Name: noninvasive sampling of mucosal lining fluid for the quantification of in vivo upper airway immune-mediator levels
Uploaded: 2017-08-07T12:30:00
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Wir bedanken uns für die Kinder und Familien von der COPSAC2010 -Kohortenstudie für all ihre Unterstützung und ihr Engagement. Wir anerkennen und schätzen die einzigartige Bemühungen der COPSAC-Research-Team und die technische Hilfe aus Techniker Lisbeth Buus Rosholm, Technical University of Denmark für die Messung der Zytokine und Chemokine.

Die Studien wurden im Einklang mit den Leitprinzipien der Deklaration von Helsinki. Genehmigungen von der Ethik-Kommission für Kopenhagen (KF 01-289/96 für COPSAC2000 ) und H-B-2008-093 COPSAC2010und der dänischen Datenschutzbehörde stammen, und schriftliche Einwilligung wurde von beiden Elternteilen jedes Fach vor der Einschreibung.
1. Versuchsaufbau
<ol>
	<li>Verwenden Sie Filter Papierbögen (faserige hydroxylierten Polyester Bettwäsche, siehe die Tabelle der Materialien</st...

<ol>
	<li>Bousquet, J., van Cauwenberge, P., Khaltaev, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allergic+Rhinitis+and+Its+Impact+on+Asthma.">Allergic Rhinitis and Its Impact on Asthma.</a> J Allergy Clin Immunol. 108 (5), 147-334 (2001).</li><li>Howarth, P. H., Persson, C. G. A., Meltzer, E. O., Jacobson, M. R., Durham, S. R., Silkoff, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Objective+monitoring+of+nasal+airway+inflammation+in+rhinitis.">Objective monitoring of nasal airway inflammation in rhinitis.</a> J Allergy Clin Immunol. 115 (3), 414-441 (2005).</li><li>Bensch, G. W., Nelson, H. S., Borish, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+cytokines+in+nasal+secretions+after+nasal+antigen+challenge:+lack+of+influence+of+antihistamines.">Evaluation of cytokines in nasal secretions after nasal antigen challenge: lack of influence of antihistamines.</a> Ann Allergy Asthma Immunol. 88 (5), 457-462 (2002).</li><li>Sussman, G. L., Mason, J., Compton, D., Stewart, J., Ricard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficacy+and+safety+of+fexofenadine+HCl+and+pseudoephedrine,+alone+and+in+combination,+in+seasonal+allergic+rhinitis.">The efficacy and safety of fexofenadine HCl and pseudoephedrine, alone and in combination, in seasonal allergic rhinitis.</a> J Allergy Clin Immunol. 104 (1), 100-106 (1999).</li><li>Bisgaard, H., Robinson, C., R&#248;meling, F., Mygind, N., Church, M., Holgate, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukotriene+C4+and+histamine+in+early+allergic+reaction+in+the+nose.">Leukotriene C4 and histamine in early allergic reaction in the nose.</a> Allergy. 43 (3), 219-227 (1988).</li><li>Chawes, B. L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+assessing+unchallenged+levels+of+mediators+in+nasal+epithelial+lining+fluid.">A novel method for assessing unchallenged levels of mediators in nasal epithelial lining fluid.</a> J Allergy Clin Immunol. 125 (6), 1387-1389 (2010).</li><li>F&#0248;lsgaard, N. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenic+bacteria+colonizing+the+airways+in+asymptomatic+neonates+stimulates+topical+inflammatory+mediator+release.">Pathogenic bacteria colonizing the airways in asymptomatic neonates stimulates topical inflammatory mediator release.</a> Am J Respir Crit Care Med. 187 (6), 589-595 (2013).</li><li>F&#0248;lsgaard, N. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+Cytokine+Profile+in+the+Airway+Mucosal+Lining+Fluid+Is+Skewed+by+Maternal+Atopy.">Neonatal Cytokine Profile in the Airway Mucosal Lining Fluid Is Skewed by Maternal Atopy.</a> Am J Respir Crit Care Med. 185 (3), 275-280 (2012).