Name: dissection of the mouse pancreas for histological analysis and metabolic profiling
Uploaded: 2017-08-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling at JoVE.com

पहुंच स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों/राष्ट्रीय कैंसर संस्थान अनुदान संख्या-1R15CA152985-01A1 से इस काम के लिए समर्थन स्वीकार करता है । इस परियोजना को भी मियामी विश्वविद्यालय के स्नातक अनुसंधान पुरस्कार कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया है, मियामी विश्वविद्यालय डॉक्टरेट-छात्रवृत्ति कार्यक्रम और मियामी विश्वविद्यालय ग्रीष्मकालीन विद्वानों कार्यक्रम के लिए स्नातक के अवसर ।

वीडियो में किए गए प्रक्रियाओं और नीचे वर्णित संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा मियामी विश्वविद्यालय में अनुमोदित किया गया है । 
 1. तैयारी और उत्तेजना टेस्ट <ol> <li> शल्य प्रक्रिय...

<ol>
	<li>Fesinmeyer, M. D., Austin, M. A., Li, C. I., De Roos, A. J., Bowen, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+Survival+by+Histologic+Type+of+Pancreatic+Cancer.">Differences in Survival by Histologic Type of Pancreatic Cancer.</a> Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 14 (7), 1766-1773 (2005).</li><li>Jackson-Grusby, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+cancer+in+mice.">Modeling cancer in mice.</a> Oncogene. 21 (35), 5504-5514 (2002).</li><li>Heid, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+requirement+of+Rac1+in+a+mouse+model+of+pancreatic+cancer.">Early requirement of Rac1 in a mouse model of pancreatic cancer.</a> Gastroenterology. 141 (2), 719-730 (2011).</li><li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preinvasive+and+invasive+ductal+pancreatic+cancer+and+its+early+detection+in+the+mouse.">Preinvasive and invasive ductal pancreatic cancer and its early detection in the mouse.</a> Cancer cell. 4 (6), 437-450 (2003).</li><li>Shi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=KRAS2+Mutations+in+Human+Pancreatic+Acinar-Ductal+Metaplastic+Lesions+Are+Limited+to+Those+with+PanIN+Implications+for+the+Human+Pancreatic+Cancer+Cell+of+Origin.">KRAS2 Mutations in Human Pancreatic Acinar-Ductal Metaplastic Lesions Are Limited to Those with PanIN Implications for the Human Pancreatic Cancer Cell of Origin.</a> Mol Cancer Res. 7 (2), 230-236 (2009).</li><li>LaConti, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+serum+metabolomics+profiles+associated+with+malignant+progression+in+the+KrasG12D+mouse+model+of+pancreatic+ductal+adenocarcinoma.">Distinct serum metabolomics profiles associated with malignant progression in the KrasG12D mouse model of pancreatic ductal adenocarcinoma.</a> BMC Genomics. 16 (1), 1-10 (2015).</li><li>Ludwig, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveying+the+serologic+proteome+in+a+tissue-specific+kras(G12D)+knockin+mouse+model+of+pancreatic+cancer.">Surveying the serologic proteome in a tissue-specific kras(G12D) knockin mouse model of pancreatic cancer.