Name: induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells
Uploaded: 2017-05-15T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Detta arbete stöddes av Max Planck Society.

1. Framställning av elektrokompetenta V. parahaemolyticus- celler och elektroporation av plasmid-DNA i simmarceller OBS: Följande avsnitt i protokollet möjliggör framställning av elektrokompetenta celler och efterföljande elektroporation av plasmid-DNA i simmarceller. Detta steg är viktigt om fluorescerande proteiner uttrycks ektopiskt från en plasmid. <ol><li> Stryk ut V. parahaemolyticus- celler från ett -80 ° C glycerollager på en ny LB-aga...

<ol>
	<li>McCarter, L., Hilmen, M., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flagellar+dynamometer+controls+swarmer+cell+differentiation+of+V.+parahaemolyticus.">Flagellar dynamometer controls swarmer cell differentiation of V. parahaemolyticus.</a> Cell. 54 (3), 345-351 (1988).</li><li>Kawagishi, I., Imagawa, M., Imae, Y., McCarter, L., Homma, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sodium-driven+polar+flagellar+motor+of+marine+Vibrio+as+the+mechanosensor+that+regulates+lateral+flagellar+expression.">The sodium-driven polar flagellar motor of marine Vibrio as the mechanosensor that regulates lateral flagellar expression.</a> Mol. Microbiol. 20 (4), 693-699 (1996).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+swarming+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Induction of swarming in Vibrio parahaemolyticus.</a> Arch. Microbiol. 101 (4), 357-363 (1974).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+temperature,+salts,+pH,+and+other+factors+on+the+development+of+peritrichous+flagella+in+Vibrio+alginolyticus.">Effect of temperature, salts, pH, and other factors on the development of peritrichous flagella in Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (3), 285-288 (1975).</li><li>Ulitzur, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+of+swarming+of+Vibrio+alginolyticus.">The mechanism of swarming of Vibrio alginolyticus.</a> Arch. Microbiol. 104 (1), 67-71 (1975).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Chodur, D. M., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+and+iron+regulate+swarming+and+type+III+secretion+in+Vibrio+parahaemolyticus.">Calcium and iron regulate swarming and type III secretion in Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 192 (22), 6025-6038 (2010).</li><li>McCarter, L., Silverman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+regulation+of+swarmer+cell+differentiation+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Iron regulation of swarmer cell differentiation of Vibrio parahaemolyticus.</a> J. Bacteriol. 171 (2), 731-736 (1989).</li><li>Gode-Potratz, C. J., Kustusch, R. J., Breheny, P. J., Weiss, D. S., McCarter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+sensing+in+Vibrio+parahaemolyticus+triggers+a+programme+of+gene+expression+that+promotes+colonization+and+virulence.">Surface sensing in Vibrio parahaemolyticus triggers a programme of gene expression that promotes colonization and virulence.</a> Mol. Microbiol. 79 (1), 240-263 (2011).</li><li>Heering, J., Ringgaard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+Localization+of+Chemotactic+Signaling+Arrays+during+the+Lifecycle+of+Vibrio+parahaemolyticus.">Differential Localization of Chemotactic Signaling Arrays during the Lifecycle of Vibrio parahaemolyticus.</a> Front Microbiol. 7 (November), 1-12 (2016).</li><li>Cameron, T. A., Anderson-Furgeson, J., Zupan, J. R., Zik, J. J., Zambryski, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptidoglycan+synthesis+machinery+in+Agrobacterium+tumefaciens+during+unipolar+growth+and+cell+division.">Peptidoglycan synthesis machinery in Agrobacterium tumefaciens during unipolar growth and cell division.</a> mBio. 5 (3), (2014).</li><li>Development Core Team, R. F. F. S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R:+A+Language+and+Environment+for+Statistical+Computing.">R: A Language and Environment for Statistical Computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. 1, 2673 (2008).</li><li>Ringgaard, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ParP+prevents+dissociation+of+CheA+from+chemotactic+signaling+arrays+and+tethers+them+to+a+polar+anchor.">ParP prevents dissociation of CheA from chemotactic signaling arrays and tethers them to a polar anchor.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (2), E255-E264 (2014).</li><li>Ringgaard, S., Schirner, K., Davis, B. M., Waldor, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+family+of+ParA-like+ATPases+promotes+cell+pole+maturation+by+facilitating+polar+localization+of+chemotaxis+proteins.">A family of ParA-like ATPases promotes cell pole maturation by facilitating polar localization of chemotaxis proteins.</a> Genes Dev. 25, 1544-1555 (2011).</li><li>Vischer, N. O. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+age+dependent+concentration+of+Escherichia+coli+divisome+proteins+analyzed+with+ImageJ+and+ObjectJ.">Cell age dependent concentration of Escherichia coli divisome proteins analyzed with ImageJ and ObjectJ.</a> Front Microbiol. 6 (JUN), (2015).</li><li>Schneider, C. a., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat. Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Sliusarenko, O., Heinritz, J., Emonet, T., Jacobs-Wagner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput,+subpixel+precision+analysis+of+bacterial+morphogenesis+and+intracellular+spatio-temporal+dynamics.">High-throughput, subpixel precision analysis of bacterial morphogenesis and intracellular spatio-temporal dynamics.</a> Mol. Microbiol. 80 (3), 612-627 (2011).</li><li>Ducret, A., Quardokus, E. M., Brun, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicrobeJ,+a+tool+for+high+throughput+bacterial+cell+detection+and+quantitative+analysis.">MicrobeJ, a tool for high throughput bacterial cell detection and quantitative analysis.</a> Nat. Microbiol. 1, 16077 (2016).</li><li>Carpenter, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CellProfiler:+image+analysis+software+for+identifying+and+quantifying+cell+phenotypes.">CellProfiler: image analysis software for identifying and quantifying cell phenotypes.</a> Genome Biol. 7 (10), R100 (2006).</li><li>Morales-Soto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation,+Imaging,+and+Quantification+of+Bacterial+Surface+Motility+Assays.">Preparation, Imaging, and Quantification of Bacterial Surface Motility Assays.</a> J. Vis. Exp. (98), e52338 (2015).</li><li>Paintdakhi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oufti:+An+integrated+software+package+for+high-accuracy,+high-throughput+quantitative+microscopy+analysis.">Oufti: An integrated software package for high-accuracy, high-throughput quantitative microscopy analysis.</a> Mol. Microbiol. 99 (4), 767-777 (2016).</li><li>de Jong, I. G., Beilharz, K., Kuipers, O. P., Veening, J. -. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Cell+Imaging+of+Bacillus+subtilis+and+Streptococcus+pneumoniae+using+Automated+Time-lapse+Microscopy.">Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy.</a> J. Vis. Exp. (53), e1-e6 (2011).</li></ol>

