Name: study of protein-protein interactions in autophagy research
Uploaded: 2017-09-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Study of Protein-protein Interactions in Autophagy Research at JoVE.com

Эта работа была поддержана науки и технологических исследований Совет Турции (ТУБИТАК) 1001 Грант 107T153, университета Сабанчи. SEB и НМК поддерживаются TUBITAK BIDEB 2211 стипендии кандидат исследований.

1. иммунофлюоресценции <ol><li>поддерживать HEK293T человеческих эмбриональных почек клеток в среде DMEM высокой глюкозы, и N2A мыши neuroblast клеток в среде DMEM низкий средний глюкозы, 5% CO 2-увлажненные инкубатора 37 ° c. Дополнение к культуре СМИ с 10% тепло инактивированная плода говядину (ФБС) с?...

<ol>
	<li>Oral, O., Akkoc, Y., Bayraktar, O., Gozuacik, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+and+pathological+significance+of+the+molecular+cross-talk+between+autophagy+and+apoptosis.">Physiological and pathological significance of the molecular cross-talk between autophagy and apoptosis.</a> Histol Histopathol. 31, 479-498 (2016).</li><li>Korkmaz, G., Tekirdag, K. A., Ozturk, D. G., Kosar, A., Sezerman, O. U., Gozuacik, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MIR376A+is+a+regulator+of+starvation-induced+autophagy.">MIR376A is a regulator of starvation-induced autophagy.</a> PLoS One. 8, e82556 (2013).</li><li>Itah, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrodynamic+cavitation+kills+prostate+cells+and+ablates+benign+prostatic+hyperplasia+tissue.">Hydrodynamic cavitation kills prostate cells and ablates benign prostatic hyperplasia tissue.</a> Exp Biol Med (Maywood). 238, 1242-1250 (2013).</li><li>Gozuacik, D., Kimchi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+as+a+cell+death+and+tumor+suppressor+mechanism).">Autophagy as a cell death and tumor suppressor mechanism).</a> Oncogene. 23, 2891-2906 (2004).</li><li>Erzurumlu, Y., Kose, F. A., Gozen, O., Gozuacik, D., Toth, E. A., Ballar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+unique+IBMPFD-related+P97/VCP+mutation+with+differential+binding+pattern+and+subcellular+localization.">A unique IBMPFD-related P97/VCP mutation with differential binding pattern and subcellular localization.</a> Int J Biochem Cell Biol. 45, 773-782 (2013).</li><li>Kuzuoglu-Ozturk, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy-related+gene,+TdAtg8,+in+wild+emmer+wheat+plays+a+role+in+drought+and+osmotic+stress+response.">Autophagy-related gene, TdAtg8, in wild emmer wheat plays a role in drought and osmotic stress response.</a> Planta. 236, 1081-1092 (2012).</li><li>Longatti, A., Tooze, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vesicular+trafficking+and+autophagosome+formation.">Vesicular trafficking and autophagosome formation.</a> Cell Death Differ. 16, 956-965 (2009).</li><li>Erbil, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RACK1+Is+an+Interaction+Partner+of+ATG5+and+a+Novel+Regulator+of+Autophagy.">RACK1 Is an Interaction Partner of ATG5 and a Novel Regulator of Autophagy.</a> J Biol Chem. 291, 16753-16765 (2016).</li><li>Gozuacik, D., Yagci-Acar, H. F., Akkoc, Y., Kosar, A., Dogan-Ekici, A. I., Ekici, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anticancer+use+of+nanoparticles+as+nucleic+acid+carriers.">Anticancer use of nanoparticles as nucleic acid carriers.</a> J Biomed Nanotechnol. 10, 1751-1783 (2014).</li><li>Phizicky, E. M., Fields, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein-protein+interactions:+methods+for+detection+and+analysis.">Protein-protein interactions: methods for detection and analysis.</a> Microbiol Rev. 59, 94-123 (1995).</li><li>Uetz, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+analysis+of+protein-protein+interactions+in+Saccharomyces+cerevisiae.">A comprehensive analysis of protein-protein interactions in Saccharomyces cerevisiae.</a> Nature. 403, 623-627 (2000).</li></ol>

Методы иммунопреципитации и иммунофлюоресценции имеют решающее значение для изучения взаимодействий протеин протеина. Хотя эти две техники широко используются и устоявшейся, некоторые критерии должны рассматриваться для определения качества экспериментов при использовании этих м?...