</li><li>Chawes, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Vitamin+D3+Supplementation+During+Pregnancy+on+Risk+of+Persistent+Wheeze+in+the+Offspring:+A+Randomized+Clinical+Trial.">Effect of Vitamin D3 Supplementation During Pregnancy on Risk of Persistent Wheeze in the Offspring: A Randomized Clinical Trial.</a> JAMA. 315 (4), 353-361 (2016).</li><li>Bischoff, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+Response+to+A(H1N1)pnd09+Vaccination+in+Pregnant+Women:+A+Single+Blinded+Randomized+Controlled+Trial.">Altered Response to A(H1N1)pnd09 Vaccination in Pregnant Women: A Single Blinded Randomized Controlled Trial.</a> PloS One. 8 (4), 56700 (2013).</li><li>Wolsk, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Picornavirus-Induced+Airway+Mucosa+Immune+Profile+in+Asymptomatic+Neonates.">Picornavirus-Induced Airway Mucosa Immune Profile in Asymptomatic Neonates.</a> J Infect Dis. 213 (8), 1262-1270 (2016).</li><li>Wolsk, H. M., Chawes, B. L., F&#248;lsgaard, N. V., Rasmussen, M. A., Brix, S., Bisgaard, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Siblings+Promote+a+Type+1/Type+17-oriented+immune+response+in+the+airways+of+asymptomatic+neonates.">Siblings Promote a Type 1/Type 17-oriented immune response in the airways of asymptomatic neonates.</a> Allergy. 71 (6), 820-828 (2016).</li><li>Alam, R., Sim, T. C., Hilsmeier, K., Grant, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+technique+for+recovery+of+cytokines+from+inflammatory+sites+in+situ.">Development of a new technique for recovery of cytokines from inflammatory sites in situ.</a> J Immunol Methods. 155 (1), 25-29 (1992).</li><li>Ishizaka, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+bronchoscopic+microsample+probe+to+measure+the+biochemical+constituents+in+epithelial+lining+fluid+of+patients+with+acute+respiratory+distress+syndrome.">New bronchoscopic microsample probe to measure the biochemical constituents in epithelial lining fluid of patients with acute respiratory distress syndrome.</a> Crit Care Med. 29 (4), 896-898 (2001).</li><li>Ishizaka, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevation+of+KL-6,+a+lung+epithelial+cell+marker,+in+plasma+and+epithelial+lining+fluid+in+acute+respiratory+distress+syndrome.">Elevation of KL-6, a lung epithelial cell marker, in plasma and epithelial lining fluid in acute respiratory distress syndrome.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 286 (6), 1088-1094 (2004).</li><li>Nakano, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelin-1+level+in+epithelial+lining+fluid+of+patients+with+acute+respiratory+distress+syndrome.">Endothelin-1 level in epithelial lining fluid of patients with acute respiratory distress syndrome.</a> Respirology. 12 (5), 740-743 (2007).</li><li>Komaki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokine-mediated+xanthine+oxidase+upregulation+in+chronic+obstructive+pulmonary+disease's+airways.">Cytokine-mediated xanthine oxidase upregulation in chronic obstructive pulmonary disease's airways.</a> Pulm Pharmacol Ther. 18 (4), 297-302 (2005).</li><li>Moeller, A., Franklin, P., Hall, G. L., Horak, F., Wildhaber, J. H., Stick, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+exhaled+breath+condensates+in+infants.">Measuring exhaled breath condensates in infants.</a> Pediatr Pulmonol. 41 (2), 184-187 (2006).</li></ol>

Mit der hier vorgestellten Technik konnten wir das in Vivo obere Atemwege Schleimhaut immun Profil bei Kindern bereits ab 1 Monat alt, zu bestimmen, die nicht zuvor getan wurde. Wir haben beobachtet, dass das Vorhandensein von spezifischen Atemwege Bakterien und Picornaviren7,11, sowie andere Pre und perinatale Expositionen im Atemweg immun Profil von den Neugeborenen gespiegelt wurden. Darüber hinaus haben wir diese Atemwege immun Profildaten studieren...

