Name: subcutaneous neurotrophin 4 infusion using osmotic pumps or direct muscular injection enhances aging rat laryngeal muscles
Uploaded: 2017-06-13T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subcutaneous Neurotrophin 4 Infusion Using Osmotic Pumps or Direct Muscular Injection Enhances Aging Rat Laryngeal Muscles at JoVE.com

Detta arbete stöddes av bidrag från National Institute on Dövhet och andra kommunikationsstörningar (R21DC010806 till CAM och JCS och R01DC011285 till CAM).

Använd manliga Fischer 344-Brown Norway råttor vid 6 och 30 månader för detta protokoll. Råttor erhölls från National Institute of Aging gnagarkoloni. Vi använde råttor för denna studie eftersom strukturen hos råtta struphuvudet liknar den hos människa, som fungerar funktionellt för luftvägsskydd och artsspecifika vokaliseringar. Denna studie utfördes i enlighet med PHS-politiken för humanvård och användning av laboratoriedjur, NIH Guide för vård och användning av laboratoriedjur och djurskyddslagen...

<ol>
	<li>Trupe, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlates+and+consequences+of+eating+dependency+in+institutionalized+elderly.">Correlates and consequences of eating dependency in institutionalized elderly.</a> J. Am. Geriatrics Society. 34 (3), 192-198 (1986).</li><li>Ward, P. H., Colton, R., McConnell, F., Malmgren, L., Kashima, H., Woodson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+of+the+voice+and+swallowing.">Aging of the voice and swallowing.</a> Otolaryngol. Head Neck Surg. 100 (4), 283-286 (1989).</li><li>Gay, E. G., Kronenfeld, J. J., Dettmann, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+on+the+effect+of+regulation+on+health+care+for+the+older+American:+a+tale+of+two+states.">A comparison on the effect of regulation on health care for the older American: a tale of two states.</a> Gerontologist. 34 (6), 787-796 (1994).</li><li>Hagen, P., Lyons, G. D., Nuss, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysphonia+in+the+elderly:diagnosis+and+management+of+age-related+voice+changes.">Dysphonia in the elderly:diagnosis and management of age-related voice changes.</a> South. Med. J. 89 (2), 204-207 (1996).</li><li>Broniatowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+evaluation+and+treatment+of+patients+with+swallowing+disorders.">Current evaluation and treatment of patients with swallowing disorders.</a> Otolaryngol. Head Neck Surgery. 120 (4), 464-473 (1999).</li><li>Lundy, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspiration:+cause+and+implications.">Aspiration: cause and implications.</a> Otolaryngol. Head Neck Surg. 120 (4), 474-478 (1999).</li><li>Schindler, J. S., Kelly, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swallowing+disorders+in+the+elderly.">Swallowing disorders in the elderly.</a> Laryngoscope. 112 (4), 589-602 (2002).</li><li>Gambino, D. R., Malmgren, L. T., Gacek, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+the+neuromuscular+junctions+in+the+human+posterior+cricoarytenoid+muscles:+a+quantitative+study.">Age-related changes in the neuromuscular junctions in the human posterior cricoarytenoid muscles: a quantitative study.</a> Laryngoscope. 100 (3), 262-268 (1990).</li><li>Sinard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+aging+voice:+how+to+differentiate+disease+from+normal+changes.">The aging voice: how to differentiate disease from normal changes.</a> Geriatrics. 53 (7), 76-79 (1998).</li><li>Baker, K. K., Olson-Raming, L., Sapir, S., Luschei, E. S., Smith, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+vocal+loudness+in+young+and+old+adults.">Control of vocal loudness in young and old adults.</a> J. Speech Lang. Hear Res. 44 (2), 297-305 (2001).</li><li>McMullen, C. A., Andrade, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+morphological+evidence+of+age-related+denervation+in+rat+laryngeal+muscles.">Functional and morphological evidence of age-related denervation in rat laryngeal muscles.</a> J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 64 (4), 435-442 (2009).</li><li>Lai, K., Ip, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postsynaptic+signaling+of+new+players+at+the+neuromuscular+junction.">Postsynaptic signaling of new players at the neuromuscular junction.</a> J. Neurocytol. 32 (5-8), 727-741 (2003).</li><li>Huang, E. J., Reichardt, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophins:+roles+in+neuronal+development+and+function.">Neurotrophins: roles in neuronal development and function.</a> Annu. Rev. Neurosci. 24 (1), 677-736 (2012).</li><li>Gonzalez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+Trkb+mediated+signaling+induces+disassembly+of+postsynaptic+receptor+clusters+at+neuromuscular+junctions.">Disruption of Trkb mediated signaling induces disassembly of postsynaptic receptor clusters at neuromuscular junctions.</a> Neuron. 24 (3), 567-583 (1999).</li><li>Hirano, S., Kishimoto, Y., Suehiro, A., Kanemaru, S., Ito, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+aged+vocal+folds:+first+human+case+treated+with+fibroblast+growth+factor.">Regeneration of aged vocal folds: first human case treated with fibroblast growth factor.