Name: induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells
Uploaded: 2017-05-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

وأيد هذا العمل جمعية ماكس بلانك.

1. إعداد الكهربائية المختصة V. بارايموليتيكوس الخلايا و إليكتروبوراتيون من الحمض النووي البلازميد في خلايا السباح ملاحظة: القسم التالي من بروتوكول يسمح لإعداد الخلايا الكهربائية المختصة وما يليه من إليكتروبوراتيون من الحمض ...

<ol>
	<li>McCarter, L., Hilmen, M., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flagellar+dynamometer+controls+swarmer+cell+differentiation+of+V.+parahaemolyticus.">Flagellar dynamometer controls swarmer cell differentiation of V. parahaemolyticus.</a> Cell. 54 (3), 345-351 (1988).</li><li>Kawagishi, I., Imagawa, M., Imae, Y., McCarter, L., Homma, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sodium-driven+polar+flagellar+motor+of+marine+Vibrio+as+the+mechanosensor+that+regulates+lateral+flagellar+expression.">The sodium-driven polar flagellar motor of marine Vibrio as the mechanosensor that regulates lateral flagellar expression.</a> Mol. Microbiol. 20 (4), 693-699 (1996).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+swarming+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Induction of swarming in Vibrio parahaemolyticus.</a> Arch. Microbiol. 101 (4), 357-363 (1974).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+temperature,+salts,+pH,+and+other+factors+on+the+development+of+peritrichous+flagella+in+Vibrio+alginolyticus.">Effect of temperature, salts, pH, and other factors on the development of peritrichous flagella in Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (3), 285-288 (1975).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+swarming+of+Vibrio+alginolyticus.">The mechanism of swarming of Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (1), 67-71 (1975).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Chodur, D. M., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+and+iron+regulate+swarming+and+type+III+secretion+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Calcium and iron regulate swarming and type III secretion in Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 192 (22), 6025-6038 (2010).</li><li>McCarter, L., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+regulation+of+swarmer+cell+differentiation+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Iron regulation of swarmer cell differentiation of Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 171 (2), 731-736 (1989).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Kustusch, R. J., Breheny, P. J., Weiss, D. S., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+sensing+in+Vibrio+parahaemolyticus+triggers+a+programme+of+gene+expression+that+promotes+colonization+and+virulence.">Surface sensing in Vibrio parahaemolyticus triggers a programme of gene expression that promotes colonization and virulence.</a> Mol. Microbiol. 79 (1), 240-263 (2011).</li><li>Heering, J., Ringgaard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+Localization+of+Chemotactic+Signaling+Arrays+during+the+Lifecycle+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Differential Localization of Chemotactic Signaling Arrays during the Lifecycle of Vibrio parahaemolyticus.</a> Front Microbiol. 7 (November), 1-12 (2016).</li><li>Cameron, T. A., Anderson-Furgeson, J., Zupan, J. R., Zik, J. J., Zambryski, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptidoglycan+synthesis+machinery+in+Agrobacterium+tumefaciens+during+unipolar+growth+and+cell+division.">Peptidoglycan synthesis machinery in Agrobacterium tumefaciens during unipolar growth and cell division.</a> mBio. 5 (3), (2014).</li><li>Development Core Team, R. F. F. S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R:+A+Language+and+Environment+for+Statistical+Computing.">R: A Language and Environment for Statistical Computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. 1, 2673 (2008).</li><li>Ringgaard, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ParP+prevents+dissociation+of+CheA+from+chemotactic+signaling+arrays+and+tethers+them+to+a+polar+anchor.">ParP prevents dissociation of CheA from chemotactic signaling arrays and tethers them to a polar anchor.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (2), E255-E264 (2014).</li><li>Ringgaard, S., Schirner, K., Davis, B. M., Waldor, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+family+of+ParA-like+ATPases+promotes+cell+pole+maturation+by+facilitating+polar+localization+of+chemotaxis+proteins.">A family of ParA-like ATPases promotes cell pole maturation by facilitating polar localization of chemotaxis proteins.</a> Genes Dev. 25, 1544-1555 (2011).</li><li>Vischer, N. O. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+age+dependent+concentration+of+Escherichia+coli+divisome+proteins+analyzed+with+ImageJ+and+ObjectJ.">Cell age dependent concentration of Escherichia coli divisome proteins analyzed with ImageJ and ObjectJ.</a> Front Microbiol. 6 (JUN), (2015).</li><li>Schneider, C. a., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat. Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Sliusarenko, O., Heinritz, J., Emonet, T., Jacobs-Wagner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput,+subpixel+precision+analysis+of+bacterial+morphogenesis+and+intracellular+spatio-temporal+dynamics.">High-throughput, subpixel precision analysis of bacterial morphogenesis and intracellular spatio-temporal dynamics.</a> Mol. Microbiol. 80 (3), 612-627 (2011).</li><li>Ducret, A., Quardokus, E. M., Brun, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicrobeJ,+a+tool+for+high+throughput+bacterial+cell+detection+and+quantitative+analysis.">MicrobeJ, a tool for high throughput bacterial cell detection and quantitative analysis.</a> Nat. Microbiol. 1, 16077 (2016).</li><li>Carpenter, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CellProfiler:+image+analysis+software+for+identifying+and+quantifying+cell+phenotypes.">CellProfiler: image analysis software for identifying and quantifying cell phenotypes.</a> Genome Biol. 7 (10), R100 (2006).</li><li>Morales-Soto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation,+Imaging,+and+Quantification+of+Bacterial+Surface+Motility+Assays.">Preparation, Imaging, and Quantification of Bacterial Surface Motility Assays.</a> J. Vis. Exp. (98), e52338 (2015).</li><li>Paintdakhi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oufti:+An+integrated+software+package+for+high-accuracy,+high-throughput+quantitative+microscopy+analysis.">Oufti: An integrated software package for high-accuracy, high-throughput quantitative microscopy analysis.</a> Mol. Microbiol. 99 (4), 767-777 (2016).</li><li>de Jong, I. G., Beilharz, K., Kuipers, O. P., Veening, J. -. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Cell+Imaging+of+Bacillus+subtilis+and+Streptococcus+pneumoniae+using+Automated+Time-lapse+Microscopy.">Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy.</a> J. Vis. Exp. (53), e1-e6 (2011).</li></ol>