Die Flüssigkeit der Schleimhaut der Nase macht sich der flüssige Teil des Systems der oberen Atemwege. Es besteht aus einer komplexen Matrix von Mediatoren aus dem Wechselspiel zwischen dem Epithel und der immunen Zellen, aus denen sich die erste Linie der Verteidigung gegen eindringende Mikroorganismen abgeleitet. Die Nasenschleimhaut ist leicht zugänglich, und es gibt eine starke funktionale und immunologische Beziehung zwischen der Nase und Bronchien1. Dieses Fach ist von besonderem Interesse in Bezug auf Krankheiten der Atemwege, die häufig in der Kindheit, wie Asthma und allergische Rhinitis, sondern auch zu einer Reihe von anderen Erkrankungen der Atemwege häufiger später im Leben.
Hier beschreiben wir die Durchführung eines Verfahrens zur Probe ungestört Schleimhaut Futter Flüssigkeit aus der Nasenhöhle ein Filterpapier-basierte, nicht-invasive Technik, sowie eine anschließende Extraktionsverfahren, verwendet, um Protein-basierten Analyten aus der Filterpapiere vor deren Quantifizierung eluieren. Diese Technik kann, z. B. zur in Vivo immun Unterschriften von gesunden Probanden und Patienten mit verschiedenen Erkrankungen der Atemwege zu erhalten. Darüber hinaus ist es möglich, Aufnahmen von Bedeutung für eine bestimmte immun Signatur zu prüfen und zu bewerten, ob es ein Prädiktor oder Vermittler der späteren Entwicklung der Krankheit ist.
Schleimhaut Flüssigkeit wurde zuvor durch nasale Lavage2, erteilt, die oft durch eine nasale Challenge-Test wo ein Allergen in hohe vorausgegangen ist Förderung eine entzündliche Reaktion3,4eingeführt. Jedoch die nasale Lavage-Technik ist nicht möglich bei Kleinkindern und stellt eine unbekannte Verdünnungsfaktor, die die Ergebnisse als der verdünnte Mediator verwirrt, die Ebenen unterhalb der Nachweisgrenze der Assay5fallen können. Aufgrund der unbekannten Verdünnungsfaktor sind die gemessenen Analyten Antworten aus der nasale Provokationstests nicht vergleichbar zwischen den Individuen, wodurch die Nützlichkeit der nasale Lavage Technik in einer Kohorte Einstellung begrenzt. Schließlich Allergen Herausforderung ist nur anwendbar bei sensibilisierten Personen und andere Herausforderungen, wie die Histamin-Herausforderung sind nicht physiologisch relevanten, verursachen eine Decke Wirkung auf Mittler-Version. Diese Probleme werden in der vorgestellten Filterpapier-basierte Technik für Schleimhaut Flüssigkeitsansammlung, wo die einzelnen Sekretion von Flüssigkeiten und Analyten Ebenen sind die einzigen Faktoren, die Einfluss auf interindividuelle Varianz, umgangen.
Während der Extraktionsverfahren sind Analyten aus der Filterpapiere nach Zugabe von identischen Volumen des Puffers auf alle Proben eluiert. Dies begünstigt ähnliche ex Vivo Verdünnung aller Proben. Ein Extraktionspuffer Albumin-basierte isotonische Salzlösung dient dem Extraktionsschritt; Es ermöglicht die Gewinnung von Protein-basierten Mediatoren und stabilisiert Proteine um Denaturierung während der nachfolgenden Einfrieren der eluierten Proteine vor der Quantifizierung zu begrenzen. Zur Vermeidung von Proteinabbau während der Extraktion-Phase wird ein Cocktail von Protease-Inhibitoren die Extraktionspuffer hinzugefügt.
Die Umsetzung der Techniken, mit denen für die Quantifizierung von ungestört, in-Vivo-generierten immun Mediatoren an Schleimhaut Standorten ist von größter Bedeutung. Erstens macht die Schleimhaut Website das größte immunologische Organ im Körper. Zweitens ist die nasale Lage am Hauptstandort in der Luft ausgesetzt und in die Atemwege immunologische Abteil der Lunge1eng verbunden ist. Drittens, eröffnet die Möglichkeit der Vermessung dieses wichtigen Organs mit einer nicht-invasive Technik die Möglichkeit bieten eine Fülle von Informationen auf der Achse wichtig Mikrobe-immun-Interaktion in Bezug auf Gesundheit und Krankheit in den Atemwegen. Viertens gibt es viele weitere Anwendungsmöglichkeiten dieser Technik, wie z. B. lokale immunologische Veränderungen in randomisierten, kontrollierten Studien von Medikamenten und Mikronährstoffen zu studieren.
Wir umgesetzt zunächst die Technik in der Kopenhagener Prospektivstudien zu Asthma Kindheit2000 (COPSAC2000) Kohorte, wo wir das immun Profil der Schleimhaut Flüssigkeit bei 7 Jahre alten Kindern mit allergischer Rhinitis im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen13bestimmt. Anschließend bewarb sich wir erfolgreich diese Technik längs-COPSAC2010 Kohorte und bewerteten Atemwege immun Profile 1 Monat, 2 Jahre und 6 Jahre alt und in Fällen von akuten respiratorischen Symptomen. Ergebnisse von 1-Monat-alten Neugeborenen haben gezeigt, dass wichtige Zusammenhänge zwischen immun Signatur und frühes Leben Umweltexposition7,8,9,10,11,12.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1688">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Fibrous hydroxylatedpolyester sheets</td>
			<td style="width:103px;">Accuwik Ultra&#160;</td>
			<td style="width:119px;">SPR0730</td>
			<td style="width:1084px;">Filter paper</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Milliplex Assay Buffer&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>L-AB</td>
			<td>Buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">low-protein binding storage plates&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>CLS8161</td>
			<td>Plates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Protease Inhibitor</td>
			<td style="width:103px;">Roche</td>
			<td align="right" style="width:119px;">11873580001</td>
			<td>complete EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Reader of multi-spot plates</td>
			<td style="width:103px;">Mesoscale</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Sector imager 6000</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Assays&#160;</td>
			<td style="width:103px;">Mesoscale</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Human 10-plex TH1/TH2 cytokine assay and 9-plex chemokine assay, and singleplex IL-17A, TGF-&#946;1and TSLP. A description can be found online on www.mesoscale.com</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

