Name: determining cell-surface expression and endocytic rate of proteins in primary astrocyte cultures using biotinylation
Uploaded: 2017-07-03T15:00:00
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Ce projet a été soutenu par l&#39;Institut canadien de recherche en santé PG # 20R47867.

1. Détermination de l&#39;expression relative des protéines de surface cellulaire dans les Astrocytes par Biotinylation NOTE: Ici, nous illustrons l&#39;application de cette technique de biotinylation à l&#39;étude des effets de la molécule de molécule de matrice extracellulaire sur la localisation de la surface cellulaire du canal perméable à l&#39;eau aquaporin-4 (AQP4). Les matériaux spécialisés requis pour ce dosage comprennent la sulfo-NHS-LC-biotine et la résine streptavidine...

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	<li>Baskin, G., Schenker, S., Frosto, T., Henderson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+growth+factor+beta+1+inhibits+epidermal+growth+factor+receptor+endocytosis+and+down-regulation+in+cultured+fetal+rat+hepatocytes.">Transforming growth factor beta 1 inhibits epidermal growth factor receptor endocytosis and down-regulation in cultured fetal rat hepatocytes.</a> J Biol Chem. 266 (20), 13238-13242 (1991).</li><li>Hazum, E., Cuatrecasas, P., Marian, J., Conn, P. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avidin+1.+the+use+of+[14-C]biotin+for+kinetic+studies+and+for+assay.">Avidin 1. the use of [14-C]biotin for kinetic studies and for assay.</a> Biochem J. 89 (3), 585-591 (1963).</li><li>Korpela, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avidin,+a+high+affinity+biotin-binding+protein,+as+a+tool+and+subject+of+biological+research.">Avidin, a high affinity biotin-binding protein, as a tool and subject of biological research.</a> Med Biol. 62 (1), 5-26 (1984).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+pHluorin-tagged+receptor+insertion+to+the+plasma+membrane+in+primary+cultured+mouse+neurons.">Imaging pHluorin-tagged receptor insertion to the plasma membrane in primary cultured mouse neurons.</a> J Vis Exp. (69), e4450 (2012).</li><li>Soohoo, A. L., Bowersox, S. L., Puthenveedu, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+clathrin-mediated+endocytosis+of+G+protein-coupled+receptors+at+single-event+resolution+via+TIRF+microscopy.">Visualizing clathrin-mediated endocytosis of G protein-coupled receptors at single-event resolution via TIRF microscopy.</a> J Vis Exp. (92), e51805 (2014).</li><li>Noel, G., Tham, D. K., Moukhles, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interdependence+of+laminin-mediated+clustering+of+lipid+rafts+and+the+dystrophin+complex+in+astrocytes.">Interdependence of laminin-mediated clustering of lipid rafts and the dystrophin complex in astrocytes.</a> J Biol Chem. 284 (29), 19694-19704 (2009).</li><li>Laemmli, U. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleavage+of+structural+proteins+during+the+assembly+of+the+head+of+bacteriophage+T4.">Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.</a> Nature. 227 (5259), 680-685 (1970).</li><li>Towbin, H., Staehelin, T., Gordon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophoretic+transfer+of+proteins+from+polyacrylamide+gels+to+nitrocellulose+sheets:+procedure+and+some+applications.">Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 76 (9), 4350-4354 (1979).</li><li>Madrid, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polarized+trafficking+and+surface+expression+of+the+AQP4+water+channel+are+coordinated+by+serial+and+regulated+interactions+with+different+clathrin-adaptor+complexes.">Polarized trafficking and surface expression of the AQP4 water channel are coordinated by serial and regulated interactions with different clathrin-adaptor complexes.</a> EMBO J. 20 (24), 7008-7021 (2001).</li><li>Tham, D. K., Joshi, B., Moukhles, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+Cell-Surface+Expression+and+Turnover+Are+Regulated+by+Dystroglycan,+Dynamin,+and+the+Extracellular+Matrix+in+Astrocytes.">Aquaporin-4 Cell-Surface Expression and Turnover Are Regulated by Dystroglycan, Dynamin, and the Extracellular Matrix in Astrocytes.</a> PLoS One. 11 (10), 0165439 (2016).</li></ol>

Modifications: Comme ces méthodes ont été conçues pour être utilisées avec des cellules adhérentes, nous avons spécifié l&#39;utilisation de PBS contenant 100 mg / L de MgCl 2 ∙ 6H 2 O et 100 mg / L de CaCl2 (CM-PBS) pour les étapes de lavage et comme base de certains tampons afin de s&#39;assurer que les cellules restent attachées à la surface de culture et que les jonctions cellule-cellule ne sont pas perturbées. Cependant, les p...

