Name: phenotypic analysis of rodent malaria parasite asexual and sexual blood stages and mosquito stages
Uploaded: 2019-05-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages at JoVE.com

أحمد علي مدعوم بتمويل من جامعة بلمياليم فاكيف من منحة وزارة التنمية التركية 2015BSV036، وبتمويل من كلية الصحة العامة والطب المداري بجامعة تولان، وبتمويل من المعهد الوطني للصحة العامة -NIAID لـ R21Grant 1R21AI111058-01A1.

وقد أجريت جميع التجارب الحيوانية الموصوفة هنا وفقا للبروتوكولات المعتمدة للجنة الرعاية والاستخدام الحيوانية المؤسسية (IACUC) من جامعة تولين ولجنة أخلاقيات الحيوانات في جامعة بزاميليم فاكيف. وقد أجريت جميع البروتوكولات التجريبية الأخرى واستخدام الحمض النووي المؤتلف وفقا للبروتوكولات الم...

وعلى الرغم من التشابه في البيولوجيا العامة لدورات حياتها مع الطفيليات البشرية بالملاريا، فإن نماذج الملاريا الفأرة لها أيضا ً العديد من أوجه الاختلاف مع أنواع البلازموديوم البشرية التي من شأنها أن تحد من استخدامها على أنها موثوقة في نماذج الجسم الحي. فعلى سبيل المثال، وباستثنا...

