Name: light sheet-based fluorescence microscopy of living or fixed and stained tribolium castaneum embryos
Uploaded: 2017-04-28T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos at JoVE.com

نشكر سفين بلاث للدعم التقني. وكان خط المعدلة وراثيا، الدبقية الأزرق هدية عينية من جريجور بوشر (غوتنغن، ألمانيا). وقد تم تمويل هذا البحث من قبل الكتلة التميز فرانكفورت للالمجمعات ضخم (CEF-MC، EXC 115، المتحدث فولكر دوتشش) الممنوحة في جزء منه إلى EHKS في معهد BUCHMANN لعلوم الحياة الجزيئية (BMLS، مدير إنريكو شليف) في Goethe UNIVERSITAT فرانكفورت قبل جمعية الألمانية للبحوث (DFG).

1. تربية الثقافات خنفساء ملاحظة: يتم تحديد الشروط القياسية باعتباره درجة حرارة الحضانة من 25 درجة مئوية، والرطوبة النسبية 70٪ في 12 ساعة مشرق / 12 ساعة دورة الظلام. لمزيد من المعلومات حول خنفساء تربية، تتوفر 64 الم...

رقابة جودة في فحوصات التصوير الحية، يجب أن تكون إجراءات إعداد وتسجيل غير الغازية، أي لا الميكانيكية والتعامل مع المواد الكيميائية (جمع، dechorionation و التركيب على حامل العينة) ولا تحميل الطاقة المتكاملة خلال الملاحظة أ...

