Name: chondrogenic pellet formation from cord blood-derived induced pluripotent stem cells
Uploaded: 2017-06-19T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chondrogenic Pellet Formation from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מענק מהפרויקט למחקר ופיתוח של טכנולוגיה בקוריאה, משרד הבריאות, הרווחה והמשפחה, הרפובליקה של קוריאה (HI16C2177).

פרוטוקול זה אושר על ידי המועצה המוסדית סקירה של האוניברסיטה הקתולית של קוריאה (KC12TISI0861). CBMCs המשמשים לתכנות מחדש הושגו ישירות מהבנק הטבורי של בית החולים סנט מרי בסיאול. 1. בידול Chondrogenic מ iPSCs <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;di...

פרוטוקול זה נוצר בהצלחה hiPSCs מ CBMCs. אנחנו תכנות מחדש CBMCs כדי hiPSCs באמצעות וקטור ויראלי Sendai המכיל גורמים Yamanaka 24 . שלושה מקרים שימשו בידול, וכל הניסויים בהצלחה נוצר chondrogenic pellets באמצעות פרוטוקול זה. מחקרים רבים דיווחו על פרוטוקולים להבחנה של hiPSCs לתוך chondrocytes <sup cl...

השימוש hiPSCs מייצג אסטרטגיה חדשה עבור בדיקות סמים ומחקרים מכניסטיים של מחלות שונות. מנקודת מבט משובי, hiPSCs הם גם מקור פוטנציאלי להחלפת רקמות שנפגעו בעלי יכולת ריפוי מוגבלת, כגון סחוס מפרקי 1 , 2 . התחדשות של סחוס articular יליד כבר אתגר במשך כמה עשרות שנים. סחוס המפרק הוא רקמה רכה, לבנה, המעטפת את קצה העצמות ומגינה עליהם מפני חיכוך. עם זאת, יש לו יכולת regenerative מוגבל כאשר פגום, מה שהופך תיקון עצמי כמעט בלתי אפשרי. לכן, מחקר התמקדות התחדשות הסחוס כבר מתמשך במשך כמה עשורים. בעבר, ב מבחנה חוץ גופית לתוך השושלת chondrogenic בוצעה בדרך כלל עם BMSCs או chondrocytes יליד מבודד מפרק הברך 3 . בשל TO הפוטנציאל chondrogenic שלהם, BMSCs ו chondrocytes יליד יש יתרונות רבים התומכים בשימוש שלהם chondrogenesis. עם זאת, בשל ההתפשטות המוגבלת שלהם פנוטיפ יציב, תאים אלה בפני מספר מגבלות שחזור של מומים הסחוס המפרקי. תחת תנאים תרבות חוץ גופית , תאים אלה נוטים לאבד את המאפיינים שלהם לאחר 3-4 מעברים, אשר בסופו של דבר משפיע על יכולות ההבחנה שלהם 4 . כמו כן, במקרה של chondrocytes יליד, נזק נוסף למפרק הברך הוא בלתי נמנע בעת קבלת תאים אלה. שלא כמו BMSCs או chondrocytes יליד, hiPSCs יכול להאריך ללא הגבלת במבחנה . עם התנאים תרבות נאותה, hiPSCs יש פוטנציאל גדול כמקור חלופי עבור בידול chondrogenic. עם זאת, זה מאתגר לשנות את המאפיינים המהותיים של hiPSCs 5 . יתר על כן, זה לוקח כמה מסובך במבחנה stePS לכוון את גורלם של hiPSCs לסוג תא מסוים. למרות סיבוכים אלה, השימוש hiPSCs עדיין מומלץ בשל יכולת ההתחדשות העצמית שלהם ואת יכולתם להבדיל תאים ממוקד, כולל chondrocytes 6 . בידול chondrogenic נעשה בדרך כלל עם מערכות תרבות תלת מימדי, כגון תרבות גלולה או תרבות micromass, באמצעות תאים MSC כמו. אם באמצעות hiPSCs, פרוטוקול לייצר תאים כמו MSC כמו שונה הפרוטוקולים הקיימים. כמה קבוצות להשתמש בתרבות monolayer של hiPSCs כדי להמיר ישירות את הפנוטיפ לתוך תאים כמו MSC 7 . עם זאת, רוב המחקרים משתמשים ב- EBS כדי ליצור תאי תמותה הדומים ל- MSC 8 , 9 , 10 , 11 . סוגים שונים של גורמי גדילה משמשים לגרום chondrogeNesis. בדרך כלל, BMP ו TGFβ משפחה חלבונים משמשים, לבד או בשילוב. הבידול גם הוא המושרה עם גורמים אחרים, כגון GDF5, FGF2, ו IGF1 12 , 13 , 14 , 15 . TGFβ1 הוכח לעורר chondrogenesis באופן תלוי מינון MSCs 16 . בהשוואה לאיזוטופיפ השני, TGFβ3, TGFβ1 גורם chondrogenesis על ידי הגדלת pre-cartilage תא התעבות mesenchymal מראש. TGFβ3 גורם chondrogenesis על ידי הגדלה משמעותית של התפשטות תאים mesenchymal 17 . עם זאת, TGFβ3 משמש לעתים קרובות יותר על ידי חוקרים מאשר TGFβ1 7 , 10 , 18 , 19 . BMP2 משפר את הביטוי של גנים הקשורים רכיבים chondrogenic מטריקס האדםChondrocytes מפרקי תחת בתנאים חוץ גופית 20 . BMP2 מגביר את הביטוי של גנים קריטיים להיווצרות סחוס ב- MSCs בשילוב עם חלבונים TGFβ 21 . כמו כן הוכח כי BMP2 סינרגיסטי משפר את ההשפעה של TGFβ3 דרך מסלולי Smad ו- MAPK 22 . במחקר זה, CBMC-hiPSCs היו מצטברים לתוך EBS באמצעות EB בינוני בצלחת פטרי מצורף נמוך. תאי תולדה נגרמו על ידי הצמדת ה- EBS לצלחת מצופה ג&#39;לטין. בידול chondrogenic באמצעות תאים תולדה בוצעה על ידי תרבות גלולה. טיפול עם שני BMP2 ו TGFβ3 בהצלחה מרוכז התאים המושרה תאי מטריקס תאי (ECM) הצטברות חלבון עבור היווצרות chondrogenic גלולה. מחקר זה מציע פרוטוקול בידול chondrogenic פשוטה אך יעילה באמצעות CBMC-hiPSCs.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="653">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:653px;">Plasticware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">100mm Dish</td>
			<td style="width:113px;">TPP</td>
			<td style="width:87px;">93100</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">6-well Plate</td>
			<td style="width:113px;">TPP</td>
			<td style="width:87px;">92006</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">50 mL Cornical Tube</td>
			<td style="width:113px;">SPL</td>
			<td style="width:87px;">50050</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">15 mL Cornical Tube</td>
			<td style="width:113px;">SPL</td>
			<td style="width:87px;">50015</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">10 mL Disposable Pipette</td>
			<td style="width:113px;">Falcon</td>
			<td style="width:87px;">7551</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">5 mL Disposable Pipette</td>
			<td style="width:113px;">Falcon</td>
			<td style="width:87px;">7543</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">12-well Plate</td>
			<td style="width:113px;">TPP</td>
			<td style="width:87px;">92012</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Name</td>
			<td style="width:113px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:247px;">Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:653px;">E8 Medium Materials</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">DMEM/F12, HEPES</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">11330-057</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (500 mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Sodium Bicarbonate</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">25080-094</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 543 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Sodium Selenite</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">S5261</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium&#160; (Conc.: 14 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Human Transfferin</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">T3705</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 10.7 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Basic FGF2</td>
			<td style="width:113px;">Peprotech</td>
			<td style="width:87px;">100-18B</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium&#160; (Conc.: 100 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Human Insulin</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">12585-014</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 20 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Human TGF&#946;1</td>
			<td style="width:113px;">Peprotech</td>
			<td style="width:87px;">100-21</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 2 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Ascorbic Acid</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">A8960</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium&#160; (Conc.: 64 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">DPBS</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">14190-144</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Vitronectin</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">A14700</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">ROCK Inhibitor</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">Y0503</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Name</td>
