Name: phenotypic analysis of rodent malaria parasite asexual and sexual blood stages and mosquito stages
Uploaded: 2019-05-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages at JoVE.com

אחמד אלי נתמך על ידי מימון וכלו באוניברסיטת משרד התחבורה התורכי 2015BSV036, ועל ידי מימון שסופקו על ידי בית הספר לבריאות של טוליין של בריאות הציבור ורפואה טרופית, ועל ידי מימון NIH-NIAID עבור R21Grant 1R21AI111058-01A1.

כל ניסויי בעלי החיים המתוארים כאן נערכו על פי הפרוטוקולים המאושרים של הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים (IACUC) של אוניברסיטת טוליין וועדת האתיקה של בעלי החיים באוניברסיטת בזועלם. כל הפרוטוקולים הניסיוניים האחרים והשימוש ב-DNA רקומביננטי נערכו על פי הפרוטוקולים המאושרים של ועדת Biosafety טיחות מ?...

למרות הדמיון בביולוגיה הכללית של מחזורי החיים שלהם זה של טפילים מלריה אנושית, מודלים מלריה העכבר גם יש הרבה וני מינים הפלסטיניום האנושי כי היה להגביל את השימוש שלהם אמין במודלים vivo . למשל, למעט טפילים חיים החליש כמו חיסונים, כל לימודי החיסונים עם יחידת ו-DNA וחיסונים אחרים נתן תוצא?...

