Name: a protocol for measuring cue reactivity in a rat model of cocaine use disorder
Uploaded: 2018-06-18T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder at JoVE.com

أجريت جميع التجارب السلوكية في جامعة تكساس الطبية فرع (يزيد) القوارض في فيفو التقييم (ريفا) الأساسية، من إخراج الدكتور كيلي دينيلي ومقرها داخل المركز "أبحاث الإدمان"، إخراج د. كاثرين كننغهام. تقديم الدعم لهذا العمل جاء من بيتر ف. مكمانوس الخيرية الثقة، المعهد الوطني لمركز علوم الصحة البيئية "علم السموم البيئية" في يزيد (T32ES007254)، معهد "العلوم متعدية الجنسيات" في يزيد (UL1TR001439)، مركز ميتشل لأمراض الأعصاب، ومركز "أبحاث الإدمان" في يزيد (DA007287، DA070087، وأموال الدراسة التجريبية).

جميع التلاعبات الحيوان تنفذ وفقا دليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (2011)، ومع موافقة من لجنة الاستخدام ورعاية الحيوان المؤسسية.
1-الحيوانات
<ol><li>تأقلم الفئران "سبراغ داولي" الذكور حوالي 8-9 أسابيع من العمر (250-260 ز) لمدة سبعة أيام على الأقل في غرفة مستعمرة للحفاظ عل?...

التعرض لمنبهات إقران المخدرات والتغيرات الفسيولوجية في الاستجابة لهذه العظة16 مقترنة بالانتكاس،11،16 والكوكايين جديلة مفاعليه الاختبار المستخدمة أعلاه طارئة يعرض الرموز المقترنة الكوكايين في نظراً لغياب المخدرات؛ وهكذا، يخدم سلوك البحث عن ا?...