Les protéines à la surface de la cellule jouent une variété de rôles essentiels au maintien de la fonction cellulaire. Dans de nombreux cas, leur activité dépend ou est modulée par des processus endocytaires qui les séquestrent temporairement dans des sites intracellulaires ou qui les dirigent vers des voies de dégradation 1 , 2 , 3 , 4 , 5 . Ici, nous mettons en évidence 2 approches basées sur la biotinylation conçues pour permettre à l&#39;utilisateur d&#39;étiqueter et d&#39;isoler spécifiquement les protéines exprimées à la membrane plasmatique et celles nouvellement internalisées. Grâce à ces méthodes, l&#39;expression de la surface cellulaire et le taux endocytique de toute protéine d&#39;intérêt peuvent être quantifiés, ce qui permet d&#39;obtenir une évaluation plus claire de sa réglementation. Détermination de l&#39;expression relative de la protéine de surface cellulaire par biotinylation La biotine, ou la vitamine B7, anciennement connue sous le nom de vitamine H 6 , est une petite molécule hydrosoluble qui peut être utilisée pour modifier chimiquement les groupes réactifs d&#39;amine, de sulfhydryle et de carboxyle de molécules biologiques. La récolte actuelle des réactifs de biotinylation de surface cellulaire consiste principalement en des esters de biotine ou de dérivés N-hydroxysuccinimides (sulfo-NHS) à base de membrane imperméables à la membrane, conçus pour réagir avec les amines présentes sur les chaînes latérales de résidus de lysine de protéines exprimées à La surface de la cellule lorsque ceux-ci deviennent déprotonés dans des conditions basiques, ce qui entraîne la formation d&#39;une liaison amide avec la fraction de biotine 7 . Les protéines de surface cellulaire ainsi modifiées peuvent ensuite être isolées par l&#39;utilisation d&#39;avidine, une protéine tétramère de 66 à 69 kDa possédant une grande affinité pour la biotine, se liant à celle-ci avec une constante de dissociation d&#39;environ 10 à 15 , la marquant comme l&#39;une des Les interactions non covalentes les plus fortes connues 8 </suP&gt; , 9 . Un certain nombre de méthodes alternatives de quantification de l&#39;expression des protéines à la surface de la cellule ont été utilisées dans des études antérieures. L&#39;étiquetage de cellules non perméabilisées utilisant des anticorps marqués par fluorescence spécifiques de la protéine d&#39;intérêt, suivi par la visualisation par microscopie par fluorescence, par exemple, est une approche couramment utilisée, mais dépend fortement de la disponibilité d&#39;anticorps qui peuvent se lier à des epitopes extracellulaires. Plus récemment, des procédés impliquant l&#39;utilisation de protéines chimères contenant des fluorophores sensibles au pH qui réagissent pour être exposés à des milieux acides ont également été utilisés avec succès 10 . Cependant, de tels tests impliquent habituellement l&#39;expression exogène de ces constructions dans des lignées cellulaires dans lesquelles la protéine d&#39;intérêt n&#39;est pas trouvée nativement. Ces approches sont néanmoins capables de fournir des informations précieuses concernant la localisation subcellulaire et l&#39;itinéraire exoctique de laCible, et devrait donc être utilisé conjointement avec les approches basées sur la biotinylation décrites ici si les outils sont disponibles. Dans un dosage de biotinylation typique, les cellules sont tout d&#39;abord lavées à fond dans du PBS à 4 ° C. Cela élimine toute traces de protéines sériques introduites par le milieu de culture, ce qui garantit que celles-ci ne consommeront pas d&#39;excès de quantité de biotine dans l&#39;étape suivante. Plus important encore, la réduction de la température entraîne une décélération significative de l&#39;endocytose. Le réactif de biotinylation est ensuite ajouté. Ensuite, les cellules sont à nouveau lavées, puis incubées avec un tampon de trempe contenant soit de la glycine soit du NH 4 Cl, dont le but est d&#39;inactiver toutes les traces restantes de la biotine n&#39;ayant pas réagi. Les cellules sont ensuite lysées, après quoi une streptavidine immobilisée à l&#39;agarose est ajoutée pour précipiter les protéines biotinylées. L&#39;analyse est généralement effectuée via Western Blot, ce qui permet l&#39;expression relative de la surface cellulaire de divers prOteins à quantifier. En raison de cette analyse, il convient à une utilisation uniquement avec des protéines possédant des parties exposées à l&#39;environnement extracellulaire. Les protéines transmembranaires multipass, qui possèdent probablement un certain nombre de lysines réactives dans leurs régions en boucle, sont les plus favorables à cette méthode, tandis que les protéines à passage unique ont tendance à être moins susceptibles d&#39;être biotinylées. Même dans ces cas, il existe une possibilité que des changements conformationnels ou des interactions intermoleculaires puissent occluser certains sites réactifs, ce qui entraîne un rendement de biotinylation inférieur à prévu. Détermination du taux d&#39;internalisation des protéines de surface cellulaire par biotinylation Les principes de ce dosage sont largement similaires à ceux de la biotinylation de la surface cellulaire, avec un certain nombre d&#39;exceptions, dont le plus important est l&#39;utilisation de réactifs de biotinylation réversibles. Les groupes de biotine (de ceux-ci) possèdent le disuLfide bonds, dans leurs structures, susceptibles d&#39;être réducteurs; Ceci est exploité pour s&#39;assurer que seules les protéines de surface cellulaire prises dans les sites intracellulaires pendant la période d&#39;analyse seront laissées biotinylées. Un dosage a généralement lieu de la manière suivante. Les cellules sont d&#39;abord lavées et biotinylées avec des réactifs froids, puis un milieu de culture cellulaire à 37 ° C est réintroduit et les cellules sont renvoyées dans l&#39;incubateur; Cela provoque une endocytose des protéines de surface cellulaire marquées. L&#39;agent réducteur du glutathion - qui ne peut pas pénétrer dans la membrane - est ensuite ajouté pour briser les liaisons disulfure des fragments de biotine attachés aux protéines restant sur la surface de la cellule. Enfin, les liaisons disulfure cassées sont mises à réagir avec de l&#39;iodoacétamide, consommant les groupes thiol labiles et empêchant les liaisons de se réformer. Comme auparavant, les cellules sont ensuite lysées, et les protéines marquées sont précipitées en utilisant de la streptavidine-agarose. Le disque de limitationsDans la section précédente s&#39;appliquent également ici en raison des similitudes partagées entre les méthodes. En outre, il convient de garder à l&#39;esprit que les changements de température impliqués dans ce dosage empêchent la détermination exacte de la quantité de protéines endocytées pour chaque incrément de temps, en particulier dans le cas de protéines de recyclage rapidement ou rapidement recyclées. Le dosage ne fournit donc qu&#39;une estimation semi-quantitative des taux endocytaires. La microscopie de fluorescence à réflexion interne totale peut être utilisée pour suivre l&#39;absorption de chaque vésicule chargée et fournir une mesure plus précise de la cinétique de l&#39;endocytose. Il peut donc fournir un complément très utile à ce dosage, en supposant qu&#39;une construction chimère marquée par fluorescence de la protéine d&#39;intérêt soit disponible 11 .

