Name: new methods to study gustatory coding
Uploaded: 2017-06-29T15:00:00
Duration: 10 min 59 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about New Methods to Study Gustatory Coding at JoVE.com

Эта работа была поддержана интрамуральным грантом от NIH-NICHD до MS. Мы благодарим Дж. Дольда и Т. Тэлбота из Core Facility Core NIH-NIMH за помощь в разработке системы доставки таланта.

<ol>
	<li>Chandrashekar, J., Hoon, M. A., Ryba, N. J. P., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+and+cells+for+mammalian+taste.">The receptors and cells for mammalian taste.</a> Nature. 444 (7117), 288-294 (2006).</li><li>Chen, X., Gabitto, M., Peng, Y., Ryba, N. J. P., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Gustotopic+Map+of+Taste+Qualities+in+the+Mammalian+Brain.">A Gustotopic Map of Taste Qualities in the Mammalian Brain.</a> Science. 333 (6047), (2011).</li><li>Yarmolinsky, D. A., Zuker, C. S., Ryba, N. J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+Sense+about+Taste:+From+Mammals+to+Insects.">Common Sense about Taste: From Mammals to Insects.</a> Cell. 139 (2), 234-244 (2009).</li><li>Mueller, K. L., Hoon, M. A., Erlenbach, I., Chandrashekar, J., Zuker, C. S., Ryba, N. J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+and+coding+logic+for+bitter+taste.">The receptors and coding logic for bitter taste.</a> Nature. 434 (7030), 225-229 (2005).</li><li>Zhao, G. Q., Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+for+mammalian+sweet+and+umami+taste.">The receptors for mammalian sweet and umami taste.</a> Cell. 115 (3), 255-266 (2003).</li><li>Huang, A. L., Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cells+and+logic+for+mammalian+sour+taste+detection.">The cells and logic for mammalian sour taste detection.</a> Nature. 442 (7105), 934-938 (2006).</li><li>Pfaffmann, C., Carl, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+afferent+code+for+sensory+quality.">The afferent code for sensory quality.</a> Am Psychol. 14 (5), 226-232 (1959).</li><li>Lemon, C. H., Katz, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+processing+of+taste.">The neural processing of taste.</a> BMC Neurosci. 8 (Suppl 3), (2007).</li><li>Barretto, R. P. J., Gillis-Smith, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+representation+of+taste+quality+at+the+periphery.">The neural representation of taste quality at the periphery.</a> Nature. 517 (7534), 373-376 (2015).</li><li>Reiter, S., Campillo Rodriguez, C., Sun, K., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatiotemporal+Coding+of+Individual+Chemicals+by+the+Gustatory+System.">Spatiotemporal Coding of Individual Chemicals by the Gustatory System.</a> J Neurosci. 35 (35), 12309-12321 (2015).</li><li>Wilson, D. M., Boughter, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bitter+Taste+Stimuli+Induce+Differential+Neural+Codes+in+Mouse+Brain.">Bitter Taste Stimuli Induce Differential Neural Codes in Mouse Brain.</a> PLoS ONE. 7 (7), e41597 (2012).</li><li>Glendinning, J. I., Davis, A., Ramaswamy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+different+taste+cells+and+signaling+pathways+to+the+discrimination+of+"bitter"+taste+stimuli+by+an+insect.">Contribution of different taste cells and signaling pathways to the discrimination of "bitter" taste stimuli by an insect.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 22 (16), 7281-7287 (2002).</li><li>Kay, L. M., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Information+processing+in+the+olfactory+systems+of+insects+and+vertebrates.">Information processing in the olfactory systems of insects and vertebrates.</a> Semin Cell Dev Biol. 17 (4), 433-442 (2006).</li><li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+Coding+of+Taste.">Peripheral Coding of Taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li><li>Carleton, A., Accolla, R., Simon, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coding+in+the+Mammalian+Gustatory+System.">Coding in the Mammalian Gustatory System.</a> Trends Neurosci. 33 (7), 326-334 (2010).</li><li>Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+organization+of+the+chemosensory+system+in+Drosophila+melanogaster:+a+rewiew.">The organization of the chemosensory system in Drosophila melanogaster: a rewiew.</a> Cell Tissue Res. 275 (1), 3-26 (1994).</li><li>Mitchell, B. K., Itagaki, H., Rivet, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+and+central+structures+involved+in+insect+gustation.">Peripheral and central structures involved in insect gustation.</a> Microsc Res Tech. 47 (6), 401-415 (1999).</li><li>Falk, R., Bleiser-Avivi, N., Atidia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labellar+taste+organs+of+Drosophila+melanogaster.">Labellar taste organs of Drosophila melanogaster.</a> J Morphol. 150 (2), 327-341 (1976).</li><li>Hodgson, E. S., Lettvin, J. Y., Roeder, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology+of+a+primary+chemoreceptor+unit.">Physiology of a primary chemoreceptor unit.</a> Science. 122 (3166), 417-418 (1955).</li><li>Delventhal, R., Kiely, A., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+recording+from+Drosophila+labellar+taste+sensilla.">Electrophysiological recording from Drosophila labellar taste sensilla.