اضطراب استخدام الكوكايين (المعارض) يتبع مسار الإدارة الذاتية المتكررة خلالها سابقا المحفزات محايدة الحصول على الحوافز القيمة1. مفاعليه جديلة الحساسية للرموز التي كانت مرتبطة في السابق بتجربة تعاطي المخدرات، وأنه يلعب دوراً بارزا في شغف البشرية2،3،،من45. خطر الانتقال إلى ائتلاف الوحدة والديمقراطية، فضلا عن الانتكاس خلال الامتناع عن ممارسة الجنس، ويعتقد أن تكون أعلى بالنسبة للأفراد الذين يعبرون عن حساسية عالية للرموز المرتبطة بالمخدرات6،7. سياقات البيئية (مثل، الناس، المباني، وأنواع الموسيقى) والمحفزات المنفصلة المرتبطة بالمخدرات (مثلاً، أدواتها) أصبح مرتبطاً بمكافأة الكوكايين؛ التعرض لهذه الإشارات يمكن أن تؤدي التغيرات في فيزيولوجيا الطرفية (مثلاً، معدل ضربات القلب ودرجة حرارة الجلد ومقاومة الجلد) واللدونه الدماغ، والدماغ الاتصال الفنية2،8،9 ،10. وبعبارة أخرى، التعرض للرموز المرتبطة بالكوكايين ينشط الدوائر كورتيكوسترياتال الحوفي لاستحضار مكيفة الاستجابات الفسيولوجية والذاتية التي تدفع مشهي النهج (البحث عن المخدرات) السلوك11،12 13، ،،من1415.
مفاعليه جديلة تقاس بالمخ الوظيفية التصوير التحليلات التنبؤية للضعف الانتكاس في الموضوعات مع ائتلاف الوحدة والديمقراطية16. جديلة مفاعليه القياسات في نماذج القوارض بمثابة مقياس مركب لخطر الانتكاس ويمكن استغلالها للدراسات متعدية الجنسيات. وهكذا، العلاج الصيدلاني أن النقصان مفاعليه جديلة في القوارض قد تكون رحلت كعلاج لمنع انتكاس في التجارب السريرية البشرية. نماذج الإكلينيكية مع الجدارة اللازمة متعدية الجنسيات وصحة التنبؤية بأهمية خاصة حيث لا يوجد حاليا لا فارماكوثيرابيس التي وافقت عليها إدارة الأغذية والعقاقير لائتلاف الوحدة والديمقراطية17.
إجراءات الإدارة الذاتية القوارض هو معيار الذهب، عمليات متعدية نموذج مع صلاحية التنبؤية ل تعاطي المخدرات البشرية18 وذات أهمية حاسمة لفهم الجزيئية والفيزيولوجية المعارض الأساسي. نتائج التسليم استجابة-مستقلة من الكوكايين في الآثار السلوكية والجزيئية والكيميائية العصبية متميزة بالنسبة إلى الاستجابة-تعتمد الكوكايين التعرض؛ على سبيل المثال-، يستحضر التسليم الكوكايين استجابة-مستقلة أعلى بكثير من معدل وفيات19. وعلاوة على ذلك، عواقب الكيميائية العصبية للامتناع عن الرد-تعتمد الكوكايين الإدارة الذاتية متميزة عن تلك الناجمة عن الامتناع عن استجابة-المستقلة الكوكايين تسليم20، 21. وهكذا، نماذج ائتلاف الوحدة والديمقراطية استناداً إلى استجابة-يتوقف تسليم الكوكايين نماذج متعدية متفوقة عند تقدير مفاعليه جديلة والآليات المرتبطة بها للعمل.
في البروتوكول المبينة أدناه، يتم تسليم الكوكايين عن طريق الوريد من خلال قسطرة داخل jugular نائحين. ومع ذلك، وضعت أساليب بديلة المخدرات عبر الطرق عن طريق الفم واستنشاق سيلفادمينيستير. الأهم من ذلك، القوارض مراقبة تسليم المخدرات، البشر مماثلة، من خلال الردود استثابي. ولذلك، هناك ارتفاع التوافق بين المخدرات تديرها الذاتي القوارض والبشر22. وتوظف العقاقير السريري الإدارة الذاتية الإجراء أدناه رافعة الضغط، معززة بتسليم المخدرات، لتحفيز استجابة معدلات أعلى من التحكم بالسيارة. سلوك البحث عن المخدرات يتم تدريبهم من قبل الأقران العظة أصلاً "محايدة" (مثلاً، ضوء حافز أو لهجة والبيئة السياقية في الكوكايين الذي يحدث الإدارة الذاتية) مع حقن الكوكايين؛ تصبح هذه الرموز reinforcers مكيفة (للاستعراض: كننغهام & أناستاسيو، 201423). اللاحقة التعرض للرموز المرتبطة بالكوكايين يؤدي سلوك البحث عن المخدرات في القوارض (أيمحاولات لتسليم الكوكايين عن طريق الضغط على رافعة نشط سابقا)، فضلا عن حنين والانتكاس في المعارض المواضيع24، 25 , 26 , 27.
عادة، تستخدم الدراسات الإكلينيكية القوارض من سلوك البحث عن المخدرات عقب الإدارة الذاتية الكوكايين الانقراض إعادة التدريب و/أو المخدرات تجري في إطار البيئة المرتبطة بالمخدرات28،29، 30 , 31 , 32-يضغط على ذراع نشطة مسبقاً، في حال عدم تسليم المخدرات و/أو جديلة، تشكل عادة مقياس لإعادته إلى وظيفته بعد انقراض33،،من3435. على العكس من ذلك، هو سلوك البحث عن المخدرات مفاعليه جديلة الامتناع القسري التالية المقررة دون انقراض السابقة تدريب28،36،37،،من3839 .
مقاييس النتائج والمتغيرات التجريبية قد اختيرت بعناية والتحقق من صحتها لتشريح الجوانب المختلفة لعلم الأعصاب لسلوك البحث عن المخدرات والشبيهة بالانتكاس، وأنها راسخة أن نيوروادابتيشنز تختلف بين النماذج مع و دون انقراض تدريب 40،41،،من4243. وعلاوة على ذلك، من منظور متعدية الجنسيات، التدريب انقراض القوارض لا ينعكس في إعدادات السريرية لائتلاف الوحدة والديمقراطية منذ العظة المتصلة بالمخدرات تشمل الدول المزاج والأماكن والأشخاص44؛ مزيج فريد من هذه الرموز من المحتمل غير متوفرة في بيئة سريرية45،،من4647. وهكذا، يعمل الطراز القوارض الموضحة هنا كمواز أفضل لحالة الإنسان من العديد من النماذج المتاحة حاليا.
فيما يلي وصف لتدريب إدارة الذاتية الكوكايين تم التحقق من صحتها، والامتناع عن ممارسة الجنس القسري ومفاعليه جديلة اختبار البروتوكول للفئران. بإيجاز، هي مزروع الفئران بالقسطرة داخل جوجولار، تدريب على سيلفادمينيستير الكوكايين أو المحلول الملحي عن طريق رافعة 'النشط' الصحافة، واستلام الحافز الكوكايين أو المحلول الملحي الذي يقترن المنفصلة منبهات الصوت والضوء التي تكون بمثابة reinforcers مكيفة. وبعد 14 يوما من الكوكايين من الإدارة الذاتية، تتعرض الفئران لمدة 30 يوما للامتناع عن ممارسة الجنس القسري واختبار مفاعليه لاحقة 60 دقيقة جديلة في ذراع الذي يقاس الضغط. الاختبار مفاعليه جديلة مقياس مركب للكوكايين الانتكاس الضعف في البشر.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catheter Tubing: 0.50mm ID x 0.94mm OD x 0.2mm width</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>11-189-15A</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cue Light</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-229M</td>
			<td>2/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guide Cannulae (22 gauge, pedestal size-8mm, cut length 11 mm, 5 mm above the pedestal)</td>
			<td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td>
			<td>8IC313G5UPXC</td>
			<td>1/rat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>House Light</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-227M</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>PHM-100</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levers</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-110M</td>
			<td>2/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Swivels</td>
			<td>Instech, Plymouth Meeting, PA, USA</td>
			<td>375/22</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED-PC Package with Infusion Pump Software</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>SOF-735 (infusions software SOF-700RA-10 version 1.04)</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal Spring Leash</td>
			<td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td>
			<td>C313CS/SPC</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle (23g, 1 in)</td>
			<td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA</td>
			<td>305193</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitex Mesh (6/6 woven mesh sheet, 12&#34;x12&#34;, 500 microns thick, 38% Open Area)</td>
			<td>Amazon, Seattle, WA, USA</td>
			<td>CMN-0500-C, B000FMUNE6</td>
			<td>~1 sheet/100 rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCI Interface Package</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>DIG-700P2-R2, MED-SYST-16</td>
			<td>1/16 operant chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Supply for Interface Modules</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>SG-6510D</td>
			<td>1/16 operant chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound-attenuating Cubicle</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-018V</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes, 10 mL Luer-Lok&#8482; tip</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>14-827-52</td>
			<td>1 case/experiment (1/operant chamber)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon Tubing for flushes: 0.51mmID x 1.52mmOD 0.51mm thick x 152.4m</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>14-170-15B</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine (10mg/mL)</td>
			<td>Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA</td>
			<td>003845</td>
			<td>~0.5mg/rat*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acraweld Repair Resin</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1013959</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Altalube (ophthalmic ointment)</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>6050059</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocaine</td>
			<td>NIDA North Bethesda, MD, USA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>~350mgs/rat for whole experiment*; requires DEA License</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (10,000 USP units/10 mL)</td>
			<td>SAGENT Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, USA</td>
			<td>NDC 25021-400-10</td>
			<td>1/experiment (~21 units/rat*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jet Liquid</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1256401</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (100mg/mL, 10mL)</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1049007</td>
			<td>~15mg/rat*; requieres DEA license</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methohexital Sodium (Brevital&#174;, 500 mg/50 mL)</td>
			<td>Patterson Dental, Saint Paul, MN, USA</td>
			<td>043-5461</td>
			<td>1/experiment; requires DEA License</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%, USP)</td>
			<td>Baxter, Deerfield, IL, USA</td>
			<td>2B1307</td>
			<td>1 case/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptokinase from &#946;-hemolytic Streptococcus (Lancefield Group C) &#8805;3,000 units/mg</td>
			<td>Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>S3134-250KU</td>
			<td>1 vial/experiment (~1.5mg/rat/experiment*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ticarcillin Disodium Salt</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>50-213-695</td>
			<td>~4 vials/exeriment or purchase the 25g vial cat.# 50-489-093 (~150mg/rat/experiment*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (100mg/mL)</td>
			<td>Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA</td>
			<td>033198</td>
			<td>~3mg/rat*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>*Assumes rat age is that described in the protocol, rats self-administer for 14 days, and flushes occur for 21 days.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for measuring cue reactivity in a rat model of cocaine use disorder

