in+gut-associated+lymphoid+tissue+despite+long-term+antiretroviral+therapy.">Persistence of HIV in gut-associated lymphoid tissue despite long-term antiretroviral therapy.</a> J Infect Dis. 197 (5), 714-720 (2008).</li><li>Horiike, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+nodes+harbor+viral+reservoirs+that+cause+rebound+of+plasma+viremia+in+SIV-infected+macaques+upon+cessation+of+combined+antiretroviral+therapy.">Lymph nodes harbor viral reservoirs that cause rebound of plasma viremia in SIV-infected macaques upon cessation of combined antiretroviral therapy.</a> Virology. 423 (2), 107-118 (2012).</li><li>North, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+sanctuaries+during+highly+active+antiretroviral+therapy+in+a+nonhuman+primate+model+for+AIDS.">Viral sanctuaries during highly active antiretroviral therapy in a nonhuman primate model for AIDS.</a> J Virol. 84 (6), 2913-2922 (2010).</li><li>Xu, H., Wang, X., Lackner, A. A., Veazey, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD8+down-regulation+and+functional+impairment+of+SIV-specific+cytotoxic+T+lymphocytes+in+lymphoid+and+mucosal+tissues+during+SIV+infection.">CD8 down-regulation and functional impairment of SIV-specific cytotoxic T lymphocytes in lymphoid and mucosal tissues during SIV infection.</a> J Leukoc Biol. 93 (6), 943-950 (2013).</li><li>Zhang, L., Dailey, P. J., Gettie, A., Blanchard, J., Ho, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Liver+Is+a+Major+Organ+for+Clearing+Simian+Immunodeficiency+Virus+in+Rhesus+Monkeys.">The Liver Is a Major Organ for Clearing Simian Immunodeficiency Virus in Rhesus Monkeys.</a> Journal of Virology. 76 (10), 5271-5273 (2002).</li><li>Dillon, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+altered+intestinal+mucosal+microbiome+in+HIV-1+infection+is+associated+with+mucosal+and+systemic+immune+activation+and+endotoxemia.">An altered intestinal mucosal microbiome in HIV-1 infection is associated with mucosal and systemic immune activation and endotoxemia.</a> Mucosal Immunol. 7 (4), 983-994 (2014).</li><li>Jiang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+levels+of+bacterial+DNA+correlate+with+immune+activation+and+the+magnitude+of+immune+restoration+in+persons+with+antiretroviral-treated+HIV+infection.">Plasma levels of bacterial DNA correlate with immune activation and the magnitude of immune restoration in persons with antiretroviral-treated HIV infection.</a> J Infect Dis. 199 (8), 1177-1185 (2009).</li><li>Sandler, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+levels+of+soluble+CD14+independently+predict+mortality+in+HIV+infection.">Plasma levels of soluble CD14 independently predict mortality in HIV infection.</a> J Infect Dis. 203 (6), 780-790 (2011).</li><li>Klase, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysbiotic+bacteria+translocate+in+progressive+SIV+infection.">Dysbiotic bacteria translocate in progressive SIV infection.</a> Mucosal Immunol. 8 (5), 1009-1020 (2015).</li><li>Evans, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SIV-induced+Translocation+of+Bacterial+Products+in+the+Liver+Mobilizes+Myeloid+Dendritic+and+Natural+Killer+Cells+Associated+With+Liver+Damage.">SIV-induced Translocation of Bacterial Products in the Liver Mobilizes Myeloid Dendritic and Natural Killer Cells Associated With Liver Damage.</a> J Infect Dis. 213 (3), 361-369 (2016).</li><li>Fish, R., Danneman, P. J., Brown, M., Karas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. 2 edn. , (2011).</li><li>Flecknell, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory Animal Anaesthesia. 3 edn. , (2009).