Name: a protocol for measuring cue reactivity in a rat model of cocaine use disorder
Uploaded: 2018-06-18T12:30:00
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सभी व्यवहार परीक्षण यूनिवर्सिटी ऑफ टेक्सास मेडिकल ब्रांच (UTMB) में कुतर कर वीवो असेसमेंट (रिवा) कोर, डॉ केली Dineley द्वारा निर्देशित और व्यसन अनुसंधान के लिए केंद्र के भीतर स्थित, डॉ कॅथ्रीन Cunningham द्वारा निर्देशित किया गया था । इस काम के लिए समर्थन पीटर एफ McManus चैरिटेबल ट्रस्ट, राष्ट्रीय पर्यावरण स्वास्थ्य विज्ञान केंद्र के पर्यावरण विषविज्ञान के लिए UTMB (T32ES007254)में संस्थान, UTMB (UL1TR001439) में अनुवाद विज्ञान के लिए संस्थान से आया है, मिशेल Neurodegenerative रोगों के लिए केंद्र, और UTMB में लत अनुसंधान के लिए केंद्र (DA007287, DA070087, और पायलट अध्ययन कोष) ।

सभी पशु जोड़तोड़ की देखभाल और प्रयोगशाला जानवरों (२०११) के उपयोग के लिए गाइड के अनुसार और संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति से अनुमोदन के साथ किया जाता है ।
1. पशु
<ol><li>Acclimate पुरुष Sprague Dawley चूहों ?...

दवा-युग्मित cues और इन cues के जवाब में शारीरिक परिवर्तन के लिए जोखिम16 पतन,11,16 और कोकीन क्यू जेट परीक्षण के साथ जुड़े रहे है आकस्मिक प्रस्तुत कोकीन-युग्मित cues में दवा के अभाव; इस प...