			<td style="width:113px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:247px;">Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:653px;">Quality Control Materials</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">18 mm Cover Glass</td>
			<td style="width:113px;">Superior</td>
			<td style="width:87px;">HSU-0111580</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">4% Paraformaldyhyde</td>
			<td style="width:113px;">Tech &#38; Innovation</td>
			<td style="width:87px;">BPP-9004</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:113px;">BIOSESANG</td>
			<td style="width:87px;">9002-93-1</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:113px;">Vector Lab</td>
			<td style="width:87px;">SP-5050</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-SSEA4 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">MAB4304</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Oct4 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:87px;">SC9081</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-TRA-1-60 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">MAB4360</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Sox2 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Biolegend</td>
			<td style="width:87px;">630801</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-TRA-1-81 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">MAB4381</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Klf4 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Abcam</td>
			<td style="width:87px;">ab151733</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Alexa Fluor 488 goat anti-mouse IgG (H+L) antibody</td>
			<td style="width:113px;">Molecular Probe</td>
			<td style="width:87px;">A11029</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Alexa Fluor 594 goat anti-rabbit IgG (H+L) antibody</td>
			<td style="width:113px;">Molecular Probe</td>
			<td style="width:87px;">A11037</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">DAPI</td>
			<td style="width:113px;">Molecular Probe</td>
			<td style="width:87px;">D1306</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Prolong gold antifade reagent</td>
			<td style="width:113px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:87px;">P36934</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">4% Paraformaldyhyde</td>
			<td style="width:113px;">Tech &#38; Innovation</td>
			<td style="width:87px;">BPP-9004</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Tween 20</td>
			<td style="width:113px;">BIOSESANG</td>
			<td style="width:87px;">T1027</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:113px;">Vector Lab</td>
			<td style="width:87px;">SP-5050</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Collagen II antibody</td>
			<td>abcam&#160;</td>
			<td style="width:87px;">ab34712</td>
			<td style="width:247px;">1:100</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Alcian blue</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>A3157-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fast Green FCF</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>F7252-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Safranin O</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">090m0039v</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Nuclear fast red</td>
			<td style="width:113px;">Americanmastertech</td>
			<td>STNFR100&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">xylene</td>
			<td style="width:113px;">Duksan</td>
			<td style="width:87px;">115&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Ethanol</td>
			<td style="width:113px;">Duksan</td>
			<td style="width:87px;">64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Mayer&#39;s hematoxylin solution</td>
			<td style="width:113px;">wako pure chemical industries</td>
			<td>LAK7534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">DAP</td>
			<td style="width:113px;">VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Slide Glass, Coated</td>
			<td style="width:113px;">Hyun Il Lab-Mate</td>
			<td style="width:87px;">HMA-S9914</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Trizol</td>
			<td style="width:113px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:87px;">15596-018</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Chloroform</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">366919</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Isoprypylalcohol</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">109634</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Ethanol</td>
			<td style="width:113px;">Duksan</td>
			<td style="width:87px;">64-17-5</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:207px;">RevertAid First Strand cDNA Synthesis kit</td>
			<td style="width:113px;">Thermo Scientfic</td>
			<td style="width:87px;">K1622</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Name</td>
			<td style="width:113px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:247px;">Description</td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Chondrogenic Differentiation Materials</td>
			<td style="width:113px;"></td>
			<td style="width:87px;"></td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">DMEM</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">11885</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (500 mL)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Penicilin Streptomycin</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">P4333</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Ascorbic Acid</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">A8960</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 64 &#956;g/mL)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">MEM Non-Essential Amino Acids Solution (100X)</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">11140-050</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 100 mM)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">rhBMP-2</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>355-BM-050</td>
			<td>Chondrogenic media component (Conc.:100ng/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Recombinant Hman TGF-beta3</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>243-B3-002</td>
			<td>Chondrogenic media component (Conc.:10ng/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">KnockOut Serum Replacement</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td>10828-028</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">ITS+ Premix</td>
			<td>BD</td>
			<td>354352</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dexamethasone-Water Soluble&#160;</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>D2915-100MG</td>
			<td>Chondrogenic media component (Conc.:10-7 M)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">GlutaMAX Supplement</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td>35050-061</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">Sodium pyruvate solution</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>S8636</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">L-Proline</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>P5607-25G</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (40&#956;g/ml)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chondrogenic pellet formation from cord blood-derived induced pluripotent stem cells

