Name: new methods to study gustatory coding
Uploaded: 2017-06-29T15:00:00
Duration: 10 min 59 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about New Methods to Study Gustatory Coding at JoVE.com

Detta arbete stöddes av ett intramuralt bidrag från NIH-NICHD till MS Vi tackar G. Dold och T. Talbot för NIH-NIMH-instrumentets kärnfacilitet för hjälp vid utformningen av smakgivande leveranssystemet.

<ol>
	<li>Chandrashekar, J., Hoon, M. A., Ryba, N. J. P., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+and+cells+for+mammalian+taste.">The receptors and cells for mammalian taste.</a> Nature. 444 (7117), 288-294 (2006).</li><li>Chen, X., Gabitto, M., Peng, Y., Ryba, N. J. P., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Gustotopic+Map+of+Taste+Qualities+in+the+Mammalian+Brain.">A Gustotopic Map of Taste Qualities in the Mammalian Brain.</a> Science. 333 (6047), (2011).</li><li>Yarmolinsky, D. A., Zuker, C. S., Ryba, N. J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+Sense+about+Taste:+From+Mammals+to+Insects.">Common Sense about Taste: From Mammals to Insects.</a> Cell. 139 (2), 234-244 (2009).</li><li>Mueller, K. L., Hoon, M. A., Erlenbach, I., Chandrashekar, J., Zuker, C. S., Ryba, N. J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+and+coding+logic+for+bitter+taste.">The receptors and coding logic for bitter taste.</a> Nature. 434 (7030), 225-229 (2005).</li><li>Zhao, G. Q., Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+for+mammalian+sweet+and+umami+taste.">The receptors for mammalian sweet and umami taste.</a> Cell. 115 (3), 255-266 (2003).</li><li>Huang, A. L., Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cells+and+logic+for+mammalian+sour+taste+detection.">The cells and logic for mammalian sour taste detection.</a> Nature. 442 (7105), 934-938 (2006).</li><li>Pfaffmann, C., Carl, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+afferent+code+for+sensory+quality.">The afferent code for sensory quality.</a> Am Psychol. 14 (5), 226-232 (1959).</li><li>Lemon, C. H., Katz, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+processing+of+taste.">The neural processing of taste.</a> BMC Neurosci. 8 (Suppl 3), (2007).</li><li>Barretto, R. P. J., Gillis-Smith, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+representation+of+taste+quality+at+the+periphery.">The neural representation of taste quality at the periphery.</a> Nature. 517 (7534), 373-376 (2015).</li><li>Reiter, S., Campillo Rodriguez, C., Sun, K., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatiotemporal+Coding+of+Individual+Chemicals+by+the+Gustatory+System.">Spatiotemporal Coding of Individual Chemicals by the Gustatory System.</a> J Neurosci. 35 (35), 12309-12321 (2015).</li><li>Wilson, D. M., Boughter, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bitter+Taste+Stimuli+Induce+Differential+Neural+Codes+in+Mouse+Brain.">Bitter Taste Stimuli Induce Differential Neural Codes in Mouse Brain.</a> PLoS ONE. 7 (7), e41597 (2012).</li><li>Glendinning, J. I., Davis, A., Ramaswamy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+different+taste+cells+and+signaling+pathways+to+the+discrimination+of+"bitter"+taste+stimuli+by+an+insect.">Contribution of different taste cells and signaling pathways to the discrimination of "bitter" taste stimuli by an insect.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 22 (16), 7281-7287 (2002).</li><li>Kay, L. M., Stopfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Information+processing+in+the+olfactory+systems+of+insects+and+vertebrates.">Information processing in the olfactory systems of insects and vertebrates.</a> Semin Cell Dev Biol. 17 (4), 433-442 (2006).</li><li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+Coding+of+Taste.">Peripheral Coding of Taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li><li>Carleton, A., Accolla, R., Simon, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coding+in+the+Mammalian+Gustatory+System.">Coding in the Mammalian Gustatory System.</a> Trends Neurosci. 33 (7), 326-334 (2010).</li><li>Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+organization+of+the+chemosensory+system+in+Drosophila+melanogaster:+a+rewiew.">The organization of the chemosensory system in Drosophila melanogaster: a rewiew.</a> Cell Tissue Res. 275 (1), 3-26 (1994).</li><li>Mitchell, B. K., Itagaki, H., Rivet, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+and+central+structures+involved+in+insect+gustation.">Peripheral and central structures involved in insect gustation.</a> Microsc Res Tech. 47 (6), 401-415 (1999).</li><li>Falk, R., Bleiser-Avivi, N., Atidia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labellar+taste+organs+of+Drosophila+melanogaster.">Labellar taste organs of Drosophila melanogaster.</a> J Morphol. 150 (2), 327-341 (1976).</li><li>Hodgson, E. S., Lettvin, J. Y., Roeder, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiology+of+a+primary+chemoreceptor+unit.">Physiology of a primary chemoreceptor unit.</a> Science. 122 (3166), 417-418 (1955).</li><li>Delventhal, R., Kiely, A., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+recording+from+Drosophila+labellar+taste+sensilla.">Electrophysiological recording from Drosophila labellar taste sensilla.