Name: light sheet-based fluorescence microscopy of living or fixed and stained tribolium castaneum embryos
Uploaded: 2017-04-28T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos at JoVE.com

Vi takker Sven Plath for teknisk støtte. Den Glia-blå transgene linjen var en slags gave fra Gregor Bucher (Göttingen, Tyskland). Forskningen ble finansiert av Cluster of Excellence Frankfurt am Main for makromolekylær komplekser (CEF-MC, EXC 115, høyttaler Volker Dötsch) innvilget delvis EHKS på Buchmann Institute for Molecular Life Sciences (BMLS, direktør Enrico Schleiff) ved Goethe Universität Frankfurt am Main ved Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG).

1. Husbandry av Tribolium kulturer MERK: Standard betingelser er definert som en inkubasjonstemperatur på 25 ° C og 70% relativ fuktighet i en 12 timers lys / 12 timers mørk syklus. For mer informasjon om Tribolium reindrift, respektive retningslinjer er tilgjengelige 64. Denne protokollen krever to forskjellige mel baserte medier, som kan fremstilles i kilogrammengder, og som er lagret i flere måneder. <ol><li> Før arbeid med mel og inaktive ...

Kvalitetskontroll I levende billeddannende analyser, må preparatet og opptaksprosedyren være ikke-invasiv, dvs. verken den mekaniske og kjemiske håndtering (samling, dechorionation, montering på prøveholderen) og heller ikke den integrerte energi belastning i løpet av observasjons skal påvirke levedyktigheten til prøvestykket. For studier som karakteriserer WT utvikling, anbefales det å kun bruke data fra eksperimenter der embryoet overlever innspillingspro...