اضطراب استخدام الكوكايين (المعارض) يتبع مسار الإدارة الذاتية المتكررة خلالها سابقا المحفزات محايدة الحصول على قيمة الحوافز. جديلة مفاعليه، الحساسية للرموز التي كانت مرتبطة في السابق بتجربة تعاطي المخدرات، يلعب دوراً بارزا في شغف البشرية خلال الامتناع عن ممارسة الجنس. ويمكن تقييم مفاعليه جديلة كاتجاه أتينشونال تجاه الرموز المرتبطة بالمخدرات التي قابلة للقياس كسلوك نهج مشهي في الدراسات الإكلينيكية والبشرية على السواء. وهنا يصف تقييما مفاعليه جديلة في الفئران مدربين على سيلفادمينيستير الكوكايين. يتم إقران الكوكايين الإدارة الذاتية مع عرض الرموز المنفصلة التي تتصرف ك reinforcers مكيفة (أي، ضوء البيت، الضوء المحفز، ضخ ضخ أصوات). وبعد فترة من الامتناع عن ممارسة الجنس، يتم قياس المطابع رافعة في سياق الإدارة الذاتية الكوكايين مصحوبة بالعظة منفصلة سابقا المقترنة مع حقن الكوكايين كجديلة مفاعليه. هذا النموذج مفيد لاستكشاف الآليات العصبية الحيوية الكامنة وراء عمليات تفاعلية جديلة، وكذلك فيما يتعلق بتقييم فارماكوثيرابيس لقمع مفاعليه جديلة وتعديل ذلك الضعف الانتكاس. وتشمل مزايا نموذج أهميتها متعدية الجنسيات، والوجه وفاليديتيس التنبؤية. القيد الرئيسي للنموذج هو أن المهمة مفاعليه جديلة يمكن أن يؤديها إلا نادراً، ويجب أن لا تستعمل إلا في مدة قصيرة (على سبيل المثال.، 1 ساعة)، خلاف ذلك سوف تبدأ الفئران لإخماد الاقتران من منبهات منفصلة مع حافز الكوكايين. ويعتبر هذا النموذج قابلة للتمديد إلى أي حافز إيجابي يعزز يقترن منبهات منفصلة؛ رغم أن ذلك ينطبق خصوصا على لتعاطي المخدرات، هذا النموذج قد عقد التطبيقات المستقبلية في مجالات مثل السمنة، حيث يمكن أن تعمل المكافآت استساغة الغذاء إيجابيا يعزز المحفزات.

