Name: a protocol for measuring cue reactivity in a rat model of cocaine use disorder
Uploaded: 2018-06-18T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder at JoVE.com

Tüm davranış test çekirdeğindeyken Dr Kelly Dineley tarafından yönetildi ve bağımlılığı araştırma, Dr Kathryn Cunningham tarafından yönetilen merkezi içinde yer alan Teksas Üniversitesi Tıbbi şube (UTMB) kemirgen In Vivo değerlendirme (RIVA) gerçekleştirildi. Bu eser Peter F. McManus hayırsever güven, Ulusal Enstitüsü'nden Çevre Sağlık Bilimleri Merkezi UTMB, Çevresel Toksikoloji geldi desteği (T32ES007254), UTMB (UL1TR001439), translasyonel Bilimleri Enstitüsü Mitchell merkezi nörodejeneratif hastalıklar ve UTMB (DA007287, DA070087 ve pilot çalışma fonları) bağımlılığı araştırma merkezi.

Tüm hayvan manipülasyonlar bakım ve Laboratuvar hayvanlarının kullanım kılavuzu (2011) uygun olarak ve kurumsal hayvan bakım ve kullanım Kurulu onayı ile yapılır.
1. hayvanlar
<ol><li>Erkek Sprague Dawley rat yaklaşık 8-9 hafta-in yaş (250-260 g) için en az yedi gün 12 h koyu döngüsü (6:00-18:00 h ışıkları) üzerinde 21-23 ° C ve 45-%50 nem muhafaza bir koloni odada alışmana.</li>
	<li>Fareler iki ev / kafes ve her gün çalışma kolu. Gıda sağlamak ve ...

Uyuşturucu eşleştirilmiş ipuçları ve fizyolojik değişiklikler bu cues16 yanıt olarak maruz relapse,11,16 ile ilişkili ve yukarıda contingently istihdam kokain işaret reaktivite testi kokain eşleştirilmiş ipuçları sunar ilaç yokluğu; Böylece, ilaç-arama davranışı daha önce aktif kollu pres şeklinde nüks güvenlik açığı bir ölçüsü olarak hizmet vermektedir. Burada açıklanan işaret reaktivite protokol han...

