Name: assessment of sarcoplasmic reticulum calcium reserve and intracellular diastolic calcium removal in isolated ventricular cardiomyocytes
Uploaded: 2017-09-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Sarcoplasmic Reticulum Calcium Reserve and Intracellular Diastolic Calcium Removal in Isolated Ventricular Cardiomyocytes at JoVE.com

Detta arbete stöds av bidrag från National Natural Science Foundation i Kina (nr. 81100159, Dongwu Lai, 81401147, Juhong Zhang), medicin och hälsa Science Program av Zhejiangprovinsen (nr 201646246, Dongwu Lai) och hälsa vetenskapen och Plan för staden Hangzhou (nr 2013A28, Ding Lin).

alla djurförsök har utförts i enlighet med protokoll som godkänts av institutionella djur vård och användning kommittén vid Experimental Research Center, Kina kinesisk medicinsk vetenskapsakademi och Zhejiang University.
 1. lösning förberedelse <ol><li>förbereda alla lösningar som beskrivs i tabell 1.</li></ol>
 2. isolering av vänster kammare (LV) hjärtmuskelcellerna Obs: LV hjärtmuskelcellerna är isolerade...

<ol>
	<li>Capel, R. A., Terrar, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+Ca+(2+)-dependent+mechanisms+for+the+initiation+of+the+heartbeat.">The importance of Ca (2+)-dependent mechanisms for the initiation of the heartbeat.</a> Front Physiol. 6, 80 (2015).</li><li>Bers, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+cycling+and+signaling+in+cardiac+myocytes.">Calcium cycling and signaling in cardiac myocytes.</a> Annu Rev Physiol. 70, 23-49 (2008).</li><li>Zhao, S. M., Wang, Y. L., Guo, C. Y., Chen, J. L., Wu, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+decay+of+Ca2++homeostasis+in+the+development+of+diabetic+cardiomyopathy.">Progressive decay of Ca2+ homeostasis in the development of diabetic cardiomyopathy.</a> Cardiovasc Diabetol. 13, 75 (2014).</li><li>Pereira, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+signaling+in+diabetic+cardiomyocytes.">Calcium signaling in diabetic cardiomyocytes.</a> Cell calcium. 56 (5), 372-380 (2014).</li><li>Coppini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Late+sodium+current+inhibition+reverses+electromechanical+dysfunction+in+human+hypertrophic+cardiomyopathy.">Late sodium current inhibition reverses electromechanical dysfunction in human hypertrophic cardiomyopathy.</a> Circulation. 127 (5), 575-584 (2013).</li><li>Ferrantini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R4496C+RyR2+mutation+impairs+atrial+and+ventricular+contractility.">R4496C RyR2 mutation impairs atrial and ventricular contractility.</a> J Gen Physiol. 147 (1), 39-52 (2016).</li><li>Li, L., Chu, G., Kranias, E. G., Bers, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+myocyte+calcium+transport+in+phospholamban+knockout+mouse+relaxation+and+endogenous+CaMKII+effects.">Cardiac myocyte calcium transport in phospholamban knockout mouse relaxation and endogenous CaMKII effects.</a> Am J Physiol. 274, H1335-H1347 (1998).</li><li>Cheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CaMKII+inhibition+in+heart+failure,+beneficial,+harmful,+or+both.">CaMKII inhibition in heart failure, beneficial, harmful, or both.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 302, H1454-H1465 (2012).</li><li>Lai, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rho+kinase+inhibitor,+fasudil,+ameliorates+diabetes-induced+cardiac+dysfunction+by+improving+calcium+clearance+and+actin+remodeling.">The Rho kinase inhibitor, fasudil, ameliorates diabetes-induced cardiac dysfunction by improving calcium clearance and actin remodeling.</a> J Mol Med (Berl). 95 (2), 155-165 (2017).</li><li>Lai, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stretch+Current-Induced+Abnormal+Impulses+in+CaMKII&#948;+Knockout+Mouse+Ventricular+Myocytes.">Stretch Current-Induced Abnormal Impulses in CaMKII&#948; Knockout Mouse Ventricular Myocytes.</a> J Cardiovasc Electrophysiol. 24 (4), 457-463 (2013).</li><li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+of+L-type+calcium+current+and+cardiac+function+in+CaMKII{delta}+knockout+mice.">Alterations of L-type calcium current and cardiac function in CaMKII{delta} knockout mice.</a> Circ Res. 107 (3), 398-407 (2010).</li><li>Roussel, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Palmitoyl-carnitine+increases+RyR2+oxidation+and+sarcoplasmic+reticulum+Ca2++leak+in+cardiomyocytes:+Role+of+adenine+nucleotide+translocase.">Palmitoyl-carnitine increases RyR2 oxidation and sarcoplasmic reticulum Ca2+ leak in cardiomyocytes: Role of adenine nucleotide translocase.</a> Biochim Biophys Acta. 1852 (5), 749-758 (2015).</li><li>Yaras, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+diabetes+on+ryanodine+receptor+Ca2++release+channel+(RyR2)+and+Ca2++homeostasis+in+rat+heart.">Effects of diabetes on ryanodine receptor Ca2+ release channel (RyR2) and Ca2+ homeostasis in rat heart.</a> Diabetes. 54 (11), 3082-3088 (2005).</li><li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenovirus-Mediated+Overexpression+of+O-GlcNAcase+Improves+Contractile+Function+in+the+Diabetic+Heart.">Adenovirus-Mediated Overexpression of O-GlcNAcase Improves Contractile Function in the Diabetic Heart.</a> Circ Res. 96 (9), 1006-1013 (2005).</li></ol>