</li><li>Tranquilli, W. J., Thurnom, J. C., Grimm, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Lumb and Jones' Veterinary Anesthesia and Analgesia. , (2007).</li><li>Ford, R. B., Mazzaferro, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Kirk and Bistner's Handbook of Veterinary Procedures and Emergency Treatment. 9 edn. , (2012).</li><li>Fransson, B. A., Mayhew, P. 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W., Ulevitch, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD14:+cell+surface+receptor+and+differentiation+marker.">CD14: cell surface receptor and differentiation marker.</a> Immunol Today. 14 (3), 121-125 (1993).</li><li>Brenchley, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+translocation+is+a+cause+of+systemic+immune+activation+in+chronic+HIV+infection.">Microbial translocation is a cause of systemic immune activation in chronic HIV infection.</a> Nat Med. 12 (12), 1365-1371 (2006).</li></ol>

लेखकों ने प्रतिस्पर्धी वित्तीय हितों की अनुपस्थिति की घोषणा की।

यहाँ, हम MLN के सीरियल संग्रह और जिगर बायोप्सी के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव तकनीक है कि इस अध्ययन में वर्णित नहीं इन और अन्य जानवरों में एक 100% सफलता दर पड़ा का प्रदर्शन। इसके अलावा, समय में एक ही जानवरों पर इस तकनीक का उपयोग किसी भी प्रतिकूल घटनाओं के साथ जुड़ा नहीं किया गया है। दरअसल, कोई जानवरों के अन्य साथियों में इस तकनीक कि SIV, बंदर / मानव इम्यूनो वायरस (शिव), या Zika वायरस (अप्रकाशित डेटा) से संक्रमित थे के उपयोग से उत्पन्न जटिलताओं किया गया है। इसी तरह, इस सर्जरी जानवरों है कि पहले, प्रमुख पेट की सर्जरी आया था में भी और थ्रोम्बोसाइटोपेनिक जानवरों (अप्रकाशित डेटा) में सफल साबित हुई। हम दिखा दिया है कि इन नमूनों जब जिगर को MLN से स्विच अतिरिक्त चीरों के लिए जरूरत से बचने कैमरा स्थान पीछे से एक ही दो बंदरगाहों के माध्यम से एकत्र किया जा सकता। MLN के संग्रह प्रभावित करने वाले कारक पहले से 13 सूचित किया गया है। <pवर्ग = &quot;jove_content&quot;&gt; 3 मिलियन और 3 जिगर बायोप्सी प्रत्येक के चार संग्रह के लिए ऊपर जटिलताओं के बिना अलग-अलग जानवरों पर समय भर में प्रदर्शन किया गया है, आंकड़ों के सफलता दरों में परिवर्तन, या परिवर्तन एकत्र। साथ ही, इस लेप्रोस्कोपिक MLN / जिगर संग्रह तकनीक सफलतापूर्वक की व्यापक मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है एक ही संवेदनाहारी घटना में परिधीय LNS, इंडोस्कोपिक ऊपरी और निचले सैनिक बायोप्सी, अस्थि मज्जा आकांक्षा, मस्तिष्कमेरु द्रव संग्रह का संग्रह है, और venipuncture के रूप में अन्य प्रक्रियाओं के साथ संयुक्त कर दिया गया है वायरस विज्ञान संबंधी और एक सीरियल फैशन में immunologic प्रतिक्रियाओं (अप्रकाशित डेटा)। पूरा करने के लिए 45 मिनट और दो ~ 0.5 सेमी चीरों के माध्यम से पूरा किया है - पूरी प्रक्रिया आम तौर पर 30 लेता है। मोटापे से ग्रस्त पशुओं में, यह एक बड़ा चीरा बनाने के लिए आवश्यक हो सकता है (~ 1 - 1.5 सेमी) के माध्यम से MLN पुनः प्राप्त करने और पूरा करने के लिए अतिरिक्त समय की आवश्यकता हो सकती है। व्यापक mesenteric वसा के साथ पशु अक्सर घ के लिए महत्वपूर्ण अनुभव की आवश्यकताआसपास के वसा से MLN ifferentiate। MLN अक्सर mesenteric वाहिका संरचना के साथ मिल गया और जहाजों में शाखा अंक के पास और अधिक प्रचलित होने लगते रहे हैं। इस तकनीक का एक महत्वपूर्ण पहलू यह है कि यह चयनित MLN की आवश्यकता है अन्त्रपेशी में पर्याप्त गतिशीलता के लिए पेट चीरा के माध्यम से exteriorized जा रहा है। नतीजतन, इस तकनीक अन्त्रपेशी की जड़ तक MLN पास इकट्ठा करने के लिए इस्तेमाल नहीं किया जा सकता है। आवर्धन के कारण, यह आसान कई बार कैमरे के साथ MLN पहचान करने के लिए, और MLN के करीब निकटता में लोभी पता लगाने और एक बार यह exteriorized है नोड की पहचान करने के साथ मदद कर सकते हैं। Trendelenburg स्थिति का उपयोग हमेशा MLN संग्रह के लिए आवश्यक नहीं किया जा सकता है, और अगर MLN आसानी से Trendelenburg स्थिति के उपयोग