الطحين خنفساء خنفساء الدقيق الحمراء الأحمر، الذي ينتمي إلى عائلة كبيرة من الخنافس darkling (Tenebrionidae)، لديها تاريخ طويل في مجال العلوم الزراعية والحياة وهو ثاني أفضل درس كائن نموذج نموذج حشرة بعد ذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة. خلال العقود الأربعة الماضية، أصبحت قوية وشعبية نموذج حشرة كائن في علم الوراثة التنموية في البيولوجيا التطورية التطوري، وخلال السنوات العشرين الماضية، في التشكل الجنيني لمجموعة متنوعة من الأسباب: ذبابة الفاكهة وخنفساء على حد سواء تنتمي إلى كاملات الانسلاخ، ولكن تباينت ما يقرب من 300 مليون سنة مضت 1، 2، 3، 4. في حين أن التطور الجنيني ذبابة الفاكهة يعتبر عادة على النحو المستمد للغاية، خنفساء يظهر الوضع القابل للأجداد جمعةopment التي وجدت في نسبة كبيرة من أنواع الحشرات 5، 6، 7، 8، 9. أولا، خنفساء يسلك تنمية رأس غير ملتف، أي فمها وهوائيات تظهر بالفعل خلال مرحلة التطور الجنيني 10، 11، 12، 13، 14، 15. ثانيا، خنفساء يتبع مبادئ التنمية قصيرة من الجراثيم، أي تضاف شرائح البطن بالتتابع من منطقة النمو الخلفي خلال germband استطالة 16 و 17 و 18 و 19. ثالثا، خنفساء تطور ويحط في وقت لاحقاثنين من الأغشية الجنينية، أي خارج السلى، والذي يغطي الجنين فقط البطني، والمصلية، الذي يغلف الجنين تماما 20 و 21 و 22. كل من الأغشية تلعب مخلق حاسما 23 وكذلك دور وقائي ضد الكائنات الدقيقة 24 و 25 و 26 جفاف. رابعا، والساقين embryonically النامية تعمل بكامل طاقتها خلال مرحلة الحياة اليرقات وبمثابة براعم للأرجل الكبار خلال التحول العذراء 27، 28، 29، 30، 31. نظرا لحجم ومطالبهم متواضعة صغيرة، وزراعة خنفساء في المختبر هي اضحة إلى حد ما. ثقافات البرية من نوع (WT) سلالات أو خطوط المعدلة وراثيا تتكون عادة من حوالي 100-300 البالغين ويمكن أن تظل داخل زجاجات سعة لتر واحد من الزجاج (البصمة 80 سم 2) شغل 3-4 سم عالية (حوالي 50 غ) مع متوسط النمو التي تتكون من القمح والحبوب الكاملة الطحين تستكمل مع الخميرة الجافة الخاملة. A إمدادات المياه ليست ضرورية. وهذا يسمح حتى معامل صغيرة للحفاظ على العشرات من الثقافات خنفساء داخل حاضنات الحشرات الصغيرة أو متوسطة الحجم متوفرة تجاريا. يتم فصل مراحل تطور لاحقة من خنفساء (اليرقات بعد حوالي رابع الطور، الشرانق والكبار) بسهولة من وسط النمو عن طريق النخل. ويتم الحصول على أجنة متزامنة التي يحتضنها البالغين لفترات قصيرة على وسط وضع البيض. لتحقيق تنمية سريعة، يتم الاحتفاظ الثقافات خنفساء في 32 ° C (حوالي أربعة أسابيع في الجيل)، في حين يتم تنفيذ حفظ الأوراق المالية عادة في 22-25 درجة مئوية (حوالي عشرة أسابيع في جيل). خلال العقد الماضي، العديد من تك القياسيةوقد تم تكييف hniques تدريجيا والأمثل للخنفساء، على النحو الموجز في كتب الناشئة نموذج الكائنات 32. من أهمية كبيرة ومتقدمة أساليب وراثية مثل الجنينية 33، اليرقات 34، 35 أو الوالدين 36 و 37 RNA القائم على التدخل إسقاط الموروثة، والتحول سلالة الجرثومية سواء مع piggyBac 38، 39 أو نظام ترانسبوزاز مينوس 40 و كريسبر / الجينوم أساس Cas9- الهندسة 41. وعلاوة على ذلك، تم التسلسل الجينوم خنفساء قبل نحو عقد من الزمن 42، والآن في الجولة الثالثة من الجينوم الافراج عن التجمع 43، والذي يسمح تحديد كفاءة والجينوم على نطاق والتحليل المنهجي للجينات 44 </sتصل&gt; أو عناصر وراثية أخرى 45 و 46. بالإضافة إلى ذلك، تتوفر للنهج الوراثية النسبية 47، 48، 49، 50 جينومات أربعة أنواع coleopteran أخرى. بالتعاون مع تسلسل الجينوم، تم إجراء تحليلين الوراثية على نطاق واسع، أي شاشة الطفرات إقحامي 51 و جين ضربة قاضية شاشة أساس التدخل RNA منهجي 52 و 53. مضان التصوير الحي مع widefield، متحد البؤر أو ضوء المجهر القائم على ورقة (LSFM) يسمح لمراقبة التشكل الجنيني للخنفساء بوصفها وظيفة من الزمن (أي التشكل) في سياق متعدد الأبعاد (الجدول 1). في widefield ومضان المجهري متحد البؤر، وكسكيتويسترشد أوجه وانبعاث الضوء من خلال العدسة نفسها موضوعية. في كلا النهجين، يضيء العينة كامل لكل طائرة ثنائية الأبعاد المسجلة. وبالتالي، يتم إخضاع العينات إلى مستويات طاقة عالية جدا. في LSFM، إلا أن fluorophores في المستوى البؤري متحمسون بسبب فصل الإضاءة والكشف باستخدام اثنين من العدسات موضوعية مرتبة عموديا (الشكل 1). LSFM يأتي في اثنين من تطبيقات شريعي - في طائرة واحدة إضاءة المجهر (SPIM) والرقمية الممسوحة ضوئيا ضوء الليزر على أساس ورقة مضان المجهر (DSLM، الشكل 2) - وتقدم العديد من المزايا الهامة على الأساليب التقليدية: (ط) الجوهرية القدرة باجتزاء البصرية، (ب) قرار محوري جيد، (ج) انخفاض بقوة مستوى الصورة تبيض، (د) منخفضة جدا صور سمية، (ت) ارتفاع نسبة الإشارة إلى الضوضاء، (السادس) عالية نسبيا سرعة الاستحواذ، (السابع) التصوير على طول عدة اتجاهات و (السادسب) اختراق الأنسجة أعمق بسبب استخدام منخفضة العددية فتحة إضاءة العدسات الهدف 54 و 55 و 56. وقد تم بالفعل تطبيق LSFM بنجاح في خنفساء لتوثيق ما يقرب من التشكل الجنيني كامل 57 وتحليل مبادئ تمزق الغشاء خارج الجنينية في بداية إغلاق الظهرية 23. لزيادة جاذبية LSFM في المجتمع خنفساء وللعلوم الحشرات بشكل عام، فإنه من الأهمية بمكان وضع إجراءات التشغيل القياسية وتحسين الطرق والبروتوكولات ومجموعة الموارد إلى المستوى الذي يصبح المجهر وسهولة -استخدام أداة قياسية في مختبرات البيولوجيا التنموية، والأسئلة البيولوجية البقاء في مركز الاهتمام. يبدأ هذا البروتوكول مع أساسيات خنفساء &lt;/ م&gt; زراعة، أي صيانة، والاستنساخ وجمع الأجنة. بعد ذلك، موضحة استراتيجيتين التجريبية: (ط) التصوير المباشر لخطوط المعدلة وراثيا حسب الطلب و (ب) تصوير الأجنة الثابتة التي كانت ملطخة الأصباغ الفلورية (الجدول 2). وفي وقت لاحق، وشرح ثلاث تقنيات المتصاعدة مع أغراض مختلفة قليلا في التفاصيل (الشكل 3 والجدول 3): (ط) عمود الاغاروز، (ب) نصف الكرة الاغاروز و (ج) صاحب بيت العنكبوت رواية. بروتوكول ثم يشرح الإجراء الحصول على البيانات مع LSFM. وترد طرائق التصوير والاعتبارات الرئيسية. وأخيرا، أوضح استرجاع الجنين ويتم تقديم اقتراحات لمعالجة البيانات الأساسية. في