Name: induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells
Uploaded: 2017-05-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Max Planck Society.

1. Fremstilling af elektrokompetente V. parahaemolyticusceller og elektroporation af plasmid-DNA i svømmerceller BEMÆRK: Følgende afsnit i protokollen tillader fremstilling af elektrokompetente celler og den efterfølgende elektroporation af plasmid-DNA i svømmerceller. Dette trin er vigtigt, hvis fluorescerende proteiner eksploderes ectopisk fra et plasmid. <ol><li> Strim ud V. parahaemolyticus celler fra en -80 ° C glycerol stamme på en frisk LB agar plad...

<ol>
	<li>McCarter, L., Hilmen, M., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flagellar+dynamometer+controls+swarmer+cell+differentiation+of+V.+parahaemolyticus.">Flagellar dynamometer controls swarmer cell differentiation of V. parahaemolyticus.</a> Cell. 54 (3), 345-351 (1988).</li><li>Kawagishi, I., Imagawa, M., Imae, Y., McCarter, L., Homma, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sodium-driven+polar+flagellar+motor+of+marine+Vibrio+as+the+mechanosensor+that+regulates+lateral+flagellar+expression.">The sodium-driven polar flagellar motor of marine Vibrio as the mechanosensor that regulates lateral flagellar expression.</a> Mol. Microbiol. 20 (4), 693-699 (1996).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+swarming+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Induction of swarming in Vibrio parahaemolyticus.</a> Arch. Microbiol. 101 (4), 357-363 (1974).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+temperature,+salts,+pH,+and+other+factors+on+the+development+of+peritrichous+flagella+in+Vibrio+alginolyticus.">Effect of temperature, salts, pH, and other factors on the development of peritrichous flagella in Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (3), 285-288 (1975).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+swarming+of+Vibrio+alginolyticus.">The mechanism of swarming of Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (1), 67-71 (1975).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Chodur, D. M., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+and+iron+regulate+swarming+and+type+III+secretion+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Calcium and iron regulate swarming and type III secretion in Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 192 (22), 6025-6038 (2010).</li><li>McCarter, L., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+regulation+of+swarmer+cell+differentiation+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Iron regulation of swarmer cell differentiation of Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 171 (2), 731-736 (1989).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Kustusch, R. J., Breheny, P. J., Weiss, D. S., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+sensing+in+Vibrio+parahaemolyticus+triggers+a+programme+of+gene+expression+that+promotes+colonization+and+virulence.">Surface sensing in Vibrio parahaemolyticus triggers a programme of gene expression that promotes colonization and virulence.</a> Mol. Microbiol. 79 (1), 240-263 (2011).</li><li>Heering, J., Ringgaard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+Localization+of+Chemotactic+Signaling+Arrays+during+the+Lifecycle+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Differential Localization of Chemotactic Signaling Arrays during the Lifecycle of Vibrio parahaemolyticus.</a> Front Microbiol. 7 (November), 1-12 (2016).</li><li>Cameron, T. A., Anderson-Furgeson, J., Zupan, J. R., Zik, J. J., Zambryski, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptidoglycan+synthesis+machinery+in+Agrobacterium+tumefaciens+during+unipolar+growth+and+cell+division.">Peptidoglycan synthesis machinery in Agrobacterium tumefaciens during unipolar growth and cell division.</a> mBio. 5 (3), (2014).</li><li>Development Core Team, R. F. F. S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R:+A+Language+and+Environment+for+Statistical+Computing.">R: A Language and Environment for Statistical Computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. 1, 2673 (2008).</li><li>Ringgaard, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ParP+prevents+dissociation+of+CheA+from+chemotactic+signaling+arrays+and+tethers+them+to+a+polar+anchor.">ParP prevents dissociation of CheA from chemotactic signaling arrays and tethers them to a polar anchor.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (2), E255-E264 (2014).</li><li>Ringgaard, S., Schirner, K., Davis, B. M., Waldor, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+family+of+ParA-like+ATPases+promotes+cell+pole+maturation+by+facilitating+polar+localization+of+chemotaxis+proteins.">A family of ParA-like ATPases promotes cell pole maturation by facilitating polar localization of chemotaxis proteins.</a> Genes Dev. 25, 1544-1555 (2011).</li><li>Vischer, N. O. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+age+dependent+concentration+of+Escherichia+coli+divisome+proteins+analyzed+with+ImageJ+and+ObjectJ.">Cell age dependent concentration of Escherichia coli divisome proteins analyzed with ImageJ and ObjectJ.</a> Front Microbiol. 6 (JUN), (2015).</li><li>Schneider, C. a., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat. Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Sliusarenko, O., Heinritz, J., Emonet, T., Jacobs-Wagner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput,+subpixel+precision+analysis+of+bacterial+morphogenesis+and+intracellular+spatio-temporal+dynamics.">High-throughput, subpixel precision analysis of bacterial morphogenesis and intracellular spatio-temporal dynamics.</a> Mol. Microbiol. 80 (3), 612-627 (2011).</li><li>Ducret, A., Quardokus, E. M., Brun, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicrobeJ,+a+tool+for+high+throughput+bacterial+cell+detection+and+quantitative+analysis.">MicrobeJ, a tool for high throughput bacterial cell detection and quantitative analysis.</a> Nat. Microbiol. 1, 16077 (2016).</li><li>Carpenter, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CellProfiler:+image+analysis+software+for+identifying+and+quantifying+cell+phenotypes.">CellProfiler: image analysis software for identifying and quantifying cell phenotypes.</a> Genome Biol. 7 (10), R100 (2006).</li><li>Morales-Soto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation,+Imaging,+and+Quantification+of+Bacterial+Surface+Motility+Assays.">Preparation, Imaging, and Quantification of Bacterial Surface Motility Assays.</a> J. Vis. Exp. (98), e52338 (2015).</li><li>Paintdakhi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oufti:+An+integrated+software+package+for+high-accuracy,+high-throughput+quantitative+microscopy+analysis.">Oufti: An integrated software package for high-accuracy, high-throughput quantitative microscopy analysis.</a> Mol. Microbiol. 99 (4), 767-777 (2016).</li><li>de Jong, I. G., Beilharz, K., Kuipers, O. P., Veening, J. -. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Cell+Imaging+of+Bacillus+subtilis+and+Streptococcus+pneumoniae+using+Automated+Time-lapse+Microscopy.">Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy.</a> J. Vis. Exp. (53), e1-e6 (2011).</li></ol>