I detta dokument rapporteras en metod för mikroskopi avbildning av V. parahaemolyticus swarmerceller, följt av nedströmsanalyser avsedda att lösa och kvantifiera den subcellulära lokaliseringen och andra egenskaper hos de studerade fluorescensmärkta proteinerna. Trots att flera verktyg finns för mikroskopibildbehandling och analys 14 , 15 , 16 , 17 , <sup class="xref...

Bakterier upplever ständigt förändringar i sin yttre miljö och har utvecklat flera tekniker för att ändra och anpassa sitt beteende i enlighet därmed. En sådan mekanism innebär differentiering i olika celltyper som bättre kompletterar den förändrade miljön. Differentiering innebär ofta stora förändringar i regleringen av cellcykeln, cellmorfologin och den spatiotemporala organisationen av cellerna. En organism som kan genomgå differentiering är Vibrio parahaemolyticus . V. parahaemolyticus tillhör Vibrionaceae , som är en familj av proteobakterier som vanligtvis bor i färskt eller saltvatten. Vibrionaceae distribueras i stor utsträckning i miljön och innehåller flera arter som orsakar tarmkanalinfektioner hos människor, även Vibrio cholerae. V. Parahaemolyticus är en dimorf organism och kan differentiera i två distinkta celltyper som ett svar för att rymma förändringar i dessYttre miljö. I vattenhaltiga miljöer existerar den som en kort stavformad simmarcell med en enda polär flagellum placerad vid den gamla cellpolen. Vid ytkontakt utlöses differentiering i en svärmercell. Swarmercelldifferentiering innebär två stora förändringar: svärmercellmorfogenes genom inhibering av celldelning och induktion av ett andra flagella-system. Detta resulterar i bildandet av en peritrik och långsträckt stångformad svärmceller, som antingen kan fortsätta svärmarnas livsstil, där divisionshändelser resulterar i avkomma swarmerceller eller alternativt differentierar tillbaka till simmarceller. Flera faktorer har rapporterats inducera eller påverka svärmerdifferentiering. Den primära stimulansen verkar drivas av mekanosensning där V. parahaemolyticus använder polär flagellum som en taktil sensor som detekterar inhibering av rotation vid ytkontakt, men flera andra faktorer är involverade somBrunn 1 I laboratoriet kan rotation av det polära flagellumet inhiberas artificiellt genom tillsats av fenamil, vilket blockerar den natriumkanalstyrda flagellära rotationen, varigenom svärmerdifferentiering 2 induceras. Vidare inducerades Vibrio alginolyticus i en tidigare studie att svärma på fast medium när celler propagerade på tillväxtmedium i en Petri-skål förseglad med klart plastband. Alkalimättat filterpapper förhindras att svälla under dessa förhållanden, vilket tyder på att en eller flera flyktiga syror kan vara involverade i induktion av svärmning. Således förseglar Petri-skålen med plastband som troligen tillåts för ackumulering av flyktiga syror, som bildas som biprodukter av cellulär metabolism, inuti plåtets huvudytor. Samma effekt uppnåddes när H2O2 tillsattes till tillväxtmediet i otätta petriskålar för att artificiellt producera flyktiga syror genom hydrolysering av mediekomponenter <supClass = &quot;xref&quot;&gt; 3 , 4 , 5 . Trots detta är identiteten hos sådana flyktiga syror fortfarande okänd. Vidare har det visat sig att överflödig tillgänglighet av kalcium 6 och järnbegränsning 7 både ökar svärmerdifferentiering och proliferation över fasta ytor. Celler kan svältas för järn genom tillsats av föreningen 2,2&#39;-bipyridyl till tillväxtmediet, vilket har visat sig påverka svärmerdifferentiering 8 . De faktorer som är kända för att reglera differentiering implementeras nu i utformningen av ett protokoll som reproducerbart inducerar V. parahaemolyticus differentiering i svärmceller och deras proliferation på fasta agarytor. V. parahaemolyticus differentiering innebär stora förändringar i regleringen av celldelning, cellmorfologi och positionering av makromolekylära maskiner såsom flagellA och kemotaxisapparater - processer