के बिना प्राप्त किया जा सकता है यह जिगर बायोप्सी आसान के रूप में यह cranially स्थानांतरण से अंगों पाएगा कर सकते हैं। कभी-कभी, Trendelenburg स्थिति में नियुक्ति के बाद, जिगर अप डायाफ्राम और चाहिए के खिलाफ स्थानांतरित कर दिया है<html> धीरे स्थिति बायोप्सी संग्रह करने से पहले में वापस हेरफेर किया जा। MLN संग्रह के लिए बंदरगाह नियुक्ति बाईं ओर है, जिगर बायोप्सी आमतौर पर छोड़ दिया पार्श्व और बाईं औसत दर्जे का जिगर पालियों से लिया के रूप में वे प्रवेशनी के करीब हैं कर रहे हैं। MLN एकत्र और जिगर बायोप्सी नीचे की ओर विश्लेषण की एक किस्म के लिए पर्याप्त सेल पैदावार प्रदान की है और एकत्र कोशिकाओं की उच्च व्यवहार्यता दिखाया। इधर, कोशिकाओं ल्युकोसैट और लिम्फोसाइट आबादी के प्रवाह cytometric विश्लेषण के लिए दाग रहे थे, और इन दो महत्वपूर्ण प्रतिरक्षा अंगों के बीच मुख्य अंतर स्पष्ट कर रहे थे। उदाहरण के लिए, MLN अत्यधिक, जिगर की तुलना में सीडी 4+ टी कोशिकाओं के लिए समृद्ध थे भड़काऊ के प्रबंधन के लिए एकत्र करने और, साथ ही सीडी 4+ टी के महत्व को अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के प्रसार के लिए केंद्रीय बिंदु के रूप में MLN के महत्व के कारण और परिवेश को tolerogenic प्रतिक्रियाओं आहार का सेवन और सैनिक-निवासी सूक्ष्मजीवों से व्युत्पन्न एंटीजनरों = &quot;xref&quot;&gt; 24। हालांकि, जिगर काफी MLN की तुलना में CD14 + ल्यूकोसाइट्स के लिए समृद्ध किया गया था। CD14 monocytes और मैक्रोफेज पर मुख्य रूप से व्यक्त किया है और बैक्टीरियल lipopolysaccharide (LPS) 25 रिसेप्टर परिसर का एक महत्वपूर्ण घटक है है। दरअसल, घुलनशील CD14 की वृद्धि की प्लाज्मा सांद्रता माइक्रोबियल अनुवादन और एचआईवी प्रतिरक्षा सक्रियण और रोगजनक SIV के संक्रमण 26 के साथ जुड़े रहे हैं। इस प्रकार, जिगर में CD14 + ल्यूकोसाइट्स का उच्च आवृत्तियों की संभावना इस अंग में एक बड़ी बैक्टीरियल बोझ से परिणाम जब MLN की तुलना में। यहाँ, हम MLN के सीरियल संग्रह और जिगर बायोप्सी लेप्रोस्कोपिक प्रविष्टि है कि किसी भी प्रतिकूल परिणामों के लिए नेतृत्व नहीं किया है के लिए केवल दो छोटे चीरों प्रयोग करने के लिए एक तेजी से और न्यूनतम इनवेसिव सर्जिकल तकनीक का प्रदर्शन। इन नमूनों कुंजी प्रतिरक्षाविज्ञानी, विषाणुजनित, और सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रक्रियाओं है कि पीएलए लेने का मूल्यांकन करने के लिए एक उपयोगी मार्ग प्रदानMLN और जिगर, जो अलग और प्रणालीगत प्रतिरक्षा से अलग हैं इस में सीई। इसी तरह, जिगर बायोप्सी एचआईवी / SIV, नशीली दवाओं के उपचार, और translocated रोगाणुओं का प्रभाव है, जो अक्सर महत्वपूर्ण जिगर की क्षति 16 प्रेरित करने के लिए गठबंधन की लंबी अवधि के मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण हैं। इसके अलावा, चूंकि MLN और जिगर प्रतिरक्षा सैनिक माइक्रोबायोटा के संपर्क में अंग होते हैं, की क्षमता समय में इन अंगों में प्रतिरक्षा मूल्यांकन करने के लिए भूमिका है कि Microbiome मेजबान प्रतिरक्षा homeostasis को बनाए रखने में नाटकों को समझने के लिए एक उत्कृष्ट मंच प्रदान करता है। एक साथ लिया, जिगर के मूल्यांकन और MLN टीका और चिकित्सीय efficacies, SIV वायरल जलाशय निकासी, और सामान्य श्लैष्मिक उन्मुक्ति के संदर्भ में प्रमुख महत्व का है। एक न्यूनतम इनवेसिव दृष्टिकोण के माध्यम से इन नमूनों को इकट्ठा करने की क्षमता का मतलब प्रक्रिया वर्तमान में प्रकाशित तकनीक और पशुओं के शरीर क्रिया विज्ञान पर कम प्रभाव के साथ मौजूद है की तुलना से संबंधित सूजन का जोखिम कम होता है। फू मेंसंरचना, हम प्रतिरक्षा प्रणाली का एक अन्य महत्वपूर्ण और विशिष्ट बात यह है कि में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा दिखाया गया है के नमूने के लिए अनुमति देने के लिए एक ही दो बंदरगाह स्थानों के माध्यम से तिल्ली का संग्रह के साथ MLN के संग्रह और जिगर गठबंधन करने के लिए संभावित मूल्यांकन करेंगे रोग मॉडल की एक संख्या।