هذه الورقة تقارير طريقة التصوير المجهري للخلايا بارايموليتيكوس V. بارايموليتيكوس ، تليها التحليلات المصب تهدف إلى حل وتحديد توطين تحت الخلوية وغيرها من الميزات من البروتينات فلورزنتلي المسمى درس. على الرغم من وجود العديد من الأدوات لمعالجة الصور المجهرية وتحل...

البكتيريا باستمرار تجربة التغييرات على البيئة الخارجية، وقد وضعت العديد من التقنيات لتغيير وتكييف سلوكهم وفقا لذلك. واحدة من هذه الآلية تنطوي على التمايز إلى أنواع الخلايا المتميزة التي تكمل بشكل أفضل البيئة المتغيرة. التمايز غالبا ما ينطوي على تغييرات كبيرة في تنظيم دورة الخلية، مورفولوجيا الخلية، والتنظيم الزماني الزماني للخلايا. أحد الكائنات الحية التي يمكن أن تخضع للتمايز هو فيبرايو بارايموليتيكوس . V. بارايموليتيكوس ينتمي إلى فيبريوناسي ، الذي هو عائلة من بروتيوباكتيريا التي تسكن عادة المياه العذبة أو المالحة. يتم توزيع فيبريوناسي على نطاق واسع في البيئة وتشمل العديد من الأنواع التي تسبب التهابات المسالك المعوية في البشر، بما في ذلك أيضا ضمة الكوليرا. باراهايموليتيكوس هو كائن حيوي و قادر على التفريق في نوعين مختلفين من الخلايا كرد فعل لاستيعاب التغيرات فيالوسط الخارجي. في البيئات المائية، فإنه موجود كخلايا السباح القصيرة على شكل قضيب مع ساق القطبية واحدة المتمركزة في القطب الخلية القديمة. عند الاتصال السطح، يتم تشغيل التمايز في خلية سرب. سوارمر تمايز الخلايا ينطوي على اثنين من التغييرات الرئيسية: سربار خلية التشكل من خلال تثبيط انقسام الخلايا، وتحريض نظام سوط الثاني. ويؤدي ذلك إلى تكوين خلية أسماك ذات شكل قضيب بيريتريشوس وممدود للغاية، والتي يمكن أن تستمر إما في نمط حياة القطيع، حيث تؤدي أحداث الانقسام إلى خلايا أسلاف أسلاف، أو تفرق في الخلف إلى خلايا السباح. وقد تم الإبلاغ عن عدة عوامل لتحفيز أو التأثير على التمايز أسوأ. ويبدو أن الحافز الأساسي يقودها ميكانوسنسينغ حيث V. بارايموليتيكوس يستخدم العلم القطبي كمستشعر اللمس الذي يكشف عن تثبيط دوران على اتصال السطح، ولكن هناك عدة عوامل أخرى تشارك كماحسنا 1 . في المختبر، دوران الساق القطبية يمكن أن يتم تثبيطها بشكل مصطنع بإضافة فيناميل، الذي يحجب دوران الصفيحة التي تحركها الصوديوم، مما يؤدي إلى تمايز الأسوار 2 . وعلاوة على ذلك، في دراسة سابقة، فيبريو ألجينوليتيكوس كان يحرض على سرب على وسائل الاعلام الصلبة عندما تم نشر الخلايا على وسط النمو في طبق بتري مختومة بشريط بلاستيكي واضح. ومنعت ورقة المرشح المشبعة بالقلويات من الاحتشاد في ظل هذه الظروف، مما يوحي بأن واحدا أو أكثر من الأحماض المتطايرة قد يكون ضالعا في تحريض الاحتكاك. وبالتالي، فإن ختم طبق بتري مع الشريط البلاستيك المرجح للسماح لتراكم الأحماض المتطايرة، التي شكلت من قبل منتجات ثانوية من التمثيل الغذائي الخلوي، داخل مساحة الرأس من لوحة. وقد تحقق نفس التأثير عندما أضيف H2 O 2 إلى وسط النمو في أطباق بيتري غير مختومة من أجل إنتاج الأحماض المتطايرة بشكل مصطنع عن طريق هدروليسينغ المكونات الإعلامية <supكلاس = &quot;كريف&quot;&gt; 3 ، 4 ، 5 . ومع ذلك، لا تزال هوية هذه الأحماض المتطايرة غير معروفة. وعلاوة على ذلك، فقد تبين أن توافر الفائض من الكالسيوم 6 والحد من الحديد 7 على حد سواء تعزيز التمايز أسوأ وانتشار على الأسطح الصلبة. يمكن تجويع الخلايا للحديد بإضافة مركب 2،2&#39;-بيبيريديل إلى وسط النمو، والذي ثبت أنه يؤثر على تمايز الأسوار 8 . يتم الآن تنفيذ العوامل المعروفة لتنظيم التمايز في تصميم بروتوكول الذي يحفز على نحو متكاثر V. التمايز بارايموليتيكوس في الخلايا الأبقار وانتشارها على السطوح أجار الصلبة. V. بارايموليتيكوس التمايز ينطوي على تغييرات كبيرة في تنظيم انقسام الخلايا، مورفولوجيا الخلوية، وتحديد المواقع من الآلات الجزيئية مثل فلاجيلأ و الكيميائي الأجهزة - العمليات التي تتطلب كل توطين محددة من البروتينات