Macroautophagy (autophagy, здесь) представляет собой механизм клеточного стресса характеризуется поглощение сыпучих цитоплазмы, белков и органеллы в двойной мембраной пузырьков называется autophagic везикулы. Через слияние внешнего слоя двойной мембраной autophagic везикулы и их грузы доставляются лизосом и деградированных нем1. Autophagy происходит низкими базальный во всех типах клеток и во всех организмах, выполняя гомеостатических функций, таких как деградации белка и органелл (например, митохондрии) оборот. В условиях, ведущих к клеточного стресса, таких, как голод autophagy быстро upregulated и позволяет ячейки для поддержания уровней энергии и основного обмена1,2,3.
Около 30 autophagy гены клонировали от дрожжей и их белковых продуктов были показаны играть роль на различных этапах процесса autophagic, включая везикул нуклеации, расширение, везикул фьюжн конце endosome/Лизосома, и деградация грузов 4 , 5. были выявлены Ортологи большинства этих генов и исследования в различных организмах подтвердил сохранение их клеточных функций6. Исследования в течение последнего десятилетия показали, что несколько autophagy связанных белковых комплексов и белок белковых взаимодействий существуют и что они управляют autophagy пути замысловатые и контролируемым образом. Перекрестки, резервные копии, механизмы обратной связи и прямой существуют, и они позволяют ячейку для координации autophagy с другими мероприятиями (например, везикулярной секреции, лизосома биогенеза, от англ сортировки и транспорта7и т.д.) В беспристрастной дрожжей два гибридных экране с помощью белка autophagy ATG5 как приманку (ATG5 является ключевой autophagy белка участвуют в системе спрягать E2-как, которая опосредует LC3 lipidation в голода индуцированной autophagy), мы определили рецепторов активировано C-киназы 1 (RACK1; GNB2L1) как сильный элемент и Роман autophagy компонент8. Важно отметить, что экран показал, что ATG5-RACK1 взаимодействие незаменимым для индукции autophagy, autophagy классических индукторов (то есть, голода и mTOR торможения).
Методы, основанные на иммунофлюоресценции обычно используются для отслеживания взаимодействий протеин протеина. Эти методы основаны на основном антитела и помочь визуализировать взаимодействие и подтвердить клеточной локализации. В этой технике, флуоресцентные метки конъюгированных антител, которые являются специфическими для протеинов интереса, обычно используются для специфического окрашивания. Каждый белка могут быть помечены с антителами, в сочетании с различными флуоресцентными красителями. С помощью белка специфические антитела, дублирование сигнала при слиянии изображения указывает Сопредседатель Локализация белков под confocal микроскопии. Этот метод применим к клетки или даже ткани. Методы иммунофлуоресценции предоставляют подсказки о взаимодействия динамики и помочь определить размер и распределение белковых комплексов, отслеживая общие изменения в клеточной морфологии под различные условия9. Иммунопреципитация-это другой часто используемый на основе антител метод, который позволяет для анализа взаимодействий между учетом белков10. Используя эту технику, протеинов интереса изолированы от клеток или тканей выдержки, с использованием специфических антител, в результате осаждения белков, которые в комплексе или в контакте с протеином интереса. Co Иммунопреципитация, где обнаружен белок и его Сопредседатель интерактивных, показывает не только взаимодействие между двумя белками, но можно измерить его сила взаимодействия при различных обстоятельствах11.
Этот протокол описывает в детали ключевых методов, которые были использованы для подтверждения и характеризуют ATG5-RACK1 и RACK1-LC3 взаимодействия. Основное внимание уделяется иммунофлюоресценции и иммунопреципитации техники, с уделением особого внимания критических шагов и ловушки для autophagy исследований, а также устранение неполадок предложения.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="716">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Trypsin EDTA Solution A</td>
			<td style="width:181px;">Biological Industries&#160;</td>
			<td style="width:133px;">BI03-050-1A</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">PBS</td>
			<td style="width:181px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:133px;">SH-30256.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">DMEM (high glucose)</td>
			<td style="width:181px;">Sigma&#160;</td>
			<td style="width:133px;">5671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">DMEM (low glucose)</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td>5546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Trypan Blue</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">T8154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td>Z359629-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">coverslides</td>
			<td>Jena Bioscience</td>
			<td>CSL-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">slides</td>
			<td style="width:181px;">Isolab</td>
			<td>I.075.02.005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Poly-L-Lysine</td>
			<td style="width:181px;">Sigma&#160;</td>
			<td style="width:133px;">P8920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Torin</td>
			<td>Tocris</td>
			<td style="width:133px;">4247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">DMSO</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">VWRSAD2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">EBSS</td>
			<td style="width:181px;">Biological Industries&#160;</td>