जठरांत्र (जीआई) पथ शरीर की सबसे बड़ी श्लैष्मिक सतह है और भोजन, रोगाणुओं, और एंडोसिम्बायोटक बैक्टीरियल समुदायों से प्राप्त एंटीजन के असंख्य सामान्यतः Microbiome 1, 2 के रूप में भेजा के संपर्क में है। Mesenteric लिम्फ नोड्स (मिलियन) GI पथ लाइन और इन विविध एंटीजन की ओर सूजन या tolerogenic प्रतिक्रियाओं को बढ़ावा देने के लिए प्रतिरक्षा के कार्य का एक प्रमुख साइट है। MLN के भौतिक संगठन एक बंटे प्रणाली है कि स्थानीय स्तर पर प्रणालीगत प्रतिक्रियाओं 3 eliciting बिना एंटीजन को प्रतिक्रिया कर सकते हैं बनाता है। इसी तरह, परिसंचरण की ओर लौटने, और इस तरह रोगाणुओं और सूक्ष्म उत्पादों कि GI पथ से लामिना प्रोप्रिया में translocated और खून 4 में प्रवेश किया है के संपर्क में है इससे पहले कि पोर्टल शिरा के माध्यम से जिगर को GI पथ नालियों से खून। जिगर भी एक माध्यमिक लसीकावत् अंग एक के रूप में कार्यnd प्रतिरक्षा कोशिकाओं की एक बड़ी संख्या, विशेष मैक्रोफेज सहित translocated रोगाणुओं 5, 6 दूर करने के लिए है। इस प्रकार, MLN और जिगर प्राथमिक प्रतिरक्षा GI पथ से सहभोजी और रोगजनक बैक्टीरिया के संपर्क में अंगों, साथ ही अन्य स्रोतों से एंटीजन की परिवेश, उन्हें अद्वितीय और एक प्रतिरक्षा के नजरिए से महत्वपूर्ण बना रहे हैं। MLN मानव इम्यूनो वायरस (एचआईवी) या रोगजनक बंदर इम्यूनो वायरस (SIV) संक्रमण के वायरस विज्ञान संबंधी और immunologic प्रभाव के मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण साइटों रहे हैं, और संभावना intrarectal चुनौती निम्नलिखित SIV के प्रारंभिक प्रसार में शामिल हैं। आंत से जुड़े लसीकावत् ऊतक आधुनिक एंटीरेट्रोवाइरल उपचारों (एआरटी) 7 से viremia के प्रभावी नियंत्रण के बावजूद लगातार एचआईवी प्रतिकृति का एक प्रमुख साइट माना जाता है। SIV के संक्रमण मॉडल में, MLN अव्यक्त वायरस के महत्वपूर्ण जलाशयों होना दिखाया गया है और हो सकता हैप्राथमिक जलाशय 8, 9 हो। जिगर के रूप में तीव्र SIV के संक्रमण 10 के दौरान macaques के जिगर में SIV के विशिष्ट CD8 + टी कोशिकाओं के संचय इसका सबूत भी lentiviral संक्रमण में महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, यह प्रमुख अंग संचलन 11 से वायरस को साफ करने के लिए जिम्मेदार है। एचआईवी और SIV के संक्रमण बदल सैनिक माइक्रोबायोटा साथ जुड़े रहे हैं, बाधित सैनिक उपकला अखंडता, और परिधि और संचलन 12, 13 में पेट से रोगाणुओं और सूक्ष्म उत्पादों की अनुवादन वृद्धि हुई है। इन प्रक्रियाओं स्थानीय और प्रणालीगत प्रतिरक्षा सक्रियण के साथ जुड़े, और एचआईवी संक्रमित व्यक्तियों 14 में वृद्धि हुई रुग्णता और मृत्यु दर कर रहे हैं। SIV के संक्रमण में, translocated बैक्टीरिया MLN 15 में देखा गया है, जबकि माइक के संचयजिगर में robial उत्पादों अंग से 16 सूजन और नुकसान हो दिखाया गया है। इस प्रकार, एचआईवी और SIV के संक्रमण के संदर्भ में, MLN और जिगर सैनिक-निवासी बैक्टीरिया द्वारा संचालित भड़काऊ प्रक्रियाओं को समझने के लिए उच्च जानकारीपूर्ण हो सकता है। यहाँ, हम गैर मानव प्राइमेट (NHPs) में MLN के सीरियल नमूना और जिगर के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव लेप्रोस्कोपिक तकनीक प्रस्तुत करते हैं। हम दो स्वस्थ महिला रीसस macaques (RMS) पर इस तकनीक का सफल प्रदर्शन का प्रदर्शन प्रत्येक सर्जरी के बीच में प्रत्येक जानवर दो बार, 160 दिनों के साथ नमूना। हम दो समय बिंदुओं के बीच अत्यधिक सुसंगत डेटा का मूल्यांकन और प्रवाह cytometry का उपयोग प्रत्येक अंग के भीतर प्रमुख ल्युकोसैट और लिम्फोसाइट आबादी की तुलना करें और प्रदर्शित करने के लिए इन नमूनों का उपयोग करने पर चलते हैं।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1395">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Artficial Tears Lubricant Ophthalmic Ointment</td>
			<td style="width:248px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:167px;">97-890-8152</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Priority Care Chlorhexidine 2% Scrub</td>
			<td style="width:248px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:167px;">07-842-6153</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Vedco Alcohol, Isopropyl 70%</td>
			<td style="width:248px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:167px;">07-869-6434</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Vedco Vetadine Scrub</td>