وفقا لدورة الخلية. وبالتالي، فإن القدرة على دراسة توطين الخلايا من هذه البروتينات أمر ضروري لفهم العمليات الخلوية المذكورة أعلاه. من أجل إجراء مثل هذه الدراسات مضان المجهري على خلايا واحدة مطلوب. هذا يمكن أن يكون تحديا بشكل خاص عندما خلايا التصوير الموجودة داخل السكان البكتيرية الكثيفة، كما هو الحال بالنسبة للخلايا أسوأ. كانت هناك محاولات للحث على التمايز أسوأ في وسائل الإعلام السائل، والتي يمكن أن تولد خلايا واحدة للدراسات المجهري. وعلى الرغم من أن على مستوى النسخي هذه الخلايا قد تسببت جزئيا برنامج تمايز أسراب، فإنها لا تخضع لنفس التغييرات المورفولوجية متميزة كما خلايا سربار متباينة تماما نمت على المتوسطة الصلبة 8 . تقدم هذه الورقة بروتوكول قوي وقابلة للتكرار من طريقة للحث على سربار مليرة لبنانية التمايز على سطح أجار. بروتوكول ينتج السكان من الخلايا التي يسهل الوصول إليها بسهولة أكثر سربار متاحة بسهولة للمجهر الخلية واحدة والتحليل اللاحق. وعلاوة على ذلك، بروتوكول تمكن دراسات التعريب من البروتينات فلورزنتلي المسمى في كل من السباح وأنواع الخلايا أسوأ (أقسام 1، 2، 3، 4). بالإضافة إلى ذلك، يصف البروتوكول سير العمل اللاحقة على كيفية معالجة وتحليل البيانات التي تم إنشاؤها من التجارب المجهري مضان، والذي يسمح للتحليل الديموغرافي للمجتمعات البكتيرية (القسم 5).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Media components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB-medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>X968.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Agar, granulated</td>
			<td>BD</td>
			<td>214510</td>
			<td>For preparation of LB agar with LB-medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Heart Infusion Agar</td>
			<td>BD</td>
			<td>244400</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose NEEO, ultra quality</td>
			<td>Roth</td>
			<td>2267.3</td>
			<td>For preparation of microscopy agarose pads</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Additives</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-arabinose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5118.3</td>
			<td>Used to induce pBAD derivatives</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2`-Bipyridyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D216305-25G</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5239.1</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin sodium salt</td>
			<td>Roth</td>
			<td>K029.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3886.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Standard recipe for Phosphate-buffered saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+) Sucrose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>4621.1</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3783.5</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 150x20mm with cams</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.1184.500</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kelvitron t (B 6420)</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for drying HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Pulser Xcell Microbial System</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>1652662</td>
			<td>Used for elctroporation of plasmid DNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Offline (version 7.7.5.0)</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy data analsis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells

القدرة على دراسة توطين الخلايا من البروتينات ضروري لفهم العديد من العمليات الخلوية. في المقابل، وهذا يتطلب القدرة على الحصول على خلايا واحدة للمجهر مضان، والتي يمكن أن تكون صعبة بشكل خاص عندما خلايا التصوير التي توجد داخل المجتمعات البكتيرية. على سبيل المثال، المسببة للأمراض البشرية فيبريو باراهايموليتيكوس موجود كخلايا السباح القصيرة على شكل قضيب في الظروف السائلة التي على سطح الاتصال التفريق في سوبوبولاتيون من خلايا أسد ممدود للغاية المتخصصة للنمو على الأسطح الصلبة. تقدم هذه الورقة طريقة لأداء تحليل خلية واحدة مضان المجهري من V. بارايموليتيكوس في دولتي التفاضلية. هذا البروتوكول استنساخا جدا يستحث التمايز من V. بارايموليتيكوس في الخلية الدافع حياة دورة ويسهل انتشارها على الأسطح الصلبة. تنتج هذه الطريقة مشاعل الخلايا المتمايزة الأيسر تمتد من tوقال انه حافة مستعمرة سرب. ومن الجدير بالذكر، في طرف جدا من سرب مشاعل، توجد خلايا أسوأ في طبقة واحدة من الخلايا، والذي يسمح لنقلها السهل إلى شريحة المجهر والتصوير المجهري مضان اللاحقة من خلايا واحدة. بالإضافة إلى ذلك، يتم عرض سير العمل لتحليل الصور للتمثيل الديمغرافي للمجتمعات البكتيرية. وكدليل على المبدأ، يتم وصف تحليل توطين الخلايا من الكيميائي يشير صفائف في السباح والخلايا الداعمة من V. بارايموليتيكوس.