			<td style="width:133px;">BI02-010-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">15812-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">BSA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td style="width:133px;">&#160;A4503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Saponin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td style="width:133px;">84510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">LC3 Antibody</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">L7543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Anti-Rabbit IgG Alexa Fluor 568</td>
			<td style="width:181px;">&#160;Invitrogen</td>
			<td style="width:133px;">A11011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">RACK1 Antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:133px;">&#160;sc-17754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-Mouse IgG Alexa Fluor 488</td>
			<td style="width:181px;">&#160;Invitrogen</td>
			<td style="width:133px;">A11001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">NP-40</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">A16694.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Sodium Chloride</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">A9242.5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium deoxycholate</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">30970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium dodecyl sulphate (SDS)</td>
			<td style="width:181px;">Biochemika</td>
			<td style="width:133px;">A2572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Trizma Base</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">T1503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton-X&#160;</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">4975</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium orthovanadate</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">450243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">ATG5 Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td style="width:133px;">A0856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">A4453</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#946;-Mercaptoethanol&#160;</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">A1108.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bromophenol blue&#160;</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">A3640.0005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Non-Fat milk</td>
			<td style="width:181px;">Applichem</td>
			<td style="width:133px;">A0830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Tween 20</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">P5927</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Sodium Azide</td>
			<td style="width:181px;">Riedel de Haen</td>
			<td style="width:133px;">13412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenol red&#160;</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">114537-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">anti-rabbit IgG , HRP conjugated</td>
			<td>Jackson Immuno.&#160;</td>
			<td style="width:133px;">1110305144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Luminol</td>
			<td style="width:181px;">Fluka</td>
			<td style="width:133px;">9253</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Coumeric Acid</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">C9008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Hydrogen Peroxide</td>
			<td style="width:181px;">Merck</td>
			<td style="width:133px;">K35522500604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">anti mouse IgG, HRP conjugated</td>
			<td style="width:181px;">Jackson Immuno.</td>
			<td style="width:133px;">115035003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#946;-Actin Antibody</td>
			<td style="width:181px;">Sigma&#160;</td>
			<td style="width:133px;">A5441</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal rabbit serum</td>
			<td style="width:181px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:133px;">sc-2027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Rapamycin</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">&#160;R0395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Protein A-Agarose Beads</td>
			<td style="width:181px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:133px;">sc-2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">fetal bovine serum&#160;</td>
			<td style="width:181px;">Biowest</td>
			<td>S1810-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">penicillin/streptomycin solution</td>
			<td style="width:181px;">Biological Industries&#160;</td>
			<td>03-031-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">L-glutamine&#160;</td>
			<td style="width:181px;">Biological Industries&#160;</td>
			<td>BI03-020-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Bradford Solution</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">6916</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Nitocellulose membrane</td>
			<td style="width:181px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:133px;">A10083108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:235px;">X-ray Films</td>
			<td style="width:181px;">Fujifilm</td>
			<td style="width:133px;">47410 19289</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:235px;">Protease inhibitor</td>
			<td style="width:181px;">Sigma</td>
			<td style="width:133px;">P8340</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