تسبب طفيليات الملاريا مئات الملايين من الإصابات بالملاريا بين البشر في جميع أنحاء العالم، مع أكثر من 600،000 حالة وفاة كل عام1. تحدث العدوى البشرية من قبل خمسة أنواع طفيلية الملاريا، وهي P. falciparum، P. vivax، P. ovale، P. malariae،و P. knowlesi. معظم الوفيات السريرية الناجمة عن الملاريا سببها P. falciparum في أفريقيا جنوب الصحراء الكبرى1. وهناك نوع آخر من أنواع طفيليات الملاريا البشرية التي تسبب أمراضا واسعة النطاق في جميع أنحاء العالم خارج أفريقيا جنوب الصحراء الكبرى هو P. vivax2. الأنواع الثلاثة الأخرى كلها مقيدة جغرافيا أكثر وتتسبب في التهابات الملاريا الحميدة، باستثناء P. knowlesiالقاتلة 3. إن عدم توافر نماذج العدوى غير البشرية ذات الصلة والعملية في الجسم الحي كان ولا يزال يشكل عقبة أمام تطوير لقاحات الملاريا والأدوية. وقد اعتمدت في وقت سابق استهداف أدوية الملاريا والدراسات الأيضية على نطاق واسع على نماذج الملاريا الطيور مثل P. gallinaceum و P. lophurae, تصيب الدجاج والبط, على التوالي4. وبعد ذلك، أدخلت أنواع الملاريا القوارض تدريجيا في مختلف اللقاحات والدراسات التي تستهدف المخدرات كما هو الحال في نماذج الجسم الحي. وعلى مر السنين، تراكمت الأدلة على أوجه التشابه بين البيولوجيا والتفاعلات بين الطفيليالمضيف والطفيليات في مراحل دورة حياة نماذج الملاريا القوارض لأنواع الملاريا البشرية.
وعلى وجه الخصوص، كانت نماذج الملاريا القوارض بالغة الأهمية لاستكشاف وتوصيف بيولوجيا البعوض والمراحل السابقة للحريثوسير5. ومع ذلك، هناك أربعة أنواع الملاريا القوارض(P. berghei، P. yoelii، P. chabaudi، و P. vinckei) التي لها سمات بيولوجية مختلفة ، وأبرزها في مراحل الدم6. تختلف أنواع الملاريا القوارض في تزامن مراحل الدم، حيث مراحل الدم من سلالات P. chabaudi و P. vinckei متزامنة في الغالب، في حين أن مراحل الدم من P. berghei و P. yoelii ليست6 , 7.وثمة فرق ملحوظ آخر هو التطهير الذاتي لمراحل الدم التي تحدث في بعض السلالات (علىسبيلالمثال، P. yoelii 17X-NL، P. berghei NK65، و P. vinckei lentum)،في حين أن عدوى الدم من غيرها سلالات من نفس النوع يمكن أن تكون قاتلة إذا تركت دون علاج(P. yoelii 17X-L, P. berghei ANKA, و P. chabaudi AS). وعلاوة على ذلك، P. yoelii 17X-NL سلالة وP. berghei ANKA سلالة تغزو بشكل تفضيلي reticulocytes8،9،10،11، على الرغم من أن هذه الميزات من P. سلالات يويلي وP. berghei ليست متطلبات النمو الصارمة12،13،14. لذلك، يتم التعامل مع الفئران مع فينيل هيدرازين قبل العدوى مع مراحل الدم من تلك الطفيليات لزيادة الطفيليات وgametocytemia اللازمة لعدوى البعوض لسلالة P. berghei ANKA وP. yoelii 17X-NL15،16،17،18،19.
كما توجد اختلافات في مراحل البعوض بين مختلف أنواع الملاريا القوارض، وأبرزها درجة الحرارة والوقت اللازمين لتطوير مراحل البعوض الأمثل وطول السبوروزويت5و6، 20. في المراحل ما قبل الاريثروسسية من أنواع الملاريا القوارض، وتشمل الاختلافات أنواع القوارض والإجهاد التي هي الأكثر عرضة للتلقيح sporozoite المعدية، وعدد من sporozoites اللازمة للتلقيح في سلالة القوارض عرضة، و أنواع الخلايا الثديية اللازمة لاختبارات تطوير مرحلة الكبد في المختبر، والوقت لإكمال تطور مرحلة الكبد5،21،22،23،24،25 ،26،27،28،29،30.
وعلى الرغم من هذه التقلبات، كانت طفيليات الملاريا القوارض النماذج المواتية في وقت مبكر لتطبيق النهج الوراثية العكسية، لأنها كانت أقل استهلاكا للوقت والموارد مع احتمال كبير للنجاح31. في الواقع، كانت نماذج الملاريا القوارض أفضل النماذج، وفي كثير من الحالات النماذج الوحيدة، المتاحة لسنوات عديدة لتوصيف وظيفيا الجينات المعبر عنها في مراحل البعوض والكبد.
في ضوء شعبية وإمكانية استخدام النهج الوراثية العكسية في نماذج الملاريا القوارض، تم استخدام عدد من المنهجيات المختلفة لتحليل الأنماط الظاهرية لمراحل دورة حياة الطفيليات المعدلة وراثيا، وخاصة مراحل الدم. غير أن بعض هذه المنهجيات غير متسقة؛ على سبيل المثال، مقارنة عدوى الطفيليات في مرحلة الدم بعد حقن IP (والتي من المحتمل أن تستنزف إلى العقد الليمفاوية العبية، ومن هناك، يمكن أن تدخل مجرى الدم؛ وبالتالي، فإن الطفيليات المحقونة لا ينتهي بها المطاف بالتساوي في مجرى الدم) ، مقارنة انتقال البعوض من الحيوانات المستنسخة مع عدد مختلف من عمليات نقل مرحلة الدم التسلسلية أو رقم G (التي يمكن أن تؤثر على تكوين اللطوطوطين32،33)، أو مقارنة الطفيليات المعدلة وراثيا مباشرة إلى النوع البري السذاجة (WT) الطفيليات التي لم تخضع أبدا للكهرباء واختيار الدواء الإيجابي ومختلف التقييمات غير الموحدة من اللجام الذكور exflagellation. لذلك، من الأهمية بمكان توحيد البروتوكولات التي هي بسيطة لمتابعة التحليل الفينوتي لأي نوع من الطفيليات الملاريا القوارض المعدلة وراثيا أو WT في الدم وفي البعوض لاستيعاب التغيرات البيولوجية لملاريا القوارض أنواع الطفيليات.
هنا، نحن تقرير عن موحدة، بروتوكول تجريبي مفصل لتحليل فينوتيبيك من مراحل دورة حياة الدم والبعوض من الطفيليات المعدلة وراثيا أو البرية من نوع P. yoelii و P. berghei . وتنطبق هذه البروتوكولات أيضا على الطفيليات P. chabaudi و P. vinckei.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:735px;" width="735">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">Heparin</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">375095-100KU</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Xanthurenic acid</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D120804-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Hypoxanthine</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">H9377-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Alsever&#39;s solution</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A3551-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Sodium Bicarbonate</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S5761-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenylhydrazine</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P26252-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">G5516-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Giemsa</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">GS1L-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">26G x 3/8 Precision Glide Needle,&#160;</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">305110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">1 ml TB Syringe, 26G x 3/8</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">309625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">1 cc Insulin Syringe, U-100 27G</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">329412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Isoflurane, USB</td>
			<td style="width:143px;">Piramal</td>
			<td style="width:119px;">2667- 46- 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">PBS, pH 7.4</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10010049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">RPMI</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>22400105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">DMEM</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>11995065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Pencillin/ Streptomycin</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10082147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Fiber Glass Wool</td>
			<td style="width:143px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3950</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phenotypic analysis of rodent malaria parasite asexual and sexual blood stages and mosquito stages