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="773">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Ammonium chloride (NH4Cl)</td>
			<td style="width:219px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">A661-500</td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Bovine serum albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9647-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Bromophenol blue</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>#1610404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">cOmplete protease inhibitor cocktail</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>11697498001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Disodium ethylenediaminetetraacetate dihydrate (EDTA)</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td style="width:129px;">#1610729</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Dithiothreitol (DTT)</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>#1610611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco/Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11960-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>#21335</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">EZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>#21331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco/Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>16000-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Glycerol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP229-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Glycine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8898&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Iodoacetamide</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>#163-2109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Laminin from Engelbreth-Holm-Swarm murine sarcoma basement membrane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L2020</td>
			<td>Thaw on ice.</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">L-glutamine</td>
			<td>Gibco/Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Mouse monoclonal anti-&#946;-actin antibody (AC-15)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5441</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Mouse monoclonal anti-&#946;-dystroglycan antibody (43DAG1/8D5)</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>B-DG-CE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Penicillin/streptomycin</td>
			<td>Gibco/Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Peroxidase AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)</td>
			<td style="width:219px;">Jackson ImmunoResearch Laboratories</td>
			<td>715-035-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td style="width:219px;">Jackson ImmunoResearch Laboratories</td>
			<td>111-035-045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Phosphate buffer saline</td>
			<td>Gibco/Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Reduced glutathione</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G6529</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S271-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Sodium dodecyl sulfate (SDS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>862010&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S318-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Streptavidin agarose resin</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>#20347</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Rabbit polyclonal anti-AQP4 antibody</td>
			<td>Alomone</td>
			<td>AQP-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Tris base (Trizma base)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP152-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Tris-HCl</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP153-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:280px;">Triton X-100</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP151-500</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

determining cell-surface expression and endocytic rate of proteins in primary astrocyte cultures using biotinylation

