Name: chondrogenic pellet formation from cord blood-derived induced pluripotent stem cells
Uploaded: 2017-06-19T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chondrogenic Pellet Formation from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells at JoVE.com

この作業は、韓国保健医療技術研究開発プロジェクト（HI16C2177）の助成を受けて行われました。

このプロトコルは、カトリック大学（KC12TISI0861）の制度審査委員会によって承認された。再プログラミングに使用したCBMCは、ソウル・セント・メアリー病院の臍帯血バンクから直接入手した。 1. iPSCとの軟骨形成分化<ol><li> CBMC-iPSC生成 <ol><li>先の研究23に示されたプロトコルを用いてCBMC-hiPSCを生成する。 </li><li>血球を15 mLコニカルチュー?...

このプロトコルは、CBMCからhiPSCを首尾よく生成した。ヤマナカ因子24を含むセンダイウイルスベクターを用いて、CBMCをhiPSCに再プログラミングした24 。分化には3例を用い、すべての実験でこのプロトコールを用いて軟骨原性ペレットを作製した。多くの研究により、hiPSCの軟骨細胞への分化に関するプロトコールが報告されている25,26,27,28。しかし、CBMC-hiPS...

hiPSCsの使用は、薬物スクリーニングおよび種々の疾患の機械的研究のための新しい戦略を表す。再生的な観点から、hiPSCsはまた、関節軟骨1,2などの治癒能力が限定された損傷組織の置換のための潜在的な供給源でもある。 天然の関節軟骨の再生は、数十年にわたり挑戦されてきた。関節軟骨は柔らかく白い組織で、骨の端を覆い、摩擦から保護します。しかし、損傷したときの再生能力は限られており、自己修復はほとんど不可能である。したがって、数十年にわたって軟骨の再生に焦点を当てた研究が進行中である。 従来、軟骨形成系統へのインビトロ分化は、通常、膝関節から単離したBMSCまたは天然軟骨細胞を用いて行った3 。原因それらの軟骨形成能、BMSCおよび天然軟骨細胞は、軟骨形成におけるそれらの使用を支持する多くのメリットを有する。しかし、それらの限定された拡大および不安定な表現型のため、これらの細胞は、関節軟骨欠損の再構築にいくつかの限界に直面する。 インビトロ培養条件下では、これらの細胞は3-4継代後にそれら自身の特徴を失う傾向があり、最終的にそれらの分化能力に影響を及ぼす4 。また、天然軟骨細胞の場合、これらの細胞を得る際には、膝関節へのさらなる損傷が不可避である。 BMSCまたは天然軟骨細胞とは異なり、hiPSCはインビトロで無期限に増殖することができる。適切な培養条件では、hiPSCは軟骨分化の代替源として大きな可能性を秘めています。しかし、hiPSCの本質的な特性を変えることは難しい5 。さらに、それはいくつかの複雑なin vitro ste特定の細胞型にhiPSCsの運命を導くps。これらの合併症にもかかわらず、hiPSCsの使用は、自己複製能力が高く、軟骨細胞を含む標的細胞に分化する能力があるため、依然として推奨されている6 。 軟骨形成分化は、通常、MSC様前駆細胞を用いて、ペレット培養またはマイクロマス培養などの三次元培養系で行われる。 hiPSCを使用する場合、MSC様前駆細胞を生成するプロトコルは、既存のプロトコルとは異なる。いくつかのグループは、表現型をMSC様細胞に直接変換するために、hiPSCの単層培養を用いる。しかし、ほとんどの研究では、EBを用いてMSC8,9,10,11に似た外殖細胞を生成しています。 様々なタイプの成長因子を用いてコンドロゲを誘導するnesis。通常、BMPおよびTGFβファミリータンパク質は、単独でまたは組み合わせて使用​​される。分化は、GDF5、FGF2、およびIGF1などの他の因子によっても誘導されている12,13,14,15。 TGFβ1は、MSCs 16において用量依存的に軟骨形成を刺激することが示されている。他のアイソタイプであるTGFβ3と比較して、TGFβ1は、軟骨前軟骨間細胞の凝縮を増加させることによって軟骨形成を誘導する.TGFβ3は、間葉細胞増殖を有意に増加させることにより軟骨形成を誘導する17 。しかし、TGFβ3は、TGFβ1より研究者により頻繁に用いられる7,10,18,19。 BMP2は、ヒトにおける軟骨形成性マトリックス成分に関連する遺伝子の発現を増強するインビトロ条件下での関節軟骨細胞20 。 BMP2は、TGFβタンパク質21と組み合わせてMSCにおける軟骨形成に重要な遺伝子の発現を増加させる21 。 BMP2は、SmadおよびMAPK経路22を介してTGFβ3の効果を相乗的に増強することも示されている22 。 この研究では、CBMC-hiPSCを、低付着ペトリ皿中でEB培地を用いてEBに凝集させた。伸長細胞は、EBをゼラチンコートディッシュに付着させることによって誘導された。外胚葉細胞を用いた軟骨形成分化をペレット培養により行った。 BMP2およびTGFβ3の両方による処理は、細胞を首尾よく凝縮させ、軟骨形成ペレット形成のための細胞外マトリックス（ECM）タンパク質蓄積を誘導した。この研究は、CBMC-hiPSCを用いた単純で効率的な軟骨形成分化プロトコルを示唆している。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="653">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:653px;">Plasticware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">100mm Dish</td>
			<td style="width:113px;">TPP</td>
			<td style="width:87px;">93100</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">6-well Plate</td>
			<td style="width:113px;">TPP</td>
			<td style="width:87px;">92006</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">50 mL Cornical Tube</td>
			<td style="width:113px;">SPL</td>
			<td style="width:87px;">50050</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">15 mL Cornical Tube</td>
			<td style="width:113px;">SPL</td>
			<td style="width:87px;">50015</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">10 mL Disposable Pipette</td>
			<td style="width:113px;">Falcon</td>
			<td style="width:87px;">7551</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">5 mL Disposable Pipette</td>
			<td style="width:113px;">Falcon</td>
			<td style="width:87px;">7543</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">12-well Plate</td>
			<td style="width:113px;">TPP</td>
			<td style="width:87px;">92012</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Name</td>
			<td style="width:113px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:247px;">Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:653px;">E8 Medium Materials</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">DMEM/F12, HEPES</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">11330-057</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (500 mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Sodium Bicarbonate</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">25080-094</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 543 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Sodium Selenite</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">S5261</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium&#160; (Conc.: 14 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Human Transfferin</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">T3705</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 10.7 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Basic FGF2</td>
