Name: light sheet-based fluorescence microscopy of living or fixed and stained tribolium castaneum embryos
Uploaded: 2017-04-28T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos at JoVE.com

Wij danken Sven Plath voor technische ondersteuning. De Glia-blauwe transgene lijn was een soort geschenk van Gregor Bucher (Göttingen, Duitsland). Het onderzoek werd gefinancierd door de Cluster of Excellence Frankfurt am Main voor macromoleculaire complexen (CEF-MC, EXC 115, spreker Volker Dötsch) gedeeltelijk toegekend aan EHKS bij de Buchmann Institute for Molecular Life Sciences (BMLS, directeur Enrico Schleiff) bij het Goethe Universität Frankfurt am Main door de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG).

1. Veehouderij van Tribolium Cultures OPMERKING: Standaard omstandigheden worden gedefinieerd als een incubatietemperatuur van 25 ° C en 70% relatieve vochtigheid in een 12 uur licht / 12 uur donker cyclus. Voor meer informatie over Tribolium en veeteelt, de respectieve richtlijnen beschikbaar 64. Dit protocol vereist twee verschillende op meel gebaseerde media, dat kan worden bereid kilogramhoeveelheden en houdbaarheid van meerdere maanden. <ol><...

Kwaliteitscontrole In levende beeldvormende assays, moet het preparaat en registratieprocedure niet-invasief, dat wil zeggen noch de mechanische en chemische hanteren (verzamelen, dechorionation, montage op de monsterhouder) noch de geïntegreerde lading energie tijdens de waarneming de levensvatbaarheid van het preparaat moeten beïnvloeden. Voor studies die kenmerkend WT ontwikkeling, is het raadzaam om alleen gegevens uit experimenten waarin het embryo overleeft ...

