Name: isolation of primary murine retinal ganglion cells (rgcs) by flow cytometry
Uploaded: 2017-07-05T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Primary Murine Retinal Ganglion Cells RGCs by Flow Cytometry at JoVE.com

Les auteurs tiennent à remercier M. Tim Higgins, Illustrateur principal du Département de microbiologie, d&#39;immunologie et de biochimie, pour l&#39;assistance vidéo technique; Dr. Matthew W. Wilson pour les discussions et les membres des laboratoires Jablonski et Morales-Tirado pour leurs commentaires utiles. Ce travail a été soutenu par le Prix du jeune chercheur de l&#39;Institut de recherche d&#39;Alcon (VMM-T), la Fondation de recherche de l&#39;Université de Tennessee (VMM-T), l&#39;Institut national des yeux EY021200 (MMJ), Gerwin Fellowship (VMM-T); La bourse pré-doctorale Gerwin (ZKG), la recherche médicale et le commandement du matériel du ministère de la Défense (VMM-T) et la subvention sans restriction de la recherche pour prévenir la cécité.

Toutes les procédures détaillées dans le protocole suivant ont été approuvées par le comité de révision institutionnel du Comité des soins et de l&#39;utilisation des animaux (IACUC) au Centre de sciences de la santé de l&#39;Université du Tennessee (UTHSC) et ont suivi l&#39;Association pour la recherche en vision et ophtalmologie (ARVO) Déclarations pour l&#39;utilisation Des animaux dans la recherche ophtalmique et de la vision, en plus des lignes directrices pour les expériences animales de laboratoire ...

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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Displaced+retinal+ganglion+cells+in+albino+and+pigmented+rats.">Displaced retinal ganglion cells in albino and pigmented rats.</a> Front Neuroanat. 8, 99 (2014).</li><li>Nadal-Nicolas, F. M., Salinas-Navarro, M., Vidal-Sanz, M., Agudo-Barriuso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+methods+to+trace+retinal+ganglion+cells+with+fluorogold:+from+the+intact+optic+nerve+or+by+stereotactic+injection+into+the+optic+tract.">Two methods to trace retinal ganglion cells with fluorogold: from the intact optic nerve or by stereotactic injection into the optic tract.</a> Exp Eye Res. 131, 12-19 (2015).</li><li>Barnstable, C. J., Drager, U. 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FACS est la technique de choix pour purifier les populations cellulaires. D&#39;autres méthodes d&#39;isolement comprennent l&#39;immunopanning, les perles magnétiques et l&#39;appauvrissement de la fixation du complément. L&#39;avantage de FACS par rapport à ces autres méthodes est basé sur l&#39;identification simultanée des marqueurs de surface cellulaire avec des degrés d&#39;intensité variables. L&#39;intensité fluorescente de la molécule est proportionnelle à la quantité d&#39;expression protéique. J...

