Name: induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells
Uploaded: 2017-05-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Max Planck Society.

1. Fremstilling av elektrokompetente V. parahaemolyticusceller og elektroporering av plasmid-DNA i svømmerceller MERK: Følgende del av protokollen tillater fremstilling av elektrokompetente celler og påfølgende elektroporation av plasmid-DNA i svømmerceller. Dette trinnet er viktig hvis fluorescerende proteiner eksploderes ectopisk fra et plasmid. <ol><li> Strek ut V. parahaemolyticus- celler fra en -80 ° C glycerol-stamme på en frisk LB-agarplate innehold...

<ol>
	<li>McCarter, L., Hilmen, M., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flagellar+dynamometer+controls+swarmer+cell+differentiation+of+V.+parahaemolyticus.">Flagellar dynamometer controls swarmer cell differentiation of V. parahaemolyticus.</a> Cell. 54 (3), 345-351 (1988).</li><li>Kawagishi, I., Imagawa, M., Imae, Y., McCarter, L., Homma, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sodium-driven+polar+flagellar+motor+of+marine+Vibrio+as+the+mechanosensor+that+regulates+lateral+flagellar+expression.">The sodium-driven polar flagellar motor of marine Vibrio as the mechanosensor that regulates lateral flagellar expression.</a> Mol. Microbiol. 20 (4), 693-699 (1996).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+swarming+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Induction of swarming in Vibrio parahaemolyticus.</a> Arch. Microbiol. 101 (4), 357-363 (1974).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+temperature,+salts,+pH,+and+other+factors+on+the+development+of+peritrichous+flagella+in+Vibrio+alginolyticus.">Effect of temperature, salts, pH, and other factors on the development of peritrichous flagella in Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (3), 285-288 (1975).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+swarming+of+Vibrio+alginolyticus.">The mechanism of swarming of Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (1), 67-71 (1975).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Chodur, D. M., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+and+iron+regulate+swarming+and+type+III+secretion+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Calcium and iron regulate swarming and type III secretion in Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 192 (22), 6025-6038 (2010).</li><li>McCarter, L., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+regulation+of+swarmer+cell+differentiation+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Iron regulation of swarmer cell differentiation of Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 171 (2), 731-736 (1989).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Kustusch, R. J., Breheny, P. J., Weiss, D. S., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+sensing+in+Vibrio+parahaemolyticus+triggers+a+programme+of+gene+expression+that+promotes+colonization+and+virulence.">Surface sensing in Vibrio parahaemolyticus triggers a programme of gene expression that promotes colonization and virulence.</a> Mol. Microbiol. 79 (1), 240-263 (2011).</li><li>Heering, J., Ringgaard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+Localization+of+Chemotactic+Signaling+Arrays+during+the+Lifecycle+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Differential Localization of Chemotactic Signaling Arrays during the Lifecycle of Vibrio parahaemolyticus.</a> Front Microbiol. 7 (November), 1-12 (2016).</li><li>Cameron, T. A., Anderson-Furgeson, J., Zupan, J. R., Zik, J. J., Zambryski, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptidoglycan+synthesis+machinery+in+Agrobacterium+tumefaciens+during+unipolar+growth+and+cell+division.">Peptidoglycan synthesis machinery in Agrobacterium tumefaciens during unipolar growth and cell division.</a> mBio. 5 (3), (2014).</li><li>Development Core Team, R. F. F. S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R:+A+Language+and+Environment+for+Statistical+Computing.">R: A Language and Environment for Statistical Computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. 1, 2673 (2008).</li><li>Ringgaard, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ParP+prevents+dissociation+of+CheA+from+chemotactic+signaling+arrays+and+tethers+them+to+a+polar+anchor.">ParP prevents dissociation of CheA from chemotactic signaling arrays and tethers them to a polar anchor.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (2), E255-E264 (2014).</li><li>Ringgaard, S., Schirner, K., Davis, B. M., Waldor, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+family+of+ParA-like+ATPases+promotes+cell+pole+maturation+by+facilitating+polar+localization+of+chemotaxis+proteins.">A family of ParA-like ATPases promotes cell pole maturation by facilitating polar localization of chemotaxis proteins.</a> Genes Dev. 25, 1544-1555 (2011).</li><li>Vischer, N. O. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+age+dependent+concentration+of+Escherichia+coli+divisome+proteins+analyzed+with+ImageJ+and+ObjectJ.">Cell age dependent concentration of Escherichia coli divisome proteins analyzed with ImageJ and ObjectJ.</a> Front Microbiol. 6 (JUN), (2015).</li><li>Schneider, C. a., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat. Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Sliusarenko, O., Heinritz, J., Emonet, T., Jacobs-Wagner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput,+subpixel+precision+analysis+of+bacterial+morphogenesis+and+intracellular+spatio-temporal+dynamics.">High-throughput, subpixel precision analysis of bacterial morphogenesis and intracellular spatio-temporal dynamics.</a> Mol. Microbiol. 80 (3), 612-627 (2011).</li><li>Ducret, A., Quardokus, E. M., Brun, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicrobeJ,+a+tool+for+high+throughput+bacterial+cell+detection+and+quantitative+analysis.">MicrobeJ, a tool for high throughput bacterial cell detection and quantitative analysis.</a> Nat. Microbiol. 1, 16077 (2016).</li><li>Carpenter, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CellProfiler:+image+analysis+software+for+identifying+and+quantifying+cell+phenotypes.">CellProfiler: image analysis software for identifying and quantifying cell phenotypes.</a> Genome Biol. 7 (10), R100 (2006).</li><li>Morales-Soto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation,+Imaging,+and+Quantification+of+Bacterial+Surface+Motility+Assays.">Preparation, Imaging, and Quantification of Bacterial Surface Motility Assays.</a> J. Vis. Exp. (98), e52338 (2015).</li><li>Paintdakhi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oufti:+An+integrated+software+package+for+high-accuracy,+high-throughput+quantitative+microscopy+analysis.">Oufti: An integrated software package for high-accuracy, high-throughput quantitative microscopy analysis.</a> Mol. Microbiol. 99 (4), 767-777 (2016).</li><li>de Jong, I. G., Beilharz, K., Kuipers, O. P., Veening, J. -. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Cell+Imaging+of+Bacillus+subtilis+and+Streptococcus+pneumoniae+using+Automated+Time-lapse+Microscopy.">Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy.</a> J. Vis. Exp. (53), e1-e6 (2011).</li></ol>

