Name: measurement of basal and forskolin-stimulated lipolysis in inguinal adipose fat pads
Uploaded: 2017-07-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Basal and Forskolin-stimulated Lipolysis in Inguinal Adipose Fat Pads at JoVE.com

이 작품은 보너스 번호 8P20 GM103432-12하에 NIH 일반 의학 연구소의 AHA Award No. 15BGIA23250030 및 BT 보조원 인 와이오밍 대학 (University of Wyoming Faculty Grant)에 의해 지원되었습니다.

모든 프로토콜은 와이오밍 대학교의 동물 관리 지침을 따릅니다. 1. 동물 주거 및 수유 참고 : 동물계 야생 동물 (C57BL / 6) (12 ~ 24 주령)은 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC) 승인 프로토콜에 따라 연구 동물 시설에서 자란다. <ol><li> 6 주부터 시작하여 4 마리의 그룹으로 된 쥐를 별도의 우리에 넣고 38 주까지 NCD 또는 HFD (+ 0.01 % CAP)의 수유 그룹에 무작?...

<ol>
	<li>Schweiger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+lipolysis.">Measurement of lipolysis.</a> Methods Enzymol. 538, 171-193 (2014).</li><li>Coelho, M., Oliveira, T., Fernandes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemistry+of+adipose+tissue:+an+endocrine+organ.">Biochemistry of adipose tissue: an endocrine organ.</a> Arch Med Sci. 9 (2), 191-200 (2013).</li><li>Richard, D., Picard, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brown+fat+biology+and+thermogenesis.">Brown fat biology and thermogenesis.</a> Front Biosci (Landmark Ed). 16, 1233-1260 (2011).</li><li>Barquissau, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White-to-brite+conversion+in+human+adipocytes+promotes+metabolic+reprogramming+towards+fatty+acid+anabolic+and+catabolic+pathways.">White-to-brite conversion in human adipocytes promotes metabolic reprogramming towards fatty acid anabolic and catabolic pathways.</a> Mol Metab. 5 (5), 352-365 (2016).</li><li>Rodriguez, A., Ezquerro, S., Mendez-Gimenez, L., Becerril, S., Fruhbeck, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revisiting+the+adipocyte:+a+model+for+integration+of+cytokine+signaling+in+the+regulation+of+energy+metabolism.">Revisiting the adipocyte: a model for integration of cytokine signaling in the regulation of energy metabolism.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 309 (8), E691-E714 (2015).</li><li>Giordano, A., Smorlesi, A., Frontini, A., Barbatelli, G., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White,+brown+and+pink+adipocytes:+the+extraordinary+plasticity+of+the+adipose+organ.">White, brown and pink adipocytes: the extraordinary plasticity of the adipose organ.</a> Eur J Endocrinol. 170 (5), R159-R171 (2014).</li><li>Langin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+lipolysis+as+a+metabolic+pathway+to+define+pharmacological+strategies+against+obesity+and+the+metabolic+syndrome.">Adipose tissue lipolysis as a metabolic pathway to define pharmacological strategies against obesity and the metabolic syndrome.</a> Pharmacol Res. 53 (6), 482-491 (2006).</li><li>Zimmermann, R., Lass, A., Haemmerle, G., Zechner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+of+fat:+the+role+of+adipose+triglyceride+lipase+in+lipolysis.">Fate of fat: the role of adipose triglyceride lipase in lipolysis.</a> Biochim Biophys Acta. 1791 (6), 494-500 (2009).</li><li>Miyoshi, H., Perfield, J. W., Obin, M. S., Greenberg, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+triglyceride+lipase+regulates+basal+lipolysis+and+lipid+droplet+size+in+adipocytes.">Adipose triglyceride lipase regulates basal lipolysis and lipid droplet size in adipocytes.</a> J Cell Biochem. 105 (6), 1430-1436 (2008).</li><li>Kolditz, C. I., Langin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+lipolysis.">Adipose tissue lipolysis.</a> Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 13 (4), 377-381 (2010).</li><li>Baskaran, P., Krishnan, V., Ren, J., Thyagarajan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capsaicin+induces+browning+of+white+adipose+tissue+and+counters+obesity+by+activating+TRPV1+channel-dependent+mechanisms.">Capsaicin induces browning of white adipose tissue and counters obesity by activating TRPV1 channel-dependent mechanisms.</a> Br J Pharmacol. 173 (15), 2369-2389 (2016).</li><li>Yang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+TRPV1+by+dietary+capsaicin+improves+endothelium-dependent+vasorelaxation+and+prevents+hypertension.">Activation of TRPV1 by dietary capsaicin improves endothelium-dependent vasorelaxation and prevents hypertension.</a> Cell Metab. 12 (2), 130-141 (2010).</li><li>Ding, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+lipolysis+response+to+adipose+afferent+reflex+involved+in+impaired+activation+of+adrenoceptor-cAMP-PKA-hormone+sensitive+lipase+pathway+in+obesity.">Reduced lipolysis response to adipose afferent reflex involved in impaired activation of adrenoceptor-cAMP-PKA-hormone sensitive lipase pathway in obesity.</a> Sci Rep. 6, 34374 (2016).</li><li>Ohyama, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+combination+of+exercise+and+capsinoid+supplementation+additively+suppresses+diet-induced+obesity+by+increasing+energy+expenditure+in+mice.">A combination of exercise and capsinoid supplementation additively suppresses diet-induced obesity by increasing energy expenditure in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 308 (4), E315-E323 (2015).