कोकीन का उपयोग विकार (जुगाली) दोहराव स्वयं प्रशासन के एक पथ के दौरान जो पहले तटस्थ उत्तेजनाओं लाभ प्रोत्साहन मान1के बाद । क्यू जेट पहले दवा लेने के अनुभव के साथ जुड़े cues के लिए संवेदनशीलता है, और यह मानव तरस2,3,4,5में एक प्रमुख भूमिका निभाता है । जुगाली के लिए प्रगति के जोखिम, साथ ही संयम के दौरान पलटा, व्यक्तियों, जो दवा से जुड़े cues6,7के लिए उच्च संवेदनशीलता व्यक्त करने के लिए उच्च माना जाता है । दोनों पर्यावरण संदर्भों (जैसे, लोगों, इमारतों, संगीत शैलियों) और असतत दवा से जुड़े उत्तेजनाओं (जैसे, सामग्री) कोकीन इनाम के साथ जुड़े हो; इन संकेतों के संपर्क परिधीय शरीर क्रिया विज्ञान में परिवर्तन ट्रिगर कर सकते हैं (जैसे, हृदय गति, त्वचा का तापमान, और त्वचा प्रतिरोध), मस्तिष्क प्लास्टिक, और मस्तिष्क कार्यात्मक कनेक्टिविटी2,8,9 ,10. दूसरे शब्दों में, कोकीन के लिए फिर से जोखिम-जुड़े cues को अंग corticostriatal सर्किट सक्रिय वातानुकूलित शारीरिक और व्यक्तिपरक प्रतिक्रियाओं कि ड्राइव appetitive दृष्टिकोण (दवा मांग) का व्यवहार11,12 ,13,14,15.
क्यू जेट कार्यात्मक मस्तिष्क इमेजिंग विश्लेषण के साथ मापा16जुगाली के साथ विषयों में पलटा भेद्यता के पूर्वानुमान है । मूषक मॉडल में क्यू जेट माप पतन जोखिम के लिए एक किराए के उपाय के रूप में सेवा और अनुवाद अध्ययन के लिए शोषण किया जा सकता है । इस प्रकार, एक pharmacotherapy कि कुतर में क्यू जेट कम हो जाती है आगे एक पलटा मानव नैदानिक परीक्षणों में रोकथाम उपचार के रूप में किया जा सकता है । आवश्यक शोधों योग्यता और पूर्वानुमान वैधता के साथ नैदानिक मॉडल विशेष रूप से महत्वपूर्ण है क्योंकि वहां वर्तमान में कोई एफडीए जुगाली17के लिए pharmacotherapies अनुमोदित कर रहे हैं ।
कुतर स्वयं प्रशासन प्रक्रिया सोने के मानक, मानव दवा के लिए पूर्वानुमान वैधता के साथ अनुवाद मॉडल है-18 ले और गंभीर आणविक और शारीरिक जुगाली अंतर्निहित प्रक्रियाओं को समझने के लिए महत्वपूर्ण है । उत्तर-अलग व्यवहार, आणविक, और neurochemical प्रतिक्रिया-निर्भर कोकीन जोखिम के सापेक्ष प्रभाव में कोकीन परिणाम कीस्वतंत्र वितरण; उदाहरणके लिए, उत्तर-स्वतंत्र कोकीन डिलिवरी काफी उच्च मृत्यु दर उदाहरणदेते हैं । इसके अलावा, प्रतिक्रिया से संयम के neurochemical परिणामनिर्भर कोकीन आत्म प्रशासन प्रतिक्रिया से संयम द्वारा ट्रिगर उन से अलग हैं-स्वतंत्र कोकीन डिलिवरी20, 21. इस प्रकार, जुगाली मॉडल कोकीन की प्रतिक्रिया परनिर्भर प्रसव पर आधारित बेहतर शोधों मॉडल जब क्यू जेट और कार्रवाई के जुड़े तंत्र का आकलन कर रहे हैं ।
नीचे उल्लिखित प्रोटोकॉल में, कोकीन एक निवास के माध्यम से नसों में दिया है इंट्रा-jugular कैथेटर । हालांकि, मौखिक और साँस लेना मार्गों के माध्यम से स्व-प्रशासन दवा के लिए वैकल्पिक तरीकों विकसित किया गया है. महत्वपूर्ण बात, operant प्रतिक्रियाओं के माध्यम से, दवा, अनुरूप मनुष्यों के नियंत्रण के वितरण कुतर । इसलिए, दवाओं के बीच उच्च सामंजस्य कुतर और मनुष्यों द्वारा प्रशासित22है । इसके बाद के नैदानिक दवा स्वयं प्रशासन प्रक्रिया नीचे दबाव लीवर को रोजगार, दवा वितरण द्वारा प्रबलित, प्रतिक्रिया वाहन नियंत्रण से अधिक दरों को प्रेरित करने के लिए । दवा की मांग व्यवहार मूल रूप से "तटस्थ" cues बाँधना द्वारा प्रशिक्षित किया जाता है (जैसे, एक उत्तेजना प्रकाश या टोन और कोकीन आत्म प्रशासन होता है जिसमें प्रासंगिक वातावरण) कोकीन आधान के साथ; इन cues (समीक्षा के लिए: Cunningham और एनेस्टेसियो, २०१४23) मजबूत वातानुकूलित हो जाते हैं । कोकीन के बाद फिर से जोखिम-जुड़े cues कुतर में दवा की मांग व्यवहार ट्रिगर (यानी, पहले से सक्रिय लीवर पर दबाव के माध्यम से कोकीन देने के प्रयास) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से तरस और पतन जुगाली विषयों में24, 25 , 26 , 27.
आम तौर पर, दवा की मांग व्यवहार के बाद से नैदानिक कुतर अध्ययन कोकीन स्वयं प्रशासन विलुप्त होने के प्रशिक्षण का उपयोग और दवा से जुड़े पर्यावरण के भीतर किए गए और / 30 , 31 , ३२. पहले सक्रिय लीवर पर प्रेस, दवा और/या क्यू डिलिवरी के अभाव में, आम तौर पर विलुप्त होने के बाद बहाली के उपाय का गठन३३,३४,३५। इसके विपरीत, क्यू जेट दवा की मांग व्यवहार पूर्व विलुप्त होने प्रशिक्षण28,३६,३७,३८,३९ के बिना मजबूर संयम के बाद मूल्यांकन किया जाता है .
परिणाम उपायों और प्रयोगात्मक चर सावधानी से चुना गया है और दवा की मांग और पतन की तरह व्यवहार के तंत्रिका जीव विज्ञान के विभिंन पहलुओं काटना के लिए मांय है, और यह अच्छी तरह से स्थापित है कि neuroadaptations के साथ मॉडलों के बीच अलग है और बिना विलुप्त प्रशिक्षण ४०,४१,४२,४३. इसके अलावा, एक शोधों के नजरिए से, कुतर विलुप्त होने प्रशिक्षण जुगाली के लिए नैदानिक सेटिंग्स में प्रतिबिंबित नहीं है के बाद से दवा से संबंधित cues मूड राज्यों, स्थानों, और लोगों को शामिल४४; इन संकेतों के अद्वितीय संयोजन की संभावना एक नैदानिक वातावरण में उपलब्ध नहीं हैं४५,४६,४७. इस प्रकार, कुतर मॉडल वर्णित इस स्पेसिफिकेशंस के रूप में कार्य करता है मानव हालत के लिए एक बेहतर समानांतर वर्तमान में उपलब्ध मॉडलों के कई ।
निंनलिखित चूहों के लिए एक मांय कोकीन स्वयं प्रशासन प्रशिक्षण, मजबूर संयम और क्यू जेट परीक्षण प्रोटोकॉल का वर्णन । संक्षेप में, चूहों अंतरराज्यीय jugular कैथेटर के साथ प्रत्यारोपित कर रहे हैं, खुद को प्रशिक्षित कोकीन या खारा ' के माध्यम से ' सक्रिय लीवर प्रेस, और कोकीन या खारा उत्तेजना की प्राप्ति असतत प्रकाश और ध्वनि cues जो वातानुकूलित के रूप में सेवा के साथ बनती है मजबूत । कोकीन स्वयं प्रशासन के 14 दिनों के बाद, चूहों मजबूर संयम के 30 दिनों के लिए अधीन है और एक बाद ६०-ंयूनतम क्यू जेट परीक्षण जिसमें लीवर दबाने मापा जाता है । क्यू जेट परीक्षण कोकीन पतन मानव में जोखिम के लिए एक किराए का उपाय है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catheter Tubing: 0.50mm ID x 0.94mm OD x 0.2mm width</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>11-189-15A</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cue Light</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-229M</td>
			<td>2/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guide Cannulae (22 gauge, pedestal size-8mm, cut length 11 mm, 5 mm above the pedestal)</td>
			<td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td>
			<td>8IC313G5UPXC</td>
			<td>1/rat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>House Light</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-227M</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>PHM-100</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levers</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-110M</td>
			<td>2/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Swivels</td>
			<td>Instech, Plymouth Meeting, PA, USA</td>
			<td>375/22</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED-PC Package with Infusion Pump Software</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>SOF-735 (infusions software SOF-700RA-10 version 1.04)</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal Spring Leash</td>
			<td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td>
			<td>C313CS/SPC</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle (23g, 1 in)</td>
			<td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA</td>
			<td>305193</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitex Mesh (6/6 woven mesh sheet, 12&#34;x12&#34;, 500 microns thick, 38% Open Area)</td>
			<td>Amazon, Seattle, WA, USA</td>
			<td>CMN-0500-C, B000FMUNE6</td>
			<td>~1 sheet/100 rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCI Interface Package</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>DIG-700P2-R2, MED-SYST-16</td>
			<td>1/16 operant chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Supply for Interface Modules</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>SG-6510D</td>
			<td>1/16 operant chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound-attenuating Cubicle</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-018V</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes, 10 mL Luer-Lok&#8482; tip</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>14-827-52</td>
			<td>1 case/experiment (1/operant chamber)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon Tubing for flushes: 0.51mmID x 1.52mmOD 0.51mm thick x 152.4m</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>14-170-15B</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine (10mg/mL)</td>
			<td>Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA</td>
			<td>003845</td>
			<td>~0.5mg/rat*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acraweld Repair Resin</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1013959</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Altalube (ophthalmic ointment)</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>6050059</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocaine</td>
			<td>NIDA North Bethesda, MD, USA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>~350mgs/rat for whole experiment*; requires DEA License</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (10,000 USP units/10 mL)</td>
			<td>SAGENT Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, USA</td>
			<td>NDC 25021-400-10</td>
			<td>1/experiment (~21 units/rat*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jet Liquid</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1256401</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (100mg/mL, 10mL)</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1049007</td>
			<td>~15mg/rat*; requieres DEA license</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methohexital Sodium (Brevital&#174;, 500 mg/50 mL)</td>
			<td>Patterson Dental, Saint Paul, MN, USA</td>
			<td>043-5461</td>
			<td>1/experiment; requires DEA License</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%, USP)</td>
			<td>Baxter, Deerfield, IL, USA</td>
			<td>2B1307</td>
			<td>1 case/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptokinase from &#946;-hemolytic Streptococcus (Lancefield Group C) &#8805;3,000 units/mg</td>
			<td>Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>S3134-250KU</td>
			<td>1 vial/experiment (~1.5mg/rat/experiment*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ticarcillin Disodium Salt</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>50-213-695</td>
			<td>~4 vials/exeriment or purchase the 25g vial cat.# 50-489-093 (~150mg/rat/experiment*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (100mg/mL)</td>
			<td>Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA</td>
			<td>033198</td>
			<td>~3mg/rat*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>*Assumes rat age is that described in the protocol, rats self-administer for 14 days, and flushes occur for 21 days.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for measuring cue reactivity in a rat model of cocaine use disorder