</a> J Vis Exp. (84), e51355 (2014).</li><li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila).">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila).</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li><li>Descoins, C., Marion-Poll, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+responses+of+gustatory+sensilla+of+Mamestra+brassicae+(Lepidoptera,+Noctuidae)+larvae+to+three+ecdysteroids:+ecdysone,+20-hydroxyecdysone+and+ponasterone.">Electrophysiological responses of gustatory sensilla of Mamestra brassicae (Lepidoptera, Noctuidae) larvae to three ecdysteroids: ecdysone, 20-hydroxyecdysone and ponasterone.</a> A. J Insect Physiol. 45 (10), 871-876 (1999).</li><li>Popescu, A., Couton, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+and+central+projections+of+gustatory+receptor+neurons+on+the+antenna+of+the+noctuid+moth+Spodoptera+littoralis.">Function and central projections of gustatory receptor neurons on the antenna of the noctuid moth Spodoptera littoralis.</a> J Comp Physiol. 199 (5), 403-416 (2013).</li><li>Morita, H., Yamashita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generator+potential+of+insect+chemoreceptor.">Generator potential of insect chemoreceptor.</a> Science. 130 (3380), 922 (1959).</li><li>Davis, N. T., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroanatomy+of+the+sucking+pump+of+the+moth,+Manduca+sexta+(Sphingidae,+Lepidoptera).">Neuroanatomy of the sucking pump of the moth, Manduca sexta (Sphingidae, Lepidoptera).</a> Arthropod Struct Dev. 35 (1), 15-33 (2006).</li><li>St&#252;rckow, B., Adams, J. R., Wilcox, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Neurons+in+the+Labellar+Nerve+of+the+Blow+Fly.">The Neurons in the Labellar Nerve of the Blow Fly.</a> Z Vergl Physiol. 54, 268-289 (1967).</li><li>St&#252;rckow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+studies+of+a+single+taste+hair+of+the+fly+during+stimulation+by+a+flowing+system.">Electrophysiological studies of a single taste hair of the fly during stimulation by a flowing system.</a> Proceed 16 Intern Contr Zool. 3 (8), 102-104 (1963).</li><li>Christensen, T. A., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male-specific,+sex+pheromone-selective+projection+neurons+in+the+antennal+lobes+of+the+moth+Manduca+sexta.">Male-specific, sex pheromone-selective projection neurons in the antennal lobes of the moth Manduca sexta.</a> J Comp Physiol A. 160, 553-569 (1987).</li><li>Reiter, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Gustatory Information Processing. , (2014).</li><li>Saha, D., Leong, K., Katta, N., Raman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-unit+Recording+Methods+to+Characterize+Neural+Activity+in+the+Locust+(Schistocerca+Americana)+Olfactory+Circuits.">Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits.</a> J Vis Exp. (71), (2013).</li><li>Pouzat, C., Mazor, O., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+noise+signature+to+optimize+spike-sorting+and+to+assess+neuronal+classification+quality.">Using noise signature to optimize spike-sorting and to assess neuronal classification quality.</a> J Neurosci Methods. 122 (1), 43-57 (2002).</li><li>Hill, D. N., Mehta, S. B., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+Metrics+to+Accompany+Spike+Sorting+of+Extracellular+Signals.">Quality Metrics to Accompany Spike Sorting of Extracellular Signals.</a> J Neurosci. 31 (24), 8699-8705 (2011).</li><li>Fee, M. S., Mitra, P. P., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+sorting+of+multiple+unit+neuronal+signals+in+the+presence+of+anisotropic+and+non-Gaussian+variability.">Automatic sorting of multiple unit neuronal signals in the presence of anisotropic and non-Gaussian variability.</a> J Neurosci Methods. 69 (2), 175-188 (1996).</li><li>Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mushroom+body+memoir:+from+maps+to+models.">Mushroom body memoir: from maps to models.</a> Nat Rev Neurosci. 4 (4), 266-275 (2003).</li><li>Naraghi, M., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant-induced+oscillations+in+the+mushroom+bodies+of+the+locust.">Odorant-induced oscillations in the mushroom bodies of the locust.</a> J Neurosci. 14, 2993-3004 (1994).</li><li>Laurent, G., Wehr, M., Davidowitz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+representations+of+odors+in+an+olfactory+network.">Temporal representations of odors in an olfactory network.</a> J Neurosci. 16, 3837-3847 (1996).</li><li>Perez-Orive, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oscillations+and+sparsening+of+odor+representations+in+the+mushroom+body.">Oscillations and sparsening of odor representations in the mushroom body.</a> Science. 297, 359-365 (2002).</li><li>Stopfer, M., Jayaraman, V., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+identity+vs.+intensity+coding+in+an+olfactory+system.">Odor identity vs. intensity coding in an olfactory system.</a> Neuron. 39, 991-1004 (2003).</li><li>Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+network+dynamics+and+the+coding+of+multidimensional+signals.">Olfactory network dynamics and the coding of multidimensional signals.</a> Nature Re Neurosci. 3, 884-895 (2002).</li></ol>

Авторам нечего раскрывать.