نتائج تمثيلية، بيانات التصوير على الهواء مباشرة من اثنين من الرواية وترد 58 خطوط المعدلة وراثيا الدبقية الأزرق ويتم توفير قواعد البيانات التصوير منها كمورد للتحميل حسب الطلب. بالإضافة إلى ذلك، صورةوتعرض البيانات للأجنة الثابتة التي كانت ملطخة مع مجموعة متنوعة من الأصباغ مضان. وتركز النقاش على مراقبة الجودة، والقيود الحالية للنهج التصوير الحي والتكيف البروتوكول إلى الأنواع الأخرى. هو مكتوب على بروتوكول لالمجاهر مضان القائم على ورقة الخفيفة التي تكون مجهزة مع غرفة العينة وآلية المشبك للتدوير لحاملي موحد عينة 54، 59، 60، والتي عادة ما تكون العناصر على شكل اسطوانة مصنوعة من المعدن والبلاستيك أو الزجاج مع قطر في نطاق ملليمتر. البروتوكول هو أيضا مناسبة لكلا تطبيقات شريعي، أي SPIM وDSLM، فضلا عن الاجهزة مع اثنين أو أكثر إضاءة والكشف عن الأسلحة 61 و 62 و 63. نتائج تمثيلية تظهر البيانات في قناتين الطيفية، الأخضر (ايلlumination مع ليزر 488 نانومتر، والكشف من خلال 525/50 ممر الموجة فلتر) والأحمر (الإضاءة مع ليزر 561 نانومتر، والكشف من خلال 607/70 ممر الموجة مرشح)، ولكن بروتوكول يمكن توسيعها إلى ثلاث أو أربع قنوات الطيفية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">full grain wheat flour</td>
			<td style="width:119px;">Demeter e.V.</td>
			<td style="width:71px;">1.13E+08</td>
			<td style="width:167px;">US: whole wheat flour, UK: whole meal flour</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">405 fine wheat flour</td>
			<td style="width:119px;">Demeter e.V.</td>
			<td style="width:71px;">1.13E+08</td>
			<td style="width:167px;">US: pastry flour, UK: soft flour</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">inactive dry yeast</td>
			<td style="width:119px;">Flystuff / Genesee Scientific</td>
			<td style="width:71px;">62-106</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">10010-023</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sodium hypochlorite, ~12% active Cl</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">425044-250ML</td>
			<td style="width:167px;">Caution: sodium hypochlorite is corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">low-melt agarose</td>
			<td style="width:119px;">Carl Roth</td>
			<td style="width:71px;">6351.2</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">6-well plate</td>
			<td style="width:119px;">Orange Scientific</td>
			<td style="width:71px;">4430500</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">24-well plate</td>
			<td style="width:119px;">Orange Scientific</td>
			<td style="width:71px;">4430300</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">glass capillaries, internal &#216; 0.46 mm</td>
			<td style="width:119px;">Brand GmbH + Co KG</td>
			<td style="width:71px;">7087 09</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">SYTOX Green</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">57020</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">YOYO-1 Iodide</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">Y3601</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">BOBO-3 Iodide</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">B3586</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">A12379</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Alexa Fluor 546 Phalloidin</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">A22283</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 800 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-051</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 710 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-050</td>
			<td style="width:167px;">for growth medium preparation (step 1.1)</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 300 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-040</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 250 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-038</td>
			<td style="width:167px;">for egg laying medium preparation (step 1.2)</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">glass dish, &#216; 100 mm &#215; 20 mm</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">CLS70165102</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">cell strainer, 100 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:71px;">352360</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">paint brush, head &#216; 2 mm</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">149-2121</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">syringe, 1.0 ml</td>
			<td style="width:119px;">B. Braun Medical AG</td>
			<td style="width:71px;">9166017V</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">scintillation vials</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">M1152-1000EA</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">paraformaldehyde</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">158127</td>
			<td style="width:167px;">Caution: paraformaldehyde is toxic and corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">n-heptane &#8805; 99%</td>
			<td style="width:119px;">Carl Roth</td>
			<td style="width:71px;">8654.1</td>
			<td style="width:167px;">Caution: n-heptane is flammable and toxic</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">X100-100ML</td>
			<td style="width:167px;">Caution: Trition X-100 is corrosive</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