som alla kräver den specifika lokaliseringen av proteiner i enlighet med cellcykeln. Således är förmågan att studera den intracellulära lokaliseringen av sådana proteiner väsentlig för förståelsen av de tidigare nämnda cellulära processerna. För att utföra sådana studier krävs fluorescensmikroskopi på enskilda celler. Detta kan vara särskilt utmanande när avbildningsceller som finns inom täta bakteriepopulationer, som det är fallet för svärmceller. Det har försökt induceras svärmdifferentiering i flytande media, som potentiellt kan generera enskilda celler för mikroskopi-studier. Och även om dessa celler på transkriptionell nivå delvis har inducerat swarmer-differentieringsprogrammet, genomgår de inte samma distinkta morfologiska förändringar som fullständigt differentierade swarmerceller odlade på fast medium 8 . Detta papper erbjuder ett robust och reproducerbart protokoll av en metod för att inducera svärmercellerLl differentiering på en agar yta. Protokollet producerar en population av lättillgängliga swarmerceller som är tillgängliga för enkelcellsmikroskopi och efterföljande analys. Vidare möjliggör protokollet lokaliseringsstudier av fluorescensmärkta proteiner i både simmar- och svärmercelltyperna (sektionerna 1, 2, 3, 4). Dessutom beskriver protokollet det efterföljande arbetsflödet om hur man bearbetar och analyserar de genererade data från fluorescensmikroskopi experiment, vilket möjliggör demografisk analys av bakteriella samhällen (avsnitt 5).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Media components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB-medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>X968.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Agar, granulated</td>
			<td>BD</td>
			<td>214510</td>
			<td>For preparation of LB agar with LB-medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Heart Infusion Agar</td>
			<td>BD</td>
			<td>244400</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose NEEO, ultra quality</td>
			<td>Roth</td>
			<td>2267.3</td>
			<td>For preparation of microscopy agarose pads</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Additives</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-arabinose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5118.3</td>
			<td>Used to induce pBAD derivatives</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2`-Bipyridyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D216305-25G</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Roth</td>
			<td>5239.1</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin sodium salt</td>
			<td>Roth</td>
			<td>K029.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3886.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Standard recipe for Phosphate-buffered saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+) Sucrose</td>
			<td>Roth</td>
			<td>4621.1</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Roth</td>
			<td>3783.5</td>
			<td>For preparation of electrocompetent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardware</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 150x20mm with cams</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>82.1184.500</td>
			<td>For preparation of HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kelvitron t (B 6420)</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for drying HI agar swarming plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gene Pulser Xcell Microbial System</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>1652662</td>
			<td>Used for elctroporation of plasmid DNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Offline (version 7.7.5.0)</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>-</td>
			<td>Used for microscopy data analsis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of cellular differentiation and single cell imaging of vibrio parahaemolyticus swimmer and swarmer cells