تحريض التمايز وتوليد المستعمرات الشكل 1 يوفر مخططا من الخطوات الهامة التي ينطوي عليها إنتاج مستعمرات سرب من V. بارايموليتيكوس ( الشكل 1A-C ). وقد رصدت ثقافة السباح على سر...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

هذا البروتوكول يتيح المجهر خلية واحدة من فيبريو باربرايموليتيكوس السباح متميزة متميزة وخلايا أسوأ. وتنتج هذه الطريقة مجموعة من الخلايا الداعمة المتاحة بسهولة لتحليل خلية واحدة ويغطي إعداد الثقافات الخلية، تحريض التمايز سوبيرمر، وإعداد العينات، وتحليل الصور.

تحريض التمايز الخلوي والتصوير خلية واحدة من<em&gt; فيبرايو بارايموليتيكوس</em&gt; السباح و سوارمر الخلايا

The ability to study the intracellular localization of proteins is essential for the understanding of many cellular processes. In turn, this requires the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

استعمار Euprymna scolopes الحبار بواسطة الضمة fischeri</em

Specific bacteria are found in association with animal tissue1-5. Such host-bacterial associations (symbioses) can be detrimental (pathogenic), have no ...

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

الكمية عالي الإنتاجية الفحص السمسة وحيدة الخلية لخلايا T

Cancer immunotherapy can harness the specificity of  immune response to target and eliminate tumors. Adoptive cell therapy (ACT)  based on the adoptive ...

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

السريرية تطبيق<em&gt; الجمال النائم</em&gt; ومستضد تقديم الخلايا الاصطناعية لتعديل وراثيا خلايا T من دم الحبل السري والمحيطية

The potency of clinical-grade T cells can be improved by combining gene therapy with immunotherapy to engineer  a biologic product with the potential for ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

العزلة والتمايز TH17 من السذاجة CD4 T الخلايا اللمفاوية

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Cortical Actin Flow in T Cells Quantified by Spatio-temporal Image Correlation Spectroscopy of Structured Illumination Microscopy Data

القشرية أكتين تدفق في خلايا T كميا بواسطة المكانية والزمانية صورة الارتباط الطيفي للهيكلة الإضاءة المجهر البيانات

Filamentous-actin plays a crucial role in a majority of cell processes including motility and, in immune cells, the formation of a key cell-cell ...

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

تطوير أكثر حساسية وخصوصية اللونية آجار المتوسطة للكشف عن<em&gt; الضمة نظيرة الحالة للدم</em&gt; وغيره<em&gt; الضمة</em&gt; الأنواع

Foodborne infections in the US caused by Vibrio species have shown an upward trend. In the genus Vibrio, V. parahaemolyticus is responsible for the ...

Highly Multiplexed, Super-resolution Imaging of T Cells Using madSTORM

عالية متعددة، والتصوير فائقة الدقة من الخلايا T باستخدام مادستورم

Imaging heterogeneous cellular structures using single molecule localization microscopy has been hindered by inadequate localization precision and ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

التنمية والتحقق من جزيء واحد أولتراسينسيتيفي الصفيف الرقمي المرتبط بالانزيم مقايسة الممتز للبشرية انترفيرون-α

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...

Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding

تقييم الإجهاد الخلوية والتهاب في نويات الدماغ إفراز الاوكسيتوسين المنفصلة في الفئران حديثي الولادة قبل وبعد التغذية اللبأ الأولى

The goal of this protocol is to isolate oxytocin-receptor rich brain nuclei in the neonatal brain before and after first colostrum feeding. The expression ...

Functionalization of Atomic Force Microscope Cantilevers with Single-T Cells or Single-Particle for Immunological Single-Cell Force Spectroscopy

وظيفية من القوة الذرية مجهر Cantilevers مع خلايا واحدة تي أو الجسيمات واحدة لالمناعية أحادية الخلية قوة مطيافية

Atomic force microscopy based single cell force spectroscopy (AFM-SCFS) is a powerful tool for studying biophysical properties of living cells. This ...