Les protéines de surface cellulaire font appel à un large éventail de fonctions. Dans de nombreux cas, leur activité est régulée par des processus endocytaires qui modulent leurs niveaux à la membrane plasmique. Ici, nous présentons des protocoles détaillés pour 2 méthodes qui facilitent l&#39;étude de tels procédés, tous deux basés sur le principe de la biotinylation des protéines de surface cellulaire. Le premier est conçu pour permettre la détermination semi-quantitative des niveaux relatifs d&#39;une protéine particulière à la surface de la cellule. Dans celui-ci, les résidus de lysine des protéines de la membrane plasmique des cellules sont d&#39;abord marqués avec un fragment de biotine. Une fois que les cellules sont lysées, ces protéines peuvent ensuite être précipitées spécifiquement par l&#39;utilisation de streptavidine immobilisée par agarose en exploitant l&#39;affinité naturelle de cette dernière pour la biotine. Les protéines isolées de cette manière peuvent ensuite être analysées par une méthode standard de Western Blot. La deuxième méthode fournit un moyen de déterminer le taux endocytique d&#39;une particuleAr cellule cible sur une période de temps. Les protéines de surface cellulaire sont d&#39;abord modifiées avec un dérivé de biotine contenant une liaison dissulfure clivable. Les cellules sont ensuite décalées vers des conditions de culture normales, ce qui provoque l&#39;absorption endocytaire d&#39;une proportion de protéines biotinylées. Ensuite, les liaisons disulfure de groupes de biotine non internalisés sont réduites en utilisant l&#39;agent réducteur imperméable à la membrane, le glutathion. Grâce à cette approche, les protéines endocytesées peuvent donc être isolées et quantifiées avec un haut degré de spécificité.

Utilisation de la biotinylation de la surface cellulaire pour évaluer l&#39;expression de la membrane plasmatique de l&#39;AQP4 dans les astrocytes Les cultures d&#39;astrocytes traitées à la laminine et les cellules témoins non traitées ont été soumises à une biotinylation de surface cellulaire en utilisant les méthodes décrites. Les protéines biotinylées ont été précipitées avec de la streptavidine conjuguée à de l&#39;agarose, puis séparées ...

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Determining Cell-surface Expression and Endocytic Rate of Proteins in Primary Astrocyte Cultures Using Biotinylation

Deux méthodes basées sur la biotinylation, conçues pour déterminer l&#39;expression de la surface cellulaire et la vitesse endocytaire des protéines exprimées à la membrane plasmatique, sont présentées dans ce rapport.

Détermination de l&#39;expression de la surface cellulaire et du taux endocytique des protéines dans les cultures d&#39;astritcy primaires utilisant la biotinylation

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Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Évaluation de la neurogenèse primaire en<em&gt; Xenopus</em&gt; Embryons Utilisation de immunocoloration

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During ...

Reliable Identification of Living Dopaminergic Neurons in Midbrain Cultures Using RNA Sequencing and TH-promoter-driven eGFP Expression

Identification fiable de la vie Neurones Dopaminergiques dans les cultures Mésencéphale utilisant l&#39;ARN Séquençage et TH-promoteur-driven eGFP Expression

In Parkinson&#39;s Disease (PD) there is widespread neuronal loss throughout the brain with pronounced degeneration of dopaminergic neurons in the SNc, ...

A Novel In Vitro Live-imaging Assay of Astrocyte-mediated Phagocytosis Using pH Indicator-conjugated Synaptosomes

A Novel In Vitro Live-imaging Assay of Astrocyte-mediated Phagocytosis Using pH Indicator-conjugated Synaptosomes

Un pH de Novel In Vitro Live-imagerie phagocytose médiée par dosage de l’Astrocyte utilisant Synaptosomes indicateur conjugué

Astrocytes are the major cell type in the brain and directly contact synapses and blood vessels. Although microglial cells have been considered the major ...

In Vivo Targeted Expression of Optogenetic Proteins Using Silk/AAV Films

In Vivo Targeted Expression of Optogenetic Proteins Using Silk/AAV Films

In Vivo Ciblé d’Expression des protéines Optogenetic, soie/AAV Films

The quest to understand how neural circuits process information in order to drive behavioral output has been greatly aided by recently-developed optical ...

Identifying Cell Surface Markers of Primary Neural Stem and Progenitor Cells by Metabolic Labeling of Sialoglycan

Identification des marqueurs de surface cellulaire des cellules neurales primaires de tige et de progéniture par l'étiquetage métabolique du sialoglycan

Neural stem and progenitor cells (NSPCs) are the cellular basis for the complex structures and functions of the brain. They are located in specialized ...