Kalcium flux släppt från SR är den största Ca2 + källan för systole i hjärtat. Till viss del, amplituden av SR Ca2 + innehåll och fraktionerad Ca återspeglar2 + släppt från SR SR Ca2 + reserven tillgängliga för hjärtats kontraktion. Däremot, beror Ca2 + reserven för SR på förmågan hos SR Ca2 + serotoninåterupptagshämmare, Ca2 + läcka av SR och deras balans över SR under diastole12,<sup cl...

Intracellulär kalcium ([Ca2 +]jag) återvinning spelar en avgörande roll i reglering av systolisk och diastolisk funktion i hjärtmuskelcellerna1. Som vi vet, initierar kalcium-inducerad Ca2 + utgivningen excitation-contraction koppling, som översätter den elektriska signalen till kontraktion. Membranet depolarisation aktiverar sarcolemmal L-typ Ca2 + kanaler, som inducerar Ca2 + släppa från SR i cytoplasman via ryanodine receptorer 2 (RyR2). Den övergående förhöjda cytoplasmiska Ca2 + initierar kontraktion av myofibrils. Under diastole, cytoplasmiska Ca2 + är reuptaken till SR genom att SR Ca2 +-ATPas 2 (SERCA2) och pumpade ur hjärtmuskelcellen via Na+-Ca2 + värmeväxlare (NCX)2. Denna process leder till kontraktion-avslappning återvinning i hjärtmuskelcellen.
Hjärt SR är ett nätverk för intracellulära membran som omger den kontraktila maskinen. Den fungerar som en Ca2 + reservoar för kontraktion och det återskapar intracellulära Ca2 + under avkoppling. Den SR Ca2 + reserven tillgänglig för beats är bestämd för hjärtats kontraktilitet. Samtidigt är avlägsnande av intracellulära Ca2 + kritiska för hjärt diastole. Under vissa patofysiologiska förhållanden, såsom diabetes och hjärtsvikt, nedsatt Ca2 + clearance och deprimerad SR Ca2 + kan butik i hjärtmuskelcellerna vara inblandade i processen hjärtdysfunktion2,3 ,4.
För mätning av SR Ca2 + release och diastoliskt Ca2 + borttagning i hjärtmuskelceller, det finns två allmänt använda metoder: integritet NCX nuvarande baserat på patch-clamp5,6, och koffein-inducerad Ca 2 + -pulsfunktion baserat påCa 2 + fluorescens imaging7,8,9. Det tidigare tillvägagångssättet beror på det faktum att de Ca2 + släppt från SR i hög grad pumpas ut ur cellen genom NCX. Detta tillvägagångssätt är dock begränsad av dess krav för avancerad utrustning och skicklig drift. I föreliggande studie beskriver vi ett praktiskt tillvägagångssätt för att bedöma SR Ca2 + reserv och Ca2 + borttagning i myocyter genom att mätaen koffein-inducerad Ca 2 + -pulsfunktion baserat på ett Ca2 + fluorescens imaging system. Kort, intracellulära Ca2 + fluorescens indikeras av Fura-2. Genom interlinkmekanismen stimulering systemet och perfusion system, presenterar vi ett program för växling perfusionen och pacing systemet automatiskt. 10 mM koffein var anställd att snabbt framkalla totalt Ca2 + release i SR. Exponentiell förruttnelse tidskonstanter (Tau) kalcium transienter och koffein-inducerad kalcium pulser erhölls från mono-exponentiell kurva montering, vilket återspeglar SERCA och NCX bidrag till diastoliskt Ca2 + borttagning med detta.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>E31K43</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>I02T070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>G22u018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPEs</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SLBM 7880V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>10189341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>10154048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOH</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>10144B17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>F21S033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>C31U038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamic</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>10149849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>J5407a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SLBM6826V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10103586001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type II</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>45k16005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Roche</td>
			<td>735094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>caffeine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C0750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fura-2 AM</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>F1201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>Olympus IX 71</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Langendorff system</td>
			<td>Beijing Syutime Technology Co</td>
			<td>PlexiThermo-S-LANGC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>Marchauser</td>
			<td>MM33 links</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion chamber</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>FHD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Valve Controlled Gravity Perfusion System</td>
			<td>ALA</td>
			<td>VC 3-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>valve commander software</td>
			<td>ALA</td>
			<td>VC 3 1.0.1.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision flow regulator</td>
			<td>Delta Med</td>
			<td>3204315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-Barrel Manifold Perfusion Pencil</td>
			<td>AutoMate Scientific</td>
			<td>04-08-[360]</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micron Removable Tip</td>
			<td>AutoMate Scientific</td>
			<td>360um i.d.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Measurement and Cell Dimensioning Systems</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>Hyperswitch</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recording software</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>IonWizard 6.2.59</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulator</td>
			<td>IonOptix</td>
			<td>MyoPacer EP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague-dawley rats</td>
			<td>Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co.</td>
			<td>SCXK 2016-01-007436</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of sarcoplasmic reticulum calcium reserve and intracellular diastolic calcium removal in isolated ventricular cardiomyocytes