Описанные здесь способы позволяют регистрировать in vivo от относительно простого животного Manduca sexta , чтобы характеризовать активность множественных, случайно выбранных GRN в течение длительных длительностей (более 2 часов), до, во время и после дегустации. Эти методы также позволяют быстро, последовательно передавать множественные стимулы вкуса с точным временным контролем, преимущества, которые полезны для изучения нейронных механизмов, лежащих в основе дегустационного представления. Этот протокол был использован для изучения того, как реакции GRN на дегустации трансформируются, когда они передаются в их постсинаптические целевые нейроны ( например, в ОЭЗ) путем мониторинга GRN одновременно с моносинхронно связанными интернейронами 10 . Кроме того, эти методы могут быть адаптированы к потребностям экспериментатора, позволяя выполнять сложные парадигмы для изучения фундаментальных аспектов вкусового кодирования. Когда начинаешьВ наших исследованиях одной технической проблемой, которую мы иногда приходилось решать, была неспособность обнаружить сигналы от верхнечелюстного нерва с проводами тетрода. Возможные причины этого разнообразны, поскольку протокол вскрытия является сложным, и для получения хорошей подготовки необходима определенная практика. Во-первых, во время вскрытия мотыля верхнечелюстные нервы легко повреждаются, особенно при удалении оболочки, окружающей нервную ткань. Во-вторых, если оболочка полностью не удалена, тетродные провода могут не иметь доступа к нерву. В обоих случаях начало новой подготовки часто является самым простым способом решения этих проблем. В-третьих, может возникнуть проблема с проводами из тетрода. Это можно проверить, измеряя импеданс проводов, который должен быть ~ 270 кОм на 1 кГц. Если значение импеданса превышает ~ 300 кОм, закрепите провода золотом для достижения желаемого импеданса (см. Ссылку 30 ). В-четвертых, часть оборудования может быть неправильно связанаИли плохое поведение. Другая возможная проблема заключается в том, что пиковые сигналы записываются, но нейрон (ы) не реагирует на вкус. Это может быть связано с тем, что записанные нейроны нечувствительны к набору поданных тантанов. Кроме того, важно помнить, что в дополнение к аксонам GRN верхнечелюстной нерв также несет механосенситивные волокна. Таким образом, можно записывать из механосенсорных нейронов вместо или в дополнение к GRN. Тем не менее, система подачи тантала предназначена для обеспечения постоянного механического ввода в течение всего эксперимента, что делает маловероятным, что ответы на вкусность будут сбиты с ответами на механический компонент его доставки. Нейроны, которые реагируют на некоторые, но не другие вкусы, или по-разному на разные вкусы, могут быть однозначно классифицированы как GRN. Мы рекомендуем использовать свежезаваренные разбавители, чтобы избежать изменения концентрации или состава вкуса из-за разложения или испарения соединенияРастворителя. Мы также рекомендуем регулярно чистить систему, чтобы избежать загрязнения трубопроводов и / или препятствий. Другой возможной технической проблемой является невыгодное отношение сигнал / шум. Эту проблему часто можно решить путем повторного хлорирования или регулировки положения заземляющего электрода ванны. Другим решениям может потребоваться экранирование и минимизация длины каждого электрического соединения в аппарате. Наконец, важно отметить, что для правильного анализа данных, полученных с использованием записей в тетроде, требуется тщательная сортировка всплесков. Мы обнаружили, что полностью автоматизированные методы обычно неадекватны. Мы рекомендуем ознакомиться с литературой по сортировке шипов, прежде чем анализировать данные тетрода 10 , 29 , 31 , 32 , 33 . Альтернативы нашей специализацииTocol может использоваться. Здесь мы описали вскрытие через вентральную часть головки мотыля, обеспечивающее доступ к верхнечелюстным нервам и ОЭЗ, но также можно получить доступ к этим структурам, рассекая через дорзальную сторону. Мы обнаружили, что подготовка дорзальной стороны не является оптимальной для записи из этих вкусовых структур из-за их глубокого местоположения, но этот препарат дает преимущество, позволяя записывать записи из структур более высокого порядка, таких как тело гриба, область, которая была связана с несколькими -сенсорная интеграция, ассоциативное обучение и обработка памяти 34 . Мы сосредоточились на использовании тетродных электродов для записи из верхнечелюстного нерва, но, как мы показали, для этой цели также могут использоваться стандартные внутриклеточные острые электроды. Кроме того, обе методики могут комбинироваться для одновременной записи из нескольких зон мозга 10 . В литературе по нейробиологии представлены многочисленные примеры iКоторые оказались мощными инструментами для выявления фундаментальных принципов сенсорной обработки, таких как обонятельное кодирование, которые применимы как к насекомым, так и к позвоночным 35 , 36 , 37 , 38 , 39 . Мы надеемся, что наши методы приведут к фундаментальным новым представлениям о вкусовом кодировании.