وقد عززت التطورات الأخيرة في علم الوراثة وتكنولوجيات بيولوجيا النظم فهمنا لبيولوجيا طفيليات الملاريا على المستوى الجزيئي. ومع ذلك، لا تزال الأهداف الفعالة لطفيليات الملاريا لتطوير اللقاحات والعلاج الكيميائي محدودة. ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى عدم توافر نماذج العدوى ذات الصلة والعملية في الجسم الحي لأنواع البلازموديوم البشرية، وأبرزها بالنسبة لP. falciparum و P. vivax. ولذلك، استخدمت أنواع الملاريا القوارض على نطاق واسع كبديل عملي في نماذج الجسم الحي للقاح الملاريا، واستهداف الأدوية، والاستجابة المناعية، ودراسات التوصيف الوظيفي للبلازموديومسب المحفوظة. وفي الواقع، أثبتت نماذج الملاريا القوارض أنها لا تقدر بثمن، ولا سيما لاستكشاف انتقال البعوض وبيولوجيا مرحلة الكبد، وكانت لا غنى عنها لإجراء دراسات مناعية. ومع ذلك، هناك اختلافات في الأساليب المستخدمة لتقييم الأنماط الظاهرية للطفيليات غير الجنسية والجنسية في مرحلة الدم. ومن الأمثلة على هذه الاختلافات اختيار العدوى الوريدية مقابل العدوى داخل تبواق القوارض مع طفيليات مرحلة الدم وتقييم الإثارة بين الذكور. هنا، نقوم بتفصيل الطرق التجريبية الموحدة لتقييم الأنماط الظاهرية لمراحل الدم غير الجنسي والجنسي في الطفيليات المعدلة وراثيا التي تعبر عن أنواع طفيليات الملاريا من نوع المراسل أو البرية من نوع القوارض. كما نقوم بتفصيل طرق تقييم الأنماط الظاهرية لمراحل البعوض الطفيلي ة (الجاميتس، أوكينيتس، أوكيستس، وسبوروزويتس) داخل ناقلات البعوض الأنوفيليس. هذه الأساليب مفصلة ومبسطة هنا للسلالات القاتلة وغير الفتاكة من P. berghei و P. yoelii ولكن يمكن أيضا أن تطبق مع بعض التعديلات على P. chabaudi و P. vinckei القوارض الملاريا الأنواع.

وقد أحدث نجاح تطبيق الأدوات والتقنيات الوراثية العكسية على طفيليات الملاريا ثورة في مجال بحوث الملاريا، مع القدرة على إضافة أو حذف أو تعديل أجزاء جينية محددة من عدة أنواع من البلازموديوم 39. والأهم من ذلك، تم تحديد موضع الجينوم القابل للصرف واستخدامه بن...