</a> Laryngoscope. 118 (12), 2254-2259 (2008).</li><li>Branski, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+transforming+growth+factor-beta+1+on+human+vocal+fold+fibroblasts.">Effects of transforming growth factor-beta 1 on human vocal fold fibroblasts.</a> Ann. Oto. Rhinol. Laryngol. 118 (3), 218-226 (2009).</li><li>Kishimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+exogenous+hepatocyte+growth+factor+on+vocal+fold+fibroblasts.">Effects of exogenous hepatocyte growth factor on vocal fold fibroblasts.</a> Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 118 (8), 606-611 (2009).</li><li>Belluardo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuromuscular+junction+disassembly+and+muscle+fatigue+in+mice+lacking+neurotrophin-4.">Neuromuscular junction disassembly and muscle fatigue in mice lacking neurotrophin-4.</a> Mol. Cell. Neurosci. 18 (1), 56-57 (2001).</li><li>Johnson, A. M., Ciucci, M. R., Connor, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vocal+training+mitigates+age-related+changes+within+the+vocal+mechanisms+in+the+old+rat.">Vocal training mitigates age-related changes within the vocal mechanisms in the old rat.</a> J. Gerontol. A Biol. Sci. Med. Sci. 68 (12), 1458-1468 (2013).</li><li>Roscow, D. E., Parikh, P., Vivero, R. J., Casiano, R. R., Lundy, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+for+initial+dosing+of+botulinum+toxin+in+treatment+of+adductor+spasmodic+dysphonia.">Considerations for initial dosing of botulinum toxin in treatment of adductor spasmodic dysphonia.</a> Oto. HeadNeck Surg. 148 (6), 1003-1006 (2013).</li><li>Benninger, M. S., Hanick, A., Hicks, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cricothyroid+muscle+botulinum+toxin+injection+to+improve+airway+for+bilateral+recurrent+laryngeal+nerve+paralysis,+A+case+series.">Cricothyroid muscle botulinum toxin injection to improve airway for bilateral recurrent laryngeal nerve paralysis, A case series.</a> J. Voice. 30 (1), 96-99 (2016).</li><li>Coppoolse, J. M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vivo+study+of+composite+microgels+based+on+hyaluronic+acid+and+gelatin+for+the+reconstruction+of+surgically+injured+rat+vocal+folds.">An in vivo study of composite microgels based on hyaluronic acid and gelatin for the reconstruction of surgically injured rat vocal folds.</a> J. Speech Lang Hear Res. 57 (2), S658-S673 (2014).</li><li>Herteg&#229;rd, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-linked+hyaluronan+used+as+augmentation+substance+for+treatment+of+glottal+insufficiency:+Safety+aspects+and+vocal+fold+function.">Cross-linked hyaluronan used as augmentation substance for treatment of glottal insufficiency: Safety aspects and vocal fold function.</a> Laryngoscope. 112 (12), 2211-2219 (2002).</li><li>Walker, W. F., Homberger, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anatomy and dissection of the rat. , (1997).</li><li>Ohno, T., Hirano, S., Rousseau, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-associated+changes+in+the+expression+and+deposition+of+vocal+fold+collagen+and+hyaluronan.">Age-associated changes in the expression and deposition of vocal fold collagen and hyaluronan.</a> Ann. Oto. Rhinol. Laryngol. 25 (1), 192-197 (2009).</li><li>Stemple, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+aging+rat+laryngeal+muscles+with+endogenous+growth+factor+treatment.">Enhancement of aging rat laryngeal muscles with endogenous growth factor treatment.</a> Physiol. Rep. 4 (10), e12798 (2016).</li><li>McMullen, C. A., Andrade, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+dysfunction+and+altered+metabolic+profile+of+the+aging+rat+thyroarytenoid+muscle.">Contractile dysfunction and altered metabolic profile of the aging rat thyroarytenoid muscle.</a> J. Appl. Phys. 100 (2), 602-608 (2006).</li><li>Engle, W. K., Cunningham, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+examination+of+muscle+tissue.+An+improved+trichrome+method+for+fresh-frozen+biopsy+section.">Rapid examination of muscle tissue. An improved trichrome method for fresh-frozen biopsy section.</a> Neurology. (13), 919-923 (1963).</li><li>Sheehan, D. C., Hrapchack, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theory+and+practice+of+histotechnology.">Theory and practice of histotechnology.</a> Battelle. , (1980).</li><li>Kulakowski, S. A., Parker, S. D., Personius, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+TrkB+expression+results+in+precocious+age-like+changes+in+neuromuscular+structure,+neurotransmission,+and+muscle+function.">Reduced TrkB expression results in precocious age-like changes in neuromuscular structure, neurotransmission, and muscle function.</a> J. Appl. Phys. 111 (3), 844-852 (2011).</li><li>Nishida, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+change+in+rat+intrinsic+laryngeal+muscles:+analysis+of+muscle+fibers,+muscle+fiber+proteins+and+subneural+apparatuses.">Age-related change in rat intrinsic laryngeal muscles: analysis of muscle fibers, muscle fiber proteins and subneural apparatuses.</a> Eur Arch Otorhinolaryngol. 270 (3), 975-984 (2013).</li></ol>