Den røde mel bille Tribolium castaneum, som tilhører den store familien av Darkling biller (Tenebrionidae), har en lang historie innenfor landbruket og biovitenskap, og er den nest beste studerte modellen insekt modellorganisme etter bananflue Drosophila melanogaster. I løpet av de siste fire tiår, ble det et kraftig og populært insekt modellorganisme i utviklingsgenetikk, i evolusjonær utviklingsbiologi, og i løpet av de siste tjue årene, i embryonale morphogenesis for en rekke årsaker: Drosophila og Tribolium begge tilhører Holometabola, men splittet omtrent 300 millioner år siden 1, 2, 3, 4. Mens den embryoutvikling av Drosophila blir vanligvis betraktet som høyt avledet viser Tribolium en mer anen måte utviklling som er funnet i en betydelig større andel av insektarter 5, 6, 7, 8, 9. For det første oppviser Tribolium ikke-involusjon hode utvikling, det vil si dens munn og antenner oppstår allerede i løpet av embryogenesen 10, 11, 12, 13, 14, 15. Dernest følger Tribolium prinsippene for kort-bakterie utvikling, det vil si mage segmenter legges sekvensielt fra en bakre vekst sone under germband forlengelse 16, 17, 18, 19. For det tredje, utvikler Tribolium og senere degraderesto ekstra-embryonale membraner dvs. amnion, som dekker embryo bare ventrally, og serosa, som omslutter fosteret helt 20, 21, 22. Begge membraner spille en avgjørende morfogenetisk 23, så vel som beskyttende rolle mot mikroorganismer 24, 25 og 26 uttørking. For det fjerde, de embryonically utviklings beina er fullt funksjonell under larve livsfase og tjene som primordia for voksne bena under pupal metamorfose 27, 28, 29, 30, 31. På grunn av sin lille størrelse og beskjedne krav, dyrking av Tribolium i laboratoriet er ganske grei. Kulturer av villtype (WT) stammer eller transgene linjer vil typisk bestå av rundt 100 til 300 voksne og kan holdes innenfor en-liters glassflasker (footprint 80 cm2) fylt tre til fire centimeter høye (ca. 50 g) med vekstmedium som består av hel hvete mel supplert med inaktive tørrgjær. En vanntilførsel er ikke nødvendig. Dette gjør at selv små laboratorier for å holde dusinvis av bille kulturer innen små- eller mellomstore kommersielt tilgjengelige insekt inkubatorer. Senere utviklingsstadier av Tribolium (larver etter omtrent fjerde stadium, puppe og voksne) er lett skilles fra vekstmediet ved sikting. Synkroniserte embryoer blir oppnådd ved å inkubere voksne for korte perioder på egg-leggende medium. For rask utvikling, blir bille kulturene holdt ved 32 ° C (ca. fire uker per generasjon), mens lagerholdet blir typisk utført ved 22-25 ° C (omtrent ti uker pr generasjon). Innenfor det siste tiåret, mange standard techniques er blitt tilpasset gradvis og optimalisert for Tribolium, som oppsummert i vekstmodellorganismer bøker 32. Av stor betydning er avanserte genetiske fremgangsmåter så som embryonal 33, larve- 34, 35 eller foreldre 36, 37 RNA interferens-baserte gen knockdown, kimlinje transformasjon med enten piggyBac 38, 39 eller den Minos 40 transposase system og CRISPR / Cas9-baserte genom ingeniør 41. Videre er Tribolium genomet blitt sekvensert omtrent ti år siden 42, og er nå i den tredje runden av genomet sammenstillingen frigjøre 43, som tillater effektiv og genom-bred identifikasjon og systematisk analyse av gener 44 </sopp&gt; eller andre genetiske elementer 45, 46. I tillegg genomene til fire andre billearter er tilgjengelige for sammenlignings genetiske tilnærminger 47, 48, 49, 50. I forbindelse med det sekvenserte genomet, har to store genetiske analyser er utført, det vil si en innskuddsmutagenese skjerm 51 og en systematisk RNA interferens-baserte gen knockdown skjerm 52, 53. Fluorescens direkte avbildning med Vidfelt, konfokalt eller lys platebasert mikroskopi (LSFM) gjør det mulig å observere den embryoniske morfologien til Tribolium som en funksjon av tid (dvs. morphogenesis) i en flerdimensjonal sammenheng (tabell 1). I Vidfelt og konfokal fluorescens mikroskopi, den Excitasjon og emisjon lys blir ledet gjennom den samme objektivlinsen. I begge tilnærminger, er hele prøven opplyst for hver registrert todimensjonalt plan. Derfor blir prøvene utsettes for meget høyt energinivå. I LSFM, bare fluoroforene i fokalplanet er spent på grunn av frakobling av belysning og deteksjon ved hjelp av to perpendikulært anordnede objektivlinser (figur 1). LSFM kommer i to canonic implementeringer - den eneste plan belysning mikroskop (SPIM) og det digitale skannede laserlys platebasert fluorescens mikroskop (DSLM, figur 2) - og gir flere viktige fordeler i forhold til tradisjonelle fremgangsmåter: (i) indre optisk seksjonering evne, (ii) god aksiell oppløsning, (iii) sterkt redusert nivå av foto-bleking, (iv) svært lav bilde-toksisitet, (v) høyt signal-til-støy-forhold, (vi) relativt høye anskaffelses hastighet, (vii) avbildning langs flere retninger, og (ivii) dypere vev penetrering på grunn av bruken av lave numeriske apertur belysningsobjektivlinser 54, 55, 56. LSFM har allerede blitt brukt i Tribolium å dokumentere nesten hele den embryoniske morphogenesis 57 og for å analysere prinsippene for ekstra-embryonale membranen briste ved begynnelsen av dorsal lokket 23. For å heve attraktivitet LSFM i Tribolium samfunnet og for insekt vitenskap generelt, er det av stor betydning å etablere standard operasjonsprosedyrer og forbedre metoder, protokoller og pool av ressurser til et nivå hvor mikroskop blir en ease-of -Bruke standard verktøy i utviklingsbiologi laboratorier, og de biologiske spørsmål bo i sentrum for oppmerksomheten. Denne protokollen begynner med det grunnleggende Tribolium &lt;/ em&gt; dyrking, dvs. vedlikehold, reproduksjon og embryo samlingen. Deretter ble to eksperimentelle strategier vist nedenfor: (i) levende avbildning av skreddersydde transgene linjer og (ii) bildedannelse av faste embryoer som var farget med fluorescerende fargestoffer (tabell 2). Deretter blir tre monteringsteknikker med litt forskjellige formål forklart i detalj (Figur 3 og Tabell 3): (i) agarose kolonne, (ii) den agarose halvkule og (iii) den nye spindelvev holderen. Protokollen forklarer deretter datainnhentingsprosedyre med LSFM. Bildediagnostikk og viktige hensyn er skissert. Til slutt blir embryo gjenfinning forklart og forslag til basisdatabehandlings er gitt. I de representative resultater, direkte avbildning av data fra to nye skreddersydd og glia-blå 58 transgene linjer er vist og de respektive avbildningsdatasett er tilveiebragt som et nedlastbart ressurs. I tillegg imagedata for faste embryoer som var farget med en rekke av fluorescens-fargestoffer er angitt. Diskusjonen fokuserer på kvalitetskontroll, aktuelle begrensningene ved direkte avbildning tilnærming og tilpasning av protokollen til andre arter. Protokollen er skrevet for å lette ark-baserte fluorescensmikroskoper som er utstyrt med et prøvekammer og en roterbar klemmeinnretning for standardiserte prøveholdere 54, 59, 60, som er typisk sylinderformede elementer fremstilt av metall, plast eller glass med en diameter i millimeterområdet. Protokollen er også egnet for både canonic implementeringer, dvs. SPIM og DSLM, så vel som for oppsett med to eller flere belysnings og deteksjonsarmene 61, 62, 63. De representative resultater viser data i to spektrale kanaler, grønn (illumination med en 488 nm laser, deteksjon gjennom et båndpassfilter 525/50) og rød (belysning med en 561 nm laser, deteksjon gjennom et båndpassfilter 607/70), men protokollen kan utvides til tre eller fire spektralkanaler.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">full grain wheat flour</td>
			<td style="width:119px;">Demeter e.V.</td>
			<td style="width:71px;">1.13E+08</td>
			<td style="width:167px;">US: whole wheat flour, UK: whole meal flour</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">405 fine wheat flour</td>
			<td style="width:119px;">Demeter e.V.</td>
			<td style="width:71px;">1.13E+08</td>
			<td style="width:167px;">US: pastry flour, UK: soft flour</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">inactive dry yeast</td>
			<td style="width:119px;">Flystuff / Genesee Scientific</td>
			<td style="width:71px;">62-106</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">10010-023</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sodium hypochlorite, ~12% active Cl</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">425044-250ML</td>
			<td style="width:167px;">Caution: sodium hypochlorite is corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">low-melt agarose</td>
			<td style="width:119px;">Carl Roth</td>
			<td style="width:71px;">6351.2</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">6-well plate</td>
			<td style="width:119px;">Orange Scientific</td>
			<td style="width:71px;">4430500</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">24-well plate</td>
			<td style="width:119px;">Orange Scientific</td>
			<td style="width:71px;">4430300</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">glass capillaries, internal &#216; 0.46 mm</td>
			<td style="width:119px;">Brand GmbH + Co KG</td>
			<td style="width:71px;">7087 09</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">SYTOX Green</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">57020</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">YOYO-1 Iodide</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">Y3601</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">BOBO-3 Iodide</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">B3586</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">A12379</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Alexa Fluor 546 Phalloidin</td>
			<td style="width:119px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:71px;">A22283</td>
			<td style="width:167px;">Staining solution preparation is explained in Table 2</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 800 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-051</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 710 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-050</td>
			<td style="width:167px;">for growth medium preparation (step 1.1)</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 300 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-040</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">sieve, 250 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">200.025.222-038</td>
			<td style="width:167px;">for egg laying medium preparation (step 1.2)</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">glass dish, &#216; 100 mm &#215; 20 mm</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">CLS70165102</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">cell strainer, 100 &#181;m mesh size</td>
			<td style="width:119px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:71px;">352360</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">paint brush, head &#216; 2 mm</td>
			<td style="width:119px;">VWR International</td>
			<td style="width:71px;">149-2121</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">syringe, 1.0 ml</td>
			<td style="width:119px;">B. Braun Medical AG</td>
			<td style="width:71px;">9166017V</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">scintillation vials</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">M1152-1000EA</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">paraformaldehyde</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">158127</td>
			<td style="width:167px;">Caution: paraformaldehyde is toxic and corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">n-heptane &#8805; 99%</td>
			<td style="width:119px;">Carl Roth</td>
			<td style="width:71px;">8654.1</td>
			<td style="width:167px;">Caution: n-heptane is flammable and toxic</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:119px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:71px;">X100-100ML</td>
			<td style="width:167px;">Caution: Trition X-100 is corrosive</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