light sheet-based fluorescence microscopy of living or fixed and stained tribolium castaneum embryos

أصبح الدقيق الحمراء خنفساء خنفساء الدقيق الحمراء هام كائن نموذج حشرة في علم الوراثة التنموية والبيولوجيا التطورية التطوري. مراقبة الأجنة خنفساء مع خفيفة على أساس ورقة مضان المجهر لها مزايا متعددة على widefield التقليدية ومتحد البؤر المجهري مضان. نظرا لخصائص فريدة من نوعها المجهر القائم على ورقة خفيفة، وثلاث صور ثلاثية الأبعاد من العينات الحية يمكن تسجيلها مع نسب عالية إشارة إلى الضجيج وانخفاض كبير في الصورة تبيض وكذلك صور سمية على طول عدة اتجاهات على مدى فترات تدوم عدة أيام. مع أكثر من أربع سنوات من التطوير المنهجي وزيادة مستمرة من البيانات، والوقت يبدو مناسبا لوضع إجراءات التشغيل القياسية لاستخدام التكنولوجيا ورقة الخفيفة في المجتمع خنفساء وكذلك في المجتمع الحشرات بشكل عام. يصف هذا البروتوكول ثلاث تقنيات التركيب مناسبة وأو لأغراض مختلفة، تقدم خطين خنفساء المعدلة وراثيا جديدة مصنوعة خصيصا مناسبا للتصوير الحية على المدى الطويل، وتشير خمسة الأصباغ الفلورية لتسمية هياكل داخل الخلايا من الأجنة ثابتة وتوفر معلومات عن ما بعد معالجة البيانات للتقييم في الوقت المناسب من البيانات المسجلة. تركز ممثل النتائج على التصوير الحي على المدى الطويل، باجتزاء البصرية ومراقبة من نفس الجنين على طول عدة اتجاهات. يتم توفير قواعد البيانات منها كمورد للتحميل. وأخيرا، يناقش بروتوكول مراقبة الجودة لفحوصات التصوير الحية، والقيود الحالية وتطبيق الإجراءات المحددة لأنواع الحشرات الأخرى. ويهدف هذا البروتوكول في المقام الأول لعلماء البيولوجيا التطورية الذين يسعون حلول التصوير التي يتفوق المعدات المختبرية القياسية. وهي تشجع محاولة مستمرة لإغلاق الفجوة بين المختبرات / المجتمعات الموجه من الناحية الفنية، والذي تطوير وصقل مايكرويننسخ منهجيا، ومختبرات علوم الحياة / المجتمعات، والتي تتطلب حلولا &quot;التوصيل والتشغيل&quot; للتحديات التقنية. وعلاوة على ذلك، فإنه يدعم هذا النهج البديهي أن يتحرك الأسئلة البيولوجية في مركز الاهتمام.