			<td style="width:113px;">Peprotech</td>
			<td style="width:87px;">100-18B</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium&#160; (Conc.: 100 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Human Insulin</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">12585-014</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 20 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Human TGF&#946;1</td>
			<td style="width:113px;">Peprotech</td>
			<td style="width:87px;">100-21</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium (Conc.: 2 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Ascorbic Acid</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">A8960</td>
			<td style="width:247px;">E8 Medium&#160; (Conc.: 64 &#956;g/mL)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">DPBS</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">14190-144</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">Vitronectin</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">A14700</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:207px;">ROCK Inhibitor</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">Y0503</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Name</td>
			<td style="width:113px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:247px;">Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="4" height="21" style="height:21px;width:653px;">Quality Control Materials</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">18 mm Cover Glass</td>
			<td style="width:113px;">Superior</td>
			<td style="width:87px;">HSU-0111580</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">4% Paraformaldyhyde</td>
			<td style="width:113px;">Tech &#38; Innovation</td>
			<td style="width:87px;">BPP-9004</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:113px;">BIOSESANG</td>
			<td style="width:87px;">9002-93-1</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:113px;">Vector Lab</td>
			<td style="width:87px;">SP-5050</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-SSEA4 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">MAB4304</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Oct4 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:87px;">SC9081</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-TRA-1-60 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">MAB4360</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Sox2 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Biolegend</td>
			<td style="width:87px;">630801</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-TRA-1-81 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">MAB4381</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Klf4 Antibody</td>
			<td style="width:113px;">Abcam</td>
			<td style="width:87px;">ab151733</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Alexa Fluor 488 goat anti-mouse IgG (H+L) antibody</td>
			<td style="width:113px;">Molecular Probe</td>
			<td style="width:87px;">A11029</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Alexa Fluor 594 goat anti-rabbit IgG (H+L) antibody</td>
			<td style="width:113px;">Molecular Probe</td>
			<td style="width:87px;">A11037</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">DAPI</td>
			<td style="width:113px;">Molecular Probe</td>
			<td style="width:87px;">D1306</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Prolong gold antifade reagent</td>
			<td style="width:113px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:87px;">P36934</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">4% Paraformaldyhyde</td>
			<td style="width:113px;">Tech &#38; Innovation</td>
			<td style="width:87px;">BPP-9004</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Tween 20</td>
			<td style="width:113px;">BIOSESANG</td>
			<td style="width:87px;">T1027</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:113px;">Vector Lab</td>
			<td style="width:87px;">SP-5050</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Anti-Collagen II antibody</td>
			<td>abcam&#160;</td>
			<td style="width:87px;">ab34712</td>