Потребительские и обонятельные системы генерируют внутренние представления о химических веществах в окружающей среде, что приводит к восприятию вкусов и запахов, соответственно. Эти химические чувства необходимы для выявления многочисленных поведений, важных для выживания организма, от поиска помощников и приема пищи, чтобы избежать хищников и токсинов. Процесс начинается, когда экологические химические вещества взаимодействуют с рецепторами, расположенными в плазматических мембранах сенсорных рецепторных клеток; Эти клетки, непосредственно или через взаимодействия с нейронами, трансформируют информацию об идентичности и концентрации химических веществ в электрические сигналы. Эти сигналы затем передаются нейронам более высокого порядка и другим структурам мозга. По мере продвижения этих шагов исходный сигнал всегда претерпевает изменения, которые способствуют способности организма обнаруживать, различать, классифицировать, сравнивать и хранить сенсорную информацию и выбирать подходящее действие. Понимание того, как бюстгальтерВ трансформирует информацию об экологических химических веществах, чтобы наилучшим образом выполнять множество задач, является основным вопросом в нейронауке. Было высказано мнение, что кодирование вкуса является относительно простым: широко распространенное мнение гласит, что каждая химическая молекула, которая вызывает вкус («вкус»), естественно, относится к одному из примерно пяти основных свойств вкуса ( то есть сладкого, горького, кислого , Соленые и умами) 1 . В этом представлении «основного вкуса» задача вкусовой системы состоит в том, чтобы определить, какой из этих основных вкусов присутствует. Кроме того, неврологические механизмы, лежащие в основе представления основного вкуса в нервной системе, неясны и считаются управляемыми либо «помеченной линией» 2 , 3 , 4 , 5 , 6, либо «поперечным рисунком» 7 </suP&gt; , 8 . В маркированном штриховом коде каждая сенсорная клетка и каждый ее нейронный последователь реагируют на одно качество вкуса, вместе образуя прямой и независимый канал для более высоких центров обработки в центральной нервной системе, посвященных этому вкусу. Напротив, в кодовом шаблоне с волокнами каждая сенсорная клетка может реагировать на многочисленные вкусовые качества, так что информация о вкусе представлена ​​общей реакцией населения сенсорных нейронов. Является ли вкусовая информация представленными основными вкусами, через маркированные строки или каким-либо другим механизмом, неясна и находится в центре внимания недавних исследований 3 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 . Наша собственная недавняя работа предполагает, что система вкуса использует пространственно-временный демографический код для генерацииПредставления индивидуальных вкусов, а не основные категории вкуса. 10 . Здесь мы предлагаем 3 новых инструмента для помощи в изучении вкусового кодирования. Во-первых, мы предлагаем использование hawkmoth Manduca sexta в качестве относительно простого модельного организма, поддающегося электрофизиологическому исследованию вкуса и описывающего процедуру вскрытия. Во-вторых, мы предлагаем использовать внеклеточные «тетроды» для регистрации активности отдельных GRN. И в-третьих, мы предлагаем новое устройство для доставки и мониторинга точно рассчитанных импульсов вкуса животного. Эти инструменты были адаптированы из методов, которые наша лаборатория и другие использовали для изучения обонятельной системы. Насекомые, такие как фруктовая муха Drosophila melanogaster , саранча Schistocerca americana , а также моль Manduca sexta, на протяжении десятилетий предоставляли мощные ресурсы для понимания основных принципов о nerVous, включая сенсорное кодирование ( например, обоняние 13 ). У млекопитающих вкусовые рецепторы являются специализированными клетками, которые общаются с нейронами через сложные пути второго мессенджера 1 , 14 . Это проще у насекомых: их рецепторы вкуса - нейроны. Кроме того, пути восприятия млекопитающих вблизи периферии являются относительно сложными, с множеством параллельных нейронных путей, а важные компоненты затрудняют доступ, которые содержатся в небольших костных структурах 15 . По-видимому, тропы наследования насекомых проще. У насекомых GRN содержатся в специализированных структурах, известных как сенсилла, расположенных в антенне, ролях, крыльях и ногах 16 , 17 . GRN непосредственно проектируются в субэзофагеальную зону (ОЭЗ), структуру, роль которой, как считается, в основном является вкусовой 17 , и которая содержит второй порядокВкусовые нейроны 10 . Оттуда информация перемещается в тело, чтобы управлять рефлексами, и к более высоким зонам головного мозга, которые должны быть интегрированы, сохранены и, в конечном счете, способствовать поведенческим выборам 16 . Необходимо охарактеризовать реакции периферического вкуса, чтобы понять, как информация о вкусе распространяется и трансформируется из одной точки в другую во всей нервной системе. Наиболее часто используемый метод непосредственного контроля за нейронной активностью GRN у насекомых является методикой регистрации наконечника 12 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23 . Это связано с размещением электрода непосредственно на сенсиллу, многие из которых относительно легко доступны. Дегустатор входит в электрод, позволяя активировать и использоватьRacellularly измерять нейронные ответы GRNs в сенсиллу. Но поскольку дегустатор содержится в электроде, невозможно измерить активность GRN до того, как тантант будет доставлен или после его удаления, или для обмена вкусовыми добавками без замены электрода 20 . Другой способ, метод записи «боковой стены», также использовался для регистрации активности GRN. Здесь регистрирующий электрод вставляется в основание вкусовой чувствительности 24 , а тантаны доставляются через отдельный стеклянный капилляр на кончике сенсиллу. Оба метода ограничивают запись с GRN на конкретный сенсилл. Здесь мы предлагаем новую методику: запись из случайно выбранных аксонов GRN из разных сенсилл, в то время как отдельно доставляем последовательности хорьков на хоботок. Записи Axon достигаются путем помещения либо острых стеклянных электродов, либо внеклеточных электродных пучков (тетродов) в нерв, который переносит аксоны изGRN в хоботке в ОЭЗ 10 . В Мандуке эти аксоны проходят через верхнечелюстной нерв, который, как известно, является чисто афферентным, что позволяет однозначно регистрировать сенсорные ответы 25 . Этот метод записи из аксонов позволяет более чем на два часа стабильно измерять ответы GRN до, во время и после серии дегустационных презентаций. Здесь мы описываем процедуру вскрытия для обнажения верхнечелюстных нервов вместе с ОЭЗ, что позволяет одновременно регистрировать ответы нескольких GRN и нейронов в ОЭЗ 10 . Мы также описываем использование внеклеточных записей GRN с использованием специально изготовленного 4-канального тетированного проволочного тетрода, который в сочетании с методом сортировки шипов позволяет проводить анализ нескольких (в наших руках, до шести) GRN одновременно. Мы также сравниваем записи, сделанные с тетродами, с записями, сделанными с резким внутриклеточнымэлектроды. Наконец, мы описываем новый аппарат для подачи вкусных стимулов. Адаптированный из оборудования, давно используемого многими исследователями для доставки одорантов в исследованиях обоняния, наш новый аппарат предлагает преимущества для изучения процесса похудения: улучшая предыдущую многоканальную систему доставки, такую ​​как разработанные Штюрков и его коллегами (см. Ссылки 26 , 27 ), наш аппарат достигает точных Контролировать время доставки по вкусу, обеспечивая при этом считывание напряжения этого времени; И он обеспечивает быструю, последовательную доставку нескольких стимулов вкуса 10 . Аппарат купает хоботок в постоянном потоке чистой воды, в который можно доставлять контролируемые импульсы вкуса. Каждый тонкий импульс проходит через хоботок и затем смывается. Tastants содержат небольшое количество безвкусной пищевой краситель, позволяя цветному датчику контролировать, с точным временем, прохождение дегустацииХоботок.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Dissection and specimen preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tube, 15 ml -Falcon</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-959-53A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, Short bevel, 19G x 1-1/2&#34;&#160;</td>