</a> J Vis Exp. (84), e51355 (2014).</li><li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila).">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila).</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li><li>Descoins, C., Marion-Poll, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+responses+of+gustatory+sensilla+of+Mamestra+brassicae+(Lepidoptera,+Noctuidae)+larvae+to+three+ecdysteroids:+ecdysone,+20-hydroxyecdysone+and+ponasterone.">Electrophysiological responses of gustatory sensilla of Mamestra brassicae (Lepidoptera, Noctuidae) larvae to three ecdysteroids: ecdysone, 20-hydroxyecdysone and ponasterone.</a> A. J Insect Physiol. 45 (10), 871-876 (1999).</li><li>Popescu, A., Couton, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+and+central+projections+of+gustatory+receptor+neurons+on+the+antenna+of+the+noctuid+moth+Spodoptera+littoralis.">Function and central projections of gustatory receptor neurons on the antenna of the noctuid moth Spodoptera littoralis.</a> J Comp Physiol. 199 (5), 403-416 (2013).</li><li>Morita, H., Yamashita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generator+potential+of+insect+chemoreceptor.">Generator potential of insect chemoreceptor.</a> Science. 130 (3380), 922 (1959).</li><li>Davis, N. T., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroanatomy+of+the+sucking+pump+of+the+moth,+Manduca+sexta+(Sphingidae,+Lepidoptera).">Neuroanatomy of the sucking pump of the moth, Manduca sexta (Sphingidae, Lepidoptera).</a> Arthropod Struct Dev. 35 (1), 15-33 (2006).</li><li>St&#252;rckow, B., Adams, J. R., Wilcox, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Neurons+in+the+Labellar+Nerve+of+the+Blow+Fly.">The Neurons in the Labellar Nerve of the Blow Fly.</a> Z Vergl Physiol. 54, 268-289 (1967).</li><li>St&#252;rckow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+studies+of+a+single+taste+hair+of+the+fly+during+stimulation+by+a+flowing+system.">Electrophysiological studies of a single taste hair of the fly during stimulation by a flowing system.</a> Proceed 16 Intern Contr Zool. 3 (8), 102-104 (1963).</li><li>Christensen, T. A., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Male-specific,+sex+pheromone-selective+projection+neurons+in+the+antennal+lobes+of+the+moth+Manduca+sexta.">Male-specific, sex pheromone-selective projection neurons in the antennal lobes of the moth Manduca sexta.</a> J Comp Physiol A. 160, 553-569 (1987).</li><li>Reiter, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Gustatory Information Processing. , (2014).</li><li>Saha, D., Leong, K., Katta, N., Raman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-unit+Recording+Methods+to+Characterize+Neural+Activity+in+the+Locust+(Schistocerca+Americana)+Olfactory+Circuits.">Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits.</a> J Vis Exp. (71), (2013).</li><li>Pouzat, C., Mazor, O., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+noise+signature+to+optimize+spike-sorting+and+to+assess+neuronal+classification+quality.">Using noise signature to optimize spike-sorting and to assess neuronal classification quality.</a> J Neurosci Methods. 122 (1), 43-57 (2002).</li><li>Hill, D. N., Mehta, S. B., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+Metrics+to+Accompany+Spike+Sorting+of+Extracellular+Signals.">Quality Metrics to Accompany Spike Sorting of Extracellular Signals.</a> J Neurosci. 31 (24), 8699-8705 (2011).</li><li>Fee, M. S., Mitra, P. P., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+sorting+of+multiple+unit+neuronal+signals+in+the+presence+of+anisotropic+and+non-Gaussian+variability.">Automatic sorting of multiple unit neuronal signals in the presence of anisotropic and non-Gaussian variability.</a> J Neurosci Methods. 69 (2), 175-188 (1996).</li><li>Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mushroom+body+memoir:+from+maps+to+models.">Mushroom body memoir: from maps to models.</a> Nat Rev Neurosci. 4 (4), 266-275 (2003).</li><li>Naraghi, M., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant-induced+oscillations+in+the+mushroom+bodies+of+the+locust.">Odorant-induced oscillations in the mushroom bodies of the locust.</a> J Neurosci. 14, 2993-3004 (1994).</li><li>Laurent, G., Wehr, M., Davidowitz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+representations+of+odors+in+an+olfactory+network.">Temporal representations of odors in an olfactory network.</a> J Neurosci. 16, 3837-3847 (1996).</li><li>Perez-Orive, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oscillations+and+sparsening+of+odor+representations+in+the+mushroom+body.">Oscillations and sparsening of odor representations in the mushroom body.</a> Science. 297, 359-365 (2002).</li><li>Stopfer, M., Jayaraman, V., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+identity+vs.+intensity+coding+in+an+olfactory+system.">Odor identity vs. intensity coding in an olfactory system.</a> Neuron. 39, 991-1004 (2003).</li><li>Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+network+dynamics+and+the+coding+of+multidimensional+signals.">Olfactory network dynamics and the coding of multidimensional signals.</a> Nature Re Neurosci. 3, 884-895 (2002).</li></ol>

Författarna har ingenting att avslöja.