Laryngeala muskler är sårbara för de ogynnsamma effekterna av åldrande. Tidigare studier har visat förändringar i åldrande larynxmuskler som inkluderar förändringar i fiberstorlek, totalt antal fibrer, regenerativ förmåga, NMJ-storlek och kvantitetsförändringar, förutom variationer i kontraktil funktion och myosinisoformskift 4 , 11 , 27 , 30 , 31</su...

Laryngeala muskler samverkar snabbt och konsekvent och är sårbara för de negativa effekterna av åldrande. Denna konstanta aktivitet är tänkt att bidra till röstproblem eller dysfagi observerad hos personer över 65 år 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 . Flera molekylära och patofysiologiska mekanismer bidrar till denna åldersrelaterade dysfunktion. Dessa mekanismer kan innefatta ombyggnad av laryngeal slemhinna, muskelfiberatrofi eller förlust, brist på regenerering av muskelfibrer eller atrofi som orsakar böjning av vokalvecken och oförmåga hos glottisluckan 8 , 9 , 10 , 11 . Det finns ingen bevisad medicinsk terapi vid denna tidpunkt som kan kommaFörhindra eller rehabilitera dessa åldersrelaterade förändringar i dessa muskler. Modulering av effektiviteten hos neuromuskulär överföring kan kraftigt påverka neuromotorisk prestanda. Familjen av neurotrofiner innefattar nervtillväxtfaktor (NGF), hjärnavledd nervtillväxtfaktor (BDNF), neurotrofin 3 (NTF3) och NTF4 12 , 13 . Neurotrofiner har visat sig modulera synaptisk effekt 1 , 4 . Hepatocyttillväxtfaktor, transformerande tillväxtfaktor beta och fibroblasttillväxtfaktor har nyligen använts hos människor för behandling av vokalviktärrbildning 15-17 . NTF4 reglerar också NMJ effektivitet; Möss som saknar NTF4 visar demonterade NMJs 11 , 18 , 19 . Dessa studier leder till lovande effekter av behandlareT av åldrande laryngeala muskelstörningar och denervering med tillväxtfaktorer. Direktinjektionsbehandling till vävnaderna i vokalvecken är inte ovanligt hos människor. Till exempel används lokala injektioner av botulinumtoxin för närvarande som en effektiv behandling för neurologiska rörelsestörningar som påverkar musklerna i struphuvudet, såsom spasmodisk dysfoni och bilateral återkommande laryngeal-förlamning 20 , 21 . Hyaluronsyrahydrogel är en annan injicerbar, som används för att behandla vokalviktskramning och glottinsufficiens 22 , 23 . Injektionslaryngoplasti kan användas för att behandla en rad kommunikationsstörningar 24 . Dessa direkta injektionsmetoder håller lov att förbättra vokalfunktionen och svälja i åldrande populationer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Neurotrophin 4</td>
			<td>Pepro Tech</td>
			<td>450-04</td>
			<td>200ng in 50&#956;l</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alzet Osmotic Pump</td>
			<td>DURECT Corporation</td>
			<td>2001D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30&#176; endoscope</td>
			<td>Stoltz</td>
			<td>61029D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mm 30 gauge 100-&#956;l syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>84850 and 201812</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>saline (sodium chloride solution)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine hydrochloride</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>56344</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine hydrochloride</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>33198</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 G 5/8 needle</td>
			<td>Becton-Dickinson</td>
			<td>305901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>Becton-Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic ointment</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>8897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clippers</td>
			<td>Oster</td>
			<td>44-018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ethanol</td>
			<td>Decon</td>
			<td>2716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iodine (Betadine)</td>
			<td>Purdue Pharma L.P.</td>
			<td>606404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>heating pad</td>
			<td>Sunbeam</td>
			<td>731-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 nylon suture thread</td>
			<td>AD Surgical</td>
			<td>PMN-518R6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>crile hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13005-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>delicate suture tying forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11063-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>meloxicam</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>49756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>carprofen</td>