			<td>&#160;MONOJET</td>
			<td>888200144</td>
			<td>For aplying air to remove the hair from the moth.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modeling Clay-Van Aken Plastalina&#160;</td>
			<td>DickBlick</td>
			<td>33268</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish-100 x 15 mm&#160;</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>89000-304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tip (1-200 &#181;L)</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1111-0806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blade</td>
			<td>Techni Edge</td>
			<td>TE05-071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 AWG standard hookup wire</td>
			<td>AlphaWire</td>
			<td>1551</td>
			<td>For inserting the proboscis into the pippete tip.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Batik wax</td>
			<td>Jacquard</td>
			<td>7946000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric waxer</td>
			<td>Almore International</td>
			<td>66000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Myscroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ75</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #1 forceps (coarse)&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500335</td>
			<td>For removing fat and non nervous tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 titanium forceps (fine)&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14096</td>
			<td>For removing fat and non nervous tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5SF forceps (super-fine)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500085</td>
			<td>For desheathing the nervious tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas scissors (fine)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500086</td>
			<td>For removing the cuticle.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase/Dispase</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>11097113001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epoxy</td>
			<td>Permatex</td>
			<td>84101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Saline perfusion system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extension set with rate flow regulator</td>
			<td>&#160;B Braun Medical Inc.</td>
			<td>V5200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IV administration set with Y injection site</td>
			<td>&#160;B Braun Medical Inc.</td>
			<td>V1402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Tastant delivery system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White Translucent Nylon Tubing OD 1/4&#34;, ID 1/8&#34;</td>
			<td>Small Parts Inc.</td>
			<td>B001JJT4SA</td>
			<td>Rigid tube that connects the four main elements of the system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soldering iron</td>
			<td>Circuit Specialists</td>
			<td>ZD200BK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotary tool-Dremel</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>4200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene mesh, hole size (hole size 0.1 x 0.13 cm)&#160;</td>
			<td>Industrial Netting</td>
			<td>XN5170</td>
			<td>For ensuring that the probosises of different animals are placed in the same location.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressurized 16-Channel perfusion system&#160;</td>
			<td>Bioscience Tools</td>
			<td>PS-16H</td>
			<td>For tastant delivery. This system includes pinch valves, tubing, manifold, solution cylinders, valve controler and fitting accesories.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tubing, ID 0.034&#34;, ID 0.050&#34;</td>
			<td>Becton, Dickinson &#38; Co</td>
			<td>427421</td>
			<td>&#160;Output tube from the perfusion system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pneumatic PicoPump</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>SYS-PV820</td>
			<td>For controlling the output channel of the perfusion system.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition software system, LabVIEW PCI-MIO-16E-4 DAQ card</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>LabVIEW 2011</td>
			<td>To control the pico pump for tastant delivery and to record the signals from the color sensor .</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compulab 3 Manostat peristaltic pump</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1366</td>
			<td>For pumping water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, ID 1/16&#34; OD 1/8&#34;</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>WU-95802-02</td>
			<td>To connect the water source to the peristaltic pump tubing, and the outlet tube of the pump to the rigid tube of the delivery system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Color sensor-digital fiber optic sensor</td>
			<td>Keyence</td>
			<td>&#160;FS-V31M</td>
			<td>For monitoring tastant delivery.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Color sensor-reflective fiber unit</td>
			<td>Keyence</td>
			<td>FU35-FZ</td>
			<td>To connect the color sensor device.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental periphery Wax</td>
			<td>Henry-Schein Dental</td>
			<td>6652151</td>
			<td>To secure the proboscis into the rigid tube.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two 3.7 L containers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To provide water to the system, and to recollect the water waste.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green FCF&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dressing forceps 25.5 cm</td>
			<td>WPI</td>
			<td>500364</td>
			<td>To introduce moths proboscis into the proboscis hole from the rigid tube.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Electrophysiology Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D.C. amplifier</td>
			<td>Brown-Lee</td>
			<td>440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lamp</td>
			<td>Schott</td>
			<td>Schott Fostec Light Source DCR 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manual micromanipulator</td>
			<td>Leica</td>
			<td>micromanipulator</td>
			<td>To precicely insert the tetrodes into the animals brain. The manipulator has to allow fine and coarse movements in x, y and z axis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ75</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibration-isolation table (MICRO-g lab table)</td>
			<td>TMC</td>
			<td>63-541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>Tektronix&#160;</td>
			<td>TDS2014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16-channle pre-amplifier and amplifier</td>
			<td>16 Channel MA-800 Amplifier System&#160;</td>
			<td>B.E.S 2013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer</td>
			<td>Dell</td>
			<td>optiplex 780</td>
			<td>The following are the minimum recommended requirements. RAM: 3.32GHz, 3GB. Processor: Intel Core&#160;2 Duo. Graphic card: integrated Intel GMA X4500.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition software system, LabVIEW PCI-MIO-16E-4 DAQ card</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>LabVIEW 2011</td>
			<td>To control the pico pump for tastant delivery and to record the signals from the color sensor and electrode .</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Tastants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KAc</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5708</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LiCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L9650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>73575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>84097</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