			<td style="width:248px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:167px;">07-869-6772</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Hospira Lactated Ringer&#39;s 250 ml</td>
			<td style="width:248px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:167px;">07-800-9325</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Adolescent Laparotomy Surgical Drape</td>
			<td style="width:248px;">Medline</td>
			<td style="width:167px;">DYNJP3004</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Access 40 L Insufflator</td>
			<td style="width:248px;">Dyonics</td>
			<td style="width:167px;">7205832</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">300XL Xenon Light Source</td>
			<td style="width:248px;">Dyonics</td>
			<td style="width:167px;">7206084</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">460P 3 &#8211; CCD Digital Camera with Head</td>
			<td style="width:248px;">Dyonics</td>
			<td style="width:167px;">72200086</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Universal Camera Drape, 7&#8221; x 96&#8221;</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">ESS-6920</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Universal Light Guide, 7.5 Ft</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">US.OU225</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Insufflator Tubing</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">TM-102</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Multipurpose Rigid Scope, 2.7mm x 187.5mm, 0 degree</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">B30-0007-00</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Exam and Protective Sheath for 2.7mm x 187.5mm scope with one fixed stopcock</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">B10-0025-00</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Rigid scope, 5mm x 300mm</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">B30-0071-00</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Veress Needle, 2mm x 80mm&#160;</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8302.08</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Solid Probe with Markings, 5mm x 320mm</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8383.661</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="81">
			<td height="81" style="height:81px;width:441px;">Maryland Grasping and Dissecting Forceps with Double Action Ratchet Handle, 3.5mm x 240mm&#160;&#160;</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8390.2054</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="29" style="height:29px;width:441px;">Biopsy Forceps, 3.5mm X 310mm</td>
			<td style="width:248px;">R. Wolf</td>
			<td style="width:167px;">8391.4063</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Plastic Threaded Cannula with Insufflator Port, 3.5mm x 60mm</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8903.072</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Plastic Threaded Cannula with Insufflator Port, 5.5mm x 60mm</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8919.333</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Blunt Tip Trocar</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8903.101</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="54">
			<td height="54" style="height:54px;width:441px;">Pyramidal Tip Trocar</td>
			<td style="width:248px;">Endoscopy Support Services</td>
			<td style="width:167px;">8903.121</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="31">
			<td height="31" style="height:31px;width:441px;">CO2</td>