noninvasive sampling of mucosal lining fluid for the quantification of in vivo upper airway immune-mediator levels

Dieses Protokoll beschreibt nicht-invasive Probenahme ungestört oberen Atemwegen Schleimhaut Flüssigkeit. Es beschreibt auch die Extraktionsverfahren vor der Analyse von immun Mediatoren in Fluid Eluate für die Untersuchung der Atemwege topische immun Signatur, ohne die Notwendigkeit einer Stimulation-Verfahren (oft durch andere Techniken verwendet). Die Schleimhaut-Flüssigkeit wird auf einem Streifen Filterpapier aufgenommen am vorderen Teil der unteren Nasenmuschel und Links für 2 min der Absorption. Analyten aus der Filterpapiere eluiert werden, und die extrahierten Protein-basierten Eluate werden durch eine Electrochemiluminescence-basierte Immunoassay, zulassend die hochempfindlichen Quantifizierung von Low und high - level Analyten in der gleichen Probe analysiert. Wir maßen die in Vivo -Level 20 vorausgewählten immun Mediatoren, die im Zusammenhang mit spezifischen immunen Signalwege in der Schleimhaut der oberen Atemwege, aber die Technik ist nicht beschränkt auf, dass bestimmte Panel oder Sampling-Website. Die Technik wurde zuerst in 7-Year-Old Kinder aus dem Kopenhagen Prospektivstudien über Asthma im Kindesalter2000 (COPSAC2000) Kohorte mit allergischer Rhinitis umgesetzt. Er diente danach in der Längsrichtung COPSAC2010 Geburt Kohorte, abgetastet, 1 Monat, 2 Jahre und 6 Jahre alt und in Fällen von akuten respiratorischen Symptomen. Erhielten wir erfolgreich und analysierten Proben von 620 (89 %) von 700 1-Monat-alten Kindern, ein paar Proben waren unterhalb der Assay-Nachweisgrenze (als der Median (Inter Quartil Range (IQR)) berichtet. Die Anzahl der Proben unter der Nachweisgrenze (d.h. von 0 auf den Sollwert für die untere Grenze der Erkennung) für jeden Vermittler war 29 (7,25-119,5). Diese Technik ermöglicht die Quantifizierung der in Vivo Atemwege Schleimhaut immun Profil von Geburt, längs aufgebracht werden und auf Studien über die Wirkung von Genetik und frühes Leben Umwelteinflüsse, Pathophysiologie, Endotyping und Überwachung von Erkrankungen der Atemwege, Entwicklung und Evaluierung neuer Therapeutika angewendet werden kann.