			<td>Merritt Veterinary Supplies</td>
			<td>148700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>antibiotic ointment</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>57110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>acepromizine Aceproject</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>3845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane Isothesia</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>50033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>induction box (anesthetizing box)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>50-0116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oxygen compressed tank</td>
			<td>Scott Gross</td>
			<td>UN1072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plexiglas platform</td>
			<td>Small Parts Inc (Amazon)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber tipped forceps</td>
			<td>Fine science tools rubber</td>
			<td>11075-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>liquid rubber for forceps above</td>
			<td>Lowe&#39;s</td>
			<td>42518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic spectula (BD syringe cut to length)</td>
			<td>Becton-Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>halogen light source rhino-laryngeal stroboscope</td>
			<td>Kay-Pentax</td>
			<td>RLS 9100 B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>video recorder</td>
			<td>Kay-Pentax</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S0389-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4417-100TAB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cryostat Mictotom HM525</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>HM 525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gill 1 hematoxylin</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10143-142</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon eosin-Y alcoholic</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>6766007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-sodium channel Nav1.5 antibody produced in rabbit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S0819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Texas red-X phalloidin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T7471</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>alpha- bungarotoxin alexa fluor 488 conjugate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>B-13422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal anaesthesia machine</td>
			<td>Smiths Medical</td>
			<td>CDS 9000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subcutaneous neurotrophin 4 infusion using osmotic pumps or direct muscular injection enhances aging rat laryngeal muscles

Laryngeal dysfunktion hos äldre är en viktig orsak till funktionshinder, från röststörningar till dysfagi och förlust av luftvägsskyddande reflexer. Få, om några, terapier existerar som riktar åldersrelaterad laryngeal muskel dysfunktion. Neurotropiner är involverade i muskelinnervation och differentiering av neuromuskulära korsningar (NMJ). Det anses att neurotrofiner förbättrar neuromuskulär överföring genom ökad frigöring av neurotransmittorer. De neuromuskulära förbindelserna (NMJ) blir mindre och mindre rikliga i åldrande råtta laryngeala muskler, med bevis på funktionell denervering. Vi undersökte effekterna av NTF4 för framtida klinisk användning som terapeutisk för att förbättra funktionen vid åldrande mänskliga larynxmuskler. Här tillhandahåller vi det detaljerade protokollet för systemisk applicering och direkt injektion av NTF4 för att undersöka förmågan att åldra råtta laryngeal muskel för att remodel som svar på NTF4 applikation. Vid denna metod fick råttor antingen NTF4 antingen systemiskt via oSmotisk pump eller genom direkt injektion genom vokalvecken. Laryngeala muskler disserades sedan och användes för histologisk undersökning av morfologi och åldersrelaterad denervering.

Råttorna avlivades efter 2 veckor av osmotisk pumpinfusion eller 1 vecka efter direkt injektion av NTF4. Larynger skördades, placerades i kryoskyddande medel (30% sackaros och 70% fosfatbuffrad saltlösning) och sedan seriellt snittad i 10 μm bredder med en kryostat. Åldrande larynxmuskler påverkas av administrering av NTF4 25 . Förutom unga och gamla råttor jämförde vi den injicerade och icke-injicerade sidan av thyroarytenoidmusklerna. Vanligtvis ser vi...