			<td style="width:248px;">Airgas</td>
			<td style="width:167px;">CD USPE</td>
			<td style="width:539px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:248px;">Fisher Scientific</td>
			<td>SH30027FS</td>
			<td>with L-Glutamine</td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">RNAlater Stabilization Solution</td>
			<td style="width:248px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AM7021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:248px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>P4333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Liberase TM Research Grade</td>
			<td style="width:248px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>5401119001</td>
			<td>Commercially available colleganse solution</td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Dnase I from bovine pancrease</td>
			<td style="width:248px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>D5025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">70 &#181;m cell strainers</td>
			<td style="width:248px;">Morganville Scientific</td>
			<td>CSS0200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">5mL Syringe</td>
			<td style="width:248px;">BD</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">50mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td style="width:248px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>339652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:248px;">Fisher Scientific</td>
			<td>SH3007003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">5mL Round-Bottom polystyrene tubes</td>
			<td style="width:248px;">Fisher Scientific</td>
			<td>14-959A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">PBS</td>
			<td style="width:248px;">Fisher Scientific</td>
			<td>SH3025601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">LIVE/DEAD Aqua Fixable Dead Cell Stain Kit</td>
			<td style="width:248px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>L34957</td>
			<td>Amine dead cell stain</td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">CD45-PerCP (clone D058-1283)</td>
			<td style="width:248px;">BD Biosciences</td>
			<td>558411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">PE-CF594 Mouse anti-Hu CD3 (clone SP34-2)</td>
			<td style="width:248px;">BD Biosciences</td>
			<td>562406</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">BV605 Mouse Anti-Hu CD4 (clone OKT4)</td>
			<td style="width:248px;">Biolegend</td>
			<td>317438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">APC-H7 Mouse anti-Hu CD8 (clone SK1)</td>
			<td style="width:248px;">BD Biosciences</td>
			<td>560179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">PE-Cy5 Mouse Anti-Hu CD20 (clone 2H7)</td>
			<td style="width:248px;">BD Biosciences</td>
			<td>555624</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">BV786 Mouse Anti-Hu CD14 (clone M5E2)</td>
			<td style="width:248px;">BD Biosciences</td>
			<td>563698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;">16% PARAFORMALDEHYDE AQ SOLUTN</td>
			<td style="width:248px;">Fisher Scientific</td>
			<td>50-980-487</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:441px;">LSR II Flow Cytometer</td>
			<td style="width:248px;">BD</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laparoscopic technique for serial collection of liver and mesenteric lymph nodes in macaques

