Name: phenotypic analysis of rodent malaria parasite asexual and sexual blood stages and mosquito stages
Uploaded: 2019-05-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages at JoVE.com

Ahmed aly, Türkiye Kalkınma Bakanlığı Grant 2015BSV036 ' dan Bezmialem vakif Üniversitesi 'ne finansman sağlayarak ve Tulane Üniversitesi Kamu Sağlığı ve tropikal Tıp Fakültesi tarafından sağlanan finansman ve R21Grant için NIH-NIAID ' e fon vererek desteklenmektedir. 1R21Aı111058-01A1.

Burada açıklanan tüm hayvan deneyleri, Tulane Üniversitesi 'nin kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi 'nin (ıAYUC) onaylı protokollerine ve Bezmialem vakif Üniversitesi hayvanlar etik komitesine göre yürütülmüştür. Diğer tüm deneysel protokoller ve rekombinant DNA kullanımı Tulane Üniversitesi Kurumsal Biyogüvenlik Komitesi (ıBC) onaylı protokollere göre yürütülmüştür.
1. kan ile fareler enfeksiyon-sahne parazitler için Parasitemia analiz ve sivrisinek enfe...

İnsan sıtma parazitleri onların yaşam döngüleri Genel Biyoloji benzerlik rağmen, fare sıtma modelleri de güvenilir in vivo modelleri olarak kullanımını sınırlamak olacak ınsan Plasmodium türleri için pek çok benzerlik vardır. Örneğin, aşılar olarak canlı zayıflatılmış parazitlerin dışında, altbirim ve DNA ve diğer aşılar ile tüm aşı çalışmaları fare modelinde mükemmel sonuçlar verdi, ancak endemik bölgelerde yaşayan insanlarda, sonuçlar tatmin edici değildi...

Sıtma parazitleri insanlar dünya çapında sıtma enfeksiyonları yüzlerce milyonlarca neden, 600.000 ' den fazla ölüm her yıl1. İnsan enfeksiyonları beş Sıtma paraziti türünün neden olduğu, yani p. falciparum, p. vivax, p. ovale, p. malariae, ve p. knowlesi. Çoğu klinik sıtma mortaliteleri, Sahra-altı Afrika 'da P. falciparum 'dan kaynaklanır1. Sahra-altı Afrika dışında geniş dünya çapında morbiditelerin neden olduğu başka bir insan Sıtma paraziti türü P. vivax2' dir. Diğer üç tür daha coğrafik olarak sınırlıdır ve ölümcül P. knowlesi3hariç, benign sıtma enfeksiyonlarına neden olmaktadır. Enfeksiyonların ilgili ve pratik olmayan-insan içinde vivo modellerin bulunabilirliği her zaman olmuştur ve hala sıtma aşısı ve ilaç gelişimi için bir engeldir. Daha önce sıtma ilaç hedefleme ve metabolik çalışmalar, sırasıyla4tavuk ve ördek enfekte p. gallinaceum ve p. lophuraegibi kuş sıtma modellerinde kapsamlı olarak güvendi. Bundan sonra, kemirgen sıtma türleri kademeli olarak çeşitli aşılar ve ilaç hedefleme çalışmalarında in vivo modelleri olarak tanıtıldı. Yıllar içinde, biyoloji ve ev sahibi-parazit etkileşimlerini insan sıtma türleri için kemirgen sıtma modellerinin yaşam döngüsü aşamalarında benzerliklerin kanıtı birikmiştir.
Özellikle, kemirgen sıtma modelleri sivrisinek ve ön eritrositik aşamaların biyolojisini keşfetmek ve karakterize etmek için son derece önemliydi5. Ancak, dört kemirgen sıtma türü vardır (p. berghei, p. yoelii, p. chabaudi, ve p. vinckei) farklı biyolojik özelliklere sahip, en önemli olan kan aşamalarında6. Kemirgen sıtma türleri kan aşamalarında eşzamanlılık farklıdır, p. chabaudi ve p. vinckei suşlarının kan aşamaları çoğunlukla senkron, p. berghei ve p. yoelii kan aşamaları6 değildir iken , 7. başka bir önemli fark, bazı suşları (örn., p. yoelii 17x-nl, p. berghei NK65 ve p. vinckei lentum) meydana gelen kan aşamalarının Self-boşluk, diğer kan enfeksiyonu ise aynı türlerin suşları (p. yoelii 17x-L, p. berghei Anka, ve p. chabaudi as) tedavi edilmemiş sol ölümcül olabilir. Dahası, p. yoelii 17x-nl strain ve p. berghei Anka gerinim tercihen retikülositler istila8,9,10,11, bu özellikleri rağmen P. yoelii ve P. berghei suşları sıkı bir büyüme gereksinimi12,13,14değildir. Bu nedenle, fareler, p. berghei Anka gerinim ve p. yoelii için bir sivrisinek enfeksiyonu için gerekli olan parasitemia ve gametocytemia artırmak için bu parazitlerin kan aşamaları ile enfeksiyondan önce fenilhidrazinsülfonik ile tedavi edilir 17x-nl15,16,17,18,19.
Sivrisinek aşamaları gelişimi farklılıkları da farklı kemirgen sıtma türleri arasında var, en önemli sıcaklık ve zaman optimum sivrisinek aşamaları gelişimi ve sporozoit uzunluğu için gerekli olan5,6, 20' ye kadar. Kemirgen sıtma türlerinin ön eritrositik aşamalarında, farklılıklar bulaşıcı sporozoit aşı en duyarlı kemirgen türler ve gerinim dahil, duyarlı kemirgen gerinim içinde aşı için gerekli sporozoitler sayısı, In vitro karaciğer sahne gelişimi için gerekli olan memelinin hücre tipleri ve karaciğer sahne gelişimini tamamlama zamanı5,21,22,23,24,25 ,26,27,28,29,30.
Bu değişkenlere rağmen, kemirgen sıtma parazitleri ters genetik yaklaşımların uygulanması için erken olumlu modeller vardı, çünkü onlar daha az zaman-ve başarı yüksek bir olasılık ile kaynak tüketen31. Aslında, kemirgen sıtma modelleri en iyi modeller vardı, ve birçok durumda sadece modelleri, işlevsel bir şekilde genleri sivrisinek ve karaciğer aşamalarında ifade niteleştirmek için kullanılabilir.
Kemirgen sıtma modellerinde ters genetik yaklaşımlar popülerlik ve amenability ışığında, farklı metodolojileri bir dizi transgenik parazitin yaşam döngüsü aşamalarında fenotipleri analiz etmek için kullanılmıştır, özellikle kan aşamaları. Ancak, bu metodolojilerin bazıları tutarsız; Örneğin, bir IP enjeksiyonu sonrasında kan-aşama parazitlerinin enfeksiyonlarını karşılaştırarak (muhtemelen periton lenf nodlarına boşaltılır ve oradan kan dolaşımına girebilir; bu nedenle, enjekte edilen parazitler kan dolaşımında eşit olarak sona ermez) , farklı sayıda seri kan-aşama transferleri veya G numarası ile klonların sivrisinek iletimi karşılaştırarak (hangi gametocytogenesis32etkileyebilir,33), ya da doğrudan saf vahşi tip (WT) transjenik parazitler karşılaştırarak Elektroporasyon ve pozitif ilaç seçimi ve erkek gamet exflagellation çeşitli standartlaştırılmış değerlendirmeleri maruz asla parazitler. Bu nedenle, kan içinde transgenik veya WT kemirgen sıtma parazitleri her türlü fenotipik analizi için takip etmek basit protokolleri standartlaştırmak etmek için çok önemlidir ve sivrisinek içinde kemirgen sıtma biyolojik varyasyon için karşılamak için parazit türleri.
Bu belgede, transjenik veya vahşi tip p. yoelii ve p. berghei parazitlerinin kan ve sivrisinek yaşam döngüsü aşamalarının fenotipik analizi için standardize edilmiş, detaylı deneysel bir protokol bildiriyoruz. Bu protokoller de p. chabaudi ve p. vinckei parazitleri için geçerlidir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:735px;" width="735">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">Heparin</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">375095-100KU</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Xanthurenic acid</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D120804-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Hypoxanthine</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">H9377-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Alsever&#39;s solution</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A3551-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Sodium Bicarbonate</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S5761-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenylhydrazine</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P26252-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">G5516-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Giemsa</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">GS1L-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">26G x 3/8 Precision Glide Needle,&#160;</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">305110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">1 ml TB Syringe, 26G x 3/8</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">309625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:307px;">1 cc Insulin Syringe, U-100 27G</td>
			<td style="width:143px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">329412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Isoflurane, USB</td>
			<td style="width:143px;">Piramal</td>
			<td style="width:119px;">2667- 46- 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">PBS, pH 7.4</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10010049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">RPMI</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>22400105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">DMEM</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>11995065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Pencillin/ Streptomycin</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10378016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td>10082147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Fiber Glass Wool</td>
			<td style="width:143px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3950</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phenotypic analysis of rodent malaria parasite asexual and sexual blood stages and mosquito stages

Genetik ve sistem biyoloji teknolojilerinde yapılan son gelişmeler, sıtma parazitlerinin biyoloji anlayışımızı moleküler düzeyde teşvik etmiştir. Ancak, aşı ve kemoterapi gelişimi için etkili Sıtma paraziti hedefleri hala sınırlıdır. Bu büyük ölçüde insan Plasmodium türleri için ilgili ve pratik in vivo enfeksiyon modellerinin olmaması nedeniyle, en önemlisi p. falciparum ve p. vivaxiçin. Bu nedenle, kemirgen sıtma türleri yaygın olarak sıtma aşısı, ilaç hedefleme, bağışıklık tepkisi ve korumalı Plasmodiumspp. genes fonksiyonel karakterizasyon çalışmaları için pratik alternatif olarak vivo modeller olarak kullanılmıştır. Nitekim, kemirgen sıtma modelleri, özellikle sivrisinek iletim ve karaciğer sahne biyoloji keşfetmek için, paha biçilemez olduğu kanıtlanmıştır ve immünolojik çalışmalar için vazgeçilmez idi. Ancak, transgenik ve vahşi tip aseksüel ve cinsel kan aşamasında parazitlerin fenotipleri değerlendirmek için kullanılan yöntemlerle farklılıkları vardır. Bu tutarsızlıkları örnekleri kan-sahne parazitleri ve erkek gamet exflagellation değerlendirilmesi ile kemirgenler intravenöz vs intraperitoneal enfeksiyon seçimdir. Burada, haberci-geni veya vahşi tip kemirgen Sıtma paraziti türlerini ifade eden transgenik parazitlerin aseksüel ve cinsel kan aşamalarında fenotipleri değerlendirmek için standartlaştırılmış deneysel yöntemler ayrıntılarıyla. Ayrıca, Anopheles sivrisinek vektörler içinde Sıtma paraziti sivrisinek aşamalarının (gametes, ookinetes, oocysts ve sporozoites) fenotipleri değerlendirmek için yöntemler ayrıntılarıyla. Bu yöntemler ayrıntılı ve burada p. berghei ve p. yoelii ölümcül ve ölümcül olmayan suşları için Basitleştirilmiş ama aynı zamanda p. chabaudi ve p. vinckei kemirgen sıtma türleri bazı ayarlamalar ile uygulanabilir.

Sıtma parazitlerine ters genetik araçlar ve teknikler uyguladığınız başarı, sıtma araştırmaları alanında devrim yaratıyor, çeşitli Plasmodium türlerinin39belirli genomik segmentlerini ekleme, silme veya değiştirme yeteneği ile. Önemlisi, vazgeçilebilir genomik loci tespit edilmiş ve başarılı bir şekilde tüm yaşam döngüsü aşamalarında istikrarlı bir ifade sağlamak için, Çift Homolog rekombinasyon tarafından kemirgen ve...

Watch this Scientific Journal Video about Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages at JoVE.com

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Kemirgen Sıtma paraziti Asexual ve cinsel kan aşamaları ve sivrisinek aşamaları phenotypic Analizi

İnsan sıtma parazitlerine kemirgen sıtma parazitlerinin yaşam döngüsü ve biyolojisinin çarpıcı benzerlikleri nedeniyle, kemirgen sıtma modelleri sıtma araştırmaları için vazgeçilmez hale gelmiştir. Burada, vahşi tip ve transgenik kemirgen sıtma türlerinin fenotipeksi analizinde kullanılan en önemli tekniklerden bazılarını standardize ettik.

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...

Kemirgen sıtma parazitlerinin yaşam döngüsü ve biyolojisinin çarpıcı benzerlikleri nedeniyle insan sıtma parazitleri, kemirgen sıtma modelleri sıtma araştırmaları için vazgeçilmez hale gelmiştir. Bu standart yöntemler, sıtma araştırma alanında yabani tip ve transgenik kemirgen sıtma türlerinin fenotik analizinin nasıl yapılacağının cevaplayıcı sorularının yanıtlatına yardımcı olabilir. Prosedürleri gösteren yüksek lisans öğrencileri Gözde Deveci ve İlknur Yılmaz benim laboratuvarımdan gelecek.Hızlı bir şekilde dondurulmuş parazit stokları korunmuş ve hemen bir mililitre şırınga 26 gauge iğne ile donatılmış kullanarak yaklaşık 200 mikrolitre stok ile genotip intraperitoneally başına en az iki donör fareler enjekte ederek başlayabilirsiniz. Enjeksiyondan 24 saat sonra, ilk farenin kuyruğunu iğnelemek ve mikroskop kaydırağında kan damlacıklarını toplamak için 24 veya 26 ölçü iğnesi kullanın. İlk slaytboyunca kanı hızlı bir şekilde bulaştırmak için başka bir kaydıranın kısa kenarını kullanın.Kan tamamen kuruduğunda, en az bir dakika için% 100 metanol slaytlar düzeltmek. Giemsa'daki sabit numuneleri 10 ila 15 dakika boyunca lekeleyin ve ardından tek veya çift distile su yıkayın. Slaytlar kuruduğunda, numuneleri 100X nesnel ve sıvı başına toplam enfekte eritrosit sayısını saymak için hafif bir mikroskop üzerinde yağ daldırma altında görüntüleyin.Enfeksiyondan 2-3 gün sonra, parazitin supine pozisyonunda %0,1 ila %1'e ulaştığı anestezili bir fareyi emniyete alın ve deri kesisinin oluşmasını kolaylaştırmak için göğüs kafesinin tabanına yakın bir deriyi kaldırmak için forseps kullanın. Diyafram ve karın boşluğunun üst maruz bırakmak için kesi yerinde ayrı deri çekin ve göğüs kafesi tabanını tutmak için forceps kullanmak diyafram ilerlerken torasik kavite girmek için. Kalbi ortaya çıkarmak için göğüs kafesini geri sabitle ve en az 20 mikrolitre heparin içeren ve kalp dokusunu hafifçe delmek için 26 kalibrelik bir iğneyle donatılmış bir mililitrelik şırınga kullanın.Yavaş yavaş yaklaşık bir mililitre kan toplamak ve bir mikrosantrifüj tüpü içine kan dağıtmak için piston geri çekmek. Tüm kan hasat edildiğinde, alıcı fareleri kırmızı ısı lambası altında ısıtın ve alıcı başına uygun dozda parazit le donatılmış bir insülin şırıngası yükleyin. Sonra bir kısıtlayıcı içine ilk alıcı yerleştirin ve genişlemiş bir kuyruk damar içine enfekte eritrositler tam bir doz enjekte.Sivrisinek besleme için, yetişkin dört ila yedi günlük dişi Anopheles stephensi veya A.gambiae sivrisinekler en yüksek exflagellation oranı ile anestezi enfekte fareler üzerinde en az 15 dakika daha fazla beslemek için sekiz ila 12 saat için açlıktan izin verin. Sivrisinek başına ookist sporozoitlerin sayısını belirlemek için, en az 10 dakika için dondurucuda 20-30 sivrisinek ötenazi ve uygun diseksiyon çözümü içeren bir cam slayt üzerinde sivrisinek midguts incelemek için bir dürbün diseksiyonu kapsamı ve iki 26 veya 27 gauge iğne kullanın. Midgut'u incelemek için, önce bir iğne ile karın alt kısmını yerinde tutun ve toraksı yukarı yönde yukarı doğru hareket edene kadar çok hafifçe itin ve torakstan aşağı sarkan beyaz renkli bir midgut maruz kalana kadar.Şimdi yemek borusu ucundan toraks yukarı itmek için kullanılan aynı iğne kullanarak midgut kesilmiş böylece ayıran ve midgut dışarı yayılıyor. Bir iğne kullanarak diseksiyon ortamından diseksiyon ortamından diseksiyon orta sını kaldırın ve 200 mikrolitre RPMI ile dolu bir tüpe aktarın. Tüm midgutlar parçalanıp hasat edildiğinde, midgutları içeren tüpü 700 kez g.0.00'da bir dakika lığına santrifüje yerleştirin.Sonra bir haşere ile hasat dokuları iki kez eziyet. Seyreltilmiş doku çözeltisinin 12 mikrolitresini hemacytometreye aktarın ve içindekilerin yerleşmesini sağlamak için hemacytometreyi oda sıcaklığında beş dakika kuluçkaya yatırın. Daha sonra faz kontrastı ve 40X büyütme altında bir ışık mikroskop üzerinde ookist sporozoitlerin ortalama sayısını belirlemek.Sivrisinek başına tükürük bezi sporozoitlerin sayısını belirlemek için, uygun zaman noktası besleme sonrası, gösterildiği gibi 50-100 kadın sivrisinek dondurun ve bir diseksiyon mikroskop ve tükürük bezleri izole etmek için bir 26 veya 27 gauge iğne yan kullanın. Tükürük bezlerini incelemek için, önce üst karın veya toraksbir bir iğnenin eğimli tarafı ile yerinde tutun ve dikkatle baş ve toraks arasındaki kavşakta çok hafif ve çok kısa iter yukarı yönde baş iter. Kafa dikkatle camsı tükürük bezi yırtılmadan göğüs kafesi ayrılır kadar itin.Diseksiyon ortamından diseksiyon tükürük bezi yükseltmek ve 1.5 mililitrelik tüp içine yerleştirmek için kısa bir cam Pasteur pipet kullanın. Tüm tükürük bezleri incelenmiş ve hasat edildiğinde, 700 kez g bir dakika için santrifüj içine bezleri içeren tüp yerleştirin. Hasat edilen dokuları bir haşere ile iki kez öğütün.Daha sonra daha önce yapıldığı gibi tükürük bezi sporozoitlerin ortalama sayısını belirleyin. Transgenik muhabir sıtma parazitleri güçlü ve kurucu bir organizatör kontrolü altında EGFP ifade etmek için tasarlanmış kan aşamalarında floresan sinyali sergilemek, ookinetes, Anopheles stephensi midguts genç ookistler, ve sporozoitler Anopheles stephensi kadın tükürük bezleri izole. Akış sitometri paraziti yüzdesi değerleri, giemsa lekeli ince kan yaymalarının izlenmesiyle elde edilen tahmini paraziti yüzdelerine doğrudan karşılık gelir ve ikinci niceleme yönteminin geçerliliğini doğrular.Buna ek olarak, farklı eşeysiz ve cinsel aşamaların her birinin yüzdelerinin tahmini, akış sitometrisi ile değerlendirilemeyen eritrositlerin morfolojik değerlendirmesine bağlıdır. İntraperitoneal ile intravenöz enfeksiyon yollarının karşılaştırılması, enfeksiyonun ilk dört gününde IV enfekte grup paraziti yüzdesine göre IP enfekte grup paraziti yüzdesinde istatistiksel olarak anlamlı bir azalma olduğunu ortaya koymaktadır ve bu da enfeksiyonun IV rotasının sıtma parazitkan evreleri ile tahliller için daha niceliksel olarak doğru bir yol olduğunu göstermektedir. Dikkat dikkat, fenilhidrazin tedavisi önemli ölçüde erkek gamet oluşumu oranını artırır gametosit sayısını artırır hangi sırayla döllenme oranı ve sonraki tüm sivrisinek aşamalarının sayısını artırır.Kemirgen sıtma kan evresi parazitlerinin fenotipik analizi ve sivrisinek vektörüne bulaşması için standart laştırılmış yöntemlerin azlığı vardır. Bu yöntemler, bu patojenlerin ve yaşam döngüsü aşamalarının incelenmesi için standartlaştırılmış ve basitleştirilmiş protokollerin sağlanmasına yardımcı olacaktır.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