light sheet-based fluorescence microscopy of living or fixed and stained tribolium castaneum embryos

Den røde mel bille Tribolium castaneum har blitt en viktig insekt modellorganisme i utviklings genetikk og evolusjonær utviklingsbiologi. Observasjonen av Tribolium embryoer med lys ark-baserte fluorescens mikroskopi har flere fordeler fremfor konvensjonelle vidfelt og konfokal fluorescens mikroskopi. På grunn av de unike egenskapene til en lett platebasert mikroskop, kan tredimensjonale bilder av levende eksemplarer tas opp med høye signal-til-støy-forhold og betydelig redusert foto-bleking, så vel som fototoksisitet langs flere retninger over perioder som varer flere dager. Med mer enn fire år med metodeutvikling og en kontinuerlig økning av data, synes tiden hensiktsmessig å etablere standard driftsprosedyrer for bruk av lys ark teknologi i Tribolium samfunnet så vel som i insektet samfunnet for øvrig. Denne protokollen beskriver tre monteringsteknikker som er egnet feller ulike formål, presenterer to nye spesiallagde transgene linjer Tribolium egnet for langvarig direkte avbildning, antyder fem fluorescerende fargestoffer å merke intracellulære strukturer av faste embryoer og gir informasjon om dataetterbehandling for rettidig evaluering av de registrerte data. Representative resultater konsentrere seg om langtids direkte avbildning, optisk seksjonering og observasjon av den samme embryoet langs flere retninger. De respektive datasettene blir tilveiebragt som et nedlastbart ressurs. Endelig omhandler den protokoll kvalitetskontroller for levende billeddannende analyser, nåværende begrensninger og anvendeligheten av de skisserte fremgangsmåter til andre insektarter. Denne protokollen er primært beregnet for utviklings biologer som søker bildeløsninger som overgår standard laboratorieutstyr. Det fremmer den kontinuerlige forsøk på å lukke gapet mellom de teknisk orientert laboratorier / samfunn, som utvikler og raffinere mikrokopiere metodisk, og life science laboratorier / lokalsamfunn, som krever &#39;plug-and-play&#39; løsninger på tekniske utfordringer. Videre støtter det et aksiomatisk tilnærming som beveger de biologiske spørsmålene i sentrum for oppmerksomheten.