Baseline Characteristics of the Airway Immune Profiles: 
Complete data on upper airway mucosal immune mediator levels at 1 month of age was obtained in 620 (89%) of the 700 children enrolled in the COPSAC2010 cohort. Ten neonates were enrolled before the technique was established, and 19 did not attend the 1-month visit. Additionally, 47 samples were excluded because they were extracted and measured in another laboratory used in a pilot study, and 4 sample...

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Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

Dieses Protokoll beschreibt eine nicht-invasive Technik für die Entnahme von ungestörten Schleimhaut Flüssigkeit aus den oberen Atemwegen. Es kann verwendet werden, die Quantifizierung der in Vivo -Level von Protein Mediatoren wie Zytokine und Chemokine, bei Patienten aller Altersgruppen durchführen.

Nicht-invasive Probenahme von Schleimhaut-Flüssigkeit für die Quantifizierung von In Vivo oberen Atemwegen immun-Mediator-Level

This protocol describes noninvasive sampling of undisturbed upper airway mucosal lining fluid. It also details the extraction procedure used prior to the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Noninvasive Sampling of Mucosal Lining Fluid for the Quantification of In Vivo Upper Airway Immune-mediator Levels

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay zur Bewertung pathogeninduzierter Neutrophiler Transepithelmigration

Mucosal surfaces serve as protective barriers against pathogenic organisms.&#160;Innate immune responses are activated upon sensing pathogen leading to ...

Forschung

Immunologie und Infektion

Dissecting Innate Immune Signaling in Viral Evasion of Cytokine Production

Zergliedern Angeborene Immunsystem Signaling in Viral Evasion von Zytokin-Produktion

In response to a viral infection, the host innate immune response is activated to up-regulate gene expression and production of antiviral cytokines. ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

Modellierung Mucosal Candidiasis in Zebrafisch-Larven von Schwimmblase Injection

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

Intranasal Administration of Recombinant Influenza Vaccines in Chimeric Mouse Models to Study Mucosal Immunity

Die intranasale Verabreichung von rekombinantem Influenza Vaccines in chimären Maus-Modelle zu Mucosale Immunität Studieren

Vaccines are one of the greatest achievements of mankind, and have saved millions of lives over the last century. Paradoxically, little is known about the ...

A RAPID Method for Blood Processing to Increase the Yield of Plasma Peptide Levels in Human Blood

Eine schnelle Methode zur Blutverarbeitung die Ausbeute an Plasma-Peptidkonzentrationen im menschlichen Blut zu erhöhen

Research in the field of food intake regulation is gaining importance. This often includes the measurement of peptides regulating food intake. For the ...

Intra-tracheal Administration of Haemophilus influenzae in Mouse Models to Study Airway Inflammation

Intra-tracheal Administration of Haemophilus influenzae in Mouse Models to Study Airway Inflammation

Intratracheale Verabreichung von<em&gt; Haemophilus influenzae</em&gt; In Mausmodelle zur Untersuchung Atemwegsentzündung

Here, we describe a detailed procedure to efficiently and directly deliver Haemophilus influenzae into the lower respiratory tracts of mice. We ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

Swab Sampling Verfahren zum Nachweis von humanem Norovirus auf Oberflächen

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Bile Salt-induced Biofilm Formation in Enteric Pathogens: Techniques for Identification and Quantification

Galle-Salz-induzierte Biofilmbildung im enterischen Krankheitserregern: Techniken für die Identifizierung und Quantifizierung

Biofilm formation is a dynamic, multistage process that occurs in bacteria under harsh environmental conditions or times of stress. For enteric pathogens, ...

Quantification of Efferocytosis by Single-cell Fluorescence Microscopy

Quantifizierung der Efferocytosis durch einzellige Fluoreszenz-Mikroskopie

Studying the regulation of efferocytosis requires methods that are able to accurately quantify the uptake of apoptotic cells and to probe the signaling ...