Watch this Scientific Journal Video about Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages at JoVE.com

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

التحليل الفينوتي لطفيليات الملاريا القوارض غير الجنسية ومراحل الدم الجنسي ومراحل البعوض

ونظرا لأوجه التشابه اللافتة للنظر في دورة الحياة وبيولوجيا طفيليات الملاريا القوارض وطفيليات الملاريا البشرية، أصبحت نماذج الملاريا القوارض لا غنى عنها لبحوث الملاريا. وفي هذا الشأن، قمنا بتوحيد بعض أهم التقنيات المستخدمة في التحليل الفينوتي للأنواع البرية والمعدلة وراثيا من الملاريا القوارض.

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...

ونظراً لأوجه التشابه الصارخة بين دورة حياة وبيولوجيا طفيليات الملاريا القوارض، طفيليات الملاريا البشرية، أصبحت نماذج الملاريا القوارض لا غنى عنها لأبحاث الملاريا. ويمكن لهذه الأساليب القياسية أن تساعد في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال بحوث الملاريا حول كيفية إجراء تحليل ظاهري لأنواع الملاريا من النوع البري وأنواع الملاريا المعدلة وراثيا. وسوف يكون من بين الاجراءات طلبة الدراسات العليا جوزد ديفيتشي ولكنور يلماز من مختبري.تبدأ بسرعة ذوبان حفّظ حفظة مخزون الطفيليات المجمدة وعلى الفور باستخدام حقنة ملليلتر واحدة مجهزة بإبرة قياس 26 لحقن ما لا يقل عن اثنين من الفئران المانحة لكل نمط جيني intraperitoneally مع ما يقرب من 200 ميكرولتر من المخزون. بعد 24 ساعة من الحقن، استخدم إبرة قياس 24 أو 26 لخز ذيل الفأر الأول وجمع قطرات الدم على شريحة المجهر. استخدم الحافة القصيرة لشريحة أخرى لتشويه الدم بسرعة عبر الشريحة الأولى.عندما يكون الدم قد جفت تماما، إصلاح الشرائح في 100٪ الميثانول لمدة دقيقة واحدة على الأقل. وصمة العينات الثابتة في Giemsa لمدة 10 إلى 15 دقيقة تليها واحدة أو مزدوجة غسل المياه المقطر. عندما تكون الشرائح قد جفت ، وعرض العينات تحت الهدف 100X والنفط الغمر على المجهر الخفيف لحساب العدد الإجمالي للجلث كريات الدم الحمراء المصابة في الشبكة.بعد يومين إلى ثلاثة أيام من العدوى ، قم بتأمين فأر تخدير يصل فيه الطفيلي إلى ما بين 0.1 إلى 1٪ في وضع الوبين واستخدم ملقطًا لرفع الجلد بالقرب من قاعدة القص لتسهيل إنشاء شق جلدي. سحب الجلد عن بعضها البعض في موقع شق لفضح الحجاب الحاجز وأعلى تجويف البطن واستخدام ملقط لعقد قاعدة القفص الصدري في حين قطع من خلال الحجاب الحاجز لدخول تجويف الصدر. دبوس مرة أخرى القفص الصدري لفضح القلب واستخدام حقنة ملليلتر واحد تحتوي على ما لا يقل عن 20 ميكرولتر من الهيبارين ومجهزة بإبرة قياس 26 لثقب بلطف أنسجة القلب.تراجع ببطء المكبس لجمع ما يقرب من ملليلتر من الدم وصرف الدم في أنبوب microcentrifuge. عندما يتم حصاد كل الدم ، تدفئة الفئران المتلقي تحت مصباح الحرارة الحمراء وتحميل حقنة الأنسولين واحدة مجهزة بإبرة قياس 27 لكل مستلم مع الجرعة المناسبة من الطفيلي. ثم ضع المتلقي الأول في تقييد وحقن جرعة واحدة كاملة من كريات الدم الحمراء المصابة في الوريد الذيل المتوسع.بالنسبة لتغذية البعوض، اسمح لأنثى أنوفيليس ستيفنسي أو بعوض غامبيا البالغ عمرها أربعة إلى سبعة أيام بالتجويع لمدة ثماني إلى 12 ساعة لإطعام أكثر من 15 دقيقة على الأقل على الفئران المصابة المصبّعة التي تعاني من أعلى معدل للتخويل. ولتحديد عدد البويضات sporozoites لكل بعوضة، قتل 20 إلى 30 بعوضة في الفريزر لمدة لا تقل عن 10 دقائق واستخدام نطاق تشريح منظار واثنين من الإبر قياس 26 أو 27 لتشريح منتصف البعوض على شريحة زجاجية تحتوي على محلول التشريح المناسب. لتشريح منتصف المنتصف ، أمسك أولاً الجزء السفلي من البطن في مكانه بإبرة واحدة ودفع الصدر برفق شديد عند التقاطع بين البطن والصدر في اتجاه تصاعدي حتى يفصل الصدر ويتم الكشف عن منتصف ة بيضاء اللون تتدلى من الصدر.