De rode Tribolium castaneum, die behoort tot de grote familie van zwartlijfkevers (Tenebrionidae), heeft een lange geschiedenis binnen de landbouw- en biowetenschappen en is het tweede best bestudeerde model insect modelorganisme na de vrucht Drosophila melanogaster vliegen. Gedurende de laatste vier decennia, het werd een krachtige en populaire insect modelorganisme in ontwikkelingsstoornissen genetica, in de evolutionaire ontwikkelingsbiologie en tijdens de laatste twintig jaar, in embryonale morfogenese voor een verscheidenheid van redenen: Drosophila en Tribolium behoren beide tot de Holometabola, maar gedivergeerd ongeveer 300 miljoen jaar geleden 1, 2, 3, 4. Terwijl de embryonale ontwikkeling van Drosophila algemeen wordt beschouwd als zeer afgeleid, Tribolium toont een voorouderlijke vorm van ontling die in een aanzienlijk groter deel van insectensoorten 5, 6, 7, 8, 9. Enerzijds, Tribolium vertoont niet-involutie head ontwikkeling, namelijk de monddelen en antennes reeds ontstaan tijdens embryogenese 10, 11, 12, 13, 14, 15. Ten tweede, Tribolium de beginselen van korte kiem ontwikkeling, namelijk buiksegmenten worden achtereenvolgens een achterste groeizone tijdens germband rek 16, 17, 18, 19. Ten derde, Tribolium ontwikkelt en later degradeerttwee extra-embryonale membranen dwz het amnion, die het embryo enige ventraal bedekt en de serosa, waarbij het embryo volledig omhult 20, 21, 22. Beide membranen spelen een cruciale morfogenetische 23 en de beschermende rol tegen micro-organismen 24, 25 en 26 uitdroging. Ten vierde, de embryonale ontwikkeling benen volledig functioneel tijdens het larvale levensfase en dienen als primordia voor de volwassen benen tijdens pupal metamorfose 27, 28, 29, 30, 31. Door hun geringe omvang en bescheiden eisen, de teelt van Tribolium in het laboratorium is vrij eenvoudig. Culturen van wildtype (WT) stammen of transgene lijnen gewoonlijk uit ongeveer 100-300 volwassenen en kan binnen één liter glazen flessen (footprint 80 cm2) gevuld 3-4 cm hoog (ongeveer 50 g) met groeimedium dat uit volledige korreltarwe bewaard meel aangevuld met actieve droge gist. Een watertoevoer is niet nodig. Dit maakt het mogelijk zelfs kleine laboratoria om tientallen kever culturen binnen kleine of middelgrote handel verkrijgbaar insect incubators te houden. Later ontwikkelingsstadia van Tribolium (larven na ongeveer het vierde stadium, poppen en volwassenen) zijn gemakkelijk gescheiden van het groeimedium door zeven. Gesynchroniseerde embryo&#39;s worden verkregen door het incuberen volwassenen kortstondig op eierleggende medium. Voor snelle ontwikkeling, worden kever kweken bij 32 ° C (ongeveer vier weken per generatie) gehouden, terwijl voorraadbeheer typisch uitgevoerd bij 22-25 ° C (ongeveer tien weken per generatie). In de afgelopen tien jaar veel standaard techniques zijn geleidelijk aangepast en geoptimaliseerd voor Tribolium, zoals samengevat in de Emerging Modelorganismen boeken 32. Van groot belang voortbewogen genetische werkwijzen zoals embryonale 33, larvale 34, 35 of ouderlijke 36, 37 RNA-interferentie genexpressie knockdown kiemlijn transformatie met ofwel de piggyBac 38, 39 of Minos 40 transposase systeem CRISPR / Cas9 gebaseerde genoom 41 techniek. Voorts is de Tribolium genoom gesequenced ongeveer tien jaar geleden 42, en is nu in de derde ronde van genoom samenstel los 43, die efficiënt en genoom-brede identificatie en systematische analyse van genen mogelijk maakt 44 </sup&gt; of andere genetische elementen 45, 46. Bovendien, de genomen van vier andere soorten coleoptera zijn vergelijkende genetische benaderingen 47, 48, 49, 50. In samenwerking met de gesequenced genoom, hebben twee grote genetische analyses uitgevoerd, namelijk een insertie mutagenese scherm 51 en een systematische RNA interferentie-genexpressie knockdown scherm 52, 53. Fluorescentie levende beeldvorming met groothoek, confocale of lichte vel gebaseerde microscopie (LSFM) maakt het mogelijk om de morfologie van embryonale Tribolium acht als functie van de tijd (de morfogenese) in een multi-dimensionele context (tabel 1). In groothoek en confocale fluorescentie microscopie, de Excitatie en emissie licht wordt geleid door dezelfde objectieflens. In beide benaderingen wordt het gehele monster verlicht elke geregistreerde tweedimensionale vlak. Derhalve worden de monsters onderworpen aan zeer hoge energieniveaus. In LSFM alleen de fluoroforen in het brandvlak worden geëxciteerd door een ontkoppeling van belichting en detectie door twee loodrecht objectieflenzen (figuur 1). LSFM komt in twee canonieke implementaties - de enkel vlak belichting microscoop (SPIM) en de digitale gescande laserlicht vel basis fluorescentiemicroscoop (DSLM figuur 2) - en biedt een aantal belangrijke voordelen ten opzichte van traditionele werkwijzen: (i) intrinsieke optische sectie vermogen, (ii) goede axiale resolutie, (iii) sterk verlaagd niveau van foto-bleken, (iv) lage foto-toxiciteit, (v) een hoge signaal-ruisverhouding, (vi) een relatief hoge meetsnelheid, (vii) beeldvorming langs meerdere richtingen en (viii) diepere penetratie dankzij het gebruik van lage numerieke apertuur verlichtingsobjektiefstelsel lenzen 54, 55, 56. LSFM is al met succes toegepast in Tribolium tot bijna het gehele embryonale morfogenese 57 te documenteren en aan de principes van extra-embryonale membraan breuk aan het begin van dorsale sluiting 23 te analyseren. Om de aantrekkelijkheid van LSFM verhogen in de Tribolium gemeenschap en voor insecten wetenschap in het algemeen, is het van groot belang is voor standard operating procedures vast te stellen en de methoden, protocollen en het zwembad van de middelen om een niveau te verbeteren waar de microscoop wordt een gemak-of -gebruik standaard instrument in ontwikkelingsbiologie laboratoria, en de biologische vragen verblijven in het centrum van de belangstelling. Dit protocol begint met de basisprincipes van Tribolium &lt;/ em&gt; teelt, dwz het onderhoud, de voortplanting en embryo collectie. Vervolgens worden twee experimentele strategieën toegelicht: (i) levende beeldvorming