Metoderna som beskrivs här tillåter in vivo inspelningar från ett relativt enkelt djur, Manduca sexta , för att karakterisera aktiviteten hos flera slumpmässigt utvalda GRNs under långa varaktigheter (i mer än 2 timmar) före, under och efter provning av smak. Dessa metoder tillåter också den snabba, sekventiella tillförseln av multipla smakstimuli med exakt temporal kontroll, fördelar som är användbara för att studera neurala mekanismer som ligger till grund för smakrepresentationen. Detta protokoll har använts för att studera hur svaren från GRN till smakämnen omvandlas när de överförs till sina postsynaptiska målneuroner ( t.ex. i SEZ) genom att övervaka GRNs samtidigt med monosynaptiskt anslutna interneuroner 10 . Dessutom kan dessa metoder anpassas till experimenternas behov, vilket gör det möjligt att genomföra komplexa paradigmer att studera grundläggande aspekter av gustatorisk kodning. När börjarG våra studier, ett tekniskt problem som vi ibland var tvungna att felsöka var oförmågan att upptäcka spiking signaler från maxillary nerv med tetrode trådarna. Möjliga orsaker till detta är olika, eftersom dissektionsprotokollet är utmanande, och en viss övning är nödvändig för att få en bra förberedelse. Först under mothissektion är de maximala nerverna lättskada, speciellt under avlägsnandet av manteln som omger nervvävnaden. För det andra, om manteln inte är helt avlägsnat, kan tetrode-trådarna inte ha tillgång till nerven. I båda fallen är det ofta det enklaste sättet att lösa dessa problem med att starta en ny förberedelse. För det tredje kan det finnas ett problem med tetrode trådarna. Detta kan kontrolleras genom mätning av trådens impedans som ska vara ~ 270 kΩ vid 1 kHz. Om impedansvärdet överstiger ~ 300 kΩ, elektroplastar trådarna med guld för att uppnå önskad impedans (se referens 30 ). För det fjärde kan en utrustningsutrustning vara ouppkoppladEller misshandlar. Ett annat möjligt problem är att spikningssignaler registreras men neuronen (n) verkar inte reagera på smakämnena. Detta kan bero på att de inspelade neuronerna är okänsliga för den uppsatta smakämnen som levereras. Det är också viktigt att komma ihåg att förutom axons av GRNs bär maxillärnerven också mekanosensoriska fibrer. Således är det möjligt att spela in från mekanosensoriska neuroner i stället för eller i tillägg till GRNs. Det smakande leveranssystemet är emellertid utformat för att ge en konstant mekanisk ingång under hela experimentet, vilket gör det osannolikt att svar på en smakämne kommer att förvirras av svar på den mekaniska komponenten av dess leverans. Neuroner som svarar på vissa men inte andra smakämnen eller på olika sätt till olika smakämnen kan klassificeras entydigt som GRN. Vi rekommenderar att du använder nyligen utspädda smakämnen för att undvika variationer i smakkoncentration eller sammansättning på grund av föreningens nedbrytning eller avdunstningAv lösningsmedlet. Vi rekommenderar också att du rengör systemet regelbundet för att undvika rörföroreningar och / eller hinder. Ett annat möjligt tekniskt problem är ett nackdeligt signal-brusförhållande. Detta problem kan ofta lösas genom reklorering eller justering av badjordelektrodens position. Andra lösningar kan kräva skärmning och minimera längden på varje elektrisk anslutning i apparaten. Slutligen är det viktigt att notera att korrekt analys av data som erhållits med hjälp av tetrodeinspelningar kräver noggrann spik sortering. Vi fann att helautomatiserade metoder är generellt otillräckliga. Vi rekommenderar att du är bekant med spikssorteringslitteraturen innan du analyserar tetrode-data 10 , 29 , 31 , 32 , 33 . Alternativ till vår dissektion proTokol kan användas. Här beskrev vi en dissektion genom den ventrala delen av moth head, vilket ger tillgång till maxillary nerver och SEZ, men det är också möjligt att komma åt dessa strukturer genom att dissekera genom dorsala sidan. Vi fann att dorsalberedningen inte är optimal för att göra inspelningar från dessa gustatoriska strukturer på grund av deras djupa läge, men denna förberedelse erbjuder fördelen att möjliggöra inspelningar från högre orderstrukturer såsom svampkroppen, ett område som har associerats med flera -sensorisk integration, associativ inlärning och minnesbehandling 34 . Vi har fokuserat på användningen av tetrodeelektroder för att spela in från maxillarynerven, men som vi illustrerat kan standard intracellulära skarpa elektroder också användas för detta ändamål. Dessutom kan båda teknikerna kombineras för att utföra samtidiga inspelningar från flera hjärnområden 10 . Neurovetenskapslitteraturen erbjuder många exempel på jagNvertebratmodeller som har visat sig vara kraftfulla verktyg för att avslöja grundläggande principer för sensorisk bearbetning, såsom olfaktorisk kodning, som gäller både insekter och ryggradsdjur 35 , 36 , 37 , 38 , 39 . Vi hoppas att våra metoder leder till grundläggande nya insikter om gustatorisk kodning.