Intracellulär kalcium återvinning spelar en avgörande roll i reglering av systolisk och diastolisk funktion i hjärtmuskelceller. Hjärt sarkoplasmatiska Retikulum (SR) fungerar som en Ca2 + reservoar för kontraktion, som reuptakes intracellulära Ca2 + under avkoppling. Den SR Ca2 + reserven tillgänglig för beats är bestämd för hjärt contractibility och borttagning av intracellulära Ca2 + är kritiska för diastolisk hjärtfunktion. Under vissa patofysiologiska förhållanden, såsom diabetes och hjärtsvikt, kan försämrad kalcium clearance och SR Ca2 + butik i hjärtmuskelcellerna vara inblandade i utvecklingen av hjärtdysfunktion. Här beskriver vi ett protokoll för att utvärdera SRCa2 + reserv och diastoliskt Ca2 + borttagning. Kort, en enda hjärtmuskelcellen isolerades enzymatiskt och intracellulära Ca2 + fluorescensen indikeras av Fura-2 spelades in av ett kalcium imaging system. För att anställa koffein för att inducera totala SR Ca2 + release, förinställningar vi en automatisk perfusion switch programmet genom interlinkmekanismen stimulering systemet och systemets perfusion. Sedan, mono-exponentiell kurva montering användes för att analysera decay tidskonstanter kalcium transienter och koffein-inducerad kalcium pulser. Därför bidrag den SR Ca2 +-ATPas (SERCA) och Na+-Ca2 + värmeväxlare (NCX) till diastoliskt kalcium borttagning utvärderades.

Här, vi illustrera streptozotocin (STZ) - inducerad diabetiska råttor (DM) och åldersmatchade Sprague - Dawley (SD) råttor till exempel. SD 8 veckor gamla hanråttor (200 ± 20 g) fick en intraperitoneal injektion av STZ (70 mg/kg, ip) för DM grupp eller citrat bufferten för kontrollgruppen. En vecka efter STZ administration, råttor med blodsockret &#62; 16,7 mmol/L ansågs diabetiker. Efter 8 veckor var de LV myocyter enzymatiskt isolerade. Efter kalcium återinförande finns det ...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Sarcoplasmic Reticulum Calcium Reserve and Intracellular Diastolic Calcium Removal in Isolated Ventricular Cardiomyocytes at JoVE.com

Assessment of Sarcoplasmic Reticulum Calcium Reserve and Intracellular Diastolic Calcium Removal in Isolated Ventricular Cardiomyocytes (Video) | JoVE

Intracellulär kalcium återvinning spelar en avgörande roll i reglering av systolisk och diastolisk funktion i hjärtmuskelceller. Här beskriver vi ett protokoll för att utvärdera sarkoplasmatiska nätmagen Ca2 + reserv och diastoliskt kalcium borttagning funktion i hjärtmuskelceller genom en kalcium imaging system.