mesenteric लिम्फ नोड्स (मिलियन) और जिगर रोगाणुओं और जठरांत्र (जीआई) पथ से सूक्ष्म उत्पादों के संपर्क में हैं, उन्हें प्रतिरक्षा के रूप में अद्वितीय बना रही है। GI पथ और संबद्ध MLN मानव इम्यूनो वायरस (एचआईवी) संक्रमण के शुरू में वायरल प्रतिकृति के स्थल हैं और MLN संभावना महत्वपूर्ण जलाशय साइटों है कि लंबे समय तक एंटीरेट्रोवाइरल थेरेपी (एआरटी) के बाद भी गुप्त रूप से संक्रमित कोशिकाओं बंदरगाह हैं। जिगर lentiviruses के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा दिखाया गया है और प्रचलन से वायरस की निकासी में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए प्रकट होता है। गैर-प्राइमेट (NHP) एचआईवी और एक्वायर्ड इम्यूनो सिंड्रोम (एड्स) के लिए मॉडल बारीकी से एचआईवी संक्रमण और वायरल प्रतिकृति और इस मॉडल में जुड़े प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के प्राथमिक साइटों के सीरियल अनुदैर्ध्य नमूना के इन पहलुओं की नकल संक्रमण में महत्वपूर्ण घटनाओं स्पष्ट करने में मदद मिलेगी, रोगजनन , और इन घटनाओं पर विभिन्न हस्तक्षेप योजनाओं के प्रभाव पर। कुरईएनटी प्रकाशित तकनीक जिगर नमूने के लिए और MLN एक साथ बड़ी सर्जरी और / या शव-परीक्षा, जो एक ही जानवर में एक सीरियल फैशन में इन महत्वपूर्ण साइटों की जांच करने की क्षमता को सीमित करता है शामिल है। हम पहले से MLN के संग्रह के लिए एक लेप्रोस्कोपिक तकनीक का वर्णन किया है। यहाँ, हम MLN के संग्रह के लिए आवश्यक एक ही दो बंदरगाह स्थानों के माध्यम से जिगर और MLN के सीरियल अनुदैर्ध्य नमूना के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव लेप्रोस्कोपिक तकनीक का वर्णन। वही दो बंदरगाहों के उपयोग पशुओं के लिए प्रभाव को कम करता है के रूप में कोई अतिरिक्त चीरों की आवश्यकता है। इस तकनीक को प्रमुख पेट की सर्जरी की तुलना में वृद्धि हुई नमूना आवृत्ति के साथ प्रयोग किया जा सकता है और शल्य जटिलताओं की संभावना कम कर देता है और स्थानीय और प्रणालीगत भड़काऊ प्रतिक्रियाओं है कि परिणाम की व्याख्या को मुश्किल कर सकता है जुड़ा हुआ है। यह प्रक्रिया NHP मॉडल को शामिल करते हुए पशु कल्याण में सुधार लाने के अध्ययन की सुविधा के लिए की क्षमता है।

इन अंगों में laparoscopically एकत्र MLN के प्रसंस्करण के लिए विस्तृत तरीकों, साथ ही सेलुलर पैदावार, और ल्युकोसैट फ़्रीक्वेन्सियों का 13 सूचित किया गया है। चित्रा 1 सेलुलर उपज और व्यवहार्यता डेटा MLN तुलना और जिगर बायोप्सी इस लेप्रोस्कोपिक तकनीक का उपयोग कर दो स्वस्थ महिला आरएमएस से 160 दिनों के अलावा दो समय बिंदुओं पर एकत्र पता चलता है। हमने पाया MLN से सेलुलर उपज जिगर (पी = 0.0021) से की तुलना में काफी अधिक था कि, प्राप्त क्रमश: 33.5 x 10 6 और 6.74 x 10 6 कोशिकाओं के औसत के साथ। मृत सेल धुंधला और फ्लो द्वारा विश्लेषण संकेत दिया कि दोनों अंगों से अलग कोशिकाओं के&gt; 90% व्यवहार्य थे। प्रवाह cytometry का उपयोग करना, हम मूल्यांकन और ल्यूकोसाइट्स और MLN और जिगर में लिम्फोसाइटों की बहुतायत की तुलना में। जिगर के लिए एक प्रतिनिधि gating योजना में दिखाया गया है <strong&gt; चित्र 2, जहां हम पहले केवल व्यवहार्य कोशिकाओं, तो CD45 के चयन + कोशिकाओं, और अंत में CD3 + कोशिकाओं के चयन के द्वारा, एकल कोशिकाओं पर गेटेड समुच्चय को बाहर करने के पीछे हो लिए। CD3 + जनसंख्या से, हम सीडी 4 + और CD8 + टी कोशिकाओं की प्रचुरता का मूल्यांकन किया है, हम CD3- आबादी से CD14 + और CD20 + कोशिकाओं की प्रचुरता का मूल्यांकन किया है। 0 दिवस और दिन 160 में CD45 + और CD3 + MLN से आबादी और दोनों पशुओं के जिगर दिखा भूखंडों cytometry प्रतिनिधि प्रवाह, 3 चित्र में दिखाया जाता है, जबकि चित्रा 4 दो जानवरों के दो नमूनों के लिए ल्युकोसैट और लिम्फोसाइट प्रचुरता को दर्शाता है। MLN से यकृत (औसत 76.9% और व्यवहार्य कोशिकाओं क्रमशः 7.66%, पी = 0.0002) किया CD45 + कोशिकाओं की काफी अधिक प्रचुरता से पता चला है। आश्चर्य नहीं कि MLN CD3 + टी कोशिकाओं की काफी अधिक अनुपात (पी से पता चला0; 0.0001) और सीडी 4+ टी कोशिकाओं (पी = 0.0004)। इसके विपरीत, जिगर काफी MLN (पी = 0.0036) की तुलना में CD14 + ल्यूकोसाइट्स के लिए समृद्ध किया गया था। MLN CD8 + टी कोशिकाओं के एक उच्च औसत से पता चला है, लेकिन इस महत्वपूर्ण नहीं था। हैरानी की बात है, इन दोनों जानवरों के लिए दोनों अंगों CD20 + बी कोशिकाओं के समान प्रचुरता का प्रदर्शन किया। सेलुलर पैदावार और MLN से अलग ल्युकोसैट और लिम्फोसाइट