Les RGC sont des neurones à différenciation terminale et, par conséquent, les cellules primaires sont nécessaires à l&#39;expérimentation. Le développement d&#39;un protocole pour l&#39;isolement et l&#39;enrichissement des cellules ganglionnaires rétiniennes murines primaires (RGC) est fondamental pour révéler les mécanismes de la santé et de la dégénérescence du RGC in vitro . Ceci est particulièrement important pour les études qui cherchent à générer des thérapies potentielles pour promouvoir la fonction RGC et pour minimiser leur décès. La dégénérescence des RGC est associée à des maladies dégénératives de la rétine, telles que le glaucome, la rétinopathie diabétique et le vieillissement normal. Bien que les mécanismes cellulaires spécifiques sous-jacents à la perte de RGC ne soient pas clairs, une série de facteurs de risque ont été identifiés. Le manque d&#39;oxygénation à la tête du nerf optique 1 , 2 , 3 provoque la mort de RGC 4 et agit comme la perturbation de l&#39;homéostasie entre l&#39;activation de l&#39;excitation et iRécepteurs nhibiteurs dans les RGC individuels 5 , 6 . Une série de défis empêchent les progrès vers l&#39;utilisation de ces cellules pour des études approfondies. Tout d&#39;abord, le nombre de RGC présents dans une rétine murine est faible. Les RGC représentent moins de 1% des cellules rétiniennes totales 7 , 8 , 9 . Deuxièmement, la plupart des marqueurs spécifiques de RGC sont des protéines intracellulaires 10 , 11 , 12 . La sélection basée sur ces marqueurs laisse les cellules non viables, ce qui empêche les analyses fonctionnelles en aval. Enfin, les protocoles actuellement disponibles sont longs et manquent de standardisation 13 , 14 . Les premiers protocoles d&#39;isolement RGC étaient basés sur les méthodes d&#39;immunopanning. Barres et al. 15 Adapté l&#39;immunop classiqueEt a ajouté une deuxième étape, qui exclut les monocytes et les cellules endothéliales de l&#39;essentiel des cellules rétiniennes avant une sélection positive basée sur l&#39;immunopostivité à l&#39;antigène anti-thymocyte (aka Thy1), un marqueur de surface cellulaire. Des années plus tard, Hong et al. Techniques combinées d&#39;isolation des perles magnétiques avec des stratégies de tri cellulaire pour isoler les RGC avec une pureté supérieure 16 . L&#39;utilisation de perles magnétiques est toujours utilisée dans de nombreuses applications scientifiques. Ensemble, les perles magnétiques et les protocoles de cytométrie de flux ont amélioré la pureté des cellules isolées. Cependant, ces systèmes de purification n&#39;ont pas encore été normalisés pour l&#39;isolement des RGC murins à partir de la rétine dissociée. La cytométrie de flux est une méthode analytique puissante qui mesure les caractéristiques optiques et de fluorescence des suspensions cellulaires. Les cellules sont analysées quantitativement et qualitativement avec un niveau élevé de sensibilité, fournissant une analyse multidimensionnelle de la population cellulaireAtion. La discrimination cellulaire repose sur deux propriétés physiques principales: la taille de la cellule ou la surface et la granularité ou la complexité interne 17 . Une analyse multidimensionnelle peut être réalisée en combinant des anticorps marqués avec des fluorochromes ayant des longueurs d&#39;onde d&#39;excitation similaires et des émissions différentes. La cytométrie de flux est rapide, reproductible et sensible. Les lasers Multitpe permettent des analyses multidimensionnelles encore plus importantes de cellules simples par cytométrie de flux. Ainsi, c&#39;est une méthodologie attrayante pour l&#39;étude de spécimens cytologiques. Le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) utilise les différences phénotypiques multidimensionnelles identifiées par la cytométrie de flux pour trier les cellules individuelles en sous-populations distinctes. Au cours de la dernière décennie, de multiples protéines superficielles et intracellulaires ont été identifiées comme biomarqueurs potentiels pour la sélection des cellules, y compris les neurones. Les études initiales visant à isoler les RGC des rats ont utilisé Thy1 comme un ganglion celL marqueur. Malheureusement, Thy1, aka CD90, a plusieurs isoformes dans d&#39;autres espèces de rongeurs 18 , 19 , 20 et est exprimé par plusieurs types de cellules rétiniennes 19 , 20 , ce qui en fait un marqueur non spécifique pour les RGC. Un autre marqueur de surface, CD48, se trouve sur des populations monocytaires dans la rétine, y compris les macrophages et la microglie. En utilisant ces deux marqueurs de surface, une signature RGC modifiée - Thy1 + et CD48 cellules négatives - a été développée 15 , 16 , 21 , 22 . Malheureusement, ces deux critères de sélection ne suffisent pas à choisir pour une population RGC très enrichie. Pour répondre à ces besoins non satisfaits, un protocole de cytométrie de flux a été développé 23 en fonction de critères de sélection positifs et négatifs multicouches usiNg marqueurs de surface cellulaire connus pour enrichir et purifier les RGC murins primaires.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-mouse CD15 PE</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>125606</td>
			<td>Clone MC-480</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse CD48 PE-Cy7</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>103424</td>
			<td>Clone HM48-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse CD57</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C6680-100TST</td>
			<td>Clone VC1.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse CD90.2 AF700</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>105320</td>
			<td>Clone 30-H12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Violet 421 Goat Anti-mouse IgG</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>405317</td>
			<td>Clone Poly4053</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purified Anti-mouse CD16/32</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>101302</td>
			<td>FcgRII/III block, Clone 93</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zombie Aqua&#160;</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>423102</td>
			<td>Live cell/ Dead cell discrimination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30071.03</td>
			<td>U.S. origin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AbC Total Antibody Compensation Bead Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A10497</td>
			<td>Multi-species Ig</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal Medium</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>21103049</td>
			<td>Add serum to media prior to culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10010049</td>
			<td>Saline solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZ-PT Model</td>
			<td>Stereo Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Centrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>ST 16R</td>
			<td>All centrifugation performed&#160; at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Base Plate &#8211; Dissection Pan</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SB15233FIM</td>
			<td>A wax plate can also be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>5002-7</td>
			<td>4 &#189; inches</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors, Straight</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>1360</td>
			<td>5 &#189; inches</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 15 mL conical tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>352097</td>
			<td>Polypropylene tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 50 mL conical tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>352098</td>
			<td>Polypropylene tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACS Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>352003</td>
			<td>Polypropylene tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 mm dishes</td>
			<td>MidSci</td>
			<td>TP93040</td>
			<td>Tissue culture treated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#956;m nylon strainer</td>
			<td>MidSci</td>
			<td>70ICS</td>