Bedömning av sarkoplasmatiska nätmagen kalcium reserv och intracellulära diastoliskt kalcium borttagning i isolerade ventrikulära hjärtmuskelcellerna

Intracellular calcium recycling plays a critical role in regulation of systolic and diastolic function in cardiomyocytes. Cardiac sarcoplasmic reticulum ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Sarcoplasmic Reticulum Calcium Reserve and Intracellular Diastolic Calcium Removal in Isolated Ventricular Cardiomyocytes

Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy

Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy (Video) | JoVE

Bedömning av hjärtfunktionen och Energetics i isolerade Mus Hearts Använda 31 P NMR-spektroskopi

Bioengineered mouse models have become powerful research tools in determining causal relationships between molecular alterations and models of ...

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples

Isolation and Functional Characterization of Human Ventricular Cardiomyocytes from Fresh Surgical Samples (Video) | JoVE

Isolering och funktionell karakterisering av Human Ventrikulär Cardiomyocytes från Fresh Kirurgiska prover

Cardiomyocytes from diseased hearts are subjected to complex remodeling processes involving changes in cell structure, excitation contraction coupling and ...

Ultrasound Based Assessment of Coronary Artery Flow and Coronary Flow Reserve Using the Pressure Overload Model in Mice

Ultrasound Based Assessment of Coronary Artery Flow and Coronary Flow Reserve Using the Pressure Overload Model in Mice (Video) | JoVE

Ultraljud Baserat Bedömning av kranskärls Flow och Coronary Flow Reserve Använda tryckÖverbelastnings Model hos möss

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet (Video) | JoVE

Kronisk Tromboembolisjukdom pulmonell hypertension och bedömning av rätt kammarfunktion i Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Transthoracic Speckle Tracking Echocardiography for the Quantitative Assessment of Left Ventricular Myocardial Deformation

Transthoracic Speckle Tracking Echocardiography for the Quantitative Assessment of Left Ventricular Myocardial Deformation (Video) | JoVE

Transtorakal Speckle Spårning ekokardiografi för kvantitativ bedömning av vänster kammares Myocardial Deformation

The value of conventional echocardiography is limited by differences in inter-individual image interpretation and therefore largely dependent on the ...

Treatment with Vancomycin Loaded Calcium Sulphate and Autogenous Bone in an Improved Rabbit Model of Bone Infection

Treatment with Vancomycin Loaded Calcium Sulphate and Autogenous Bone in an Improved Rabbit Model of Bone Infection (Video) | JoVE

Behandling med vankomycin lastade kalciumsulfat och autologt ben i en förbättrad kanin modell av benet infektion

Bone infection results from bacterial invasion, which is extremely difficult to treat in clinical, orthopedic, and traumatic surgery. The bone infection ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse (Video) | JoVE

Ekokardiografisk mätning av höger kammar diastoliska parametrar i mus

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice (Video) | JoVE

Invasiv hemodynamisk bedömning för det högra ventrikulär systemet och Hypoxiinducerad pulmonell arteriell hypertension hos möss

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Generation of Ventricular-Like HiPSC-Derived Cardiomyocytes and High-Quality Cell Preparations for Calcium Handling Characterization

Generation of Ventricular-Like HiPSC-Derived Cardiomyocytes and High-Quality Cell Preparations for Calcium Handling Characterization (Video) | JoVE

Generering av ventrikulär-liknande HiPSC-härledda Kardiomyocyter och högkvalitativa cell preparat för kalcium hantering karakterisering

Human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (iPSC-CMs) provide a valuable human source for studying the basic science of calcium (Ca2+) ...

In Vitro Assessment of Cardiac Function Using Skinned Cardiomyocytes

In Vitro Assessment of Cardiac Function Using Skinned Cardiomyocytes (Video) | JoVE

In Vitro Bedömning av hjärtfunktion Använda Skinned Kardiomyocyter

In this article, we describe the steps required to isolate a single permeabilized (&#34;skinned&#34;) cardiomyocyte and attach it to a force-measuring ...