Gustatoriska och olfaktoriska system genererar interna representationer av kemikalier i miljön, vilket ger upphov till uppfattningar av smak och lukt. Dessa kemiska sinnen är viktiga för att framkalla många beteenden som är kritiska för organismens överlevnad, allt från att hitta kompisar och måltider för att undvika rovdjur och toxiner. Processen börjar när miljökemikalier interagerar med receptorer belägna i plasmamembranen hos sensoriska receptorceller; Dessa celler, direkt eller genom interaktioner med neuroner, omvandlar information om identitet och koncentration av kemikalier till elektriska signaler. Dessa signaler överförs sedan till högre ordningens neuroner och till andra hjärnstrukturer. Eftersom dessa steg fortskrider, genomgår ursprungssignalen alltid förändringar som främjar organismens förmåga att upptäcka, diskriminera, klassificera, jämföra och lagra den sensoriska informationen och välja en lämplig åtgärd. Förstå hur bhI omvandlar information om miljökemikalier för att bäst utföra en rad olika uppgifter är en grundläggande fråga i neurovetenskap. Gustatkodning har ansetts vara relativt enkel: En allmänt hållen åsikt innebär att varje kemisk molekyl som framkallar en smak (en &quot;smakämne&quot;) naturligt hör till en av de ungefär fem eller så grundläggande smakkvaliteterna ( dvs. söt, bitter, sur , Salt och umami) 1 . I denna &quot;grundläggande smak&quot; -vy är gustationssystemets jobb att bestämma vilken av dessa grundläggande smaker som finns. Vidare är de neurala mekanismerna som ligger bakom den grundläggande smaksrepresentationen i nervsystemet oklara och anses vara styrda av antingen en &quot;märkt linje&quot; 2 , 3 , 4 , 5 , 6 eller en &quot;över fibermönster&quot; 7 </suP&gt; , 8 kod. I en märkt linjekod svarar varje sensorisk cell och var och en av dess neurala följare på en enda smakkvalitet, som tillsammans bildar en direkt och oberoende kanal till högre behandlingscentraler i centrala nervsystemet dedikerade till den smaken. I motsats härtill kan varje sensorisk cell i en tvärgående fibermönsterkod svara på flera smakkvaliteter så att information om smakämnet representeras av det totala svaret hos populationen av sensoriska neuroner. Huruvida gustatorisk information representeras av grundläggande smaker, genom märkta linjer eller genom någon annan mekanism, är oklart och ligger i den senaste undersökningen 3 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 . Vårt eget senaste arbete tyder på att gustatory systemet använder en spatiotemporal befolkningskod för att genereraRepresentationer av enskilda smakämnen i stället för grundläggande smakkategorier 10 . Här erbjuder vi 3 nya verktyg som hjälper till vid studier av gustatorisk kodning. För det första föreslår vi användning av hawkmoth Manduca sexta som en relativt enkel modellorganisme som kan användas för elektrofysiologisk smakstudie och beskriver ett dissektionsförfarande. För det andra föreslår vi användning av extracellulära &quot;tetroder&quot; för att registrera aktiviteten hos individuella GRNs. För det tredje föreslår vi en ny apparat för att leverera och övervaka exakt tidsbestämda pulser av smakämnen till djuret. Dessa verktyg anpassades från tekniker som vårt lab och andra har använt för att studera olfaktoriska systemet. Insekter som fruktflugan Drosophila melanogaster , johannesbrädet Schistocerca americana och moth Manduca sexta har under årtionden gett kraftfulla resurser för att förstå grundläggande principer om nerernVous system, inklusive sensorisk kodning ( t.ex. olfaction 13 ). I däggdjur är smakreceptorer specialiserade celler som kommunicerar med neuroner genom komplexa andra budbärarvägar 1 , 14 . Det är enklare i insekter: deras smak receptorer är neuroner. Vidare är däggdjurs smakvägar nära periferin relativt komplexa med flera parallella neurala vägar och viktiga komponenter är utmanande att komma åt, innehållna i små benformade strukturer 15 . Insektens smakvägar verkar vara enklare. I insekter finns GRNs i specialiserade strukturer som kallas sensilla, som ligger i antennen, munstyckena, vingarna och benen 16 , 17 . GRNs projektar direkt till subesophageal zone (SEZ), en struktur vars roll har ansetts vara huvudsakligen gustatory 17 , och som innehåller andra orderGustatoriska neuroner 10 . Därifrån reser informationen till kroppen för att driva reflexer och till högre hjärnområden att integreras, lagras och i slutändan driva beteendeval 16 . Det är nödvändigt att karakterisera perifer smak svar för att förstå hur smaksinformationen förökas och omvandlas från punkt till punkt i hela nervsystemet. Den vanligaste metoden för att direkt övervaka den neurala aktiviteten hos GRNs i insekter är tippinspelningstekniken 12 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23 . Detta innebär att en elektrod placeras direkt på en sensillum, varav många är relativt lättillgängliga. Smaken ingår i elektroden, vilket gör att man kan aktivera och extMäta racellulärt neuronalt svar av GRN i sensillumet. Men eftersom smakämnet finns i elektroden är det inte möjligt att mäta GRN-aktivitet innan smakgivaren levereras eller efter att den har tagits bort, eller att byta smakämnen utan att ersätta elektroden 20 . En annan metod, &quot;sidovägg&quot; inspelningsteknik, har också använts för att registrera GRNs aktivitet. Här införs en inspelningselektrod i basen av en smak sensillum 24 , och smakämnen levereras genom en separat glaskapillär på sensillumets spets. Båda teknikerna begränsar inspelning från GRN till en viss sensillum. Här föreslår vi en ny teknik: inspelning från slumpmässigt utvalda GRN-axoner från olika sensilar, medan de separat levererar sekvenser av smakämnen till proboscisen. Axoninspelningar uppnås genom att placera antingen skarpa glaselektroder eller extracellulära elektrodbuntar (tetroder) i nerven som bär axoner frånGRNs i proboscis till SEZ 10 . I Manduca passerar dessa axoner maxillärnerven, som är känd för att vara rent avferent, vilket möjliggör en entydig registrering av sensoriska responser 25 . Denna metod för inspelning från axoner möjliggör, i mer än två timmar, stabil mätning av GRN-svar före, under och efter en serie provsmakningspresentationer. Här beskriver vi ett dissektionsförfarande för exponering av maxillärnerven tillsammans med SEZ, vilket kan tillåta att man samtidigt registrerar svaren på flera GRN och neuroner i SEZ 10 . Vi beskriver också användningen av extracellulära inspelningar av GRNs med hjälp av en skräddarsydd 4-kanals twisted wire tetrode som i kombination med en spikesorteringsmetod tillåter analys av flera (i våra händer upp till sex) GRNs samtidigt. Vi jämför ytterligare inspelningar gjorda med tetroder till inspelningar gjorda med skarp intracellulärelektroder. Slutligen beskriver vi en ny apparat för att leverera smakstimuli. Vår nya apparat anpassas från utrustning som många forskare använde för att leverera luktämnen i olfaction-studier, och erbjuder nya fördelar för att studera gustation: Förbättring av tidigare system för flerkanalförsörjning, såsom de som utvecklats av Stürckow och kollegor (se referenser 26 , 27 ), uppnår vår apparat exakt Kontroll över tidpunkten för smakleveransen medan en spänningsavläsning av denna tidpunkt tillhandahålls; Och det möjliggör snabb, sekventiell leverans av flera smakstimuli 10 . Apparaten badar proboscisen i ett konstant flöde av rent vatten i vilket kontrollerade pulser av smakämnet kan levereras. Varje smakpuls passerar över proboscisen och tvättas sedan bort. Tastanter innehåller en liten mängd smaklös matfärgning, så att en färgsensor kan övervaka, med exakt timing, passagen av smakämnet ovÄr proboscisen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Dissection and specimen preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tube, 15 ml -Falcon</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-959-53A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, Short bevel, 19G x 1-1/2&#34;&#160;</td>