			<td>sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#956;m nylon strainer</td>
			<td>MidSci</td>
			<td>40ICS</td>
			<td>sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;BD 10 mL syringe</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>301604</td>
			<td>Disposable Syringe without needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pestles</td>
			<td>MidSci</td>
			<td>PEST</td>
			<td>sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wheaton Vials</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>986734</td>
			<td>No Liner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 30 G needle</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>305128</td>
			<td>1 inch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hausser Scientific Bright-Line Glass Counting Chamber</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>0267151B</td>
			<td>Hemocytometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco Trypan blue 0.4% Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15250061</td>
			<td>Viability Dye</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>05-402-25</td>
			<td>1.5mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS Floid Cell Imaging</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>447113</td>
			<td>Fluorescence Imaging with a 20x objective</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100% Ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>04-355-452</td>
			<td>Used to make 70% Ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet-Lite LTS Pipette L-1000XLS+</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17014282</td>
			<td>LTS Pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet-Lite LTS Pipette L-200XLS+</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17014391</td>
			<td>LTS Pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet-Lite LTS Pipette L-20XLS+</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17014392</td>
			<td>LTS Pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack LTS 1000 mL &#8211; GPS-L1000S</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17005088</td>
			<td>Blue Rack Sterile Tips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack LTS 250 mL &#8211; GPS-L250S</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17005092</td>
			<td>Green Rack Sterile Tips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack LTS 20 mL &#8211; GPS-L10S</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17005090</td>
			<td>Red Rack Sterile Tips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSAria II Cell Sorter</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom order</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSR II Cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom order</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Abca8a</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00462440_m1</td>
			<td>M&#252;ller cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldh1al</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00657317_m1</td>
			<td>M&#252;ller cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aqp4</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00802131_m1</td>
			<td>Astrocytes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calb2</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00801461_m1</td>
			<td>Amacrine, Horizontal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cd68</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm03047340_m1</td>
			<td>Retinal Pigment Epithelial Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gad2</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00484623_m1</td>
			<td>Amacrine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hprt</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01545399_m1</td>
			<td>House keeping gene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lhx1</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01297482_m1</td>
			<td>Horizontal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lim2</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00624623_m1</td>
			<td>Horizontal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nrl</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00476550_m1</td>
			<td>Photoreceptors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ntrk1</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01219406_m1</td>
			<td>Horizontal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pcp4</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00500973_m1</td>
			<td>Bipolar, Amacrine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pou4f1</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm02343791_m1</td>
			<td>Retinal Ganglion Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prdx6</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00725435_s1</td>
			<td>Astrocytes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prkca</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00440858_m1</td>
			<td>Bipolar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prox1</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00435969_m1</td>
			<td>Horizontal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pvalb</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00443100_m1</td>
			<td>Amacrine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbpms</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm02343791_m1</td>
			<td>Retinal Ganglion Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rom1</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00436364_g1</td>
			<td>Photoreceptors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rpe65</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00504133_m1</td>
			<td>Retinal Pigment Epithelial cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slc1a3</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00600697_m1</td>
			<td>Astrocytes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slc6a9</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00433662_m1</td>
			<td>Amacrine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sncg</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00488345_m1</td>
			<td>Retinal Ganglion Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubb3</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00727586_s1</td>
			<td>Retinal Ganglion Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vim</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01333430_m1</td>
			<td>M&#252;ller cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taqman Universal Master Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>4440047</td>
			<td>qPCR Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>miRNeasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>217004</td>
			<td>RNA Isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11754250</td>
			<td>cDNA synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taqman PreAmp Master Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>4391128</td>
			<td>Pre-Amplification step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Cytofix/ Cytoperm</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>554714</td>
			<td>Fixation/ Permeabilization Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Perm/ Wash</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>554723</td>
			<td>Permeabilization Solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBPMS</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-86815</td>
			<td>intracellular antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SNCG</td>
			<td>Gene Tex</td>
			<td>GTX110483</td>
			<td>intracellular antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BRN3A</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-8429</td>
			<td>intracellular antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUJ1</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>801202</td>
			<td>intracellular antibody</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of primary murine retinal ganglion cells (rgcs) by flow cytometry