</li><li>Beylot, M., Martin, C., Beaufrere, B., Riou, J. P., Mornex, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+steady+state+and+nonsteady-state+glycerol+kinetics+in+humans+using+deuterium-labeled+tracer.">Determination of steady state and nonsteady-state glycerol kinetics in humans using deuterium-labeled tracer.</a> J Lipid Res. 28 (4), 414-422 (1987).</li><li>Gilker, C. D., Pesola, G. R., Matthews, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mass+spectrometric+method+for+measuring+glycerol+levels+and+enrichments+in+plasma+using+13C+and+2H+stable+isotopic+tracers.">A mass spectrometric method for measuring glycerol levels and enrichments in plasma using 13C and 2H stable isotopic tracers.</a> Anal Biochem. 205 (1), 172-178 (1992).</li><li>Baskaran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPV1+activation+counters+diet-induced+obesity+through+sirtuin-1+activation+and+PRDM-16+deacetylation+in+brown+adipose+tissue.">TRPV1 activation counters diet-induced obesity through sirtuin-1 activation and PRDM-16 deacetylation in brown adipose tissue.</a> Int J Obes (Lond). , (2017).</li><li>Smith, N. C., Fairbridge, N. A., Pallegar, N. K., Christian, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+upregulation+of+CD24+in+pre-adipocytes+promotes+adipogenesis.">Dynamic upregulation of CD24 in pre-adipocytes promotes adipogenesis.</a> Adipocyte. 4 (2), 89-100 (2015).</li><li>Schweiger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+lipolysis.">Measurement of lipolysis.</a> Methods Enzymol. 538, 171-193 (2014).</li><li>Duncan, R. E., Ahmadian, M., Jaworski, K., Sarkadi-Nagy, E., Sul, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+lipolysis+in+adipocytes.">Regulation of lipolysis in adipocytes.</a> Annu Rev Nutr. 27, 79-101 (2007).</li><li>Ahmadian, M., Duncan, R. E., Sul, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+skinny+on+fat:+lipolysis+and+fatty+acid+utilization+in+adipocytes.">The skinny on fat: lipolysis and fatty acid utilization in adipocytes.</a> Trends Endocrinol Metab. 20 (9), 424-428 (2009).</li><li>Jaworski, K., Sarkadi-Nagy, E., Duncan, R. E., Ahmadian, M., Sul, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+triglyceride+metabolism.+IV.+Hormonal+regulation+of+lipolysis+in+adipose+tissue.">Regulation of triglyceride metabolism. IV. Hormonal regulation of lipolysis in adipose tissue.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 293 (1), G1-G4 (2007).</li><li>Jeppesen, J., Kiens, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+and+limitations+to+fatty+acid+oxidation+during+exercise.">Regulation and limitations to fatty acid oxidation during exercise.</a> J Physiol. 590 (5), 1059-1068 (2012).</li><li>Nakamura, M. T., Yudell, B. E., Loor, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+energy+metabolism+by+long-chain+fatty+acids.">Regulation of energy metabolism by long-chain fatty acids.</a> Prog Lipid Res. 53, 124-144 (2014).</li><li>Murray, A. J., Panagia, M., Hauton, D., Gibbons, G. F., Clarke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+free+fatty+acids+and+peroxisome+proliferator-activated+receptor+alpha+in+the+control+of+myocardial+uncoupling+protein+levels.">Plasma free fatty acids and peroxisome proliferator-activated receptor alpha in the control of myocardial uncoupling protein levels.</a> Diabetes. 54 (12), 3496-3502 (2005).</li><li>Barbera, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor+alpha+activates+transcription+of+the+brown+fat+uncoupling+protein-1+gene.+A+link+between+regulation+of+the+thermogenic+and+lipid+oxidation+pathways+in+the+brown+fat+cell.">Peroxisome proliferator-activated receptor alpha activates transcription of the brown fat uncoupling protein-1 gene. A link between regulation of the thermogenic and lipid oxidation pathways in the brown fat cell.</a> J Biol Chem. 276 (2), 1486-1493 (2001).</li><li>Leung, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capsaicin+as+an+anti-obesity+drug.">Capsaicin as an anti-obesity drug.</a> Prog Drug Res. 68, 171-179 (2014).</li><li>Hursel, R., Westerterp-Plantenga, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermogenic+ingredients+and+body+weight+regulation.">Thermogenic ingredients and body weight regulation.</a> Int J Obes (Lond). 34 (4), 659-669 (2010).</li><li>Kang, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+capsaicin+reduces+obesity-induced+insulin+resistance+and+hepatic+steatosis+in+obese+mice+fed+a+high-fat+diet.">Dietary capsaicin reduces obesity-induced insulin resistance and hepatic steatosis in obese mice fed a high-fat diet.</a> Obesity (Silver Spring). 18 (4), 780-787 (2010).</li><li>Winkler, B., Steele, R., Altszuler, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+glycerol+uptake+to+plasma+glycerol+concentration+in+the+normal+dog.">Relationship of glycerol uptake to plasma glycerol concentration in the normal dog.</a> Am J Physiol. 216 (1), 191-196 (1969).</li><li>Dugan, C. E., Cawthorn, W. P., MacDougald, O. A., Kennedy, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplexed+microfluidic+enzyme+assays+for+simultaneous+detection+of+lipolysis+products+from+adipocytes.">Multiplexed microfluidic enzyme assays for simultaneous detection of lipolysis products from adipocytes.</a> Anal Bioanal Chem. 406 (20), 4851-4859 (2014).</li></ol>