טפילים מלריה לגרום למאות מיליוני דלקות מלריה בבני אדם ברחבי העולם, עם יותר מ 600,000 מקרי מוות מדי שנה1. זיהומים אנושיים נגרמים על ידי חמש מינים טפיל מלריה, כלומר p. falciparum, p. vivax, p. ovale, פ. מלאריאה, ו p.ה,. רוב מלריה קלינית נגרמת על ידי P. falciparum באפריקה שמדרום לסהרה1. נוסף מלריה אנושית טפיל מינים הגורמת morbidities נרחב ברחבי העולם מחוץ לאפריקה שמדרום לסהרה הוא P. vivax2. שלושת המינים האחרים מוגבלים יותר מבחינה גיאוגרפית וגורמים לדלקות מלריה שפירים, למעט הקטלניים הקטלנית3. אי-הזמינות של מודלים רלוונטיים ומעשיים שאינם אנושיים בvivo של זיהומים היתה תמיד ועדיין הוא מכשול חיסון נגד מלריה ופיתוח התרופה. מוקדם יותר תרופות מלריה פילוח מחקרים מטבולית סמכו בהרחבה על דגמי מלריה העופות כמו p. אבירים ו p. lophurae, הדבקת תרנגולות וברווזים, בהתאמה4. לאחר מכן, מינים מלריה מכרסמים הוכנסו בהדרגה חיסונים שונים ומיקוד הסמים מחקרים כמו במודלים vivo. במהלך השנים, עדויות של קווי הדמיון של הביולוגיה ואינטראקציות מארח-טפיל של שלבים מחזור החיים של מודלים מכרסמים מכרסם למינים מלריה בני אדם צברו.
בפרט, דגמי מלריה מכרסמים היו חשובים מאוד כדי לחקור ולאפיין את הביולוגיה של יתושים ושלבים טרום אריתרופויזיים5. עם זאת, ישנם ארבעה מינים מלריה מכרסמים (p. ברגניי, p. yoelii, p. שאבו, ו P. vinckei) כי יש תכונות ביולוגיות שונות, הבולטים ביותר שנמצאים בשלבי הדם6. מינים מלריה מכרסם שונים ב סינכגניות של שלבי הדם, איפה בשלבים דם של p. שאבו ו p. זנים ויניקאי הם בעיקר סינכרוני, בעוד שלבי הדם של p. ברגניי ו p. yoelii אינם6 , 7. עוד הבדל הבולט הוא הסיווג העצמי של שלבי הדם המתרחשת בזנים מסוימים (למשל, p. yoelii 17x-NL, p. ברגניי NK65, ו p. vinckei lentum), בעוד זיהום הדם של אחרים זנים של אותו מין יכול להיות קטלני אם לא מטופל (p. yoelii 17x-L, p. ברגניי אנקה, ו P. שאבו כמו). יתר על כן, p. yoelii 17x-NL המתח ו p ברגמיי מאמץ מאוד לפלוש לעבר רטיקולולוציטים8,9,10,11, למרות תכונות אלה של P. yoelii ו P. בוני זנים הם לא דרישה הצמיחה קפדנית12,13,14. לכן, העכברים מטופלים עם פנילהיהידראזין לפני זיהום עם שלבי הדם של טפילים אלה כדי להגדיל את הקיפוד ואת gametocytemia הצורך לזיהום יתוש עבור הזן p. ברגאיי אנקה עבור p. yoelii 17 x-NL15,16,17,18,19.
הבדלים בשלבי פיתוח של יתושים קיימים גם בין מינים שונים מלריה מכרסמים, הבולטים ביותר להיות הטמפרטורה ואת הזמן הנדרש עבור פיתוח בשלבים מיטביים יתושים ואת אורך sporozoite5,6, . עשריםדולר בשלבים טרום אריתרופויוטיים של מיני מלריה מכרסמים, ההבדלים כוללים את המינים מכרסם ומסננים כי הם רגישים ביותר מדבקת sporozoite זיהומיות, מספר הספוראוזוטים הדרושים לחיסון למאמץ מכרסם רגיש, ה סוגי תא ממגלית הדרושים לפיתוח בכבד מחוץ לתחום, והזמן להשלמת התפתחות הכבד בשלב5,21,22,23,24,25 ,26,27,28,29,30.
למרות היכולות הללו, טפילים מלריה מכרסמים היו מודלים חיוביות מוקדם על היישום של גישות גנטיות הפוכה, כי הם היו פחות זמן-ו לצרוך משאבים עם הסתברות גבוהה של הצלחה31. למעשה, דגמי מלריה מכרסמים היו הדגמים הטובים ביותר, ובמקרים רבים את המודלים היחידים, זמין במשך שנים רבות כדי לאפיין את הגנים באופן פונקציונלי הביע בשלבים יתושים ובכבד.
לאור הפופולריות ואת היכולת ההפוכה של גישות גנטיות הפוכה במודלים של מלריה מכרסמים, מספר מתודולוגיות שונות השתמשו כדי לנתח את פנוטיפים של שלבים מחזור החיים טפיל הטרנסגניים, במיוחד שלבי הדם. עם זאת, חלק ממתודולוגיות אלה אינן עקביות; למשל, השוואת זיהומים של טפילים בשלב הדם בעקבות הזרקת IP (אשר עלולים להיות מנוקז לבלוטות הלימפה הצפק, משם, יכול להיכנס למחזור הדם; לכן, טפילים מוזרק לא לסיים באופן שווה בזרם הדם) , השוואת העברת היתוש של שיבוטים עם מספר שונה של העברות הבמה דם סדרתי או מספר G (אשר יכול להשפיע על gametocytogenesis32,33), או השוואת טפילים טרנסגניים ישירות לסוג פראי נאיבי (WT) טפילים שמעולם לא נחשפו לאלקטרופורציה ולבחירת סמים חיוביים ולהערכות השונות הבלתי מתוקננת של ההלקאה הגברית. לכן, זה חיוני כדי לתקנן פרוטוקולים כי הם פשוט לעקוב אחר ניתוח פנוטיפ של כל סוג של הטרנסגניים או הטפילים מכרסם מכרסמים בדם ביתוש כדי להתאים את היכולות הביולוגי של מלריה מכרסמים מין טפיל.
בזאת, אנו מדווחים על פרוטוקול ניסיוני מפורט מפורטים לניתוח פנוטיפ של דם ויתושים בשלבים מחזור החיים של הטרנסגניים או מסוג פראי p. yoelii ו p. ברגניי טפילים. פרוטוקולים אלה חלים גם על p. שאבו ו p. ויניקאי טפילים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:735px;" width="735">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">Heparin</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">375095-100KU</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Xanthurenic acid</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D120804-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Hypoxanthine</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">H9377-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Alsever&#39;s solution</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A3551-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Sodium Bicarbonate</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S5761-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenylhydrazine</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P26252-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">G5516-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Giemsa</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">GS1L-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">26G x 3/8 Precision Glide Needle,&#160;</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">305110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">1 ml TB Syringe, 26G x 3/8</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">309625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">1 cc Insulin Syringe, U-100 27G</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">329412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Isoflurane, USB</td>
			<td style="width:143px;">Piramal</td>
			<td style="width:119px;">2667- 46- 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">PBS, pH 7.4</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10010049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">RPMI</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>22400105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">DMEM</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>11995065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Pencillin/ Streptomycin</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10082147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Fiber Glass Wool</td>
			<td style="width:143px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3950</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phenotypic analysis of rodent malaria parasite asexual and sexual blood stages and mosquito stages