Les maladies neurodégénératives ont souvent un impact dévastateur sur les personnes touchées. La perte de cellules ganglionnaires rétiniennes (RGC) est impliquée dans une série de maladies, y compris la rétinopathie diabétique et le glaucome, en plus du vieillissement normal. Malgré leur importance, les RGC ont été extrêmement difficiles à étudier jusqu&#39;à maintenant en raison en partie du fait qu&#39;ils ne comprennent qu&#39;un faible pourcentage de la grande variété de cellules de la rétine. En outre, les méthodes d&#39;isolement actuelles utilisent des marqueurs intracellulaires pour identifier les RGC, qui produisent des cellules non viables. Ces techniques impliquent également de longs protocoles d&#39;isolement, de sorte qu&#39;il existe un manque de méthodes pratiques, normalisées et fiables pour obtenir et isoler les RGC. Ce travail décrit une méthode efficace, complète et fiable pour isoler les RGC primaires des rétines de souris en utilisant un protocole basé sur des critères de sélection positifs et négatifs. Les méthodes présentées permettent l&#39;étude future des RGC, dans le but de mieux comprendre les grandsDéclin de l&#39;acuité visuelle résultant de la perte de RGC fonctionnels dans les maladies neurodégénératives.

<html> L&#39;étude approfondie des RGC est entravée par de nombreux facteurs, y compris leur faible fréquence et l&#39;absence d&#39;une méthodologie robuste et standardisée pour leur isolement. La figure 1 montre la méthodologie utilisée pour l&#39;isolement des rétines. Les variations de la procédure d&#39;énucléation existent en fonction du type d&#39;analyse, comme si l&#39;énucléation fait partie de l&#39;expérimentation in vivo <s...

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Isolation of Primary Murine Retinal Ganglion Cells RGCs by Flow Cytometry

Des millions de personnes souffrent de maladies dégénératives de la rétine qui entraînent une cécité irréversible. Un élément commun de nombreuses de ces maladies est la perte de cellules ganglionnaires de la rétine (RGC). Ce protocole détaillé décrit l&#39;isolement des RGC murins primaires par sélection positive et négative avec cytométrie de flux.

Isolement des cellules de ganglion rétiniennes murines primaires (RGC) par cytométrie de flux

Neurodegenerative diseases often have a devastating impact on those affected. Retinal ganglion cell (RGC) loss is implicated in an array of diseases, ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Isolation of Primary Murine Retinal Ganglion Cells (RGCs) by Flow Cytometry

Parallel-plate Flow Chamber and Continuous Flow Circuit to Evaluate Endothelial Progenitor Cells under Laminar Flow Shear Stress

Chambre de circulation à plaques parallèles et de circuit d&#39;écoulement continu pour évaluer les cellules progénitrices endothéliales en cisaillement du flux laminaire

The overall goal of this method is to describe a technique to subject adherent cells to laminar flow conditions and evaluate their response to well ...

Recherche

Bio-ingénierie

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Analyser l&#39;internalisation cellulaire de nanoparticules et de bactéries multi-spectrale par cytométrie de flux d&#39;imagerie

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

Evaluation of Polymeric Gene Delivery Nanoparticles by Nanoparticle Tracking Analysis and High-throughput Flow Cytometry

Évaluation de livraison Gene polymère nanoparticules d&#39;analyse de suivi par des nanoparticules et de cytométrie en flux à haut débit

Non-viral gene delivery using polymeric nanoparticles has emerged as an attractive approach for gene therapy to treat genetic diseases1 and as a ...

Wide-field Fluorescent Microscopy and Fluorescent Imaging Flow Cytometry on a Cell-phone

Champ large Microscopie fluorescente et cytométrie de flux fluorescente imagerie sur un téléphone portable

Fluorescent microscopy and flow cytometry are widely used tools in biomedical research and clinical diagnosis. However these devices are in general ...

Localization and Relative Quantification of Carbon Nanotubes in Cells with Multispectral Imaging Flow Cytometry

Carbon-based nanomaterials, like carbon nanotubes (CNTs), belong to this type of nanoparticles which are very difficult to discriminate from carbon-rich ...

Isolation of Primary Human Colon Tumor Cells from Surgical Tissues and Culturing Them Directly on Soft Elastic Substrates for Traction Cytometry

Isolation des droits de cellules primaires de tumeurs du côlon à partir de tissus chirurgicaux et les cultivant directement sur élastique souple substrats pour Traction cytométrie

Cancer cells respond to matrix mechanical stiffness in a complex manner using a coordinated, hierarchical mechano-chemical system composed of adhesion ...

Sensitive Detection of Proteopathic Seeding Activity with FRET Flow Cytometry

Détection sensible de Proteopathic semis Activité FRET avec la cytométrie en flux

Increasing evidence supports transcellular propagation of toxic protein aggregates, or proteopathic seeds, as a mechanism for the initiation and ...

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Microfluidique flux Chambers Utilisation de sang Reconstitué au modèle Hémostase et Platelet Transfusion<em&gt; In vitro</em

Blood platelets prepared for transfusion gradually lose hemostatic function during storage. Platelet function can be investigated using a variety of ...

A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time

A microfluidique débit Chambre Modèle pour Platelet Transfusion et Hémostase mesures Platelet Déposition et la formation de fibrine en temps réel

Microfluidic models of hemostasis assess platelet function under conditions of hydrodynamic shear, but in the presence of anticoagulants, this analysis is ...