			<td>&#160;MONOJET</td>
			<td>888200144</td>
			<td>For aplying air to remove the hair from the moth.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modeling Clay-Van Aken Plastalina&#160;</td>
			<td>DickBlick</td>
			<td>33268</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish-100 x 15 mm&#160;</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>89000-304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tip (1-200 &#181;L)</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1111-0806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blade</td>
			<td>Techni Edge</td>
			<td>TE05-071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 AWG standard hookup wire</td>
			<td>AlphaWire</td>
			<td>1551</td>
			<td>For inserting the proboscis into the pippete tip.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Batik wax</td>
			<td>Jacquard</td>
			<td>7946000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric waxer</td>
			<td>Almore International</td>
			<td>66000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Myscroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ75</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #1 forceps (coarse)&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500335</td>
			<td>For removing fat and non nervous tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 titanium forceps (fine)&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14096</td>
			<td>For removing fat and non nervous tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5SF forceps (super-fine)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500085</td>
			<td>For desheathing the nervious tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas scissors (fine)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500086</td>
			<td>For removing the cuticle.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase/Dispase</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>11097113001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epoxy</td>
			<td>Permatex</td>
			<td>84101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Saline perfusion system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extension set with rate flow regulator</td>
			<td>&#160;B Braun Medical Inc.</td>
			<td>V5200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IV administration set with Y injection site</td>
			<td>&#160;B Braun Medical Inc.</td>
			<td>V1402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Tastant delivery system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White Translucent Nylon Tubing OD 1/4&#34;, ID 1/8&#34;</td>
			<td>Small Parts Inc.</td>
			<td>B001JJT4SA</td>
			<td>Rigid tube that connects the four main elements of the system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soldering iron</td>
			<td>Circuit Specialists</td>
			<td>ZD200BK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotary tool-Dremel</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>4200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene mesh, hole size (hole size 0.1 x 0.13 cm)&#160;</td>
			<td>Industrial Netting</td>
			<td>XN5170</td>
			<td>For ensuring that the probosises of different animals are placed in the same location.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressurized 16-Channel perfusion system&#160;</td>
			<td>Bioscience Tools</td>
			<td>PS-16H</td>
			<td>For tastant delivery. This system includes pinch valves, tubing, manifold, solution cylinders, valve controler and fitting accesories.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene tubing, ID 0.034&#34;, ID 0.050&#34;</td>
			<td>Becton, Dickinson &#38; Co</td>
			<td>427421</td>
			<td>&#160;Output tube from the perfusion system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pneumatic PicoPump</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>SYS-PV820</td>
			<td>For controlling the output channel of the perfusion system.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition software system, LabVIEW PCI-MIO-16E-4 DAQ card</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>LabVIEW 2011</td>
			<td>To control the pico pump for tastant delivery and to record the signals from the color sensor .</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compulab 3 Manostat peristaltic pump</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1366</td>
			<td>For pumping water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tubing, ID 1/16&#34; OD 1/8&#34;</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td>WU-95802-02</td>
			<td>To connect the water source to the peristaltic pump tubing, and the outlet tube of the pump to the rigid tube of the delivery system.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Color sensor-digital fiber optic sensor</td>
			<td>Keyence</td>
			<td>&#160;FS-V31M</td>
			<td>For monitoring tastant delivery.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Color sensor-reflective fiber unit</td>
			<td>Keyence</td>
			<td>FU35-FZ</td>
			<td>To connect the color sensor device.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental periphery Wax</td>
			<td>Henry-Schein Dental</td>
			<td>6652151</td>
			<td>To secure the proboscis into the rigid tube.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two 3.7 L containers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To provide water to the system, and to recollect the water waste.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast green FCF&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dressing forceps 25.5 cm</td>
			<td>WPI</td>
			<td>500364</td>
			<td>To introduce moths proboscis into the proboscis hole from the rigid tube.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Electrophysiology Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D.C. amplifier</td>
			<td>Brown-Lee</td>
			<td>440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lamp</td>
			<td>Schott</td>
			<td>Schott Fostec Light Source DCR 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manual micromanipulator</td>
			<td>Leica</td>
			<td>micromanipulator</td>
			<td>To precicely insert the tetrodes into the animals brain. The manipulator has to allow fine and coarse movements in x, y and z axis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ75</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibration-isolation table (MICRO-g lab table)</td>
			<td>TMC</td>
			<td>63-541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>Tektronix&#160;</td>
			<td>TDS2014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16-channle pre-amplifier and amplifier</td>
			<td>16 Channel MA-800 Amplifier System&#160;</td>
			<td>B.E.S 2013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer</td>
			<td>Dell</td>
			<td>optiplex 780</td>
			<td>The following are the minimum recommended requirements. RAM: 3.32GHz, 3GB. Processor: Intel Core&#160;2 Duo. Graphic card: integrated Intel GMA X4500.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data acquisition software system, LabVIEW PCI-MIO-16E-4 DAQ card</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>LabVIEW 2011</td>
			<td>To control the pico pump for tastant delivery and to record the signals from the color sensor and electrode .</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Tastants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KAc</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5708</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LiCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L9650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>73575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>84097</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