new methods to study gustatory coding

Чувство вкуса позволяет животным обнаруживать химические вещества в окружающей среде, вызывая поведение, критичное для выживания. Когда Hustator Receptor Neurons (GRNs) обнаруживают дегустационные молекулы, они кодируют информацию об идентичности и концентрации вкуса как модели электрической активности, которые затем распространяются на последующие нейроны в головном мозге. Эти шаблоны представляют собой внутренние представления вкуса, которые затем позволяют животному выбирать действия и формировать воспоминания. Использование относительно простых моделей животных было мощным инструментом для изучения основных принципов сенсорного кодирования. Здесь мы предлагаем три новых метода изучения вкусового кодирования с использованием моли Manduca sexta . Во-первых, мы представляем процедуру вскрытия для выявления верхнечелюстных нервов и субэзофагеальной зоны (ОЭЗ), что позволяет регистрировать активность GRN из их аксонов. Во-вторых, мы описываем использование внеклеточных электродов для регистрации активности нескольких GRN путем размещения teТроевые провода непосредственно в верхнечелюстной нерв. В-третьих, мы представляем новую систему доставки и мониторинга с высокой временной точностью, импульсами разных вкусов. Эти методы позволяют характеризовать ответы нейронов in vivo непосредственно из GRN до, во время и после доставки тантанов. Мы приводим примеры следов напряжения, записанных из нескольких GRN, и представляем пример того, как метод сортировки шипов может быть применен к данным для идентификации ответов отдельных нейронов. Наконец, чтобы подтвердить наш подход к записи, мы сравниваем внеклеточные записи, полученные из GRN с тетродами, с внутриклеточными записями, полученными с острыми стеклянными электродами.