Möjligheten att studera intracellulär lokalisering av proteiner är avgörande för förståelsen av många cellulära processer. Detta kräver i sin tur förmågan att erhålla enskilda celler för fluorescensmikroskopi, vilket kan vara särskilt utmanande när avbildande celler som existerar inom bakteriella samhällen. Till exempel existerar den humana patogenen Vibrio parahaemolyticus som korta stavformade simmarceller i flytande tillstånd som vid ytkontakt differentierar till en subpopulation av höglånga svärmceller specialiserade för tillväxt på fasta ytor. Detta papper presenterar en metod för att utföra encellsfluorescensmikroskopianalys av V. parahaemolyticus i sina två differentiella tillstånd. Detta protokoll inducerar väldigt reproducerbart differentiering av V. parahaemolyticus i livscykel för svärmercell och underlättar deras proliferation över fasta ytor. Metoden producerar flares av differentierade swarmerceller som sträcker sig från tHan svärmkoloniens kant. I synnerhet, i själva verket av svärmflikarna finns svärmceller i ett enda lager av celler, vilket möjliggör deras lätta överföring till en mikroskopdia och efterföljande fluorescensmikroskopi avbildning av enskilda celler. Dessutom presenteras arbetsflödet av bildanalys för demografisk representation av bakteriella samhällen. Som ett principprincip beskrivs analysen av den intracellulära lokaliseringen av kemotaxis-signaleringsarrayer i simmare och svavelceller av V. parahaemolyticus.