Kokain kullanımı bozukluğu (GEVİŞ) hangi sırasında daha önce teşvik değer1nötr uyaran kazanç tekrarlayan öz yönetim bir yörünge izler. İşaret reaktivite daha önce uyuşturucu alma deneyimi ile bağlantılı ipuçlarını duyarlılığı, ve insan özlem2',3,4,5önemli bir rol oynar. CUD yanı sıra nüks ilerleme sırasında oruç, riski yüksek hassasiyet uyuşturucu ilgili ipuçları6,7hızlı bireyler için daha yüksek olduğu düşünülmektedir. Çevresel bağlamlarda (Örneğin, insanlar, binalar, müzik türleri) ve ayrı uyuşturucu ilişkili uyaranlara (Örneğin, gereçlerinin) kokain ödül ile ilişkili hale gelir; pozlama bu ipuçlarını çevresel Fizyoloji (Örneğin, kalp hızı, cilt sıcaklığı ve cilt direnç), beyin plastisite ve beyin fonksiyonel bağlantı2,8,9 değişiklikleri tetikleyebilir ,10. Başka bir deyişle, re-pozlama kokain ilgili ipuçlarını limbik corticostriatal devreler appetitive yaklaşım (ilaç-arama) davranış11,12 sürücü şartına fizyolojik ve öznel yanıt uyandırmak için etkinleştirir ,13,14,15.
Fonksiyonel beyin görüntüleme analizleri ile ölçülen işaret reaktivite CUD16olan bireylerde nüks açığının akıllı. Bir vekil ölçmek için relaps riski ve çevirim çalışmaları için yararlanılabilir işaret reaktivite ölçümleri kemirgen modellerinde hizmet. Böylece, bir farmakoterapi işaret reaktivite Rodents olabilir azaltır insan klinik çalışmalarda nüks önleme tedavisi olarak ileri taşıdı. Çünkü şu anda yok FDA onaylı sağaltımı CUD17ile gerekli translasyonel hak ve akıllı yürürlük preklinik modelleri özellikle önemlidir.
Kemirgen öz yönetim yordam altın standart, temel CUD translasyonel modeli ile akıllı geçerlilik insan uyuşturucu alma18 ve moleküler ve fizyolojik anlamak için önemli işler. Yanıt - yanıt -bağımlı kokain pozlama göre farklı davranış, moleküler ve nörokimyasal etkileri kokain sonuçlarındabağımsız teslim; Örn., yanıt -bağımsız kokain teslim anlamlı olarak daha yüksek mortalite19çağrıştırır. Ayrıca, yanıt -bağımlı kokain öz yönetim oruç nörokimyasal sonuçlarını bu yanıt -bağımsız kokain teslim20, oruç tarafından tetiklenen farklıdır 21. böylece, yanıtbağımlı teslim kokain alan CUD modelleri üstün translasyonel işaret reaktivite ve eylem ilişkili mekanizmaları değerlendirirken modellerdir.
Aşağıda özetlenen iletişim kuralında, kokain intravenöz kalıcı bir intra şah kateter teslim edilir. Ancak, ilaç ağız ve solunum yolları üzerinden yapabilirsiniz için alternatif yöntemler geliştirilmiştir. Önemlisi, kemirgenler uyuşturucu teslimini operant yanıtları ile benzer insanları kontrol. Bu nedenle, kemirgenler ve insanlar22tarafından kendi kendine yönetilen ilaçlar arasında yüksek uyumluluk yoktur. Aşağıdaki preklinik uyuşturucu öz yönetim yordam basarak, araç kontrol yüksek yanıt oranları motive etmek için ilaç dağıtım, takviye kolu kullanır. İlaç-arama davranışı kokain infüzyonu ile başlangıçta "tarafsız" yardımlar (Örneğin, bir uyarıcı ışık veya sesi ve bağlamsal çevrenin hangi kokain öz yönetim oluşur) çifti tarafından eğitilmiş; Bu yardımlar şartına reinforcers haline (gözden geçirme için: Cunningham & Anastasio, 201423). İlaç-arama davranışı (yani, daha önce aktif yandaki tuşuna basarak aracılığıyla kokain sunmak için çalışır) kemirgenler hem de özlem ve nüks CUD konular24, , sonraki re-pozlama kokain ilgili ipuçlarını tetikleyen 25 , 26 , 27.
Tipik olarak, geçersiz kalma eğitim ve/veya uyuşturucu geri alalım ve uyuşturucu ilişkili ortam28,29içinde, yapılan ilaç-arama davranışı kokain öz yönetim takip preklinik kemirgen çalışmaları kullanmak 30 , 31 , 32. presler yokluğunda, uyuşturucu ve/veya işaret teslim, daha önce aktif kolu üzerinde genellikle yok olma33,34,35takip iade ölçüsü oluşturmaktadır. Aksine, işaret reaktivite ilaç-arama davranışı önceden kalma eğitimi28,36,37,38,39 olmadan biçilen aşağıdaki zorla oruç olduğunu .
Sonuç ölçümleri ve deneysel değişkenleri edilmiş dikkatle seçilmiş ve Nörobiyoloji ilaç arama ve nüks benzeri davranış farklı yönlerini incelemek için doğrulanmış ve neuroadaptations modelleri arasında farklılık köklü ve Geçersiz kalma eğitim 40,41,42,43. Ruh Birleşik, yerler ve insanlar44uyuşturucuyla ilgili yardımlar dahil beri Ayrıca, translasyonel bir bakış açısından, kemirgen tükenme eğitim CUD için klinik ayarlarında yansıtılır değil; Bu ipuçları eşsiz kombinasyonu büyük olasılıkla bir klinik ortamda45,46,47mevcut değil. Böylece, burada açıklanan kemirgen modeli daha iyi bir insan durumun paralel çok modelleri şu anda daha görür.
Doğrulanmış kokain öz yönetim eğitim aşağıda açıklanmıştır, zorla oruç ve işaret reaktivite test protokolünü fareler için. Kısaca, fareler intra şah kateterler, kokain ya da serum 'etkin' kolu basın, üzerinden yapabilirsiniz için eğitim ile implante edilir ve kokain ya da serum uyarıcı alınmasından şartına reinforcers hizmet ayrı ışık ve ses ipuçları ile eşleştirilmiş. Kokain öz yönetim 14 gün fareler için 30 gün zorla oruç ve hangi kolu içeri acil ölçülür bir sonraki 60 dk işaret reaktivite testi tabi tutulmaktadır. İşaret reaktivite testi insanlarda kokain nüks güvenlik açığı için bir vekil ölçüsüdür.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catheter Tubing: 0.50mm ID x 0.94mm OD x 0.2mm width</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>11-189-15A</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cue Light</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-229M</td>
			<td>2/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guide Cannulae (22 gauge, pedestal size-8mm, cut length 11 mm, 5 mm above the pedestal)</td>
			<td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td>
			<td>8IC313G5UPXC</td>
			<td>1/rat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>House Light</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-227M</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infusion Pump</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>PHM-100</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levers</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-110M</td>
			<td>2/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Swivels</td>
			<td>Instech, Plymouth Meeting, PA, USA</td>
			<td>375/22</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MED-PC Package with Infusion Pump Software</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>SOF-735 (infusions software SOF-700RA-10 version 1.04)</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal Spring Leash</td>
			<td>Plastics One, Roanoke, VA, USA</td>
			<td>C313CS/SPC</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle (23g, 1 in)</td>
			<td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA</td>
			<td>305193</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitex Mesh (6/6 woven mesh sheet, 12&#34;x12&#34;, 500 microns thick, 38% Open Area)</td>
			<td>Amazon, Seattle, WA, USA</td>
			<td>CMN-0500-C, B000FMUNE6</td>
			<td>~1 sheet/100 rats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCI Interface Package</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>DIG-700P2-R2, MED-SYST-16</td>
			<td>1/16 operant chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Supply for Interface Modules</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>SG-6510D</td>
			<td>1/16 operant chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound-attenuating Cubicle</td>
			<td>Med-Associates Inc. St. Albans, VT, USA</td>
			<td>ENV-018V</td>
			<td>1/operant chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes, 10 mL Luer-Lok&#8482; tip</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>14-827-52</td>
			<td>1 case/experiment (1/operant chamber)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon Tubing for flushes: 0.51mmID x 1.52mmOD 0.51mm thick x 152.4m</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>14-170-15B</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine (10mg/mL)</td>
			<td>Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA</td>
			<td>003845</td>
			<td>~0.5mg/rat*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acraweld Repair Resin</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1013959</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Altalube (ophthalmic ointment)</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>6050059</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocaine</td>
			<td>NIDA North Bethesda, MD, USA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>~350mgs/rat for whole experiment*; requires DEA License</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin (10,000 USP units/10 mL)</td>
			<td>SAGENT Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, USA</td>
			<td>NDC 25021-400-10</td>
			<td>1/experiment (~21 units/rat*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jet Liquid</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1256401</td>
			<td>1/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (100mg/mL, 10mL)</td>
			<td>Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA</td>
			<td>1049007</td>
			<td>~15mg/rat*; requieres DEA license</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methohexital Sodium (Brevital&#174;, 500 mg/50 mL)</td>
			<td>Patterson Dental, Saint Paul, MN, USA</td>
			<td>043-5461</td>
			<td>1/experiment; requires DEA License</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9%, USP)</td>
			<td>Baxter, Deerfield, IL, USA</td>
			<td>2B1307</td>
			<td>1 case/experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptokinase from &#946;-hemolytic Streptococcus (Lancefield Group C) &#8805;3,000 units/mg</td>
			<td>Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>S3134-250KU</td>
			<td>1 vial/experiment (~1.5mg/rat/experiment*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ticarcillin Disodium Salt</td>
			<td>Fisher Scientific, Hampton, NH, USA</td>
			<td>50-213-695</td>
			<td>~4 vials/exeriment or purchase the 25g vial cat.# 50-489-093 (~150mg/rat/experiment*)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (100mg/mL)</td>
			<td>Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA</td>
			<td>033198</td>
			<td>~3mg/rat*</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>*Assumes rat age is that described in the protocol, rats self-administer for 14 days, and flushes occur for 21 days.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for measuring cue reactivity in a rat model of cocaine use disorder