</a> Proteomics. 16 (3), 516-531 (2016).</li><li>Taylor, D. K., Mook, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+Waste+Anesthetic+Gas+Concentrations+Associated+with+the+Open-Drop+Method.">Isoflurane Waste Anesthetic Gas Concentrations Associated with the Open-Drop Method.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 48 (1), 61-64 (2009).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Li, D. S., Yuan, Y. H., Tu, H. J., Liang, Q. L., Dai, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+islet+isolation+from+mouse+pancreas.">A protocol for islet isolation from mouse pancreas.</a> Nature Protocols. 4 (11), 1649-1652 (2009).</li><li>Auer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+frozen+tissue+storage+conditions+on+the+integrity+of+RNA+and+protein.">The effects of frozen tissue storage conditions on the integrity of RNA and protein.</a> Biotech Histochem. 89 (7), 518-528 (2014).</li><li>Ma, J., Leung, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limbic+System+Participates+in+Mediating+the+Effects+of+General+Anesthetics.">Limbic System Participates in Mediating the Effects of General Anesthetics.</a> Neuropsychopharmacology. 31, 1177-1192 (2006).</li><li>Ijichi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggressive+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+in+mice+caused+by+pancreas-specific+blockade+of+transforming+growth+factor-&#946;+signaling+in+cooperation+with+active+Kras+expression.">Aggressive pancreatic ductal adenocarcinoma in mice caused by pancreas-specific blockade of transforming growth factor-&#946; signaling in cooperation with active Kras expression.</a> Genes Dev. 20 (22), 3147-3160 (2006).</li><li>Abiatari, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Moesin-dependent+cytoskeleton+remodelling+is+associated+with+an+anaplastic+phenotype+of+pancreatic+cancer.">Moesin-dependent cytoskeleton remodelling is associated with an anaplastic phenotype of pancreatic cancer.</a> J Cell Mol Med. 14 (5), 1166-1179 (2010).</li><li>Goodpaster, A. M., Romick-Rosendale, L. E., Kennedy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+Statistical+significance+analysis+of+nuclear+magnetic+resonance-based+metabonomics+data.">a Statistical significance analysis of nuclear magnetic resonance-based metabonomics data.</a> Analytical biochemistry. 401, 134-143 (2010).</li><li>Yadav, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Idiopathic+Tumefactive+Chronic+Pancreatitis:+Clinical+Profile,+Histology,+and+Natural+History+After+Resection.">Idiopathic Tumefactive Chronic Pancreatitis: Clinical Profile, Histology, and Natural History After Resection.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 1 (2), 129-135 (2003).</li></ol>