study of protein-protein interactions in autophagy research

Белок белковых взаимодействий являются важными для понимания сотовой сигнальных каскадов и выявления роман путь компонентов и динамики белков. Большая часть клеточной деятельности требует физических взаимодействий между белками. Для анализа и сопоставления этих взаимодействий, были разработаны различные экспериментальные методы, а также инструментов биоинформатики. Autophagy является сотовых рециркуляции механизм, который позволяет справиться с различными раздражители, включая лишение питательных веществ, химических веществ и гипоксии клетки. Чтобы лучше понять сигнализации событий, связанных с autophagy и обнаружить новые факторы, которые регулируют белковых комплексов в autophagy, мы провели экранов взаимодействия протеин протеина. Проверка этих результатов скрининга требует использования иммунофлюоресценции и методы иммунопреципитации. В этой системе, были протестированы конкретных связанных с autophagy белок белковых взаимодействий, которые мы обнаружили в Neuro2A (N2A) и HEK293T клеточных линий. Подробная информация о технических процедур, используемых описаны в этом документе визуализированных эксперимент.

В Рисунок 1 пример совместного локализации отображается результат, полученные с помощью этого протокола. Фигура из нашей недавней работе представлен8. Здесь эндогенного белка RACK1 был окрашенных в зеленый цвет, в то время как эндогенных LC3 был окрашенных в кр?...

Watch this Scientific Journal Video about Study of Protein-protein Interactions in Autophagy Research at JoVE.com

Study of Protein-protein Interactions in Autophagy Research

Представленные здесь являются два методы исследования взаимодействия на основе антител протеин: иммунофлюоресценции и иммунопреципитации. Эти методы подходят для изучения физических взаимодействий между белками для обнаружения новых компонентов клеточной сигнальных путей и понимание динамики белков.

Исследование взаимодействий протеин протеина в Autophagy исследований

Protein-protein interactions are important for understanding cellular signaling cascades and identifying novel pathway components and protein dynamics. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

Тестирование зрительной чувствительности к скорости и направления движения в Ящерицы

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions

Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid MYTH System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions

Сплит-Убиквитин основе дрожжей Мембрана два-Hybrid (МИФ) Система: Мощный инструмент для выявления белок-белковых взаимодействий

The fundamental biological and clinical importance of integral membrane proteins prompted the development of a yeast-based system for the high-throughput ...

In-vivo Detection of Protein-protein Interactions on Micro-patterned Surfaces

In-vivo Detection of Protein-protein Interactions on Micro-patterned Surfaces

В естественных условиях обнаружения белок-белковых взаимодействий на микро-узорной поверхности

Unraveling the interaction network of molecules in-vivo is key to understanding the mechanisms that regulate cell function and metabolism. A multitude of ...

Imaging Protein-protein Interactions in vivo

Imaging Protein-protein Interactions in vivo

Изображениями белок-белковых взаимодействий В естественных условиях</em

Protein-protein interactions are a hallmark of all essential cellular processes. However, many of these interactions are transient, or energetically weak, ...

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Do-It-Yourself Устройство для восстановления криоконсервированных образцов случайно уронил в криогенных резервуаров

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

A Liquid Phase Affinity Capture Assay Using Magnetic Beads to Study Protein-Protein Interaction: The Poliovirus-Nanobody Example

Жидкая фаза Affinity Capture методом с использованием магнитных шариков по изучению белок-белковые взаимодействия: Полиовирус-нанотела Пример

In this article, a simple, quantitative, liquid phase affinity capture assay is presented. Provided that one protein can be tagged and another protein ...

Protein-protein Interactions Visualized by Bimolecular Fluorescence Complementation in Tobacco Protoplasts and Leaves

Белок-белковых взаимодействий визуализируется бимолекулярного флуоресценции комплементации табачными протопластов и листья

Many proteins interact transiently with other proteins or are integrated into multi-protein complexes to perform their biological function. Bimolecular ...

Investigating Protein-protein Interactions in Live Cells Using Bioluminescence Resonance Energy Transfer

Исследование белок-белковых взаимодействий в живых клетках с помощью биолюминесценции резонансный перенос энергии

Assays based on Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) provide a sensitive and reliable means to monitor protein-protein interactions in live ...

Combining Single-molecule Manipulation and Imaging for the Study of Protein-DNA Interactions

Сочетание Манипуляции одиночных молекул и визуализации по изучению взаимодействий белок-ДНК

The paper describes the combination of optical tweezers and single molecule fluorescence detection for the study of protein-DNA interaction. The method ...

Probing High-density Functional Protein Microarrays to Detect Protein-protein Interactions

Исследование высокой плотности белковых Функциональные Microarrays для обнаружения белок-белковых взаимодействий

High-density functional protein microarrays containing ~4,200 recombinant yeast proteins are examined for kinase protein-protein interactions using an ...