कोकीन का उपयोग विकार (जुगाली) दोहराव स्वयं प्रशासन के एक पथ के दौरान जो पहले तटस्थ उत्तेजनाओं प्रोत्साहन मूल्य हासिल । क्यू जेट, पहले दवा लेने के अनुभव के साथ जुड़े cues के लिए संवेदनशीलता, संयम के दौरान मानव लालसा में एक प्रमुख भूमिका निभाता है । क्यू जेट दवा संबद्ध cues कि दोनों नैदानिक और मानव अध्ययन में appetitive दृष्टिकोण व्यवहार के रूप में मापने योग्य है की ओर ध्यान उंमुखीकरण के रूप में मूल्यांकन किया जा सकता है । इस के साथ साथ स्वयं को प्रशिक्षित चूहों में क्यू जेट के एक आकलन का वर्णन कोकीन प्रशासन । कोकीन स्वयं प्रशासन असतत cues कि वातानुकूलित (यानी, घर प्रकाश, उत्तेजना प्रकाश, अर्क पंप लगता है) के रूप में कार्य की प्रस्तुति के साथ बनती है । संयम की अवधि के बाद, लीवर कोकीन स्वयं में प्रेस-प्रशासन असतत cues पहले कोकीन अर्क के साथ जोड़ा के साथ संदर्भ क्यू जेट के रूप में मापा जाता है । इस मॉडल के लिए क्यू जेट प्रक्रियाओं अंतर्निहित neurobiological तंत्र का पता लगाने के रूप में के रूप में अच्छी तरह से pharmacotherapies का आकलन करने के लिए उपयोगी है, और इसलिए और इसलिए, पलटा भेद्यता को संशोधित । मॉडल के लाभ अपनी अनुवाद प्रासंगिकता, और उसके चेहरे और पूर्वानुमान वैध शामिल हैं । मॉडल की प्राथमिक सीमा है कि क्यू जेट कार्य केवल अक्सर प्रदर्शन किया जा सकता है और केवल कम अवधि में इस्तेमाल किया जाना चाहिए (जैसे, 1 घंटे), अंयथा चूहों कोकीन उत्तेजना के साथ असतत cues के बाँधना बुझाने के लिए शुरू हो जाएगा । मॉडल किसी भी सकारात्मक मजबूत असतत cues के साथ युग्मित उत्तेजना के लिए बढ़ा है; हालांकि दुरुपयोग की दवाओं के लिए विशेष रूप से लागू है, इस मॉडल जैसे मोटापे, जहां स्वादिष्ट खाद्य पुरस्कार सकारात्मक मजबूत उत्तेजनाओं के रूप में कार्य कर सकते है के रूप में खेतों में भविष्य अनुप्रयोगों पकड़ सकता है ।