मौजूदा तरीकों के संबंध में महत्व जबकि अंय माउस विच्छेदन के अनौपचारिक वीडियो मौजूद है, इस वीडियो लेख पहले पेशेवर गुणवत्ता प्रदान करता है, की समीक्षा की सहकर्मी, विस्तृत निष्कर्षण और माउस अग्ंया...

माउस मानव अग्नाशय के कैंसर1,2के एक महत्वपूर्ण पशु मॉडल के रूप में उभरा है । Ptf1a मेंcre/ LSL-KrasG12D/+ माउस मॉडल, िईद्भस्टेन चूहा सार्कोमा (कश्मीर रास) oncogene अग्न्याशय में विशेष रूप से सक्रिय है, अग्न्याशय में कैंसर के घावों की दीक्षा में जिसके परिणामस्वरूप, अग्नाशय intraepithelial neoplasias (PanINs) के रूप में जाना जाता है, कि प्रगति अग्नाशय वाहिनी adenocarcinomas, सामांयतः के रूप में संदर्भित करने के लिए PDACs3। इस माउस मॉडल प्रणाली मानव अग्नाशय के कैंसर के लिए सबसे अच्छा उपलब्ध पशु मॉडलों में से एक प्रदान करता है4,5, अतिरिक्त लाभ के साथ कि PanINs जीवन के पहले पांच महीनों के भीतर उभरने और अक्सर एक के भीतर PDAC प्रगति एकल वर्ष4,5, जबकि अग्नाशय के कैंसर सबसे अधिक बार उंर के 60-70 वर्ष मनुष्यों में होता है ।
Ptf1a से विच्छेदन द्वारा अग्ंयाशय का निष्कर्षणcre/ LSL-KrasG12D/+ विभिंन उंर में चूहों अग्ंयाशय में कैंसर के विकास की विस्तृत अनुदैर्ध्य ऊतकीय परीक्षा के लिए अनुमति देता है, को प्रगति के माध्यम से जल्द से प्नि्न चरणों से लेकर PDAC3,4 , 5. पांच से पंद्रह महीने से लेकर उंर में अग्ंयाशय कटाई भी ऊतक निष्कर्षों को तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है अग्ंयाशय4 चयापचय में वैश्विक परिवर्तन विशेषता है कि स्वस्थ से रोगग्रस्त ऊतक संक्रमण के दौरान हो 6,7.
यह आलेख एक माउस अग्न्याशय निष्कर्षण करने के लिए आवश्यक चरणों का एक पूर्ण दृश्य मार्गदर्शिका प्रस्तुत करता है और आगे विश्लेषण के लिए एक अग्ंयाशय के संग्रहण के लिए दिशानिर्देश उपलब्ध कराता है । इस गाइड प्रकार मैं मधुमेह सहित अन्य अग्नाशय के रोगों पर अनुसंधान का आयोजन व्यक्तियों के लिए समान रूप से मूल्यवान हो जाएगा, और विशेष रूप से छात्रों और माउस का उपयोग कर अग्न्याशय की कटाई को शामिल अनुसंधान के लिए नए जांचकर्ताओं के लिए उपयोगी होना चाहिए चयापचय की रूपरेखा या ऊतकीय विश्लेषण के लिए विच्छेदन ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="790">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass Jar&#160;</td>
			<td style="width:288px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3140-150</td>
			<td style="width:167px;">The glass jar used in the video has been discontinued.&#160; This is its replacement.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Lid of Glass Jar</td>
			<td style="width:288px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">9985-150</td>
			<td>The glass jar lid used in the video has been discontinued.&#160; This is its replacement.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">15 mL Falcon Tubes</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">339650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Surgical Scissors</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">9201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Squeeze bottle&#160;</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">03-409-10DD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">100% Ethanol</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">22-032-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Formalin</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">245-684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Foam Boards</td>
			<td style="width:288px;">Therapak</td>
			<td style="width:119px;">562908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Forceps</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">200205SHN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1 mL 21G Syringes</td>
			<td style="width:288px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">309624</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">50 mL Falcon Tubes</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">339652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">2.0 mL Microcentrifuge Tubes&#160;</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">02-681-258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Surgical Pads</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">S67011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">T-Pins Length:&#160; 2&#34;&#160;</td>
			<td style="width:288px;">Advance Store Products</td>
			<td>X32T-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Sterilizing Wipes</td>
			<td style="width:288px;">Professional Disposables International Inc.</td>
			<td style="width:119px;">Q85084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sharps Container</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">14-827-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Analytical Balance</td>
			<td style="width:288px;">Marshall Scientific</td>
			<td style="width:119px;">ME-AE200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">4L Dewar</td>
			<td style="width:288px;">Taylor-Wharton</td>
			<td style="width:119px;">4LD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Shallow Wide Mouth Dewar</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">F3087-V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Floating Microtube Rack</td>
			<td style="width:288px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">60986-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cryogenic Vial 1.2 mL, Sterile</td>
			<td style="width:288px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">10-500-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Isothesia (Isoflurane)&#160;</td>
			<td style="width:288px;">Henry Schein Animal Health</td>
			<td style="width:119px;">050033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Liquid Nitrogen</td>
			<td style="width:288px;">Wright Brothers</td>
			<td style="width:119px;">NIT-60-XX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mouse Kras Strain</td>
			<td style="width:288px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td style="width:119px;">OO8179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mouse Cre Strain</td>
			<td style="width:288px;">MMRRC</td>
			<td style="width:119px;">OOO435-UNC</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dissection of the mouse pancreas for histological analysis and metabolic profiling