			<td style="width:247px;">1:100</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Alcian blue</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>A3157-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fast Green FCF</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>F7252-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Safranin O</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">090m0039v</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Nuclear fast red</td>
			<td style="width:113px;">Americanmastertech</td>
			<td>STNFR100&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">xylene</td>
			<td style="width:113px;">Duksan</td>
			<td style="width:87px;">115&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Ethanol</td>
			<td style="width:113px;">Duksan</td>
			<td style="width:87px;">64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Mayer&#39;s hematoxylin solution</td>
			<td style="width:113px;">wako pure chemical industries</td>
			<td>LAK7534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">DAP</td>
			<td style="width:113px;">VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Slide Glass, Coated</td>
			<td style="width:113px;">Hyun Il Lab-Mate</td>
			<td style="width:87px;">HMA-S9914</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Trizol</td>
			<td style="width:113px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:87px;">15596-018</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Chloroform</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">366919</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Isoprypylalcohol</td>
			<td style="width:113px;">Millipore</td>
			<td style="width:87px;">109634</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">Ethanol</td>
			<td style="width:113px;">Duksan</td>
			<td style="width:87px;">64-17-5</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:207px;">RevertAid First Strand cDNA Synthesis kit</td>
			<td style="width:113px;">Thermo Scientfic</td>
			<td style="width:87px;">K1622</td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Name</td>
			<td style="width:113px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:247px;">Description</td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:207px;">Chondrogenic Differentiation Materials</td>
			<td style="width:113px;"></td>
			<td style="width:87px;"></td>
			<td style="width:247px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:207px;">DMEM</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">11885</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (500 mL)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Penicilin Streptomycin</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">P4333</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">Ascorbic Acid</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:87px;">A8960</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 64 &#956;g/mL)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:207px;">MEM Non-Essential Amino Acids Solution (100X)</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:87px;">11140-050</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 100 mM)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">rhBMP-2</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>355-BM-050</td>
			<td>Chondrogenic media component (Conc.:100ng/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Recombinant Hman TGF-beta3</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>243-B3-002</td>
			<td>Chondrogenic media component (Conc.:10ng/ml)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">KnockOut Serum Replacement</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td>10828-028</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">ITS+ Premix</td>
			<td>BD</td>
			<td>354352</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dexamethasone-Water Soluble&#160;</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>D2915-100MG</td>
			<td>Chondrogenic media component (Conc.:10-7 M)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">GlutaMAX Supplement</td>
			<td style="width:113px;">Life Technologies</td>
			<td>35050-061</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">Sodium pyruvate solution</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>S8636</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (Conc.: 1 %)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">L-Proline</td>
			<td style="width:113px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>P5607-25G</td>
			<td style="width:247px;">Chondrogenic media component (40&#956;g/ml)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chondrogenic pellet formation from cord blood-derived induced pluripotent stem cells