Dette papiret rapporterer en metode for mikroskopisk avbildning av V. parahaemolyticus swarmersceller, etterfulgt av nedstrømsanalyser beregnet på å løse og kvantifisere subcellulær lokalisering og andre trekk ved de studerte fluorescensmerkede proteiner. Selv om flere verktøy eksisterer for mikroskopi bildebehandling og analyse 14 , 15 , 16 , 17 , 1...

Bakterier opplever hele tiden endringer i deres ytre miljø og har utviklet flere teknikker for å endre og tilpasse deres oppførsel tilsvarende. En slik mekanisme innebærer differensiering i forskjellige celletyper som bedre utfyller det forandrede miljøet. Differensiering innebærer ofte store endringer i reguleringen av cellesyklusen, cellemorfologi og spatiotemporal organisering av cellene. En organisme som kan gjennomgå differensiering er Vibrio parahaemolyticus . V. parahaemolyticus tilhører Vibrionaceae , som er en familie av proteobakterier som vanligvis lever i frisk eller saltvann. Vibrionaceae er utbredt i miljøet og inkluderer flere arter som forårsaker tarmkanalinfeksjoner hos mennesker, også inkludert Vibrio cholerae. V. Parahaemolyticus er en dimorf organisme og er i stand til å skille seg inn i to forskjellige celletyper som et svar for å imøtekomme endringer i detsEksternt miljø. I vandige miljøer eksisterer den som en kort stavformet svømmercelle med en enkelt polar flagellum plassert ved den gamle cellepolen. Ved overflatekontakt utløses differensiering i en sværmercelle. Swarmercelle-differensiering innebærer to store endringer: svovelcellemorfogenese gjennom inhibering av celledeling, og induksjon av et andre flagellasystem. Dette resulterer i dannelsen av en peritrichøs og langstrakt stangformet sværmercelle, som enten kan fortsette sværmerens livsstil, hvor delingshendelser resulterer i avkomme swarmerceller, eller alternativt differensiere tilbake til svømmerceller. Flere faktorer har blitt rapportert å indusere eller påvirke swarmer differensiering. Den primære stimulansen ser ut til å være drevet av mekanosensing hvor V. parahaemolyticus bruker polar flagellum som en taktil sensor som påviser inhibering av rotasjonen ved overflatekontakt, men flere andre faktorer er involvert somBrønn 1 . I laboratoriet kan rotasjon av det polære flagellum inhiberes kunstig ved tilsetning av fenamil, som blokkerer den natriumkanal-drevne flagellære rotasjonen, og derved fremkaller sværmerdifferensiering 2 . Videre ble i en tidligere studie indusert Vibrio alginolyticus til å svømme på fast medium når celler ble forplantet på vekstmedium i en Petri-skål forseglet med klart plastbånd. Alkali-mettet filterpapir forhindret å swarming under disse forholdene, og dermed foreslå at en eller flere flyktige syrer kan være involvert i induksjon av swarming. Således forsegler Petri-skålen med plastbånd som sannsynligvis er tillatt for akkumulering av flyktige syrer, dannet som biprodukter av cellemetabolismen, innenfor platens hovedområde. Den samme effekt ble oppnådd når H202 ble tilsatt til vekstmediet i uforseglede petriskål for å kunstig fremstille flyktige syrer ved hydrolysering av mediekomponenter <supClass = &quot;xref&quot;&gt; 3 , 4 , 5 . Likevel er identiteten til slike flyktige syrer ukjent. Videre har det vist seg at overskytende tilgjengeligheten av kalsium 6 og jernbegrensning 7 begge forbedrer svarte-differensiering og spredning over faste overflater. Celler kan sultes for jern ved å tilsette forbindelsen 2,2&#39;-Bipyridyl til vekstmediet, som har vist seg å påvirke svarte-differensiering 8 . Faktorene som er kjent for å regulere differensiering, implementeres nå i utformingen av en protokoll som reproduserbart forårsaker V. parahaemolyticus- differensiering i sværmerceller og deres spredning på faste agaroverflater. V. parahaemolyticus-differensiering innebærer