Kokain kullanımı bozukluğu (GEVİŞ) tekrarlayan öz yönetim sırasında daha önce tarafsız uyaranlar teşvik değeri elde bir yörünge izler. İşaret reaktivite, daha önce uyuşturucu alma deneyimi ile bağlantılı ipuçlarını duyarlılığı insan özlem oruç sırasında önemli bir rol oynar. İşaret reaktivite appetitive yaklaşım davranış ise preklinik ve insan çalışmaları olarak ölçülebilir dikkatte yönlendirmeyi uyuşturucu ilgili ipuçlarını doğru olarak tespit edilebilir. Burada işaret reaktivite sıçanlarda kokain yapabilirsiniz için eğitilmiş bir değerlendirmesini açıklar. Kokain öz yönetim şartına reinforcers (yani, ev ışık, uyarıcı ışık, infüzyon pompası sesler) hareket ayrık cues sunumu ile eşleştirilmiş. Oruç bir süre sonrasında, daha önce kokain infüzyonu ile eşleştirilmiş ayrık ipuçları eşliğinde kokain öz yönetim bağlamda kolu presler işaret reaktivite ölçülür. Nörobiyolojik mekanizmaları sağaltımı işaret reaktivite bastırmak ve bu nedenle, nüks güvenlik açığı değiştirmek için değerlendirmek için işaret reaktivite süreçleri de yatan keşfetmek kullanışlı bir modeldir. Modelinin avantajı translasyonel önemini ve onun yüz ve akıllı müddətləri içerir. Birincil model işaret reaktivite görev yalnızca seyrek olarak gerçekleştirilebilir ve sadece kısa süre içinde kullanılması gerekir kısıtlamasıdır (Örn., 1 saat), aksi takdirde fareler kokain uyarıcı ile ayrık ipuçları eşleştirme söndürmek başlayacak. Model ile ayrık ipuçları eşleştirilmiş olumlu destekleyen herhangi bir uyarana Genişletilebilir; Uyuşturucu istismarı özellikle ilgili olsa da, bu model obezite gibi alanlarda nerede lezzetli yiyecek Ödülleri olumlu bir çekim gücü takviye olarak hareket edebilir gelecekteki uygulamalar saptanabilir.