van op maat gemaakte transgene lijnen en (ii) beeldvorming vaste embryo&#39;s die werden gekleurd met fluorescente kleurstoffen (Tabel 2). Vervolgens drie bevestigingstechnieken met lichtjes verschillende doeleinden worden toegelicht (figuur 3 en tabel 3): (i) het agarosekolom, (ii) de agarose halfrond en (iii) het nieuwe spinnenweb houder. Het protocol legt vervolgens de data acquisitie procedure LSFM. Beeldvormende modaliteiten en de belangrijkste overwegingen zijn geschetst. Tenslotte wordt embryo retrieval uitgelegd en suggesties voor basisgegevens transformatie worden geleverd. In de representatieve resultaten, actuele beeldgegevens van twee nieuwe maat en Glia-blauwe 58 transgene lijnen weergegeven en de bijbehorende datasets beeldvorming verschaft als downloadbare bron. Bovendien, imagegegevens van vaste embryo&#39;s die werden gekleurd met verschillende fluorescentie kleurstoffen worden gepresenteerd. De discussie richt zich op de kwaliteitscontrole, de huidige beperkingen van de live-imaging benadering en de aanpassing van het protocol bij andere soorten. Het protocol is bestemd voor lichte plaat gebaseerde fluorescentie microscopen die zijn voorzien van een monsterkamer en een draaibaar klemmechanisme gestandaardiseerde monsterhouders 54, 59, 60, die typisch cilindervormige elementen van metaal, kunststof of glas met een diameter in het millimeterbereik. Het protocol is geschikt voor canonische implementaties, namelijk SPIM en DSLM, alsmede voor opstellingen met twee of meer belichting en detectie armen 61, 62, 63. De representatieve resultaten tonen gegevens in twee spektraalkanalen, groen (illumination met een 488 nm laser detectie door een 525/50 banddoorlaatfilter) en rode (belichting met een 561 nm laser detectie door een 607/70 banddoorlaatfilter), maar het protocol kan worden uitgebreid tot drie of vier spektraalkanalen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">full grain wheat flour</td>
			<td style="width:119px;">Demeter e.V.</td>
			<td style="width:71px;">1.13E+08</td>
			<td style="width:167px;">US: whole wheat flour, UK: whole meal flour</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">405 fine wheat flour</td>
			<td style="width:119px;">Demeter e.V.</td>
			<td style="width:71px;">1.13E+08</td>
			<td style="width:167px;">US: pastry flour, UK: soft flour</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">inactive dry yeast</td>
			<td style="width:119px;">Flystuff / Genesee Scientific</td>
			<td style="width:71px;">62-106</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">10010-023</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sodium hypochlorite, ~12% active Cl</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">425044-250ML</td>
			<td style="width:167px;">Caution: sodium hypochlorite is corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">low-melt agarose</td>
			<td style="width:119px;">Carl Roth</td>
			<td style="width:71px;">6351.2</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">6-well plate</td>
			<td style="width:119px;">Orange Scientific</td>
			<td style="width:71px;">4430500</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">24-well plate</td>
			<td style="width:119px;">Orange Scientific</td>
			<td style="width:71px;">4430300</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">glass capillaries, internal &#216; 0.46 mm</td>
			<td style="width:119px;">Brand GmbH + Co KG</td>
			<td style="width:71px;">7087 09</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">SYTOX Green</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">57020</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">YOYO-1 Iodide</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">Y3601</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">BOBO-3 Iodide</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">B3586</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">A12379</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Alexa Fluor 546 Phalloidin</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">A22283</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 800 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-051</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 710 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-050</td>
			<td style="width:167px;">for growth medium preparation (step 1.1)</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 300 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-040</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 250 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-038</td>
			<td style="width:167px;">for egg laying medium preparation (step 1.2)</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">glass dish, &#216; 100 mm &#215; 20 mm</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">CLS70165102</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">cell strainer, 100 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:71px;">352360</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">paint brush, head &#216; 2 mm</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">149-2121</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">syringe, 1.0 ml</td>
			<td style="width:119px;">B. Braun Medical AG</td>
			<td style="width:71px;">9166017V</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">scintillation vials</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">M1152-1000EA</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">paraformaldehyde</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">158127</td>
			<td style="width:167px;">Caution: paraformaldehyde is toxic and corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">n-heptane &#8805; 99%</td>
			<td style="width:119px;">Carl Roth</td>
			<td style="width:71px;">8654.1</td>
			<td style="width:167px;">Caution: n-heptane is flammable and toxic</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">X100-100ML</td>
			<td style="width:167px;">Caution: Trition X-100 is corrosive</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