Induktion av differentiering och generering av svärmande kolonier Figur 1 ger en schema över de viktiga stegen involverade i att producera svärmande kolonier av V. parahaemolyticus ( Figur 1A-C ). En simmarkultur upptäcktes på svärmagar och inkuberades vid 24 ° C, vilket inducerade svärmerdifferentiering och proliferation över den fasta agarytan. En representativ ster...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells at JoVE.com

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Detta protokoll möjliggör enkelcellsmikroskopi av de differentiellt distinkta Vibrio parahaemolyticus- simmaren och svärmcellerna. Metoden producerar en population av swarmerceller som är lätt tillgängliga för enkelcellsanalys och täcker beredning av cellkulturer, induktion av swarmerdifferentiering, provberedning och bildanalys.

Induktion av cellulär differentiering och enkelcellsimaging av<em&gt; Vibrio parahaemolyticus</em&gt; Simmare och svavelceller

The ability to study the intracellular localization of proteins is essential for the understanding of many cellular processes. In turn, this requires the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Cellular Differentiation and Single Cell Imaging of Vibrio parahaemolyticus Swimmer and Swarmer Cells

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Colonization of Euprymna scolopes Squid by Vibrio fischeri

Kolonisering av Euprymna scolopes Squid genom Vibrio fischeri</em

Specific bacteria are found in association with animal tissue1-5. Such host-bacterial associations (symbioses) can be detrimental (pathogenic), have no ...

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Kvantitativ hög kapacitet encelliga cytotoxicitetsanalys för T-celler

Cancer immunotherapy can harness the specificity of  immune response to target and eliminate tumors. Adoptive cell therapy (ACT)  based on the adoptive ...

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Klinisk tillämpning av<em&gt; Törnrosa</em&gt; Konstgjord och antigenpresenterande celler för att genetiskt modifiera T celler från perifert och navelsträngsblod

The potency of clinical-grade T cells can be improved by combining gene therapy with immunotherapy to engineer  a biologic product with the potential for ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

Isolering och Th17 differentiering för naiv CD4 T-lymfocyter

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Cortical Actin Flow in T Cells Quantified by Spatio-temporal Image Correlation Spectroscopy of Structured Illumination Microscopy Data

Kortikal Actin Flow i T-celler kvantifieras genom Spatio-temporal bild korrelationsspektroskopi av Structured belysning mikroskopi Data

Filamentous-actin plays a crucial role in a majority of cell processes including motility and, in immune cells, the formation of a key cell-cell ...

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Development of a More Sensitive and Specific Chromogenic Agar Medium for the Detection of Vibrio parahaemolyticus and Other Vibrio Species

Utveckling av en känsligare och mer specifik kromogena Agar Medium för detektion av<em&gt; Vibrio parahaemolyticus</em&gt; Och annat<em&gt; Vibrio</em&gt; Arter

Foodborne infections in the US caused by Vibrio species have shown an upward trend. In the genus Vibrio, V. parahaemolyticus is responsible for the ...

Highly Multiplexed, Super-resolution Imaging of T Cells Using madSTORM

Mycket multiplexerad, superupplösning av T-celler med hjälp av madSTORM

Imaging heterogeneous cellular structures using single molecule localization microscopy has been hindered by inadequate localization precision and ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

Utveckling och validering av en Ultrasensitive enda molekyl Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay för humant Interferon-α

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...

Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding

Bedömningen av cellulär Stress och Inflammation i diskreta Oxytocin-utsöndrar hjärnan kärnor i Neonatal råtta, före och efter första råmjölk utfodring

The goal of this protocol is to isolate oxytocin-receptor rich brain nuclei in the neonatal brain before and after first colostrum feeding. The expression ...

Functionalization of Atomic Force Microscope Cantilevers with Single-T Cells or Single-Particle for Immunological Single-Cell Force Spectroscopy

Funktionalisering av atomkraftmikroskop Cantispakar med Single-T-celler eller Single-partikel för immunologiska Single-cell Force spektroskopi

Atomic force microscopy based single cell force spectroscopy (AFM-SCFS) is a powerful tool for studying biophysical properties of living cells. This ...