Активность GRN может быть записана с использованием внеклеточного тетродного электрода до, во время и после допинга ( рис. 6A и 6C ). На рисунке 6А (средняя и нижняя панели) показаны отфильтрованные (300-6000 Гц) следы напряжения, записанные каждым из четырех проводов, помещенных в верхнечелюстной нерв, где могут наблюдаться сигналы разных амплитуд, отражающих потенциалы действия (стрелки). Импульс 1 с tastant (1 M сахароза) был доставлен 2 с после начала эксперимента; Начальное и смещение стимула контролировалось датчиком цвета ( рис. 6А , верхняя панель). Тантальные индуцированные всплески, которые можно наблюдать в каждом из четырех каналов ( рис. 6А , средняя панель). GRN можно идентифицировать и отличать от механосенсоров (не показано здесь), когда они реагируют на некоторые вкусы, а не другие Чтобы идентифицировать и изолировать отдельные реакции нейронов от записей тетрода, мы выполнили сортировку по шипу в автономном режиме с использованием набора пользовательских функций, основанных на методах Pouzat&#39;s 31 и Kleinfeld&#39;s 32 , 33 (эти методы описаны в этих цитатах: 10 , 29 ). На фиг.6В показан пример сортировки шипов, примененный к данным, показанным на фиг.6А , в которых были обнаружены три хорошо изолированных блока. Растровые графики на рис. 6C изображают ответы трех изолированных единиц на рисунке 6B на шесть разных вкусов (1 м сахароза, мальтоза и NaCl, 100 мМ кофеина и 10 мМ берберина и лобинелина), доставленные последовательно (4 испытанияS / tastant). Как показано на рисунке 6C , зарегистрированные GRN имеют разные уровни базовой активности, начиная от тихих (GRNs 1) до низких или умеренных (GRN 2 и 3). После дегустационного начала GRN демонстрируют разнообразные формы активности и демонстрируют различную селективность вкусов. Например, GRN 1 отвечал только на сахарозу, тогда как GRN 2 отвечал на мальтозу и NaCl всплеском всплесков и на лобелин с пиками только в начале стимула. Кроме того, некоторые ответы блокируются по времени стимула ( например, ответ GRN 1 на сахарозу), тогда как другие ответы превышают продолжительность стимула ( например, ответ GRN 3 на берберин) или содержат как возбуждающие, так и ингибирующие компоненты ( например, рисунок 7 GRN 2 ответы на NaCl и сахарозу). Для получения дополнительной информации о различных особенностях и характеристиках GRN см. Ссылку 10 . <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page= &quot;1&quot;&gt; Чтобы проверить использование методов тетрода и сортировки шипов для регистрации GRN из верхнечелюстного нерва, мы выполнили внутриклеточные записи из аксонов GRN у других животных с использованием обычных острых стеклянных электродов (сопротивление 80-120 МОм). Мы обнаружили, что картины активности, полученные с использованием внутриклеточных записей, были сходны с ответами, наблюдаемыми с использованием техники тетрода ( рис. 7 ). Трассировки напряжения в зеленой коробке на панели А регистрировались внутриклеточно из GRN 1 в течение 5 последовательных испытаний представления сахарозы, а одни и те же ответы показаны как растровые графики в панели B. (Обратите внимание, что этот тип ответов соответствует таковым, полученным с тетродами и Показанный на рис. 6C .) GRN 2, записанный с острыми внутриклеточными электродами, показывает более широкую характеристику ответа. <img alt="Рисунок 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55868/55868fig6v2.jpg"/&gt; Рисунок 6: Репрезентативные результаты регистрации верхнечелюстных нервов с внеклеточными тетродами. ( A ) Отфильтрованные (300-6000 Гц) напряжения, записанные каждым из четырех проводов в верхнечелюстном нерве, показаны (средняя панель). В течение периода времени, обозначенного красным затенением на средней панели, был применен импульс длительностью 1 с. Начало и смещение стимула контролировалось датчиком цвета, как показано красной дорожкой напряжения на верхней панели, и обозначается на средней панели красно-заштрихованной областью. Пунктирные горизонтальные линии обозначают +50 (верхний), 0 (средний) и -50 (снизу) мкВ. Отображается увеличение трасс необработанных напряжений, соответствующих площади внутри вертикальных пунктирных линий (нижняя панель). Примеры спайков обозначены стрелками. ( B ) Пример сортировки шипов, применяемый к данным, показанным на панели A. Формы сигналов, записанные на каждом из четырех внеклеточных проводов (1-4) arE, идентифицированные с тремя различными GRN (единицы 1-3), способствующие записываемым сигналам. Отдельные события (цветные тонкие линии) и средняя (толстая черная линия) показаны для трех единиц. Необходимо учитывать ряд статистических критериев, чтобы надежно идентифицировать независимые единицы, используя метод сортировки шипов (см. Ссылки 10 , 29 ). ( C ) показаны растровые графики, представляющие ответы трех изолированных единиц, на последовательность из шести разных вкусов (4 испытания / вкус). Красная затененная область указывает период времени доставки (1 с). Концентрация тантанов составляла 1 М (сахароза, мальтоза, NaCl), 100 мМ (кофеин) и 10 мМ (бербер и лобелин). <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55868/55868fig6v2large.jpg" target="_blank">Нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a> <img alt="Рисунок 7" c<html> Lass = &quot;xfigimg&quot; src = &quot;/ files / ftp_upload / 55868 / 55868fig7.jpg&quot; /&gt; Рисунок 7 : Внутриклеточные записи от аксонов GRN. ( A , зеленая рамка). Трассы напряжения, записанные из GRN с острыми стеклянными внутриклеточными электродами (сопротивление 80-120 МОм), помещены в верхнечелюстной нерв, вызванный 5 последовательными стимуляциями с 1 М сахарозой (Suc). ( B ) Растровые графики ответов двух GRN, включая ответы, показанные на панели A (панель зеленого ящика), до двух разных вкусов, поставленных в последовательности (100 мМ серого цвета шрифта, 1 M черного цвета шрифта), записанных с помощью острых стеклянных внутриклеточных электродов Помещенных в верхнечелюстной нерв (7 проб / опытов и 3 испытания / вода показаны). Время доставки тантата обозначается красно-затененными участками обеих панелей. Начальное и смещение стимула контролировалось цветовым датчиком, о чем свидетельствуют красные следы напряжения в нижней части каждой панели.Es / ftp_upload / 55868 / 55868fig7large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Watch this Scientific Journal Video about New Methods to Study Gustatory Coding at JoVE.com