ההתקדמות האחרונה בטכנולוגיות הגנטיקה והביולוגיה של המערכות קידמו את הבנתנו את הביולוגיה של טפילי המלריה ברמה המולקולרית. עם זאת, יעיל מלריה טפיל מטרות עבור החיסון ופיתוח כימותרפיה עדיין מוגבלים. הדבר נובע במידה ניכרת מחוסר הזמינות של הרלוונטיים והמעשיים במודלים של זיהום vivo למינים של הפלמודניום האנושי, בעיקר עבור p. falciparum ו p. vivax. לכן, מינים מלריה מכרסמים כבר בשימוש נרחב כמו חלופה מעשית במודלים vivo עבור חיסון נגד מלריה, סמים מיקוד, התגובה החיסונית, ולימודי אפיון פונקציונלי של שימור הגנים הפלסטיות. אכן, דגמי מלריה מכרסמים הוכיחו להיות יסולא בפז, במיוחד עבור חקר שידור יתושים וביולוגיה שלב הכבד, והיה חיוני למחקרים אימונולוגיים. עם זאת, ישנם אי-התאמות בשיטות המשמשות כדי להעריך את פנוטיפים של הטרנסגניים והפראי, מיני ומינית טפילים בשלב הדם. דוגמאות לסתירות אלה הן הבחירה של זיהום בתוך הצפק לעומת הדלקת פנים של מכרסמים עם טפילים בשלב הדם ואת ההערכה של הגבר להלקאה. בזאת, אנו פירוט שיטות ניסיוני סטנדרטית כדי להעריך את פנוטיפים של שלבים מיני ומינית דם בטפילים טרנסגניים ביטוי הכתב-גן או פראי סוג מלריה מכרסם טפיל מינים. כמו כן אנו מפרטים את השיטות כדי להעריך את פנוטיפים של מלריה טפיל שלבים נגד יתושים (gametes, ookinetes, oocysts, ו sporozoites) בתוך אנופלס וקטורים יתושים. שיטות אלה מפורטות ופשוטים כאן עבור זנים קטלניים ולא קטלניים של p. ברגניי ו p. yoelii אבל יכול להיות גם להחיל עם כמה התאמות p. שאבו ו p. ויניקיי מכרסם מיני מלריה.

ההצלחה של החלת כלים גנטיים הפוכה וטכניקות לטפילים מלריה יש מהפכה בתחום של מחקר מלריה, עם היכולת להוסיף, למחוק, או לשנות מגזרים גנומית ספציפיים של כמה מינים פלמודניום 39. חשוב מכך, גנומית מקבל לוויתור זוהו והשתמשו בהצלחה כדי להחדיר סמנים חלבון הפלואורסצנט...

Watch this Scientific Journal Video about Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages at JoVE.com

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

ניתוח פנוטימית של מלריה מכרסם טפיל מינית ושלבי דם מיניים ושלבי יתוש

בשל הדמיון הבולט של מחזור החיים ביולוגיה של טפילים מלריה מכרסמים לטפילים מלריה אדם, מודלים מלריה מכרסם הפכו חיוניים למחקר מלריה. בזאת, אנו מתוקננת כמה מן הטכניקות החשובות ביותר בשימוש בניתוח פנוטיפ של פראי סוג ומלריה מכרסם הטרנסגניים.

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...

בשל הדמיון המדהים של מחזור החיים והביולוגיה של טפילי מלריה מכרסמים, טפילי המלריה האנושית, מודלים מלריה מכרסמים הפכו חיוניים למחקר מלריה. שיטות סטנדרטיות אלה יכולות לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מחקר המלריה על איך לבצע ניתוח פנוטיפי של סוג הבר ומינים מהופנטים מלריה מכרסמים. הדגמת ההליכים תהיה סטודנטים לתארים מתקדמים גד דבסי ואילקנור ילמז מהמעבדה שלי.התחל על ידי הפשרה מהירה cryo נשמר מלאי טפיל קפוא ומיד באמצעות מזרק אחד מיליליטר מצויד מחט 26 מד להזריק לפחות שני עכברים תורמים לכל גנוטיפ intraperitoneally עם כ 200 microliters של מלאי. עשרים וארבע שעות לאחר ההזרקה, להשתמש במחט 24 או 26 מד כדי לדקור את הזנב של העכבר הראשון ולאסוף את טיפת הדם על מגלשת מיקרוסקופ. השתמש בקצה הקצר של שקופית אחרת כדי למרוח במהירות את הדם לאורך השקופית הראשונה.כאשר הדם התייבש לחלוטין, לתקן את השקופיות ב 100% מתנול לפחות דקה אחת. הכתם את הדגימות הקבועות בגימסה במשך 10 עד 15 דקות ולאחר מכן לשטוף מים מזוקקים בודדים או כפולים. כאשר השקופיות התייבשו, להציג את הדגימות תחת מטרה 100X וטבילת שמן על מיקרוסקופ אור לספירת המספר הכולל של אריתרוקיטים נגועים לכל רשת.יומיים עד שלושה ימים לאחר הזיהום, לאבטח עכבר הרדמה שבו הטפיל הגיע בין 0.1 ל 1% בתמורת סופין ולהשתמש מדפים כדי להרים את העור ליד הבסיס של עצם החזה כדי להקל על יצירת חתך בעור. משוך את העור לגזרים באתר החתך כדי לחשוף את הסרעפת ואת החלק העליון של חלל הבטן ולהשתמש במקלות להחזיק את הבסיס של בית החזה תוך חיתוך דרך הסרעפת כדי להיכנס לחלל בית החזה. הצמד בחזרה את בית החזה כדי לחשוף את הלב ולהשתמש מזרק מיליליטר אחד המכיל לפחות 20 microliters של הפרין מצויד מחט 26 מד בעדינות לנקב את רקמת הלב.לאט לאט לסגת הבוכנה כדי לאסוף כמיליליטר של דם ולחלק את הדם לתוך צינור מיקרוצנטריפוגה. כאשר כל הדם נקצר, לחמם את העכברים המטופל תחת מנורת חום אדומה לטעון מזרק אינסולין אחד מצויד מחט 27 מד לכל הנמען עם המינון המתאים של טפיל. ואז למקם את הנמען הראשון לתוך מרסן ולהזריק מנה אחת מלאה של אריתרוסיטים נגועים לתוך וריד זנב הפוך.להאכלת יתושים, אפשרו למבוגרת בת ארבעה עד שבעה ימים, נקבה Anopheles stephensi או A.gambiae יתושים מורעבים במשך שמונה עד 12 שעות כדי להאכיל יותר 15 דקות לפחות על עכברים נגועים בהרדמה עם שיעור האקספלציה הגבוה ביותר. כדי לקבוע את מספר sporozoites oocyst לכל יתוש, המתת דם 20 עד 30 יתושים במקפיא במשך לא פחות מ 10 דקות ולהשתמש בהיקף ניתוח משקפת ושני 26 או 27 מחטי מד לנתח את midguts של יתושים על מגלשת זכוכית המכילה את פתרון הניתוח המתאים. כדי לנתח את midgut, תחילה להחזיק את החלק התחתון של הבטן במקום עם מחט אחת בזהירות לדחוף את בית החזה בקלילות רבה בצומת בין הבטן לבית החזה בכיוון כלפי מעלה עד שהוא מפריד את בית החזה ואת midgut בצבע לבן חשוף מתנדנד למטה מבית החזה.עכשיו לחתוך את midgut מקצה הוושט באמצעות אותה מחט ששימשה לדחוף את בית החזה כלפי מעלה ובכך להפריד ולהפיץ את midgut. הרם את מידגוט נותק מן מדיום הניתוח באמצעות מחט ולהעביר אותו לצינור מלא 200 microliters של RPMI. כאשר כל האמצע נותחו ונקצרו, מניחים את הצינור המכיל את האמצע לתוך הצנטריפוגה במשך דקה אחת ב 700 פעמים g.ואז לטחון את הרקמות שנקטפו עם עלה פעמיים. מעבירים 12 מיקרוליטרים של תסנובת הרקמה המדולדללת להמיציטומטר ומדגרים את המציטומטר בטמפרטורת החדר למשך חמש דקות כדי לאפשר לתכולת להתיישב. לאחר מכן לקבוע את המספר הממוצע של sporozoites oocyst על מיקרוסקופ אור תחת ניגודיות פאזה והגדלה 40X.כדי לקבוע את מספר sporozoites בלוטת הרוק לכל יתוש, בנקודת הזמן המתאימה לאחר האכלה, להקפיא המתת חום 50 עד 100 יתושים נקבה כפי שהוכח ולהשתמש מיקרוסקופ ניתוח ואת הצד של מחט 26 או 27 מד כדי לבודד את בלוטות הרוק. כדי לנתח בלוטות הרוק, תחילה להחזיק את הבטן העליונה או בית החזה במקום עם הצד משופע של מחט אחת בזהירות לדחוף את הראש בקלילות רבה מאוד קצר דוחף בצומת בין הראש לבית החזה בכיוון כלפי מעלה. לדחוף עד הראש מופרד בזהירות מבית החזה מבלי לקרוע את בלוטת הרוק מזכוכית.השתמש פיפטה פסטר זכוכית קצרה כדי להעלות את בלוטת הרוק נותק מן מדיום הניתוח ולמקום אותו לתוך צינור 1.5 מיליליטר. כאשר כל בלוטות הרוק נותחו ונקצרו, מניחים את הצינור המכיל את הבלוטות לתוך הצנטריפוגה במשך דקה אחת ב 700 פעמים g. טוחנים את הרקמות שנקטפו עם עלה פעמיים.לאחר מכן לקבוע את המספר הממוצע של ספורוזואיטים בלוטת הרוק כפי שנעשה בעבר. טפילי מלריה מהונדסים שהונדסו לבטא EGFP תחת שליטתו של מקדם חזק ומכונן מפגינים את אות הפלואורסצנטיות בשלבי דם, ookinetes, oocysts צעירים על אנדופלס סטיבנסי midguts, וב ספורוזואיטים מבודדים מבלוטות הרוק של נקבות אנופלס סטיבנסי. ערכי אחוזי הטפילים של ציטומטריית זרימה תואמים ישירות לאחוזים המשוערים של טפילים המתקבלים על ידי ניטור כתמי דם דקים מוכתמים בגימסה כפי שהוכח המאשרים את תוקפה של שיטת הכימות האחרונה.בנוסף, הערכת האחוזים של כל אחד מהשלבים הא-מיניים והמיניים השונים תלויה בהערכה המורפולוגית של אריתרוציטים שלא ניתן להעריך על ידי ציטומטריית זרימה. השוואה בין מסלולי ההדבקה האינטר-פרטיים לעומת תוך ורשתיים מגלה ירידה מובהקת סטטיסטית באחוז הטפילים הקבוצתיים הנגועים ב- IP בהשוואה לאחוז הטפילים הקבוצתיים הנגועים בעירוי במהלך ארבעת הימים הראשונים של ההדבקה, מה שמוכיח כי נתיב הזיהום הרביעי הוא מסלול מדויק יותר מבחינה כמותית עבור בדיקות עם שלבי הדם של טפיל המלריה. שים לב, טיפול phenylhydrazine מגדיל באופן משמעותי את מספר gametocytes אשר מגביר את קצב היווצרות gamete זכר אשר בתורו מגביר את קצב ההפריה ואת מספר כל שלבי היתוש הבאים.יש מחסור בשיטות סטנדרטיות לניתוח פנוטיפי של טפילי שלב הדם של מלריה מכרסמים והעברתם לווקטור היתושים. שיטות אלה יסייעו לספק פרוטוקולים סטנדרטיים ומפושטים לחקר פתוגנים אלה ושלבי מחזור החיים שלהם.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