人間の関節軟骨は、それ自体を修復する能力が欠けている。従って、軟骨変性は治癒的ではなく、保存的治療によって治療される。現在、 エクスビボで増殖した軟骨細胞または骨髄由来間葉系幹細胞（BMSC）を用いて損傷軟骨を再生する努力がなされている。しかしながら、これらの細胞の制限された生存能力および不安定性は、軟骨再建におけるそれらの適用を制限する。ヒトに誘導された多能性幹細胞（hiPSC）は、再生的応用のための新しい選択肢として科学的な注目を集めている。無制限の自己複製能力と多能性を有することにより、hiPSCは、軟骨修復のための新しい置換細胞源として注目されている。しかし、高品質の軟骨形成性のペレットを大量に得ることは、臨床応用への大きな課題です。この研究では、胚様体（EB）由来の外胚葉細胞を軟骨分化のために使用した。成功した軟骨形成は、PCRおよびアルシアンブルー、トルイジンブルー、およびコラーゲンI型およびII型（それぞれCOL1A1およびCOL2A1）に対する抗体で染色した。我々は、臍帯血単核細胞由来iPSC（CBMC-hiPSC）の軟骨形成性ペレットへの分化のための詳細な方法を提供する。

この研究では、EB細胞から伸長細胞を誘導することにより、CBMC-hiPSCから軟骨形成性ペレットを作製した。多分化能が高いことが確認されたCBMC-hiPSCを用いて軟骨形成分化を誘導した11 。我々のプロトコルの簡単なスキームを図1Aに示す 。分化の前に、iPSCコロニーを拡大した（ 図1B ）。拡大されたiPSCをEBと?...

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Chondrogenic Pellet Formation from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

臍帯血由来誘導多能性幹細胞からの軟骨形成ペレット形成

ここでは、臍帯血単核球由来ヒト由来多能性幹細胞からの軟骨分化のプロトコールを提案する。

Human articular cartilage lacks the ability to repair itself. Cartilage degeneration is thus treated not by curative but by conservative treatments. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Three-dimensional Quantification of Dendritic Spines from Pyramidal Neurons Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells

ヒト人工多能性幹細胞由来の錐体ニューロンからの樹状突起棘の三次元定量

Dendritic spines are small protrusions that correspond to the post-synaptic compartments of excitatory synapses in the central nervous system. They are ...

Cultivate Primary Nasal Epithelial Cells from Children and Reprogram into Induced Pluripotent Stem Cells

子供からプライマリ鼻上皮細胞を培養し、人工多能性幹細胞に再プログラム

Nasal epithelial cells (NECs) are the part of the airways that respond to air pollutants and are the first cells infected with respiratory viruses. They ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Human Melanoma Tumor-infiltrating Lymphocytes

ヒトメラノーマ腫瘍浸潤リンパ球から誘導多能性幹細胞の生成

Adoptive transfer of ex vivo expanded autologous tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) can mediate durable and complete responses in significant subsets ...

Induced Pluripotent Stem Cell Generation from Blood Cells Using Sendai Virus and Centrifugation

センダイウイルスや遠心分離を用いて血液細胞から誘導多能性幹細胞の生成

The recent development of human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) proved that mature somatic cells can return to an undifferentiated, pluripotent ...

Differentiating Chondrocytes from Peripheral Blood-derived Human Induced Pluripotent Stem Cells

末梢血由来ヒト誘導多能性幹細胞からの軟骨細胞の分化

In this study, we used peripheral blood cells (PBCs) as seed cells to produce chondrocytes via induced pluripotent stem cells (iPSCs) in an ...

Rapid, Directed Differentiation of Retinal Pigment Epithelial Cells from Human Embryonic or Induced Pluripotent Stem Cells

人間の胚または誘導多能性幹細胞からの網膜色素上皮細胞の急速な監督の分化

We describe a robust method to direct the differentiation of pluripotent stem cells into retinal pigment epithelial cells (RPE). The purpose of providing ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

臍帯血由来から 3 D 肌 Organoid の生成誘導多能性幹細胞

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

体節誘導体誘導される人間からの体外世代多能性幹細胞します。

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Pan-myeloid Differentiation of Human Cord Blood Derived CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells

Pan-myeloid Differentiation of Human Cord Blood Derived CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells

ヒト臍帯血由来CD34+造血幹細胞および前駆細胞のパンミエロイド分化

Ex vivo differentiation of human hematopoietic stem cells is a widely used model for studying hematopoiesis. The protocol described here is for cytokine ...