New Methods to Study Gustatory Coding

Мы представляем три новых метода изучения вкусового кодирования . Используя простое животное, моль Manduca sexta ( Manduca ) , мы описываем протокол вскрытия, использование внеклеточных тетродов для регистрации активности множественных вкусовых рецепторных нейронов и систему для доставки и мониторинга точно синхронизированных импульсов тантанов.

Новые методы изучения кодирования вкуса

The sense of taste allows animals to detect chemicals in the environment, giving rise to behaviors critical for survival. When Gustatory Receptor Neurons ...

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Neuroscience

Human Biology

Sensory Systems

SCIENTISTS IN ACTION

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Лазерная Захват микродиссекции Drosophila Периферийные Нейроны

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

How to Create and Use Binocular Rivalry

Как создавать и использовать бинокулярный Соперничество

Each of our eyes normally sees a slightly different image of the world around us. The brain can combine these two images into a single coherent ...

Study Glial Cell Heterogeneity Influence on Axon Growth Using a New Coculture Method

Исследование глиальных Влияние неоднородности сотовый на рост Axon Использование нового метода Coculture

In the central nervous system of all mammals, severed axons after injury are unable to regenerate to their original targets and functional recovery is ...

Methods for Study of Neuronal Morphogenesis: Ex vivo RNAi Electroporation in Embryonic Murine Cerebral Cortex

Methods for Study of Neuronal Morphogenesis: Ex vivo RNAi Electroporation in Embryonic Murine Cerebral Cortex

Методы изучения морфогенеза нейронов:<em&gt; Ex естественных условиях</em&gt; RNAi Электропорация в эмбриональной коры головного мозга мышей

The cerebral cortex directs higher cognitive functions. This six layered structure is generated in an inside-first, outside-last manner, in which the ...

Measuring the Subjective Value of Risky and Ambiguous Options using Experimental Economics and Functional MRI Methods

Измерение субъективной ценности рискованный и неоднозначный вариантов с использованием экспериментальной экономики и функциональной МРТ методы

Most of the choices we make have uncertain consequences. In some cases the probabilities for different possible outcomes are precisely known, a condition ...

Methods to Assay Drosophila Behavior

Methods to Assay Drosophila Behavior

Методы Анализ Drosophila Поведение

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

A Caenorhabditis elegans Model System for Amylopathy Study

A Caenorhabditis elegans Model System for Amylopathy Study

<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em&gt; Модельной системы для исследования Amylopathy

Amylopathy is a term that describes abnormal synthesis and accumulation of amyloid beta (A&beta;) in tissues with time. A&beta; is a hallmark of ...

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

RNAi-опосредованной Двухместный Нокдаун гена и вкусовые восприятия измерений в медоносных пчел (<em&gt; Apis MELLIFERA</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

Мембранный потенциал Краска Визуализация вентромедиального Hypothalamus нейроны от взрослых мышей по изучению глюкозы Sensing

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

A Method to Make a Craniotomy on the Ventral Skull of Neonate Rodents

Метод Сделать трепанации черепа на брюшной Череп новорожденного Грызуны

The use of a craniotomy for in vivo experiments provides an opportunity to investigate the dynamics of diverse cellular processes in the mammalian brain ...