Dette papir rapporterer en metode til mikroskopisk billeddannelse af V. parahaemolyticus swarmerceller efterfulgt af downstream-analyser beregnet til at løse og kvantificere den subcellulære lokalisering og andre træk ved de undersøgte fluorescensmærkede proteiner. Selv om der findes flere værktøjer til mikroskopi billedbehandling og analyse 14 , 15 , 16 , 17 , <sup ...

Bakterier oplever konstant ændringer i deres ydre miljø og har udviklet flere teknikker til at ændre og tilpasse deres adfærd i overensstemmelse hermed. En sådan mekanisme indebærer differentiering i forskellige celletyper, der bedre supplerer det ændrede miljø. Differentiering involverer ofte store ændringer i reguleringen af ​​cellecyklussen, cellemorfologi og den spatiotemporale organisation af cellerne. En organisme der kan undergå differentiering er Vibrio parahaemolyticus . V. parahaemolyticus tilhører Vibrionaceae , som er en familie af proteobakterier, der normalt beboer frisk eller saltvand. Vibrionaceae er bredt fordelt i miljøet og omfatter flere arter, der forårsager intestinale infektioner hos mennesker, også inklusive Vibrio cholerae. V. Parahaemolyticus er en dimorf organisme og er i stand til at differentiere i to forskellige celletyper som et svar for at imødekomme ændringer i detsEksternt miljø. I vandige omgivelser eksisterer den som en kort stangformet svømmercelle med et enkelt polært flagellum placeret ved den gamle cellepæl. Ved overfladekontakt udløses differentiering i en sværmercelle. Swarmer celledifferentiering involverer to store ændringer: swarmercellemorfogenese gennem inhibering af celledeling og induktion af et andet flagella system. Dette resulterer i dannelsen af ​​en peritrich og stærkt forlænget stangformet sværmercelle, som enten kan fortsætte sværmerens livsstil, hvor divisionshændelser resulterer i afkom swarmerceller eller alternativt differentierer tilbage til svømmerceller. Flere faktorer er blevet rapporteret at inducere eller påvirke swarmer differentiering. Den primære stimulus ser ud til at være drevet af mekanosensing, hvor V. parahaemolyticus bruger polar flagellum som en taktil sensor, som detekterer inhibering af rotationen ved overfladekontakt, men flere andre faktorer er involveret somBrønd 1 I laboratoriet kan rotation af det polære flagellum inhiberes kunstigt ved tilsætning af phenamil, som blokerer den natriumkanal-drevne flagellære rotation og derved fremkalde sværmer differentiering 2 . Desuden blev Vibrio alginolyticus i et tidligere forsøg induceret at sværmme på fast medium, når celler blev formeret på vækstmedium i en Petri-skål forseglet med klart plastikbånd. Alkalisk-mættet filterpapir forhindret sværmer under disse betingelser, hvilket tyder på, at en eller flere flygtige syrer kan være involveret i induktion af sværmer. Således forsegles petriskålen med plastikbånd, der sandsynligvis er tilladt for akkumulering af flygtige syrer, dannet som biprodukter af cellulær metabolisme inden for pladens hovedplade. Den samme effekt blev opnået, når H202 blev tilsat til vækstmediet i uforseglede petriskåle med henblik på kunstigt at fremstille flygtige syrer ved hydrolysering af mediekomponenter <supClass = &quot;xref&quot;&gt; 3 , 4 , 5 . Ikke desto mindre er identiteten af ​​sådanne flygtige syrer forblev ukendt. Det har desuden vist sig, at overskydende tilgængelighed af calcium 6 og jernbegrænsning 7 begge forøger sværmer differentiering og proliferation over faste overflader. Celler kan sultes for jern ved at tilsætte forbindelsen 2,2&#39;-bipyridyl til vækstmediet, som har vist sig at påvirke swarmer differentiering 8 . De faktorer, der er kendt for at regulere differentiering, implementeres nu i udformningen af ​​en protokol, som reproducerbart inducerer V. parahaemolyticus differentiering i sværmerceller og deres proliferation på faste agaroverflader. V. parahaemolyticus