एक कोकीन स्वयं प्रशासन और संयम प्रयोग के परिणाम एक पहले से प्रकाशित अध्ययन५७ से एक क्यू जेट परीक्षण के बाद चित्रा 1में दिखाया गया है । स्टडी टाइमलाइन को फिगर 1a</stro...

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A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

क्यू जेट दवा के साथ जुड़े संकेतों को संवेदनशीलता के रूप में धारणा है कि अनुभवों को तरस और संयमी मनुष्यों में पतन के लिए योगदान ले । क्यू जेट दवा से जुड़े cues की ओर ध्यान उन्मुखीकरण अभिविन्यास को मापने के द्वारा चूहों में मॉडलिंग की है कि आत्म प्रशासन और मजबूर संयम के बाद एक क्यू जेट परीक्षण में appetitive दृष्टिकोण व्यवहार में परिणाम.

कोकीन का उपयोग विकार के एक चूहे मॉडल में क्यू जेट को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

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We are describing a quick method to dissociate and culture hippocampal or cortical neurons from E15-17 rat embryos. The procedure can be applied ...

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एक Hypothalamic सेल मॉडल में apoptosis निर्धारित करने के लिए कस्पासे बहुसंकेतन परख का उपयोग

The ability to multiplex assays in studies of complex cellular mechanisms eliminates the need for repetitive experiments, provides internal controls, and ...

Measuring Connectivity in the Primary Visual Pathway in Human Albinism Using Diffusion Tensor Imaging and Tractography

मानव Albinism में प्राथमिक दृश्य मार्ग में मापने कनेक्टिविटी प्रसार tensor इमेजिंग और Tractography का प्रयोग

In albinism, the number of ipsilaterally projecting retinal ganglion cells (RGCs) is significantly reduced. The retina and optic chiasm have been proposed ...

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After intracerebral infection with the Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV), susceptible SJL mice develop a chronic-progressive demyelinating ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

एक चूहा मॉडल भ्रूण शराब स्पेक्ट्रम विकारों में हिप्पोकैम्पस रोग का आकलन करने के लिए ट्रेस Eyeblink शास्त्रीय कंडीशनिंग का उपयोग

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तीव्र<em&gt; विवो में</em&gt; एनेस्थेटेड चूहों में हाइपरडायरेक्ट पाथवे से स्थानीय फील्ड प्रोटेलेशन और मल्टी-यूनिट गतिविधि के इलेक्ट्रोफिजिकल रिकॉर्डिंग

Converging evidence shows that many neuropsychiatric diseases should be understood as disorders of large-scale neuronal networks. To better understand the ...

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We describe the development of a reproducible, child-friendly motor response inhibition task suitable for online Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

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