Name: detection of residual donor erythroid progenitor cells after hematopoietic stem cell transplantation for patients with hemoglobinopathies
Uploaded: 2017-09-06T13:00:00
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Este trabalho foi apoiado pela Kinderkrebshilfe Regenbogen Südtirol.

1. isolamento de medula óssea células hematopoiéticas classificando multiparâmetro fluorescência-ativado celular <ol><li>amostra de coloração <ol><li>antes de iniciar o processo, os seguintes itens precisam ser coletados e preparado: <ol><li>mídia de gradiente para a preparação de mononucleares células tubos (GM), 50 mL cônica</li> <li>12 x 75 mm tubos de fluxo para coloração de células</li> <li>coloração tampão: tampão fosfato salino (PBS) + 3% de soro de vitela fetal (FCS)</li> <l...

<ol>
	<li>Angelucci, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoietic+stem+cell+transplantation+in+thalassemia+major+and+sickle+cell+disease:+indications+and+management+recommendations+from+an+international+expert+panel.">Hematopoietic stem cell transplantation in thalassemia major and sickle cell disease: indications and management recommendations from an international expert panel.</a> Haematologica. 99, 811-820 (2014).</li><li>Lucarelli, G., Isgro, A., Sodani, P., Gaziev, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoietic+stem+cell+transplantation+in+thalassemia+and+sickle+cell+anemia.">Hematopoietic stem cell transplantation in thalassemia and sickle cell anemia.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 2, a011825 (2012).</li><li>Andreani, M., Testi, M., Lucarelli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mixed+chimerism+in+haemoglobinopathies:+from+risk+of+graft+rejection+to+immune+tolerance.">Mixed chimerism in haemoglobinopathies: from risk of graft rejection to immune tolerance.</a> Tissue Antigens. 83, 137-146 (2014).</li><li>Andreani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+mixed+chimerism+in+patients+transplanted+for+the+treatment+of+thalassemia.">Persistence of mixed chimerism in patients transplanted for the treatment of thalassemia.</a> Blood. 87, 3494-3499 (1996).</li><li>Andreani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+survival+of+ex-thalassemic+patients+with+persistent+mixed+chimerism+after+bone+marrow+transplantation.">Long-term survival of ex-thalassemic patients with persistent mixed chimerism after bone marrow transplantation.</a> Bone Marrow Transplant. 25, 401-404 (2000).</li><li>Kumar, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pilot+study+of+prophylactic+ex+vivo+costimulated+donor+leukocyte+infusion+after+reduced-intensity+conditioned+allogeneic+stem+cell+transplantation.">Pilot study of prophylactic ex vivo costimulated donor leukocyte infusion after reduced-intensity conditioned allogeneic stem cell transplantation.</a> Biol Blood Marrow Transplant. 19, 1094-1101 (2013).</li><li>Lawler, S. D., Harris, H., Millar, J., Barrett, A., Powles, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytogenetic+follow-up+studies+of+recipients+of+T-cell+depleted+allogeneic+bone+marrow.">Cytogenetic follow-up studies of recipients of T-cell depleted allogeneic bone marrow.</a> Br J Haematol. 65, 143-150 (1987).</li><li>McCann, S. R., Crampe, M., Molloy, K., Lawler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemopoietic+chimerism+following+stem+cell+transplantation.">Hemopoietic chimerism following stem cell transplantation.</a> Transfus Apher Sci. 32, 55-61 (2005).</li><li>Dewald, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multicenter+investigation+with+interphase+fluorescence+in+situ+hybridization+using+X-+and+Y-chromosome+probes.">A multicenter investigation with interphase fluorescence in situ hybridization using X- and Y-chromosome probes.</a> Am J Med Genet. 76, 318-326 (1998).</li><li>Andreani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitatively+different+red+cell/nucleated+cell+chimerism+in+patients+with+long-term,+persistent+hematopoietic+mixed+chimerism+after+bone+marrow+transplantation+for+thalassemia+major+or+sickle+cell+disease.">Quantitatively different red cell/nucleated cell chimerism in patients with long-term, persistent hematopoietic mixed chimerism after bone marrow transplantation for thalassemia major or sickle cell disease.</a> Haematologica. 96, 128-133 (2011).</li><li>Andreani, M., Testi, M., Battarra, M., Lucarelli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Split+chimerism+between+nucleated+and+red+blood+cells+after+bone+marrow+transplantation+for+haemoglobinopathies.">Split chimerism between nucleated and red blood cells after bone marrow transplantation for haemoglobinopathies.</a> Chimerism. 2, 21-22 (2011).</li><li>Kropshofer, G., Sopper, S., Steurer, M., