Name: a method to test the effect of environmental cues on mating behavior in drosophila melanogaster
Uploaded: 2017-07-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster at JoVE.com

Vi tackar Bloomington Drosophila Stock Center för flygbolagen. C. Gahr, JT Alkema och S. van Hasselt för deras tidiga försök att utveckla tryckluftanalysen; Jasper Bosman för råd om odling av jäst Och Rezza Azanchi och Joel Levine för att ursprungligen utveckla tid-lapse övervakning av Drosophila parning beteende. JA Gorter stöddes av ett stipendium för Neuroscience Research School BCN / NWO Graduate Program. Detta arbete stöddes delvis av den nederländska organisationen för vetenskaplig forskning (NWO) (referens: 821.02.020) till JC Billeter.

1. Miljöstyrd parningslåda <ol><li> För att säkerställa ett kontrollerat och lätt att rengöra testområde, sätt in ett köksskåp av rostfritt stål av 120 cm x 64 cm x 85 cm, vilket visas i figur 1A. <ol><li> Borra ett hål på baksidan av skåpet strax under taket och fyra uppsättningar med fyra hål i sidorna, var och en med en diameter av 2 cm. Borra de första två uppsättningarna med fyra hål på varje sida av lådan i en höjd av 7 cm från botten av lådan och med 12,5 cm mellan hå...

<ol>
	<li>Hileman, S. M., Pierroz, D. D., Flier, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+nutrition,+and+reproduction:+timing+is+everything.">Leptin nutrition, and reproduction: timing is everything.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 85 (2), 804-807 (2000).</li><li>Grosjean, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+olfactory+receptor+for+food-derived+odours+promotes+male+courtship+in+Drosophila.">An olfactory receptor for food-derived odours promotes male courtship in Drosophila.</a> Nature. 478 (7368), 236-240 (2011).</li><li>Harshman, L. G., Hoffman, A. A., Prout, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+effects+on+remating+in+Drosophila+melanogaster.">Environmental effects on remating in Drosophila melanogaster.</a> Evolution. 42 (2), 312-321 (1988).</li><li>Fricke, C., Bretman, A., Chapman, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+nutritional+status+determines+the+magnitude+and+sign+of+responses+to+a+male+ejaculate+signal+in+Drosophila+melanogaster.">Female nutritional status determines the magnitude and sign of responses to a male ejaculate signal in Drosophila melanogaster.</a> J. Evol. Biol. 23 (1), 157-165 (2010).</li><li>Gorter, J. A., Jagadeesh, S., Gahr, C., Boonekamp, J. J., Levine, J. D., Billeter, J. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nutritional+and+hedonic+value+of+food+modulate+sexual+receptivity+in+Drosophila+melanogaster+females.">The nutritional and hedonic value of food modulate sexual receptivity in Drosophila melanogaster females.</a> Sci. Rep. , 1-10 (2016).</li><li>Wigby, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+signalling+regulates+remating+in+female+Drosophila.">Insulin signalling regulates remating in female Drosophila.</a> Proc. Biol. Sci. 278 (1704), 424-431 (2011).</li><li>Ribeiro, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dilemmas+of+the+gourmet+fly:+the+molecular+and+neuronal+mechanisms+of+feeding+and+nutrient+decision+making+in+Drosophila.">The dilemmas of the gourmet fly: the molecular and neuronal mechanisms of feeding and nutrient decision making in Drosophila.</a> Front. Neurosci. 7, 1-13 (2013).</li><li>Walker, S. J., Corrales-Carvajal, V. M., Ribeiro, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postmating+circuitry+modulates+salt+taste+processing+to+increase+reproductive+output+in+Drosophila.">Postmating circuitry modulates salt taste processing to increase reproductive output in Drosophila.</a> Curr. Biol. 25 (20), 2621-2630 (2015).</li><li>Hussain, A., &#220;&#231;punar, H. K., Zhang, M., Loschek, L. F., Grunwald Kadow, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropeptides+modulate+female+chemosensory+processing+upon+mating+in+Drosophila.">Neuropeptides modulate female chemosensory processing upon mating in Drosophila.</a> PLoS Biol. 14 (5), e1002455-e1002428 (2016).</li><li>Avila, F. W., Sirot, L. K., LaFlamme, B. A., Rubinstein, C. D., Wolfner, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+seminal+fluid+proteins:+identification+and+function.">Insect seminal fluid proteins: identification and function.</a> Annu. Rev. Entomol. 56 (1), 21-40 (2011).</li><li>Laturney, M., Billeter, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenetics+of+female+reproductive+behaviors+in+Drosophila+melanogaster.">Neurogenetics of female reproductive behaviors in Drosophila melanogaster.</a> BS:ADGEN. 85, 1-108 (2014).</li><li>Liu, H., Kubli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-peptide+is+the+molecular+basis+of+the+sperm+effect+in+Drosophila+melanogaster.">Sex-peptide is the molecular basis of the sperm effect in Drosophila melanogaster.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 100 (17), 9929-9933 (2003).</li><li>Ram, K. R., Wolfner, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+post-mating+response+in+Drosophila+melanogaster+requires+multiple+seminal+fluid+Proteins.">Sustained post-mating response in Drosophila melanogaster requires multiple seminal fluid Proteins.</a> PLoS gen. 3 (12), 2428-2438 (2007).</li><li>Yapici, N., Kim, Y. -. J., Ribeiro, C., Dickson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+receptor+that+mediates+the+post-mating+switch+in+Drosophila+reproductive+behaviour.">A receptor that mediates the post-mating switch in Drosophila reproductive behaviour.</a> Nature. 451 (7174), 33-37 (2008).</li><li>Yang, C. -. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+the+postmating+behavioral+switch+in+Drosophila+females+by+internal+sensory+neurons.">Control of the postmating behavioral switch in Drosophila females by internal sensory neurons.</a> Neuron. 61 (4), 519-526 (2009).</li><li>H&#228;semeyer, M., Yapici, N., Heberlein, U., Dickson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+neurons+in+the+Drosophila+genital+tract+regulate+female+reproductive+behavior.">Sensory neurons in the Drosophila genital tract regulate female reproductive behavior.</a> Neuron. 61 (4), 511-518 (2009).</li><li>Rez&#225;val, C., Pavlou, H. J., Dornan, A. J., Chan, Y. -. B., Kravitz, E. A., Goodwin, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+circuitry+underlying+Drosophila+female+postmating+behavioral+responses.">Neural circuitry underlying Drosophila female postmating behavioral responses.</a> Curr. Biol. , 1-11 (2012).</li><li>Haussmann, I. U., Hemani, Y., Wijesekera, T., Dauwalder, B., Soller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+pathways+mediate+the+sex-peptide-regulated+switch+in+female+Drosophila+reproductive+behaviours.">Multiple pathways mediate the sex-peptide-regulated switch in female Drosophila reproductive behaviours.</a> Proc. Biol. Sci. 280 (1771), 20131938-20131938 (2015).</li><li>Krupp, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+experience+modifies+pheromone+expression+and+mating+behavior+in+male+Drosophila+melanogaster.">Social experience modifies pheromone expression and mating behavior in male Drosophila melanogaster.</a> Curr. Biol. 18 (18), 1373-1383 (2008).</li><li>Billeter, J. C., Jagadeesh, S., Stepek, N., Azanchi, R., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster+females+change+mating+behaviour+and+offspring+production+based+on+social+context.">Drosophila melanogaster females change mating behaviour and offspring production based on social context.</a> Proc. Biol.l Sci. 279 (1737), 2417-2425 (2012).</li><li>Krupp, J. J., Billeter, J. -. C., Wong, A., Choi, C., Nitabach, M. N., Levine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pigment-dispersing+factor+modulates+pheromone+production+in+clock+cells+that+influence+mating+in+Drosophila.">Pigment-dispersing factor modulates pheromone production in clock cells that influence mating in Drosophila.</a> Neuron. 79 (1), 54-68 (2013).</li><li>Imhof, M., Harr, B., Brem, G., Schl&#246;tterer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+mating+in+wild+Drosophila+melanogaster+revisited+by+microsatellite+analysis.">Multiple mating in wild Drosophila melanogaster revisited by microsatellite analysis.</a> Mol. Ecol. , 915-917 (1998).</li><li>Ochando, M. D., Reyes, A., Ayala, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+paternity+in+two+natural+populations+(orchard+and+vineyard)+of+Drosophila.">Multiple paternity in two natural populations (orchard and vineyard) of Drosophila.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 93 (21), 11769-11773 (1996).</li><li>Becher, P. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yeast,+not+fruit+volatiles+mediate+Drosophila+melanogaster+attraction,+oviposition+and+development.">Yeast, not fruit volatiles mediate Drosophila melanogaster attraction, oviposition and development.</a> Func. Ecol. 26 (4), 822-828 (2012).</li><li>Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+visual+transduction.">Drosophila visual transduction.</a> Trends Neurosci. 35 (6), 356-363 (2012).</li><li>Ejima, A., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assay+for+courtship+suppression+in+Drosophila.">Assay for courtship suppression in Drosophila.</a> Cold Spring Harbor Prot. 2011 (2), 5575 (2011).</li><li>Crickmore, M. A., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opposing+Dopaminergic+and+GABAergic+Neurons+Control+the+Duration+and+Persistence+of+Copulation+in+Drosophila.">Opposing Dopaminergic and GABAergic Neurons Control the Duration and Persistence of Copulation in Drosophila.</a> Cell. 155 (4), 881-893 (2013).</li><li>Bretman, A., Fricke, C., Chapman, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastic+responses+of+male+Drosophila+melanogaster+to+the+level+of+sperm+competition+increase+male+reproductive+fitness.">Plastic responses of male Drosophila melanogaster to the level of sperm competition increase male reproductive fitness.</a> Proc. Biol. Sci. 276 (1662), 1705-1711 (2009).</li><li>Dukas, R., Jongsma, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Costs+to+females+and+benefits+to+males+from+forced+copulations+in+fruit+flies.">Costs to females and benefits to males from forced copulations in fruit flies.</a> Anim. Behav. 84 (5), 1177-1182 (2012).</li><li>Yorozu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+sensory+representations+of+wind+and+near-field+sound+in+the+Drosophila+brain.">Distinct sensory representations of wind and near-field sound in the Drosophila brain.</a> Nature. 457 (7235), 201-205 (2009).</li></ol>

Detta protokoll beskriver en analys för att testa parning beteende under 24 timmar medan man kontinuerligt kontrollerar de miljökod som ett parpar är hypoteser att använda för att bestämma parringsfrekvensen. Det är möjligt att öka parningsfrekvensen som svar på jästluft som levereras genom ett tryckluftssystem när mediet innehåller jäst samt ( Figur 2B ). Dessutom kan ett liknande svar i parningsfrekvens observeras med ett förenklat livsmedelsmedium innehållande endast agar, pepton och ...

Reproduktiva beteenden har vanligtvis höga energikostnader, särskilt för kvinnor, som producerar större gameter än män och måste noggrant välja villkoren för att höja sina utvecklingsavkommor. På grund av energikostnaden är det inte förvånande att reproduktionen är kopplad till näringsförhållandena. Detta gäller i de flesta, om inte alla, djur inklusive däggdjur, vars pubertet kan fördröjas av undernäring och vars sexuella körning kan påverkas negativt av livsmedelsbegränsning 1 . Reproduktionen av den genetiska modellorganismen Drosophila melanogaster påverkas också av näringsbetingelser. Males domstol på högre nivå i närvaro av livsmedel flyktiga 2 , och honor är mer sexuellt mottagliga i närvaro av jäst, ett viktigt näringsämne för äggproduktion och avkomma överlevnad 3 , 4 , 5 . DettaEvolutionärt konserverat reproduktivt svar på mat ger möjlighet att studera mekanismer som förbinder tillgången till livsmedel i livsmedel till sexuell reproduktion i en genetiskt torkbar och tidseffektiv organism. Faktum är att arbetet i D. melanogaster har inneburit insulinväggen som en viktig regulator för sambandet mellan mat och parningsbeteende 6 . Det har också visat att själva parningen av parning ändrar kvinnans matförmåga såväl som de associerade kemosensoriska neuronerna 7 , 8 , 9 . Det är uppenbart att livsmedelstrådar påverkar reproduktionsbeteenden i D. melanogaster . Dessa effekter verkar huvudsakligen påverka kvinnor, speciellt de som redan har parat 5 . Men för att testa dessa akuta effekter av miljöförhållanden kan analysen som klassiskt används för kvinnlig parning beteendeInte vara mycket lämplig på grund av de långa avbrotten mellan parningspisoderna. I den klassiska remateringsanalysen möts en jungfru med en man och är omedelbart isolerad och presenterad med en ny man 24 till 48 timmar senare. Denna klassiska analys har använts med stor framgång för att identifiera komponenter av manlig ejakulat som modifierar kvinnligt beteende och kvinnligt svar 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 . Den kontinuerliga parningsanalysen som visas här är därför ett tillägg till klassiska parningsanalyser som kan användas för att studera den akuta effekten av miljöförhållanden på reproduktiva beteenden. Med hjälp av den kontinuerliga analysen för parning beteende som förklaras här visade vi tidigare att ett par flugor utsatta för jäst kommer att remetera sEveral tider under en 24 timmars observationstid 5 , 19 , 20 , 21 , medan flugor inte exponeras för mat kommer endast att remate en gång 5 . Detta resultat kan vara förbryllande i ljuset av en stor del av D. melanogasterlitteraturen som indikerar att honor inte remitterar flera dagar efter en första parning (ses i referenser 10 , 11 ). Denna skillnad kan emellertid lätt förklaras av analysförhållanden, där en kvinna isoleras i en till flera dagar innan ett nytt parningstillfälle tillhandahålls. Om paret inte klarar sig i denna timmars observationsperiod, kännetecknas kvinnan som inte mottaglig. Dessutom bör den höga parringsfrekvensen inte vara överraskande med tanke på att data från vildfångade flugor visar att honor innehåller spermier från 4 till 6 män i sina lagringsorgan. Därmed iDikterar att kvinnorna naturligt remitterar flera gånger 22 , 23 . Här demonstrerar vi användningen av denna kontinuerliga parningsanalys för att räkna ut hur flugor samlas och kombinerar information om miljöförhållanden för att modulera parningsfrekvensen. Denna analys gör att man kan testa ett relativt stort antal parande par för genetiska studier och för att testa påverkan av flyktiga och icke-flyktiga miljöanpassningar. Analysen löper typiskt i 24 timmar, men kan förlängas till 48 timmar, vilket möjliggör testning av cykliska miljöanpassningar, såsom den ljusmunna (LD) -cykeln. Vi demonstrerar denna analys genom att testa påverkan av flyktiga signaler från en jästkultur inom ett trycksatt luftsystem i kombination med tillgången på icke-flyktigt jästnäringsämne i livsmedelssubstratet. Tryckluftssystemet pumpar kontinuerligt flyktiga signaler till en parningsarena som innehållerEtt livsmedelssubstrat och ett testpar (vars parningsbeteende övervakas). För att ytterligare bestämma de särdrag genom vilka jäst påverkar parning testar vi en stor flyktig förening av jäst, nämligen ättiksyra 24 , i kombination med en aminosyrahalt som motsvarar den hos jäst i livsmedelssubstratet, i form av pepton (amino Syror härrörande från enzymatisk uppslutning av animaliska proteiner). Tillsammans visar dessa experiment hur effekten av miljöanpassade signaler på D. melanogasters parringsbeteende kan testas med denna analys.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cabinet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel kitchen cabinet</td>
			<td>Horecaworld</td>
			<td>7412.0105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White LEDs</td>
			<td>Lucky Light</td>
			<td>ll-583wc2c-001</td>
			<td>Cold white, 20 mAmp and 2 V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red LEDs</td>
			<td>Lucky Ligt</td>
			<td>ll-583vc2c-v1-4da</td>
			<td>Wavelength between 625 nm, 20 mAmp and 6 V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Resistor</td>
			<td>Royal Ohm</td>
			<td>CFR0W4J0561A50</td>
			<td>560 ohm, 0.25 W, 250 V and 5 % tolerance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smartphone light meter app</td>
			<td>Patrick Giudicelli</td>
			<td></td>
			<td>Light/Lux Meter FREE, version 1.1.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power timer</td>
			<td>Alecto</td>
			<td>TS-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal brackets</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sharp angle 5 by 5 mm,&#160; 2 x 5450 and 1 x 1100 mm long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Frosted glass plate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1190 x 545 x 5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper sheets</td>
			<td>LEE filters</td>
			<td>220</td>
			<td>White frost</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fan</td>
			<td>Nanoxia Deep silence</td>
			<td>4260285292828</td>
			<td>80 mm Ultra-Quiet PC Fan, 1200 RPM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big fan</td>
			<td>Nanoxia Deep silence</td>
			<td>4260285292910</td>
			<td>120 mm Ultra-Quiet PC Fan, 650-1500 RPM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcam camera</td>
			<td>Logitech</td>
			<td>950270</td>
			<td>B910 HD WEBCAM OEM, Angle: 78-degree, resolution: 5-million-pixel&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera software</td>
			<td>DeskShare</td>
			<td></td>
			<td>Security monitor pro</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly rearing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly rearing bottles</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>32-130</td>
			<td>6oz Drosophila stock bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flypad</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>59-114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wild-type flies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Canton-S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly rearing vials</td>
			<td>Dominique Dutscher</td>
			<td>789008</td>
			<td>Drosophila tubes narrow 25x95 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td>MIR-154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic hot plate</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>505-20000-00</td>
			<td>MR Hei-Standard</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Caldic Ingredients B.V.</td>
			<td>010001.26.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Gezond&#38;wel</td>
			<td>1019155</td>
			<td>Dextrose/Druivensuiker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Van Gilse</td>
			<td></td>
			<td>Granulated sugar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cornmeal</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>62-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wheat germ</td>
			<td>Gezond&#38;wel</td>
			<td>1017683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soy flour</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>62-115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molasses</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>62-117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Active dry yeast</td>
			<td>Red Star</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tegosept</td>
			<td>Flystuff</td>
			<td>20-258</td>
			<td>100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone (bacto)</td>
			<td>BD</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1000631000</td>
			<td>Glacial, 100%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small petridish</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>627102</td>
			<td>35 x 10 mm with vents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin film</td>
			<td>Bemis NA</td>
			<td></td>
			<td>Parafilm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast and pressurised air set-up</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big petridish</td>
			<td>Gosselin</td>
			<td>BP140-01</td>
			<td>140 x 20.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>Millipore corporation</td>
			<td></td>
			<td>MiliQ</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract</td>
			<td>BD</td>
			<td>212750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar (pure)</td>
			<td>BD</td>
			<td>214530</td>
			<td>bacto</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose (0(+)-glucose monohydrate)&#160;</td>
			<td>Merck</td>
			<td>18270000004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open caps</td>
			<td>Schott</td>
			<td>29 240 28&#160;</td>
			<td>GL45</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone septum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>548-0662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barbed bulkhead fittings</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>6149-0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large PVC tubing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>diameter: outer 1.2 cm and inner 0.9 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small PVC tubing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>diameters: outer 0.8 cm and inner 0.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquarium pump</td>
			<td>Sera precision</td>
			<td></td>
			<td>Sera air 110 plus, AC 220-240 V, 50/60 Hz, 3 W and pressure &#62;100 mbar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Activated charcoal</td>
			<td>Superfish</td>
			<td>A8040400</td>
			<td>Norit activated carbon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposible filter unit</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>10462100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipettes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>612-1600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>300013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot glue</td>
			<td>Pattex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filter</td>
			<td>Whatman</td>
			<td></td>
			<td>FP 30/pore size 0.45 mm CA-S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analysis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistics software</td>
			<td>R</td>
			<td></td>
			<td>lme4 package</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method to test the effect of environmental cues on mating behavior in drosophila melanogaster