דלדול של אוכלוסיות תאים ספציפיים על ידי דלדול משלים

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

טיהור אוכלוסייה תאים ספציפיים על ידי מיון פלואורסצנטי תא פעיל (FACS)

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Protocol for Production of a Genetic Cross of the Rodent Malaria Parasites

פרוטוקול עבור הפקה של הצלב גנטית של טפילי מלריה מכרסמים

Variation in response to antimalarial drugs and in pathogenicity of malaria parasites is of biologic and medical importance. Linkage mapping has led to ...

Intravital Microscopy of the Spleen: Quantitative Analysis of Parasite Mobility and Blood Flow

מיקרוסקופית Intravital של הטחול: ניתוח כמותי של ניידות טפיל ואת זרימת הדם

The advent of intravital microscopy in experimental rodent malaria models has allowed major advances to the knowledge of parasite-host interactions 1,2. ...

Vaccinia Reporter Viruses for Quantifying Viral Function at All Stages of Gene Expression

וירוסי כתב Vaccinia לכימות פונקציה ויראלי בכל השלבים של ביטוי גנים

Poxviruses are a family of double stranded DNA viruses that include active human pathogens such as monkeypox, molluscum contagiousum, and Contagalo virus. ...

Mouse Fetal Liver Culture System to Dissect Target Gene Functions at the Early and Late Stages of Terminal Erythropoiesis

עכבר עוברי כבד מערכת התרבות לנתח פונקציות היעד ג&#39;ין בשלבים המוקדמים ומאוחרים של המסוף erythropoiesis

Erythropoiesis involves a dynamic process that begins with committed erythroid burst forming units (BFU-Es) followed by rapidly dividing erythroid colony ...

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

בידוד לימפוציטים מעור אדם עבור ניתוח פנוטיפי<em&gt; Ex Vivo</em&gt; תרבית תאים

Human skin has an important barrier function and contains various immune cells that contribute to tissue homeostasis and protection from pathogens. As the ...

Phenotypic and Functional Analysis of Activated Regulatory T Cells Isolated from Chronic Lymphocytic Choriomeningitis Virus-infected Mice

פנוטיפי אנליזה פונקציונלית של תאים תקינה T הופעל מבודדת מן עכברים הנגועים בנגיף לימפוציטית כרונית Choriomeningitis

Regulatory T (Treg) cells, which express Foxp3 as a transcription factor, are subsets of CD4+ T cells. Treg cells play crucial roles in immune tolerance ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

פיתוח של מערכת Reporter וירוס הפטיטיס B לפקח בשלבים המוקדמים של מחזור שכפול

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

לתוספי משפר את היעילות התמרה חושית Lentiviral של תאי NK העיקרי מאתר ואנושי

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...