light sheet-based fluorescence microscopy of living or fixed and stained tribolium castaneum embryos

De rode Tribolium castaneum is uitgegroeid tot een belangrijke insect modelorganisme in ontwikkelings-genetica en de evolutionaire ontwikkelingsbiologie. De waarneming van Tribolium embryo met licht-sheet based fluorescentiemicroscopie heeft meerdere voordelen ten opzichte van conventionele groothoek en confocale fluorescentiemicroscopie. Vanwege de unieke eigenschappen van een licht-sheet based microscoop, kunnen driedimensionale beelden van levende exemplaren worden opgenomen met hoge signaal-ruisverhouding en een aanzienlijk verlaagde foto-bleking en foto- toxiciteit langs meerdere richtingen gedurende perioden dat verschillende duren dagen. Met meer dan vier jaar van ontwikkeling van de methodiek en een continue toename van data, lijkt het geschikt moment in standard operating procedures vast te stellen voor het gebruik van licht plaat technologie in de Tribolium gemeenschap als in het insect gemeenschap in het algemeen. Dit protocol beschrijft drie bevestigingstechnieken geschof andere doeleinden, presenteert twee nieuwe op maat gemaakte transgene lijnen Tribolium geschikt voor langdurige levende beeldvorming, stelt vijf fluorescerende kleurstoffen intracellulaire structuren vaste embryo label verschaft informatie aangaande data naverwerking voor de tijdige evaluatie van de geregistreerde gegevens. Representatieve resultaten concentreren op de lange termijn live-imaging, optische sectie en de observatie van dezelfde embryo langs meerdere richtingen. De respectieve datasets worden geleverd als downloadbare bron. Tenslotte beschrijft het protocol kwaliteitscontroles voor levende beeldvormende assays huidige beperkingen en de toepasbaarheid van de beschreven procedures met andere insectensoorten. Dit protocol is vooral bedoeld voor ontwikkelingsstoornissen biologen die imaging oplossingen die standaard laboratoriumapparatuur overtreffen zoeken. Het bevordert de continue poging om de kloof tussen de technisch georiënteerde laboratoria / gemeenschappen, die zich ontwikkelen en verfijnen micro sluitenkopiëren methodologisch, en de life science laboratoria / gemeenschappen, die &#39;plug-and-play&#39; oplossingen voor technische uitdagingen vereisen. Bovendien ondersteunt een axiomatische benadering die de biologische vraagstukken in het middelpunt van de aandacht beweegt.