new methods to study gustatory coding

Smakens känsla gör det möjligt för djur att upptäcka kemikalier i miljön, vilket ger upphov till beteende som är kritiska för överlevnad. När gödningsreceptor Neurons (GRNs) detekterar smakämnesmolekyler kodar de information om identiteten och koncentrationen av smakämnet som mönster av elektrisk aktivitet som sedan sprids för att följa neuroner i hjärnan. Dessa mönster utgör interna representationer av smakaren, som då tillåter djuret att välja åtgärder och formminnen. Användningen av relativt enkla djurmodeller har varit ett kraftfullt verktyg för att studera grundläggande principer inom sensorisk kodning. Här föreslår vi tre nya metoder för att studera gustatorisk kodning med Moth Manduca Sexta . Först presenterar vi ett dissektionsförfarande för exponering av maxillary nerver och subesophageal zone (SEZ), vilket möjliggör inspelning av aktiviteten av GRNs från deras axoner. För det andra beskriver vi användningen av extracellulära elektroder för att registrera aktiviteten hos flera GRN genom att placera teTråden direkt i maxillärnerven. För det tredje presenterar vi ett nytt system för leverans och övervakning, med hög temporal precision, pulser av olika smakämnen. Dessa metoder möjliggör karaktärisering av neuronala svar in vivo direkt från GRNs före, under och efter att smakämnen levereras. Vi tillhandahåller exempel på spänningsspår registrerade från flera GRN, och presenterar ett exempel på hur en spikssorteringsteknik kan appliceras på data för att identifiera svaren hos enskilda neuroner. Slutligen, för att validera vår inspelning, jämför vi extracellulära inspelningar som erhållits från GRNs med tetroder till intracellulära inspelningar erhållna med skarpa glaselektroder.