الآن قطع منتصف المريء من نهاية استخدام نفس إبرة التي كانت تستخدم لدفع الصدر التصاعدي وبالتالي فصل ونشر منتصف. رفع midgut تشريح من وسيلة تشريح باستخدام إبرة ونقلها إلى أنبوب مملوءة 200 ميكرولترات من RPMI. عندما يتم تشريح جميع منتصفات وحصد، ضع الأنبوب الذي يحتوي على منتصف الguts في جهاز الطرد المركزي لمدة دقيقة واحدة في 700 مرة ز.ثم طحن الأنسجة المحصودة مع آفة مرتين. نقل 12 ميكرولترات من محلول الأنسجة المخفف إلى مقياس الهد واحتضان مقياس الهائيات في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس دقائق للسماح للمحتويات بالاستقرار. ثم تحديد متوسط عدد sporozoites oocyst على المجهر الخفيف تحت النقيض المرحلة والتكبير 40X.لتحديد عدد الغدد اللعابية sporozoites لكل بعوضة، في الوقت المناسب بعد التغذية، وتجميد القتل الرحيم 50 إلى 100 البعوض الإناث كما هو موضح واستخدام مجهر تشريح والجانب من إبرة قياس 26 أو 27 لعزل الغدد اللعابية. لتشريح الغدد اللعابية، أولا عقد الجزء العلوي من البطن أو الصدر في مكان مع الجانب مشطوف من إبرة واحدة ودفع بعناية الرأس بخفة جدا ويدفع قصيرة جدا عند تقاطع بين الرأس والصدر في اتجاه تصاعدي. ادفع حتى يتم فصل الرأس بعناية عن الصدر دون تمزيق الغدة اللعابية الزجاجية.استخدام ماصة قصيرة من الزجاج باستور لرفع الغدة اللعابية تشريح من وسط تشريح ووضعها في أنبوب 1.5 ملليلتر. عندما يتم تشريح جميع الغدد اللعابية وحصادها، ضع الأنبوب الذي يحتوي على الغدد في جهاز الطرد المركزي لمدة دقيقة واحدة في 700 مرة ز. طحن الأنسجة المحصودة مع آفة مرتين.ثم تحديد متوسط عدد الغدد اللعابية sporozoites كما فعلت سابقا. الطفيليات الملاريا مراسل المعدلة وراثيا هندستها للتعبير عن EGFP تحت سيطرة المروج قوية و التأسيسية المعرض إشارة الفلوريس في مراحل الدم، ookinetes، oocysts الشباب على أنوفيليس ستيفنسي midguts، وفي sporozoites معزولة عن الغدد اللعابية من الإناث Anopheles ستيفنسي. تدفق قيم نسبة الطفيليات الدموية خلايا تتوافق مباشرة مع النسب المئوية المقدرة للطفيليات التي تم الحصول عليها عن طريق رصد مسحات الدم رقيقة Giemsa ملطخة كما ثبت التأكد من صحة طريقة القياس الكمي الأخير.بالإضافة إلى ذلك، فإن تقدير النسب المئوية لكل مرحلة من المراحل الجنسية والجنسية المختلفة يعتمد على التقييم المورفولوجي للكريات الحمراء التي لا يمكن تقييمها بواسطة قياس التدفق الخلوي. مقارنة بين الطرق الوريدية للعدوى بين المسارات الوريدية للعدوى تكشف عن انخفاض مهم إحصائياً في نسبة الطفيليات في فئة المصابين بالملكية الفكرية مقارنة بنسبة طفيلي الدم في الفئة الرابعة المصابة خلال الأيام الأربعة الأولى من العدوى مما يدل على أن الطريق الرابع للعدوى هو طريق أكثر دقة من الناحية الكمية للمقارنات مع مراحل الدم طفيليات الملاريا. وتجدر الإشارة إلى أن علاج فينيل هييدرازين يزيد بشكل كبير من عدد الخلايا التي تزيد من معدل تكوين شعيتات الذكور مما يؤدي بدوره إلى زيادة معدل الإخصاب وعدد جميع مراحل البعوض اللاحقة.هناك ندرة في الأساليب الموحدة للتحليل الظاهري للطفيليات مرحلة الدم الملاريا القوارض وانتقالها إلى ناقل البعوض. وستساعد هذه الطرق على توفير بروتوكولات موحدة ومبسطة لدراسة مسببات الأمراض هذه ومراحل دورة حياتها.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