글리세롤과 지방산으로의 TGL 분해 과정은 기저 지방 분해 동안 ATGL 9에 의해 촉매되고 자극 된 지방 분해 동안 아데 닐릴 사이 클라 제 / PKA 의존 경로의 활성화를 포함하는 단백질 어레이에 의해 조율된다 21 , 22 , 23 . 지방 분해의 향상은 교통 및 에너지 사용량 24 지방산의 혈장 수준을 증가?...

지방 조직은 에너지를 지방 2 로 저장하고 지방산 산화는 열 생성 3 , 4에 필요합니다. 다이어트를 통해 섭취 된 지방산은 아포 단백질과 함께 키로 마이크론으로 포장되어 혈액 순환을 통해 신체의 다른 조직으로 전달됩니다. 신체의 대부분의 세포가 에너지를 저장하지만, 지방 조직은 과도한 에너지를 지방으로 저장합니다 5 , 6 . 지방 조직에서 지방 분해는 복잡한 프로세스에 의해 규제되고 지방 분해의 분자 세부 사항은 아직 7 모호한 남아있다. 지방 분해는 지방 조직에 저장된 트리글리 세라이드 (TGL)를 가수 분해하여 효소 지방 트리글리세리드 리파아제 (ATGL) 8에 의해 글리세롤 및 지방산 (FA)을 생산하는 과정입니다. 기저 및 자극 된 지방 분해의 변형은 비만의 특징입니다. The basal lipolysis는 TGL을 diacylglycerol (DAG)로 전환시키는 ATGL 활성화 9에 의해 조절되며,이어서 DAG가 monoacyl glycerol (MAG)로 가수 분해됩니다. adenylyl cyclase 를 통한 호르몬 민감성 lipase (HSL)의 활성화는 cyclic adenosine monophosphate (cAMP) 의존성 protein kinase A (PKA) 자극을 활성화시키고 지방 분해를 일으킨다. 따라서, 지방 분해, 기초 및 자극의 측정은이 과정에 관여하는 단백질의 활성을 분석하는 데 중요합니다. 또한, lipolysis의 분자 조절을 풀어 비만 10 새로운 치료 전략을 개발하는 것이 유리할 수 있습니다. 지방 분해와 지방산 산화를 자극하는 분자는 저장소에 저장된 지방을 감소시키는 잠재적 인 후보이므로, 재현성에 대한 견고한 분석을 이용하는 것이 중요합니다. 이전에 발표 된 데이터는 CAP에 의해 백색 지방 조직에서 발현 된 TRPV1 단백질의 활성화가 기저부 강화및 사타구니 지방 패드에 FSK (adenylyl cyclase 활성제) 자극 lipolysis 11 . 이전의 연구는 또한 CAP에 의한 TRPV1의 장기간 활성화가 PKA 12를 활성화 시킨다는 것을 제안한다. PKA의 활성화가 lipolysis 13 , 14를 자극하기 때문에 NBC 또는 HFD (± CAP)가 투여 된 사료에서 32 주 후에 각 사료를 먹인 사타구니 지방 패드에서 기초 및 PKA 의존성 지방 분해를 측정 한 결과 TRPV1 지방 분해의 활성화. 이 기사는 기저 및 자극 지방 분해를 결정하는 효율적인 방법을 설명합니다. 글리세롤 지루한 고성능 액체 크로마토 그래피 측정 또는 (15, 16)를 사용할 수있는 용 기체 크로마토 그래피 / 질량 분석기의 방사성 동위 원소를 이용하는 다른 방법이 있지만,이 방법은 더 직접적 간단하고 비용 효율적인 제공지방 조직에서의 지방 분해를 측정하는 기술.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="694">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Capsaicin</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">M2028</td>
			<td style="width:189px;">TRPV1 agonist</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Forskolin</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">F6886</td>
			<td>Adenylyl cyclase activator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">DMEM</td>
			<td style="width:171px;">GE healthcare and life sciences, UT, USA</td>
			<td style="width:119px;">SH30081.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">High fat diet</td>
			<td style="width:171px;">Research diets, New Brunswick, USA</td>
			<td style="width:119px;">D12492</td>
			<td>Abbreviated as HFD</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tris</td>
			<td style="width:171px;">Amresco, USA</td>
			<td style="width:119px;">O497</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium chloride</td>
			<td style="width:171px;">Thermofisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP358-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium deoxycholate</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">D6750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dithiothreitol</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">D9163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium orthovanadate</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">S6508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Protease inhibitor cocktail</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">P8340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Free Glycerol reagent</td>