En persons sexualitet påverkas av genotyp, erfarenhet och miljöförhållanden. Hur dessa faktorer interagerar för att modulera sexuellt beteende förblir dåligt förstådda. I Drosophila melanogaster påverkar miljöanpassningar, såsom tillgången på mat, parning, som erbjuder ett töjbart system för att undersöka mekanismerna som modulerar sexuellt beteende. I D. melanogaster avkännes miljömärden ofta via kemosensoriska gustatoriska och olfaktoriska system. Här presenterar vi en metod för att testa effekten av miljömässiga kemiska signaler på parningsbeteende. Analysen består av en liten parningsarena som innehåller matmedium och ett parpar. Sammankopplingsfrekvensen för varje par övervakas kontinuerligt under 24 timmar. Här presenterar vi tillämpligheten av denna analys för att testa miljöföreningar från en extern källa genom ett tryckluftssystem samt manipulering av miljökomponenterna direkt i parningsarenan. USiktet på ett trycksatt luftsystem är speciellt användbart för att testa effekten av mycket flyktiga föreningar, medan manipulering av komponenter direkt i parningsarenan kan vara av värde för att fastställa en förenings närvaro. Denna analys kan anpassas för att svara på frågor om påverkan av genetiska och miljömässiga signaler på parningsbeteende och fecundity liksom andra reproduktiva beteenden hos man och kvinna.