Aktiviteten av GRNs kan registreras med användning av en extracellulär tetrodeelektrod före, under och efter provning av smak ( Figur 6A och 6C ). Figur 6A (mitten och bottenpanelen) visar filtrerade spänningsspår (300-6000 Hz) inspelade av var och en av de fyra trådarna placerade i maxillärnerven, där signaler med olika amplituder som reflekterar åtgärdspotentialer (pilar) kan observeras. En 1 s puls av smakämne (1 M sackaros) levererades 2s efter experimentets början; Stimulans start och offset övervakades av färggivaren ( figur 6A , övre panelen). De smakande inducerade spikarna som kan observeras i var och en av de fyra kanalerna ( Figur 6A , mittpanelen). GRNs kan identifieras och särskiljas från mekanosensorer (ingen som visas här) när de svarar på vissa smakämnen och inte andra För att identifiera och isolera enkla neuronresponser från tetrode-inspelningarna utförde vi off-line spikesortering med hjälp av en uppsättning anpassade funktioner baserade på Pouzats 31 och Kleinfelds 32 , 33 metoder (dessa metoder beskrivs i dessa citat: 10 , 29 ). Figur 6B visar ett exempel på spik sortering applicerad på data som visas i figur 6A , i vilken tre väl isolerade enheter hittades. Rasterplottar från Figur 6C avbildar svaren från de tre isolerade enheterna i figur 6B till sex olika smakämnen (1 M sackaros, maltos och NaCl, 100 mM koffein och 10 mM berberin och lobelin) levereras i följd (4 försökS / smakämne visas). Såsom visas i Figur 6C har de inspelade GRN: erna olika nivåer av baslinjeaktivitet, allt från tyst (GRNs 1) till lågt eller måttligt (GRN 2 och 3). Efter smakuppträdande visar GRNs olika aktivitetsmönster och uppvisar olika selektivitet för smakämnena. Till exempel svarade GRN 1 endast på sackaros, medan GRN 2 svarade på maltos och NaCl med spetsbyxor och lobeline med spiking endast vid stimulans start. Dessutom låses några svar till stimulans tidpunkt ( t.ex. GRN 1-respons på sackaros), medan andra svar sträcker sig längre från stimulans varaktighet ( t.ex. GRN 3-svar på berberin) eller innehåller både excitatoriska och hämmande komponenter ( t.ex. Figur 7 GRN 2-svar på NaCl och sackaros). För mer information om GRNs olika känsligheter och aktivitetsmönster, se referens 10 . <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page= &quot;1&quot;&gt; För att validera användningen av tetrode- och spikssorteringsteknikerna för att registrera GRNs från maxillarynerven utförde vi intracellulära inspelningar från GRN-axoner hos andra djur med hjälp av konventionella skarpa glaselektroder (motstånd 80-120 MΩ). Vi fann att aktivitetsmönstren erhållna genom användning av intracellulära inspelningar liknade svar som observerades genom användning av tetrode-tekniken ( Figur 7 ). Spänningsspåren i den gröna lådan i panel A registrerades intracellulärt från GRN 1 under 5 på varandra följande försök med sackarospresentation, och samma svar visas som rasterplottar i panel B. (Observera att denna typ av svar matchar det som erhållits med tetroder och Visas i figur 6C .) GRN 2, inspelad med skarpa intracellulära elektroder, visar ett bredare responsmönster. <img alt="Figur 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55868/55868fig6v2.jpg"/&gt; Figur 6: Representativa resultat från maxillära nervinspelningar med extracellulära tetroder. ( A ) Spänningsspårfiltrerade (300-6000 Hz) inspelade av var och en av de fyra trådarna vid maxillärnerven visas (mittpanel). En 1 s puls av smakämne applicerades under den tidsperiod som indikeras av röd skuggning i mittpanelen. Stimulans start och offset övervakades av färgsensorn som indikeras av det röda spänningsspåret på överpanelen och betecknas på mellansidan av det röda skuggade området. De prickade horisontella linjerna betecknar +50 (topp), 0 (mitten) och -50 (botten) μV. En förstoring av de råspänningsspår som motsvarar området inuti de vertikala streckade linjerna visas (bottenpanel). Exempel på spikar indikeras med pilarna. ( B ) Ett exempel på spik sortering applicerad på de data som visas i panel A. De vågformer som registreras vid var och en av de fyra extracellulära trådarna (1-4) arE identifierad med tre olika GRNs (enheter 1-3) som bidrar till de inspelade signalerna. Individuella händelser (färgade tunna linjer) och medelvärdet (tjock svart linje) visas för de tre enheterna. Ett antal statistiska kriterier måste övervägas för att på ett tillförlitligt sätt kunna identifiera oberoende enheter med hjälp av spik-sorteringsmetoden (se referenser 10 , 29 ). ( C ) Raster-diagram som representerar svaren från de tre isolerade enheterna till en sekvens av sex olika smakämnen (4 försök / smakämnen visas). Tidsperioden för smakleverans (1 s) indikeras av det röda skuggade området. Koncentrationerna av smakämnen var antingen 1 M (sackaros, maltos, NaCl), 100 mM (koffein) och 10 mM (berberin och lobelin). <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55868/55868fig6v2large.jpg" target="_blank">Vänligen klicka här för att se en större version av denna figur.</a> <img alt="Figur 7" c<html> Lass = &quot;xfigimg&quot; src = &quot;/ files / ftp_upload / 55868 / 55868fig7.jpg&quot; /&gt; Figur 7 : Intracellulära inspelningar från GRN Axons. ( A , green box panel) Spänningsspår registrerade från en GRN med skarpa glas intracellulära elektroder (resistans 80-120 MΩ) placerad i maxillarynerven, framkallad av 5 på varandra följande stimuleringar med 1 M sackaros (Suc). ( B ) Rasterposter av svaren på två GRN, inklusive svar som visas i panel A (grön boxpanel), till två olika smakämnen som levereras i följd (100 mM grå teckensfärg, 1 M svart teckensfärg) inspelad med skarpa glas intracellulära elektroder Placerad i maxillärnerven (7 prov / smakämne och 3 försök / vatten visas). Tastant leveranstid indikeras med röda skuggade områden i båda paneler. Stimulans start och offset övervakades av färggivaren, vilket indikeras av de röda spänningsspåren längst ned på varje panel.Es / ftp_upload / 55868 / 55868fig7large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Vänligen klicka här för att se en större version av denna figur.