نضوب بالسكان خلية معينة من قبل استنفاد تكملة

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

تنقية سكان خلية معينة من قبل الإسفار الفرز الخلية المنشط (FACS)

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Protocol for Production of a Genetic Cross of the Rodent Malaria Parasites

بروتوكول للانتاج من الصليب الوراثية للطفيليات الملاريا القوارض

Variation in response to antimalarial drugs and in pathogenicity of malaria parasites is of biologic and medical importance. Linkage mapping has led to ...

Intravital Microscopy of the Spleen: Quantitative Analysis of Parasite Mobility and Blood Flow

Intravital الميكروسكوب في الطحال : التحليل الكمي للتنقل الطفيلي وتدفق الدم

The advent of intravital microscopy in experimental rodent malaria models has allowed major advances to the knowledge of parasite-host interactions 1,2. ...

Vaccinia Reporter Viruses for Quantifying Viral Function at All Stages of Gene Expression

اللقاحية مراسل الفيروسات لقياس وظيفة الفيروسية في جميع مراحل التعبير الجيني

Poxviruses are a family of double stranded DNA viruses that include active human pathogens such as monkeypox, molluscum contagiousum, and Contagalo virus. ...

Mouse Fetal Liver Culture System to Dissect Target Gene Functions at the Early and Late Stages of Terminal Erythropoiesis

الماوس الجنين الكبد نظام الثقافة لتشريح الهدف جين وظائف في المراحل المبكرة والمتأخرة من محطة الكريات الحمر

Erythropoiesis involves a dynamic process that begins with committed erythroid burst forming units (BFU-Es) followed by rapidly dividing erythroid colony ...

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

عزل الخلايا اللمفاوية من الجلد البشري لتحليل المظهري و<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; زراعة الخلايا

Human skin has an important barrier function and contains various immune cells that contribute to tissue homeostasis and protection from pathogens. As the ...

Phenotypic and Functional Analysis of Activated Regulatory T Cells Isolated from Chronic Lymphocytic Choriomeningitis Virus-infected Mice

المظهرية والتحليل الوظيفي من المنشط خلايا تنظيم تي المعزولة من الفئران المصابة بفيروس المزمنة الليمفاوي المشيمي

Regulatory T (Treg) cells, which express Foxp3 as a transcription factor, are subsets of CD4+ T cells. Treg cells play crucial roles in immune tolerance ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

تطوير نظام الفيروسات مراسل التهاب الكبد B لرصد المراحل المبكرة من دورة النسخ المتماثل

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

ديكستران يعزز كفاءة توصيل لينتيفيرال الخلايا ناغورني كاراباخ الابتدائي مورين والبشرية

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...