يصف هذا البروتوكول في إطار تجريبي للتصوير مضان المعيشة أو ثابتة وملطخة الأجنة خنفساء مع LSFM. ويرجع ذلك إلى انخفاض مستويات الصورة تبيض والصور سمية، وهي نتيجة مباشرة لقدرتها باجتزاء البصرية، LSFM بشكل خاص مناسبة تماما لتصوير حي على المدى الطويل. ...

Watch this Scientific Journal Video about Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos at JoVE.com

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

أصبح تصوير التشكل للأجنة الحشرات مع ضوء على أساس ورقة مضان المجهر الدولة من الفن. ويحدد هذا البروتوكول ويقارن ثلاث تقنيات التركيب المناسبة للأجنة خنفساء الدقيق الحمراء، ويدخل اثنين من رواية خطوط المعدلة وراثيا حسب الطلب مناسبة تماما لتصوير العيش، ويناقش ضوابط الجودة الأساسية ويشير إلى القيود التجريبية الحالية.

مضان المجهر المعيشة أو الثابتة والملون على أساس ورقة الخفيفة<em&gt; خنفساء الدقيق الحمراء</em&gt; الأجنة

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion FDAP

قياس الاستقرار البروتين المتواجد في الحي اسماك الزرد الأجنة عن طريق الإسفار تسوس بعد Photoconversion (FDAP)

Protein stability influences many aspects of biology, and measuring the clearance kinetics of proteins can provide important insights into biological ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

طرق لنقل المترجمة على وجه التحديد من الخلايا أو الحمض النووي في Postimplantation المبكر أجنة الفئران

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Using Light Sheet Fluorescence Microscopy to Image Zebrafish Eye Development

باستخدام ورقة ضوء مضان المجهري لصورة التنمية الزرد العين

Light sheet fluorescence microscopy (LSFM) is gaining more and more popularity as a method to image embryonic development. The main advantages of LSFM ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

تحريض نقص الأكسجة في الضفدع الحي والأجنة الزرد

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

تحليل كمي الجامع-جبل الفلورة السكان السلف القلب في الأجنة الماوس

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Multimodal Hierarchical Imaging of Serial Sections for Finding Specific Cellular Targets within Large Volumes

تصوير هرمي متعدد الوسائط من مقاطع المسلسل للعثور على أهداف محددة الخلوية داخل كميات كبيرة

Targeting specific cells at ultrastructural resolution within a mixed cell population or a tissue can be achieved by hierarchical imaging using a ...

Isotropic Light-Sheet Microscopy and Automated Cell Lineage Analyses to Catalogue Caenorhabditis elegans Embryogenesis with Subcellular Resolution

المجهر الضوئي ورقه الخفيفة والمؤتمتة الخلايا النسب تحليلات لكتالوج Caenorhabditis الاجنه الجنينية مع القرار تحت الخلوية

Caenorhabditis elegans (C. elegans) stands out as the only organism in which the challenge of understanding the cellular origins of an entire nervous ...

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

الحقن المجهري للحمض النووي في براعم العيون في أجنة Xenopus laevis والتصوير من GFP التعبير عن الأشجار Axonal البصرية في سليمة، وحيا Xenopus Tadpoles

The primary visual projection of tadpoles of the aquatic frog Xenopus laevis serves as an excellent model system for studying mechanisms that regulate the ...

A Layered Mounting Method for Extended Time-Lapse Confocal Microscopy of Whole Zebrafish Embryos

طريقه تركيب طبقات لتمديد المجهر البؤري المجهري لأجنه الزبرافيش الكاملة بفواصل زمنيه طويلة

Dynamics of development can be followed by confocal time-lapse microscopy of live transgenic zebrafish embryos expressing fluorescence in specific tissues ...

Light-Induced GFP Expression in Zebrafish Embryos using the Optogenetic TAEL/C120 System

تعبير GFP الناجم عن الضوء في أجنة حمار وحشي باستخدام نظام TAEL/C120 Optogenetic

Inducible gene expression systems are an invaluable tool for studying biological processes. Optogenetic expression systems can provide precise control ...