Dit protocol beschrijft een experimenteel kader voor fluorescentie beeldvorming van levende of gefixeerd en gekleurd Tribolium embryo&#39;s met LSFM. Vanwege de lage foto-bleken en foto-toxiciteit, een direct gevolg van de optische sectie vermogen, LSFM bijzonder geschikt voor langdurig leven beeldvorming. De nieuwe AGOC {ATub&#39;H2B-mEmerald} nr.1 transgene lijn brengt een histone2B mEmerald-fusie-eiwit onder contro...

Watch this Scientific Journal Video about Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos at JoVE.com

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Afbeelden van de morfogenese van insecten embryo met licht-sheet based fluorescentiemicroscopie is state of the art worden. Dit protocol beschrijft en vergelijkt drie montagetechnieken geschikt voor Tribolium castaneum embryo, worden twee nieuwe op maat gemaakte transgene lijnen geschikt voor levende imaging bespreekt essentiële kwaliteitscontroles en geeft de huidige experimentele beperkingen.

Light-Sheet gebaseerd fluorescentiemicroscopie van de levens- of gefixeerd en gekleurd<em&gt; Tribolium castaneum</em&gt; Embryo&#39;s

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion FDAP

Meten Eiwit Stabiliteit in Living zebravis embryo&#39;s met behulp van fluorescentie Decay Na Photoconversion (FDAP)

Protein stability influences many aspects of biology, and measuring the clearance kinetics of proteins can provide important insights into biological ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

Methoden voor Juist Gelokaliseerde Overdracht van cellen of DNA in Early postimplantatie muizenembryo&#39;s

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Using Light Sheet Fluorescence Microscopy to Image Zebrafish Eye Development

Met behulp van Light Sheet fluorescentiemicroscopie met Afbeelding zebravis Eye Development

Light sheet fluorescence microscopy (LSFM) is gaining more and more popularity as a method to image embryonic development. The main advantages of LSFM ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

Inductie van hypoxie in levende kikker en zebravis embryo&#39;s

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

Kwantitatieve geheel-mount immunofluorescentie analyse van cardiale Progenitor populaties in muis embryo 's

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Multimodal Hierarchical Imaging of Serial Sections for Finding Specific Cellular Targets within Large Volumes

Multimodale hiërarchische beeldvorming van seriële secties voor het vinden van specifieke cellulaire doelen binnen grote Volumes

Targeting specific cells at ultrastructural resolution within a mixed cell population or a tissue can be achieved by hierarchical imaging using a ...

Isotropic Light-Sheet Microscopy and Automated Cell Lineage Analyses to Catalogue Caenorhabditis elegans Embryogenesis with Subcellular Resolution

Isotrope licht-vel microscopie en geautomatiseerde Cell Lineage analyses catalogus Caenorhabditis embryogenese met subcellulaire resolutie

Caenorhabditis elegans (C. elegans) stands out as the only organism in which the challenge of understanding the cellular origins of an entire nervous ...

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Micro injectie van DNA in de Oogtoppen van Xenopus laevis embryo's en beeldvorming van GFP dat optische axonale Arbors uitdrukt in intact, levend Xenopus tadpoles

The primary visual projection of tadpoles of the aquatic frog Xenopus laevis serves as an excellent model system for studying mechanisms that regulate the ...

A Layered Mounting Method for Extended Time-Lapse Confocal Microscopy of Whole Zebrafish Embryos

Een gelaagde montagemethode voor de uitgebreide time-lapse confocale microscopie van hele zebravis embryo's

Dynamics of development can be followed by confocal time-lapse microscopy of live transgenic zebrafish embryos expressing fluorescence in specific tissues ...

Light-Induced GFP Expression in Zebrafish Embryos using the Optogenetic TAEL/C120 System

Lichtgeïnduceerde GFP-expressie in zebravisembryo's met behulp van het optogenetische TAEL/C120-systeem

Inducible gene expression systems are an invaluable tool for studying biological processes. Optogenetic expression systems can provide precise control ...