			<td style="width:171px;">Sigma USA</td>
			<td style="width:119px;">F6428</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMSO</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">D8779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Triacsin C</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">T4540</td>
			<td>Acyl CoA transferase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bovine serum albumin</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">A7030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Chloroform</td>
			<td style="width:171px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">31998-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Methanol</td>
			<td style="width:171px;">Thermofisher Scientific, USA</td>
			<td style="width:119px;">A412-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium hydroxide</td>
			<td style="width:171px;">Amresco, USA</td>
			<td style="width:119px;">O583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sodium dodecyl sulfate</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">L3371</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bicinchoninic acid reagent</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">BCA1-1KT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">UV-VIS Spectrophotometer</td>
			<td style="width:171px;">Pharmacia Biotech, NJ, USA</td>
			<td style="width:119px;">Ultrospec 2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Normal chow diet</td>
			<td style="width:171px;">Labdiet.com</td>
			<td style="width:119px;">500I</td>
			<td>abreviated as NCD</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">C57BL/6 mice</td>
			<td style="width:171px;">Jackson Laboratory, CT, USA</td>
			<td style="width:119px;">Stock number000664</td>
			<td>wild type mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Parafilm</td>
			<td style="width:171px;">Heathrow Scientific, USA</td>
			<td style="width:119px;">HS 234526A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glycerol standard</td>
			<td style="width:171px;">Sigma, USA</td>
			<td style="width:119px;">G7793</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
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measurement of basal and forskolin-stimulated lipolysis in inguinal adipose fat pads

지방 분해는 지방 조직에 트리글리 세라이드로 저장된 지질을 글리세롤과 지방산으로 가수 분해하는 과정입니다. 이 기사에서는 정상적인식이 요법 (NCD), 고지방식이 요법 (HFD) 또는 0.01을 포함하는 고지식식이 요법을받은 야생형 마우스에서 격리 된 사타구니 지방 패드에서 basal and forskolin (FSK) - 자극 된 지방 분해 측정 방법을 설명합니다 capsaicin (CAP; 일시적인 수용체 잠재 성 vanilloid subfamily 1 (TRPV1) agonist)을 32 주간 투여 하였다. 체외 지방 분해를 수행하기 위해 여기에 기술 된 방법은 Schweiger et al. 1 UV-Visible (UV / Vis) 분광 광도계로 글리세롤 농도를 측정하기위한 상세한 프로토콜을 제시합니다. 여기에 설명 된 방법은 일관된 결과를 얻기 위해 지질 분해 측정을 위해 사타구니 지방 패드를 성공적으로 분리하는 데 사용할 수 있습니다. 사타구니 지방 패드에 설명 된 프로토콜을 다른 조직에서 지방 분해를 측정하기 위해 쉽게 확장 할 수 있습니다.