לסחוס המפרקי של האדם אין יכולת לתקן את עצמו. ניוון הסחוס ולכן מטופל לא על ידי טיפולים שמרניים אלא על ידי שמרני. נכון לעכשיו, המאמצים נעשים כדי לחדש סחוס פגום עם chivrocytes לשעבר vivo מורחבת או מוח העצם נגזר תאי גזע mesenchymal (BMSCs). עם זאת, המוגבלות הכדאיות וחוסר היציבות של תאים אלה להגביל את היישום שלהם שחזור סחוס. תאי גזע pluripotent האדם המושרה (hiPSCs) קיבלו תשומת לב מדעית כחלופה חדשה ליישומים משובי. עם יכולת חידוש עצמי בלתי מוגבלת ורב-יכולות, hiPSCs הודגשו כמקור חלופי חדש לתיקון סחוס. עם זאת, השגת כמות גבוהה של כדורי chondrogenic באיכות גבוהה היא אתגר גדול היישום הקליני שלהם. במחקר זה, השתמשנו בתאי גדילה של תאי גופרית (EB). CHondrogenesis מוצלח אושרה על ידי PCR אD מכתים עם כחול alcian, כחול toluidine, ונוגדנים נגד סוגי קולגן I ו- II (COL1A1 ו COL2A1, בהתאמה). אנו מספקים שיטה מפורטת להבדיל של דם טבורי mononuclear תא נגזר iPSCs (CBMC-hiPSCs) לתוך כדורי chondrogenic.