सबसेट की प्रचुरता इस अध्ययन पहले से इस बात की पुष्टि में मानों 23 की सूचना दी। <img alt="आकृति 1" src="/files/ftp_upload/55617/55617fig1.jpg" /> चित्र 1 कुल सेलुलर यील्ड (ऊपर) और सेल व्यवहार्यता (नीचे) Serially एकत्र MLN और लीवर बायोप्सी से। MLN काफी अधिक सेल पैदावार से जिगर किया दिखाया। हालांकि, दोनों नमूना प्रकार नीचे की ओर विश्लेषण के लिए पर्याप्त कोशिकाओं प्रदान की है। सेल व्यवहार्यता, प्रवाह cytom द्वारा मापाetrically एक सुधारी जा सकने वाली मृत सेल अमाइन दाग का उपयोग कर, पता चला है कि दोनों नमूना प्रकार आम तौर पर सामने आए ऊतक पृथक्करण के बाद&gt; 90% सेल व्यवहार्यता। त्रुटि बार नमूने के बीच मानक विचलन का प्रतिनिधित्व करते हैं। <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55617/55617fig1large.jpg" target="_blank">यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a> <img alt="चित्र 2" src="/files/ftp_upload/55617/55617fig2.jpg" /> चित्रा 2. प्रतिनिधि फ्लो गेटिंग रणनीति। सबसे पहले, एकत्रित कोशिकाओं एक सुधारी जा सकने वाली मृत सेल अमाइन दाग का उपयोग कर धुंधला के बाद बाहर रखा गया, केवल व्यवहार्य कोशिकाओं के चयन के बाद। इसके बाद, CD45 + ल्यूकोसाइट्स, चयन किया गया था CD3 + टी कोशिकाओं के चयन के बाद। CD3 + जनसंख्या से, सीडी 4 + और CD8 + टी कोशिकाओं विश्लेषण किया गया। CD3 से - जनसंख्या, CD14 + और CD20 + कोशिकाओं विश्लेषण किया गया। थी<html> रों gating रणनीति भी MLN के लिए इस्तेमाल किया गया था। <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55617/55617fig2large.jpg" target="_blank">यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a> <img alt="चित्र तीन" src="/files/ftp_upload/55617/55617fig3.jpg" /> MLN और दो पशु Longitudinally के लीवर से चित्रा 3. फ्लो भूखंड। MLN और जिगर नमूने दोनों जानवरों के लिए 160 दिनों के अलावा एकत्र किए गए थे। (ए)। MLN CD45 + कोशिकाओं (ल्यूकोसाइट्स); (बी) लिवर CD45 + कोशिकाओं (ल्यूकोसाइट्स); (सी) MLN + CD3 + कोशिकाओं (टी कोशिकाओं); (डी) लिवर CD3 + कोशिकाओं (टी कोशिकाओं)। दोनों जानवरों के लिए, MLN जिगर की तुलना में CD45 + और CD3 + कोशिकाओं की उच्च अनुपात दिखाया। समय के पार, इन आबादियों की आवृत्तियों दोनों जानवरों के लिए समान थे।एस / ftp_upload / 55,617 / 55617fig3large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। <img alt="चित्रा 4" src="/files/ftp_upload/55617/55617fig4.jpg" /> चित्रा 4. CD45 + कोशिकाओं (बाएं) की आवृत्ति और विभिन्न ल्युकोसैट और लिम्फोसाइट उप-जनसंख्या (दाएं) 23 अलग-अलग नमूनों के पार। MLNs, CD45 +, CD3 +, और सीडी 4 + कोशिकाओं के अधिक से अधिक महत्वपूर्ण आवृत्तियों दिखाया गया है, जबकि जिगर CD14 + ल्यूकोसाइट्स का अधिक से अधिक महत्वपूर्ण आवृत्तियों से पता चला है, प्रत्येक अंग की अनूठी कार्यों का प्रदर्शन है। त्रुटि बार नमूने के बीच मानक विचलन का प्रतिनिधित्व करते हैं। <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55617/55617fig4large.jpg" target="_blank">यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>

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Laparoscopic Technique for Serial Collection of Liver and Mesenteric Lymph Nodes in Macaques

यहाँ, हम macaques में जिगर और mesenteric लिम्फ नोड्स (मिलियन) के सीरियल नमूना है कि वृद्धि हुई नमूना आवृत्ति के लिए अनुमति देता है, और शल्य जटिलताओं के लिए क्षमता को कम कर देता है जब एक laparotomy प्रदर्शन की तुलना के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव लेप्रोस्कोपिक तकनीक का वर्णन।

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Research

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Medicine

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Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Subnormothermic की तकनीक<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; लिवर संग्रहण, मूल्यांकन के लिए छिड़काव, और सीमांत जिगर grafts के मरम्मत

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