हम अग्ंयाशय विशिष्ट प्रतिलेखन कारक है, 1a cre-recombinase जांच कर रहा है; लोक्स-stop-लोक्स-िईद्भस्टेन चूहा सार्कोमा, glycine में एसपारटिक एसिड से 12 codon (Ptf1acre/ LSL-KrasG12D/+) मानव अग्नाशय के कैंसर के एक मॉडल के रूप में माउस तनाव । हमारे वर्तमान अध्ययन के लक्ष्य के लिए अग्नाशय के कैंसर की प्रगति के उपंयास चयापचय के निशान की पहचान है । हम मूत्र, मल, रक्त, और अग्न्याशय ऊतक निष्कर्षों के चयापचय की रूपरेखा का प्रदर्शन किया है, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से कैंसर प्रगति चरण के लिए अग्ंयाशय के ऊतकीय विश्लेषण । माउस अग्ंयाशय मानव में की तरह एक अच्छी तरह से परिभाषित ठोस अंग नहीं है, बल्कि एक diffusely वितरित नरम ऊतक है कि आसानी से माउस आंतरिक शरीर रचना विज्ञान या व्यक्तियों है कि कम या कोई अनुभव के साथ अपरिचित व्यक्तियों द्वारा की पहचान नहीं है प्रदर्शन माउस अंग विच्छेदन । इस अनुच्छेद के प्रयोजन के लिए एक विस्तृत कदम वार दृश्य प्रदर्शन प्रदान करने के लिए विच्छेदन द्वारा माउस अग्ंयाशय को हटाने में नौसिखिया गाइड है । यह लेख विशेष रूप से छात्रों और अनुसंधान के लिए नए जांचकर्ताओं के लिए मूल्यवान होना चाहिए कि चयापचय रूपरेखा या ऊतकीय विश्लेषण के लिए विच्छेदन द्वारा माउस अग्ंयाशय की कटाई की आवश्यकता है ।

चित्र 1 ऑपरेटिंग वातावरण क्षेत्र का ओवरव्यू दिखाता है और चित्र 2 पोस्ट कार्रवाई क्षेत्र दिखाता है । हालांकि इस सेटिंग उपकरण और मचान की ंयूनतम राशि प्रदान करता है, व्य?...

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Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

इस वीडियो लेख ऊतकीय विश्लेषण और चयापचय रूपरेखा के लिए विच्छेदन द्वारा एक माउस से अग्ंयाशय को सफलतापूर्वक हटाने के लिए आवश्यक प्रक्रियाओं का एक विस्तृत प्रदर्शन प्रदान करता है ।

ऊतकीय विश्लेषण और चयापचय की रूपरेखा के लिए माउस अग्ंयाशय का विच्छेदन

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis

मानव प्रोटिओमिक विश्लेषण के लिए शीशे शारीरिक तत्वों के विच्छेदन

The vitreous is an optically clear, collagenous extracellular matrix that fills the inside of the eye and overlies the retina. 1,2 Abnormal interactions ...

Collection Protocol for Human Pancreas

मानव अग्नाशय के लिए संग्रह प्रोटोकॉल

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Whole Vitreous Humor Dissection for Vitreodynamic Analysis

Vitreodynamic विश्लेषण के लिए पूरे शीशे हास्य विच्छेदन

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous ...

Surgical Injury to the Mouse Pancreas through Ligation of the Pancreatic Duct as a Model for Endocrine and Exocrine Reprogramming and Proliferation

Endocrine और बहि: Reprogramming और प्रसार के लिए एक मॉडल के रूप में अग्नाशय वाहिनी के ligation के माध्यम से माउस अग्न्याशय के लिए सर्जिकल चोट

Expansion of pancreatic beta cells in vivo or ex vivo, or generation of beta cells by differentiation from an embryonic or adult stem cell, can provide ...

Do's and Don'ts in the Preparation of Muscle Cryosections for Histological Analysis

Histological विश्लेषण के लिए पेशी cryosections की तैयारी में है और don&#39;ts

Histological evaluation of muscle biopsies has served as an indispensable tool in the understanding of the development and progression of pathology of ...

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Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

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Dissection and Explant Culture of Murine Allantois for the In Vitro Analysis of Allantoic Attachment

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विच्छेदन और Explant संस्कृति के लिए Murine Allantois के इन विट्रो विश्लेषण Allantoic लगाव के

The placenta is essential for the growth and development of mammalian embryos. For this reason, numerous genetic alterations and likely also environmental ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

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मात्रात्मक माइक्रो-सीटी विश्लेषण के एक माउस मॉडल में Aortopathy β-aminopropionitrile-प्रेरित महाधमनी धमनीविस्फार और विच्छेदन

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Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

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