במחקר זה, יצרנו כדורי chondrogenic מ CBMC-hiPSCs על ידי גרימת תאים outgrowth מ EBS. בידול chondrogenic היה המושרה באמצעות CBMC-hiPSCs עם pluripotency 1 אישר 11 . תוכנית פשוטה של ​​הפרוטוקול שלנו מוצג באיור 1A . לפני בידול, מושבות iPSC הורחבו ( איור 1 ב...

Watch this Scientific Journal Video about Chondrogenic Pellet Formation from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

Chondrogenic Pellet Formation from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Chondrogenic גלולה היווצרות דם טבורי הנגזרות Pluripotent תאים גזעיים

כאן, אנו מציעים פרוטוקול לבידול chondrogenic מ דם טבורי mononuclear תאים נגזר האדם המושרה בתאי גזע pluripotent.

Human articular cartilage lacks the ability to repair itself. Cartilage degeneration is thus treated not by curative but by conservative treatments. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Three-dimensional Quantification of Dendritic Spines from Pyramidal Neurons Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells

כימות תלת ממדיות של קוצים הדנדריטים מפירמידת נוירונים שמקורם בתאי גזע האנושי המושרה pluripotent

Dendritic spines are small protrusions that correspond to the post-synaptic compartments of excitatory synapses in the central nervous system. They are ...

Cultivate Primary Nasal Epithelial Cells from Children and Reprogram into Induced Pluripotent Stem Cells

טפח תאי אפיתל באף הראשי מיילד לתכנת מחדש לתאי גזע מושרים

Nasal epithelial cells (NECs) are the part of the airways that respond to air pollutants and are the first cells infected with respiratory viruses. They ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Human Melanoma Tumor-infiltrating Lymphocytes

דור של תאי גזע מושרים ממלנומה האדם שחדר-גידול לימפוציטים

Adoptive transfer of ex vivo expanded autologous tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) can mediate durable and complete responses in significant subsets ...

Induced Pluripotent Stem Cell Generation from Blood Cells Using Sendai Virus and Centrifugation

נייד דור גזע מושר מתאי דם באמצעות וירוס Sendai ו צנטריפוגה

The recent development of human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) proved that mature somatic cells can return to an undifferentiated, pluripotent ...

Differentiating Chondrocytes from Peripheral Blood-derived Human Induced Pluripotent Stem Cells

הבדל Chondrocytes מ היקפי דם הנגזרות האדם תאים Pluripotent Pluripotent Induced

In this study, we used peripheral blood cells (PBCs) as seed cells to produce chondrocytes via induced pluripotent stem cells (iPSCs) in an ...

Rapid, Directed Differentiation of Retinal Pigment Epithelial Cells from Human Embryonic or Induced Pluripotent Stem Cells

הבידול מהירה, מכוונת של תאים אפיתל הפיגמנט ברשתית מתאי גזע Pluripotent האנושי עובריים או מושרה

We describe a robust method to direct the differentiation of pluripotent stem cells into retinal pigment epithelial cells (RPE). The purpose of providing ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

דור של תא צורב עור תלת-ממד של כבל דם-derived המושרה בתאי גזע Pluripotent

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

בדור חוץ גופית של Somite נגזרים מן האדם המושרה בתאי גזע Pluripotent

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Pan-myeloid Differentiation of Human Cord Blood Derived CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells

Pan-myeloid Differentiation of Human Cord Blood Derived CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells

פאן-מיאלואיד הבידול של האדם כבל דם נגזר CD34+ המטפאות גזע ותאים מחולל

Ex vivo differentiation of human hematopoietic stem cells is a widely used model for studying hematopoiesis. The protocol described here is for cytokine ...