وتظهر نتائج تجربة الإدارة الذاتية والامتناع عن ممارسة الجنس الكوكايين تليها اختبار مفاعليه جديلة من دراسة منشورة سابقا57 في الشكل 1. ويرد في الشكل 1Aدراسة الجدول الزمني.
الفئران على حدة الانتق?...

Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder at JoVE.com

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

هو تصور مفاعليه جديلة كالحساسية لمنبهات مرتبطة بخبرات تعاطي المخدرات التي تسهم في حنين والانتكاس في البشر ممتنعين. وعلى غرار مفاعليه جديلة في الفئران بقياس الاتجاه أتينشونال تجاه الرموز المرتبطة بالمخدرات التي ينتج عنها سلوك نهج مشهي في اختبار مفاعليه جديلة بعد الإدارة الذاتية وأجبر الامتناع عن ممارسة الجنس.

بروتوكول لقياس مفاعليه جديلة في نموذج الفئران من اضطراب استخدام الكوكايين

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

إجراء دراسة لإعادة Footshock الناتج عن السعي من الكوكايين في فئران التجارب

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Isolation and Culture of Rat Embryonic Neural Cells: A Quick Protocol

العزلة والثقافة من خلايا الفئران العصبية الجنينية: بروتوكول سريعة

We are describing a quick method to dissociate and culture hippocampal or cortical neurons from E15-17 rat embryos. The procedure can be applied ...

Trypsin Digest Protocol to Analyze the Retinal Vasculature of a Mouse Model

التربسين بروتوكول دايجست لتحليل الأوعية الدموية الشبكية للنموذج الفأر

Trypsin digest is the gold standard method to analyze the retinal vasculature 1-5. It allows visualization of the entire network of complex ...

Use of a Caspase Multiplexing Assay to Determine Apoptosis in a Hypothalamic Cell Model

استخدام كاسباس المتعدد الفحص لتحديد موت الخلايا المبرمج في المهاد الخليوي نموذج

The ability to multiplex assays in studies of complex cellular mechanisms eliminates the need for repetitive experiments, provides internal controls, and ...

Measuring Connectivity in the Primary Visual Pathway in Human Albinism Using Diffusion Tensor Imaging and Tractography

قياس التوصيل في البصرية المسار الابتدائي في المهق الإنسان عن طريق التصوير إنتشار العضلة الشادة وTractography

In albinism, the number of ipsilaterally projecting retinal ganglion cells (RGCs) is significantly reduced. The retina and optic chiasm have been proposed ...

Measuring Progressive Neurological Disability in a Mouse Model of Multiple Sclerosis

قياس التقدمي العصبية الإعاقة في نموذج الفأر من مرض التصلب العصبي المتعدد

After intracerebral infection with the Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV), susceptible SJL mice develop a chronic-progressive demyelinating ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

استخدام الاشراط الكلاسيكي اييبلينك تتبع لتقييم هيبوكامبال الخلل في نموذج الفئران من اضطرابات طيف الكحول الجنيني

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

حاد<em&gt; في فيفو</em&gt; تسجيلات الكهربية للميكانيات الميدانية المحلية والنشاط متعدد الوحدات من مسار هيبيرديركت في الفئران تخدير

Converging evidence shows that many neuropsychiatric diseases should be understood as disorders of large-scale neuronal networks. To better understand the ...

Online Transcranial Magnetic Stimulation Protocol for Measuring Cortical Physiology Associated with Response Inhibition

بروتوكول التحفيز المغناطيسي Transcranial على الإنترنت لقياس القشرية علم وظائف الأعضاء المرتبطة بتثبيط استجابة

We describe the development of a reproducible, child-friendly motor response inhibition task suitable for online Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

تقييم في فيفو لتعطيل حاجز الدم في الدماغ في نموذج الفئران من السكتة الدماغية

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...