store endringer i reguleringen av celledeling, cellemorfologi og posisjonering av makromolekylære maskiner som flagellA og kjemotaksisapparater - prosesser som alle krever spesifikk lokalisering av proteiner i samsvar med cellesyklusen. Dermed er evnen til å studere intracellulær lokalisering av slike proteiner avgjørende for forståelsen av de nevnte cellulære prosesser. For å utføre slike studier er det nødvendig med fluorescensmikroskopi på enkeltceller. Dette kan være spesielt utfordrende når avbildningsceller som finnes i tette bakteriepopulasjoner, som det er tilfelle for sværmerceller. Det har vært forsøk på å indusere sværmerdifferensiering i flytende medier, som potensielt kan generere enkeltceller for mikroskopi-studier. Og selv om disse cellene på et transkripsjonsnivå delvis har indusert swarmer-differensieringsprogrammet, gjennomgår de ikke de samme tydelige morfologiske forandringene som fullt differensierte svømmerceller dyrket på fast medium 8 . Dette papiret gir en robust og reproducerbar protokoll av en metode for å indusere sværmerLl differensiering på en agaroverflate. Protokollen produserer en populasjon av lett tilgjengelige swarmersceller som er lett tilgjengelige for enkeltcellemikroskopi og etterfølgende analyse. Videre muliggjør protokollen lokaliseringsstudier av fluorescensmerkede proteiner i både svømmer- og svømmercelletyper (avsnitt 1, 2, 3, 4). I tillegg beskriver protokollen den etterfølgende arbeidsflyten på hvordan å behandle og analysere de genererte dataene fra fluorescensmikroskopieksperimenter, noe som muliggjør demografisk analyse av bakterielle samfunn (seksjon 5).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Media components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB-medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>X968.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Agar, granulated</td>
			<td>BD</td>
			<td>214510</td>
			<td>For preparation of LB agar with LB-medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Heart Infusion Agar</td>
			<td>BD</td>
			<td>244400</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose NEEO, ultra quality</td>
			<td>Roth</td>
			<td>2267.3</td>
			<td>For preparation of microscopy agarose pads</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Additives</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-arabinose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5118.3</td>
			<td>Used to induce pBAD derivatives</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2`-Bipyridyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D216305-25G</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5239.1</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin sodium salt</td>
			<td>Roth</td>
			<td>K029.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3886.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Standard recipe for Phosphate-buffered saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+) Sucrose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>4621.1</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3783.5</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 150x20mm with cams</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.1184.500</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kelvitron t (B 6420)</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for drying HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Pulser Xcell Microbial System</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>1652662</td>
			<td>Used for elctroporation of plasmid DNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Offline (version 7.7.5.0)</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy data analsis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells

Evnen til å studere intracellulær lokalisering av proteiner er avgjørende for forståelsen av mange cellulære prosesser. I sin tur krever dette evnen til å skaffe enkeltceller for fluorescensmikroskopi, noe som kan være spesielt utfordrende når avbildningsceller som finnes i bakterielle samfunn. For eksempel eksisterer det humane patogenet Vibrio parahaemolyticus som korte stavformede svømmerceller i flytende forhold som ved overflatekontakt skiller seg inn i en delpopulasjon av svært langstrakte svømmerceller spesialisert for vekst på faste overflater. Dette papiret presenterer en metode for å utføre single cell fluorescensmikroskopi analyse av V. parahaemolyticus i sine to differensialtilstander. Denne protokollen induserer meget differensiering av V. parahaemolyticus til en livscykel i svovelceller og letter deres spredning over faste overflater. Metoden produserer flammer av differensierte svømmerceller som strekker seg fra tHan kanten av svømmekolonien. Spesielt, i spissen av swarm-fakkene, finnes svømmerceller i et enkelt lag av celler, noe som muliggjør enkel overføring til et mikroskopdia og etterfølgende fluorescensmikroskopi av enkeltceller. I tillegg presenteres arbeidsflyten av bildeanalyse for demografisk representasjon av bakterielle samfunn. Som prinsippsbestemmelse er analysen av intracellulær lokalisering av kjemotaksis-signaleringsarrayer i svømmer- og svovelceller av V. parahaemolyticus beskrevet.

Induksjon av differensiering og generering av swarming kolonier Figur 1 gir et skjema over de viktige trinnene som er involvert i å produsere sværmende kolonier av V. parahaemolyticus ( Figur 1A-C ). En svømmerkultur ble oppdaget på swarm-agar og inkubert ved 24 ° C, hvilket induserte svovel-differensiering og proliferasjon over den faste agaroverflaten. Et representativt...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Denne protokollen muliggjør singlecellemikroskopi av de differensielt forskjellige Vibrio parahaemolyticus svømmer- og svømmerceller. Metoden produserer en populasjon av swarmersceller som er lett tilgjengelige for enkelcelleanalyser og dekker fremstilling av cellekulturer, induksjon av swarmer-differensiering, prøvepreparasjon og bildeanalyse.

Induksjon av Cellulær Differensiering og Single Cell Imaging of<em&gt; Vibrio parahaemolyticus</em&gt; Svømmer- og svovelceller

The ability to study the intracellular localization of proteins is essential for the understanding of many cellular processes. In turn, this requires the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Kolonisering av Euprymna scolopes Squid av Vibrio fischeri</em

Specific bacteria are found in association with animal tissue1-5. Such host-bacterial associations (symbioses) can be detrimental (pathogenic), have no ...

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Kvantitativ Høy gjennomstrømming encellede Cytotoksisitet analysen for T celler

Cancer immunotherapy can harness the specificity of  immune response to target and eliminate tumors. Adoptive cell therapy (ACT)  based on the adoptive ...

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Klinisk anvendelse av<em&gt; Sleeping Beauty</em&gt; Og kunstig antigenpresenterende celler å genmodifisere T celler fra perifert og navlestrengsblod

The potency of clinical-grade T cells can be improved by combining gene therapy with immunotherapy to engineer  a biologic product with the potential for ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

Isolasjon og Th17 Differensiering av naive CD4 T-lymfocytter

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Cortical Actin Flow in T Cells Quantified by Spatio-temporal Image Correlation Spectroscopy of Structured Illumination Microscopy Data

Kortikal Actin Flow i T-celler kvantifisert ved Spatio-temp Bilde korrelasjon spektroskopi av Strukturert Illumination Mikros data

Filamentous-actin plays a crucial role in a majority of cell processes including motility and, in immune cells, the formation of a key cell-cell ...

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Utvikling av en mer sensitiv og spesifikk kromogen Agar Medium for deteksjon av<em&gt; Vibrio parahaemolyticus</em&gt; Og annet<em&gt; Vibrio</em&gt; Arter

Foodborne infections in the US caused by Vibrio species have shown an upward trend. In the genus Vibrio, V. parahaemolyticus is responsible for the ...

Highly Multiplexed, Super-resolution Imaging of T Cells Using madSTORM

Meget multiplexert, superoppløselig bildebehandling av T-celler ved hjelp av madSTORM

Imaging heterogeneous cellular structures using single molecule localization microscopy has been hindered by inadequate localization precision and ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

Utvikling og validering av en Ultrasensitive ett molekyl Array Digital enzym knyttet Immunosorbent analysen for menneskelig Interferon-α

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...

Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding

Vurdere mobilnettet Stress og betennelser i diskret Oxytocin-sekresjon hjernen kjerner i Neonatal rotte før og etter første Colostrum fôring

The goal of this protocol is to isolate oxytocin-receptor rich brain nuclei in the neonatal brain before and after first colostrum feeding. The expression ...

Functionalization of Atomic Force Microscope Cantilevers with Single-T Cells or Single-Particle for Immunological Single-Cell Force Spectroscopy

Funksjonalisering av Atomic Force mikroskop utkragning med single-T celler eller single-partikkel for immunologiske single-Cell Force spektroskopi

Atomic force microscopy based single cell force spectroscopy (AFM-SCFS) is a powerful tool for studying biophysical properties of living cells. This ...