Watch this Scientific Journal Video about New Methods to Study Gustatory Coding at JoVE.com

New Methods to Study Gustatory Coding

Vi presenterar tre nya metoder för att studera gustatorisk kodning . Med hjälp av ett enkelt djur beskriver moth Manduca sexta ( Manduca ) ett dissektionsprotokoll, användningen av extracellulära tetroder för att registrera aktiviteten hos flera gustatoriska receptorneuroner och ett system för att leverera och övervaka exakt timade pulser av smakämnen.

Nya metoder för att studera gustatorisk kodning

The sense of taste allows animals to detect chemicals in the environment, giving rise to behaviors critical for survival. When Gustatory Receptor Neurons ...

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Neuroscience

Human Biology

Sensory Systems

SCIENTISTS IN ACTION

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection av Drosophila Neuron

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

How to Create and Use Binocular Rivalry

Hur till Skapa och använda Kikare Rivalitet

Each of our eyes normally sees a slightly different image of the world around us. The brain can combine these two images into a single coherent ...

Study Glial Cell Heterogeneity Influence on Axon Growth Using a New Coculture Method

Studie gliacellsmarkörer Heterogenitet Påverkan på Axon tillväxt Använda ett nytt Coculture metod

In the central nervous system of all mammals, severed axons after injury are unable to regenerate to their original targets and functional recovery is ...

Methods for Study of Neuronal Morphogenesis: Ex vivo RNAi Electroporation in Embryonic Murine Cerebral Cortex

Methods for Study of Neuronal Morphogenesis: Ex vivo RNAi Electroporation in Embryonic Murine Cerebral Cortex

Metoder för studier av Neuronal Morfogenes:<em&gt; Ex vivo</em&gt; RNAi Elektroporation i embryonal Murine Cerebral Cortex

The cerebral cortex directs higher cognitive functions. This six layered structure is generated in an inside-first, outside-last manner, in which the ...

Measuring the Subjective Value of Risky and Ambiguous Options using Experimental Economics and Functional MRI Methods

Mäta det subjektiva värdet av riskfyllda och oklara alternativ med experimentell ekonomi och funktionell MRI metoder

Most of the choices we make have uncertain consequences. In some cases the probabilities for different possible outcomes are precisely known, a condition ...

Methods to Assay Drosophila Behavior

Methods to Assay Drosophila Behavior

Metoder för analys Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

A Caenorhabditis elegans Model System for Amylopathy Study

A Caenorhabditis elegans Model System for Amylopathy Study

ETT<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Modellsystem för Amylopathy Study

Amylopathy is a term that describes abnormal synthesis and accumulation of amyloid beta (A&beta;) in tissues with time. A&beta; is a hallmark of ...

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

RNAi-medierad Dubbel Gene Knockdown och Smaklig Perception Mätning honungsbin (<em&gt; Apis mellifera</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

Membranpotential Dye avbildning av ventromediala Hypothalamus nervceller från vuxna möss för att studera Glucose Sensing

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

A Method to Make a Craniotomy on the Ventral Skull of Neonate Rodents

En metod för att göra en Kraniotomi på den ventrala Skull of Neonatal Gnagare

The use of a craniotomy for in vivo experiments provides an opportunity to investigate the dynamics of diverse cellular processes in the mammalian brain ...