Watch this Scientific Journal Video about Subcutaneous Neurotrophin 4 Infusion Using Osmotic Pumps or Direct Muscular Injection Enhances Aging Rat Laryngeal Muscles at JoVE.com

Subcutaneous Neurotrophin 4 Infusion Using Osmotic Pumps or Direct Muscular Injection Enhances Aging Rat Laryngeal Muscles

Här presenterar vi ett protokoll för att beskriva användningen av neurotropin 4 (NTF4) systemiskt och direkt för att omforma råtta åldrande laryngeala muskler.

Subkutan neurotropin 4-infusion med hjälp av osmotiska pumpar eller direkt muskelsprutning förbättrar åldrande råtta larynxmuskler

Laryngeal dysfunction in the elderly is a major cause of disability, from voice disorders to dysphagia and loss of airway protective reflexes. Few, if ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation and Characterization of Satellite Cells from Rat Head Branchiomeric Muscles

Isolering och karakterisering av satellitceller från råtta Head Branchiomeric Muskler

Fibrosis and defective muscle regeneration can hamper the functional recovery of the soft palate muscles after cleft palate repair. This causes persistent ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Frozen Buffy Coats using Non-integrating Episomal Plasmids

Generering av inducerade pluripotenta stamceller från Frozen Buffy Coats använder icke-integrerande Episomalt plasmider

Somatic cells can be reprogrammed into induced pluripotent stem cells (iPSCs) by forcing the expression of four transcription factors (Oct-4, Sox-2, ...

Preparation of Rat Oligodendrocyte Progenitor Cultures and Quantification of Oligodendrogenesis Using Dual-infrared Fluorescence Scanning

Framställning av råtta Oligodendrocyte gångar kulturer och kvantifiering av Oligodendrogenesis Med dubbla infraröd fluorescens Scanning

Efficient oligodendrogenesis is the therapeutic goal of a number of areas of research including spinal cord injury, neonatal hypoxia, and demyelinating ...

Isolation and Differentiation of Adipose-Derived Stem Cells from Porcine Subcutaneous Adipose Tissues

Isolering och differentiering av Fett-Derived stamceller från svin subkutan fettvävnad

Obesity is an unconstrained worldwide epidemic. Unraveling molecular controls in adipose tissue development holds promise to treat obesity or diabetes. ...

Analysis of Zebrafish Kidney Development with Time-lapse Imaging Using a Dissecting Microscope Equipped for Optical Sectioning

Analys av zebrafisk njure utveckling med Time-lapse avbildning med ett dissektionsmikroskop Utrustad för optisk Sektione

In order to understand organogenesis, the spatial and temporal alterations that occur during development of tissues need to be recorded. The method ...

Quantifying Branching Density in Rat Mammary Gland Whole-mounts Using the Sholl Analysis Method

Kvantifiering av förgreningsdensitet i råtta Mammary Gland Whole-mounts med hjälp av Sholl analysmetoden

An increasing number of studies are utilizing the rodent mammary gland as an endpoint for assessing the developmental toxicity of a chemical exposure. The ...

Isolation of Type I and Type II Pericytes from Mouse Skeletal Muscles

Isolering av typ I och typ II pericyter från muskelsmuskler

Pericytes are perivascular multipotent cells that show heterogeneity in different organs or even within the same tissue. In skeletal muscles, there are at ...

Induction and Validation of Cellular Senescence in Primary Human Cells

Induktion och validering av cellulära åldras i primära mänskliga celler

Cellular senescence is a state of permanent cell cycle arrest activated in response to different damaging stimuli. Activation of cellular senescence is a ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualisera den noden och Notochordal plattan i Gastrulating musembryon som använder Scanning Electron Microscopy och hela Mount immunofluorescens

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Adult Zebrafish Injury Models to Study the Effects of Prednisolone in Regenerating Bone Tissue

Adult zebrafiskar skada modeller för att studera effekterna av prednisolon i regenererande benvävnad

Zebrafish are able to regenerate various organs, including appendages (fins) after amputation. This involves the regeneration of bone, which regrows ...