Denne protokollen beskriver en eksperimentell rammeverk for fluorescensavbildning av levende eller fiksert og farget Tribolium embryoer med LSFM. På grunn av de lave nivåer av foto-bleking og fototoksisitet, en direkte konsekvens av den optiske snitting evne, er LSFM spesielt godt egnet for langvarig direkte avbildning. Den nye AGOC {ATub&#39;H2B-mEmerald} 1 transgen linje uttrykker en histone2B-mEmerald fusjonsprot...

Watch this Scientific Journal Video about Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos at JoVE.com

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Avbilde morfogenesen av insekt embryoer med lys ark-baserte fluorescens mikroskopi har blitt state of the art. Denne protokollen skisserer og sammenligner tre monterings teknikker som passer for Tribolium castaneum embryoer, introduserer to nye spesiallagde transgene linjer godt egnet for direkte avbildning, diskuterer vesentlige kvalitetskontroller og viser nåværende eksperimentelle begrensninger.

Lys Sheet-basert Fluorescensmikroskopi of Living eller fikseres og farges<em&gt; Tribolium castaneum</em&gt; Embryoet

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion (FDAP)

Measuring Protein Stability in Living Zebrafish Embryos Using Fluorescence Decay After Photoconversion FDAP

Måling Protein Stabilitet på Living Sebrafisk embryo med fluoresens Decay Etter Photoconversion (FDAP)

Protein stability influences many aspects of biology, and measuring the clearance kinetics of proteins can provide important insights into biological ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

Metoder for Nettopp Lokalisert Overføring av celler eller DNA i Early fostertap Mouse Embryoer

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Using Light Sheet Fluorescence Microscopy to Image Zebrafish Eye Development

Ved hjelp av lys Sheet Fluorescensmikroskopi til bilde Sebrafisk Eye Development

Light sheet fluorescence microscopy (LSFM) is gaining more and more popularity as a method to image embryonic development. The main advantages of LSFM ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

Induksjon av hypoksi i levende frosk og sebrafiskembryoer

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

Kvantitativ hele-mount Immunofluorescence analyse av Cardiac stamfar populasjoner i Mouse embryoer

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Multimodal Hierarchical Imaging of Serial Sections for Finding Specific Cellular Targets within Large Volumes

Flere hierarkisk Imaging av føljetong delene for å finne konkrete mobilnettet mål i store volumer

Targeting specific cells at ultrastructural resolution within a mixed cell population or a tissue can be achieved by hierarchical imaging using a ...

Isotropic Light-Sheet Microscopy and Automated Cell Lineage Analyses to Catalogue Caenorhabditis elegans Embryogenesis with Subcellular Resolution

Isotropic lys-ark mikroskopi og automatisert Cell Lineage analyser til katalog Caenorhabditis elegans embryogenesis med Subcellulære oppløsning

Caenorhabditis elegans (C. elegans) stands out as the only organism in which the challenge of understanding the cellular origins of an entire nervous ...

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinjection av DNA i Eyebuds i Xenopus laevis embryo og IMAGING av GFP uttrykke optikk axonal arbors i intakt, Living Xenopus rumpetroll

The primary visual projection of tadpoles of the aquatic frog Xenopus laevis serves as an excellent model system for studying mechanisms that regulate the ...

A Layered Mounting Method for Extended Time-Lapse Confocal Microscopy of Whole Zebrafish Embryos

En lagdelt montering metode for utvidet tidsforløp Konfokalmikroskopi mikroskopi av hele sebrafisk embryo

Dynamics of development can be followed by confocal time-lapse microscopy of live transgenic zebrafish embryos expressing fluorescence in specific tissues ...

Light-Induced GFP Expression in Zebrafish Embryos using the Optogenetic TAEL/C120 System

Lysindusert GFP-uttrykk i sebrafiskembryoer ved hjelp av Optogenetic TAEL/C120-systemet

Inducible gene expression systems are an invaluable tool for studying biological processes. Optogenetic expression systems can provide precise control ...