Genom att använda denna kontinuerliga analys, parning beteende och parning frekvens i specifika, kan bestämmas under experimentella miljöförhållanden. För att reglera miljöförhållandena förvandlade vi ett köksskåp av rostfritt stål till ett testområde med egen ljuskälla och diffusion, vilket garanterar ett högt överflöd av ljus och en minimal mängd glans från toppen av parningslägena ( Figur 1A ) . Det inre testområdet är helt inneslutet av rostfri...

Watch this Scientific Journal Video about A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster at JoVE.com

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

Vi demonstrerar en analys för att analysera de miljömässiga och genetiska signalerna som påverkar parning beteende i fruktflödet Drosophila melanogaster .

En metod för att testa effekten av miljökanaler på parningsbeteende i<em&gt; Drosophila melanogaster</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Research

JoVE Journal

Behavior

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Ett förfarande för att studera effekten av Långvarig Food Begränsning av heroin Söker i abstinent råttor

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Measuring Sensitivity to Viewpoint Change with and without Stereoscopic Cues

Mätning Känslighet för Point Förändring med och utan Stereoscopic köer

The speed and accuracy of object recognition is compromised by a change in viewpoint; demonstrating that human observers are sensitive to this ...

The Use of the Puzzle Box as a Means of Assessing the Efficacy of Environmental Enrichment

Användning av Puzzle Box som ett sätt att bedöma hur effektiva miljöberikning

Environmental enrichment can dramatically influence the development and function of neural circuits.  Further, enrichment has been shown to successfully ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

Den sociala dimensionen av stress: experimentella manipulationer av socialt stöd och social identitet i Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

En metod för att utvärdera de förstärkande egenskaper av etanol i råttor utan vattenbrist, Sackarin Fading eller utökad tillgång Training

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

Gnagare Psyko Vigilance Test (rPVT): En metod för bedömning neurobehavioral Performance i råttor och möss

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

Testning djur ångest hos råttor: effekter av öppen Arm avsatser och stängda Arm vägg insyn i förhöjd Plus labyrint Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae

A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae

En grävande/Tunneling analys för detektion av hypoxi i Drosophila melanogaster larver

Oxygen deprivation in animals can result from exposure to low atmospheric oxygen levels or from internal tissue damage that interferes with oxygen ...

Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements

Förhöjd Plus labyrint Test kombinerat med Video mjukvara för att undersöka den ångestdämpande effekten av exogena ketogen kosttillskott

The overall goal of this study is to describe the methodology of the elevated plus maze (EPM) test in combination with a video tracking software. The ...

Providing Meaningful Environmental Enrichment and Measuring Saliva Cortisol in Pigs Housed on Slatted Flooring

Att ge meningsfull miljöberikning och mätning av saliv kortisol hos svin inhysta på slatted golv

As pork is the most consumed meat worldwide, the welfare of animals in the swine industry has increasingly become a major public concern, which imposes a ...