Bir işaret reaktivite testi ile bir daha önce yayımlanmış çalışma57 takip kokain öz yönetim ve oruç denemenin sonuçları Şekil 1' de gösterilir. Çalışma zaman çizelgesi Şekil 1Aile tasvir edilir.
Ölçütlere uyan gibi fareler FR1 ayrı ayrı FR5 için geçiş. Edimsel Klima kokain yönetme grubunda devam ettikçe, onlar bir pl...

Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder at JoVE.com

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

İşaret reaktivite duyarlılık ipuçlarını özlem için katkıda bulunmak ve kanaatkâr insanlarda relaps uyuşturucu alma deneyimleri ile bağlantılı olarak kavramsallaştırma. İşaret reaktivite Rat appetitive yaklaşım davranış kendi kendine Yönetim takip ve oruç zorla bir işaret reaktivite testi sonuçları ölçme dikkatte yönlendirme uyuşturucu ilgili ipuçlarını doğru tarafından modellenmiştir.

Cue reaktivite kokain kullanımı bozukluğu bir sıçan modelinde ölçmek için bir protokol

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

Laboratuar Farelerinde Aradığınız Kokain Footshock Bağlı Yürürlüğe Girmesi incelenmesi için Usulü

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Isolation and Culture of Rat Embryonic Neural Cells: A Quick Protocol

Sıçan Embriyonik Nöral Hücre İzolasyonu ve Kültür: Bir Hızlı Protokol

We are describing a quick method to dissociate and culture hippocampal or cortical neurons from E15-17 rat embryos. The procedure can be applied ...

Trypsin Digest Protocol to Analyze the Retinal Vasculature of a Mouse Model

Tripsin Digest Protokolü Fare Modeli Retina damarları Analiz

Trypsin digest is the gold standard method to analyze the retinal vasculature 1-5. It allows visualization of the entire network of complex ...

Use of a Caspase Multiplexing Assay to Determine Apoptosis in a Hypothalamic Cell Model

Bir Hipotalamik Hücre Modeli Apoptosisi Belirleyen Bir Kaspaz Çoğullama Testi Kullanımı

The ability to multiplex assays in studies of complex cellular mechanisms eliminates the need for repetitive experiments, provides internal controls, and ...

Measuring Connectivity in the Primary Visual Pathway in Human Albinism Using Diffusion Tensor Imaging and Tractography

Difüzyon tensör görüntüleme ve traktografi kullanarak İnsan Albinizmi İlköğretim Görsel Yolu&#39;ndaki Bağlantı Ölçme

In albinism, the number of ipsilaterally projecting retinal ganglion cells (RGCs) is significantly reduced. The retina and optic chiasm have been proposed ...

Measuring Progressive Neurological Disability in a Mouse Model of Multiple Sclerosis

Multipl Skleroz Fare Modeli Progressive Nörolojik Engellilik Ölçümü

After intracerebral infection with the Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV), susceptible SJL mice develop a chronic-progressive demyelinating ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Hipokampal disfonksiyon Fetal alkol spektrum bozuklukları, fare modeli değerlendirmek için izleme Eyeblink Klasik koşullanma kullanımı

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

Akut<emIn vivo</em&gt; Anestezi Uygulanan Sıçanlarda Hiperdirect Pathway&#39;den Lokal Alan Potansiyellerinin Elektrofizyolojik Kayıtları ve Çoklu Ünite Aktivitesi

Converging evidence shows that many neuropsychiatric diseases should be understood as disorders of large-scale neuronal networks. To better understand the ...

Online Transcranial Magnetic Stimulation Protocol for Measuring Cortical Physiology Associated with Response Inhibition

Kortikal Fizyoloji yanıt inhibisyonu ile ilgili ölçmek için online Transkraniyal manyetik stimülasyon Protokolü

We describe the development of a reproducible, child-friendly motor response inhibition task suitable for online Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

Kan - beyin bariyerini bozulma iskemik inme, bir fare modeli Vivo içinde değerlendirilmesi

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...