differentiering indebærer store ændringer i reguleringen af ​​celledeling, cellulær morfologi og positionering af makromolekylære maskiner såsom flagellA og chemotaxis apparater - processer, som alle kræver den specifikke lokalisering af proteiner i overensstemmelse med cellecyklussen. Evnen til at studere den intracellulære lokalisering af sådanne proteiner er således afgørende for forståelsen af ​​de ovennævnte cellulære processer. For at udføre sådanne undersøgelser kræves fluorescensmikroskopi på enkeltceller. Dette kan være særligt udfordrende, når billeddannelsesceller findes inden for tætte bakteriepopulationer, som det er tilfældet med sværmerceller. Der har været forsøg på at fremkalde sværmer differentiering i flydende medier, som potentielt kunne danne enkeltceller til mikroskopi undersøgelser. Og selvom disse celler på et transkriptionsniveau delvis har induceret swarmer-differentieringsprogrammet, undergår de ikke de samme særskilte morfologiske forandringer som fuldt differentierede swarmerceller dyrket på fast medium 8 . Dette papir tilbyder en robust og reproducerbar protokol for en metode til at inducere sværmerLl differentiering på en agaroverflade. Protokollen producerer en population af let tilgængelige sværmerceller, der er tilgængelige for enkeltcellemikroskopi og efterfølgende analyse. Desuden muliggør protokollen lokaliseringsstudier af fluorescensmærkede proteiner i både svømmer- og sværmercelletyperne (sektioner 1, 2, 3, 4). Desuden beskriver protokollen den efterfølgende arbejdsgang om, hvordan man behandler og analyserer de genererede data fra fluorescensmikroskopi eksperimenter, som muliggør demografisk analyse af bakterielle samfund (afsnit 5).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Media components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB-medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>X968.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Agar, granulated</td>
			<td>BD</td>
			<td>214510</td>
			<td>For preparation of LB agar with LB-medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Heart Infusion Agar</td>
			<td>BD</td>
			<td>244400</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose NEEO, ultra quality</td>
			<td>Roth</td>
			<td>2267.3</td>
			<td>For preparation of microscopy agarose pads</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Additives</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-arabinose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5118.3</td>
			<td>Used to induce pBAD derivatives</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2`-Bipyridyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D216305-25G</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5239.1</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin sodium salt</td>
			<td>Roth</td>
			<td>K029.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3886.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Standard recipe for Phosphate-buffered saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+) Sucrose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>4621.1</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3783.5</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 150x20mm with cams</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.1184.500</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kelvitron t (B 6420)</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for drying HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Pulser Xcell Microbial System</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>1652662</td>
			<td>Used for elctroporation of plasmid DNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Offline (version 7.7.5.0)</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy data analsis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells

Evnen til at studere intracellulær lokalisering af proteiner er afgørende for forståelsen af ​​mange cellulære processer. Til gengæld kræver dette evnen til at opnå enkelte celler til fluorescensmikroskopi, hvilket kan være særligt udfordrende, når billeddannende celler, som eksisterer inden for bakterielle samfund. For eksempel eksisterer det humane patogen Vibrio parahaemolyticus som korte stavformede svømmerceller i flydende forhold, som ved overfladekontakt differentieres i en subpopulation af stærkt langstrakte sværmerceller specialiseret til vækst på faste overflader. Dette papir præsenterer en metode til at udføre single cell fluorescensmikroskopi analyse af V. parahaemolyticus i sine to differentierede tilstande. Denne protokol inducerer meget reproducerbar differentiering af V. parahaemolyticus i en livscyklus for sværmerceller og letter deres spredning over faste overflader. Fremgangsmåden frembringer flares af differentierede swarmerceller, der strækker sig fra tHan kant af sværm-koloni. Især i spidsen af ​​sværgflekserne findes sværmerceller i et enkelt lag af celler, hvilket muliggør deres nemme overførsel til et mikroskopglas og efterfølgende fluorescensmikroskopi afbildning af enkeltceller. Derudover er workflow af billedanalyse til demografisk repræsentation af bakterielle samfund præsenteret. Som et principprincip beskrives analysen af ​​den intracellulære lokalisering af kemotaxis-signaleringsarrayer i svømmer- og svømmerceller af V. parahaemolyticus.

Induktion af differentiering og generation af sværmende kolonier Figur 1 giver et skema over de vigtige trin involveret i fremstilling af sværmende kolonier af V. parahaemolyticus ( figur 1A-C ). En svømmerkultur blev spottet på swarm-agar og inkuberet ved 24 ° C, hvilket inducerede sværmer differentiering og proliferation over den faste agaroverflade. Et repræsentativt...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Denne protokol muliggør enkeltcellemikroskopi af de forskelligt adskilte Vibrio parahaemolyticus svømmer- og sværmerceller. Fremgangsmåden frembringer en population af swarmerceller, der er let tilgængelige til enkeltcelleanalyse og dækker fremstilling af cellekulturer, induktion af swarmer differentiering, prøvepræparation og billedanalyse.

Induktion af celledifferentiering og single cell imaging af<em&gt; Vibrio parahaemolyticus</em&gt; Svømmer og sværmerceller

The ability to study the intracellular localization of proteins is essential for the understanding of many cellular processes. In turn, this requires the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Kolonisering af Euprymna scolopes Squid ved Vibrio fischeri</em

Specific bacteria are found in association with animal tissue1-5. Such host-bacterial associations (symbioses) can be detrimental (pathogenic), have no ...

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Kvantitativ Højkapacitetsforskning encellede cytotoksicitetsassay for T-celler

Cancer immunotherapy can harness the specificity of  immune response to target and eliminate tumors. Adoptive cell therapy (ACT)  based on the adoptive ...

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Klinisk anvendelse af<em&gt; Tornerose</em&gt; Artificial og antigen-præsenterende celler til genetisk at modificere T-celler fra perifert og navlestrengsblod

The potency of clinical-grade T cells can be improved by combining gene therapy with immunotherapy to engineer  a biologic product with the potential for ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

Isolering og Th17 Differentiering af Naïve CD4 T-lymfocytter

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Cortical Actin Flow in T Cells Quantified by Spatio-temporal Image Correlation Spectroscopy of Structured Illumination Microscopy Data

Kortikal Actin Flow i T-celler kvantificeret ved Spatio-temporale billede Korrelation spektroskopi af Struktureret Illumination Microscopy data

Filamentous-actin plays a crucial role in a majority of cell processes including motility and, in immune cells, the formation of a key cell-cell ...

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Udvikling af en mere følsom og specifik Chromogenic Agar Medium til detektion af<em&gt; Vibrio parahaemolyticus</em&gt; Og Andet<em&gt; Vibrio</em&gt; Arter

Foodborne infections in the US caused by Vibrio species have shown an upward trend. In the genus Vibrio, V. parahaemolyticus is responsible for the ...

Highly Multiplexed, Super-resolution Imaging of T Cells Using madSTORM

Meget multiplexeret, superopløselig billeddannelse af T-celler ved hjælp af madSTORM

Imaging heterogeneous cellular structures using single molecule localization microscopy has been hindered by inadequate localization precision and ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

Udvikling og validering af et Ultrasensitive enkelt molekyle Array Digital enzym-forbundet Immunosorbent Assay for menneskelige Interferon-α

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...

Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding

Vurdering af cellulært Stress og Inflammation i diskrete Oxytocin-secernerende hjernen kerner i Neonatal rotten før og efter første råmælk fodring

The goal of this protocol is to isolate oxytocin-receptor rich brain nuclei in the neonatal brain before and after first colostrum feeding. The expression ...

Functionalization of Atomic Force Microscope Cantilevers with Single-T Cells or Single-Particle for Immunological Single-Cell Force Spectroscopy

Funktionalisering af atomkraften mikroskop Cantihåndtag med enkelt-T-celler eller enkelt-partikel for immunologisk enkelt celle kraft spektroskopi

Atomic force microscopy based single cell force spectroscopy (AFM-SCFS) is a powerful tool for studying biophysical properties of living cells. This ...