기초 및 자극 lipolysis에 대한 CAP의 효과를 평가하기 위해,이 연구는 NCD 또는 HFD (± CAP)가 투여 된 야생형 마우스로부터 격리 된 사타구니 지방 지방 패드에서 지방 분해를 측정했습니다. 사타구니 지방 패드에 대한 기초 및 FSK 자극 lipolysis에 대한 대표 결과는 표 1 에 나와 있습니다. 아실 CoA 신테 타제를 억제하고 TGL의 재생을 방지하는 Triacsin C의 ?...

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Measurement of Basal and Forskolin-stimulated Lipolysis in Inguinal Adipose Fat Pads

이 프로토콜은 일반식이 다이어트 (NCD) 또는 고지 방식 (HFD) ± 캡사이신 야생 동물 먹이에서 얻은 사타구니 지방 패드에서 기초 및 forskolin - 자극 lipolysis를 결정하는 방법을 설명합니다. 지방 분해 지수는 사타구니 지방 지방 패드에서 글리세롤 방출을 측정했습니다.

사타구니 지방 지방 패드에서 기저 및 포스 콜린 자극 된 지방 분해의 측정

Lipolysis is a process by which the lipid stored as triglycerides in adipose tissues are hydrolyzed into glycerol and fatty acids. This article describes ...

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

각 질의 닭 깃털 및 화장품에의 응용에서의 준비

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

연구

생화학

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

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절연 및 호흡 측정의 미토 콘 드리 아 애기 thaliana 에서

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

Simultaneous Measurement of Superoxide/Hydrogen Peroxide and NADH Production by Flavin-containing Mitochondrial Dehydrogenases

초과/수소 과산화 수소와 NADH 생산 미토 콘 드리 아 Dehydrogenases 플 라빈을 포함 하 여 동시 측정

It has been reported that mitochondria can contain up to 12 enzymatic sources of reactive oxygen species (ROS). A majority of these sites include ...

Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA Analysis

마우스 지방 조직 수집 및 RNA 분석에 대 한 처리

Compared to other tissues, white adipose tissue has a considerably less RNA and protein content for downstream applications such as real-time PCR and ...

Measurement of Mitochondrial Oxygen Consumption in Permeabilized Fibers of Drosophila Using Minimal Amounts of Tissue

조직의 최소 금액을 사용 하 여 초파리의 Permeabilized 섬유에 미토 콘 드리 아 산소 소비량의 측정

The fruit fly, Drosophila melanogaster, represents an emerging model for the study of metabolism. Indeed, drosophila have structures homologous to human ...

In Situ Measurement and Correlation of Cell Density and Light Emission of Bioluminescent Bacteria

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제자리에서 측정 및 셀 밀도의 상관 관계 및 발광 박테리아의 발광

There is a considerable number of bacterial species capable of emitting light. All of them share the same gene cluster, namely the lux operon. Despite ...

Cortisol Measurement in Koala (Phascolarctos cinereus) Fur

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코알라의 코티솔 측정(파스콜아크토시네레우스)모피

Optimal methods of hormone extraction used to measure stress in animals across sample types are not always the same. Australia&#39;s iconic marsupial ...

Direct Measurement of KDM1A Target Engagement Using Chemoprobe-based Immunoassays

화학 프로브 기반 면역 분석제사용 KDM1A 표적 결합의 직접 측정

The assessment of the target engagement, defined as the interaction of a drug with the protein it was designed for, is a basic requirement for the ...

Measurement of Fatty Acid &#946;-Oxidation in a Suspension of Freshly Isolated Mouse Hepatocytes

Measurement of Fatty Acid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Oxidation in a Suspension of Freshly Isolated Mouse Hepatocytes

갓 분리된 마우스 간세포의 현탁액에서의 지방산 β산화의 측정

Fatty acid &#946;-oxidation is a key metabolic pathway to meet the energy demands of the liver and provide substrates and cofactors for additional ...

Measurement of Protein Import Capacity of Skeletal Muscle Mitochondria

골격 근육 미토콘드리아의 단백질 수입 능력 측정

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