Kompleman tükenmesi Özel Hücre Populasyonlarının tükenmesi

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

Floresan Aktive Hücre Ayırma (FACS) Özgül Hücre Nüfus Arıtma

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Protocol for Production of a Genetic Cross of the Rodent Malaria Parasites

Kemirgen Sıtma Parazitler Genetik Haç üretimi için protokol

Variation in response to antimalarial drugs and in pathogenicity of malaria parasites is of biologic and medical importance. Linkage mapping has led to ...

Intravital Microscopy of the Spleen: Quantitative Analysis of Parasite Mobility and Blood Flow

Dalak intravital Mikroskopi: Parazit Mobilite ve Kan Akımının Kantitatif Analiz

The advent of intravital microscopy in experimental rodent malaria models has allowed major advances to the knowledge of parasite-host interactions 1,2. ...

Vaccinia Reporter Viruses for Quantifying Viral Function at All Stages of Gene Expression

Gen İfade Tüm Dönemlerinde Viral Fonksiyonu sayısallaştırabilmek için vaksiniya Reporter Virüsler

Poxviruses are a family of double stranded DNA viruses that include active human pathogens such as monkeypox, molluscum contagiousum, and Contagalo virus. ...

Mouse Fetal Liver Culture System to Dissect Target Gene Functions at the Early and Late Stages of Terminal Erythropoiesis

Fare Fetal Karaciğer Kültür Sistemi Terminali Eritropoiesis Erken ve Geç Dönemlerinde Hedef Gene İşlevleri teşrih etmek

Erythropoiesis involves a dynamic process that begins with committed erythroid burst forming units (BFU-Es) followed by rapidly dividing erythroid colony ...

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Fenotipik Analizi ve İnsan Cilt lenfosit izolasyonu<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Hücre Kültürü

Human skin has an important barrier function and contains various immune cells that contribute to tissue homeostasis and protection from pathogens. As the ...

Phenotypic and Functional Analysis of Activated Regulatory T Cells Isolated from Chronic Lymphocytic Choriomeningitis Virus-infected Mice

Fenotipik ve Kronik Lenfositik koryomenenjit Virüs ile enfekte Fare İzole Aktif Düzenleyici T hücrelerinin Fonksiyonel Analiz

Regulatory T (Treg) cells, which express Foxp3 as a transcription factor, are subsets of CD4+ T cells. Treg cells play crucial roles in immune tolerance ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

Bir Hepatit B Virüsü Muhabir Sisteminin Geliştirilmesi Çoğaltma Döngüsü Erken Aşamaları Monitör

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dextran fare ve insan birincil NK hücreleri Lentiviral iletim verimliliğini artırır

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...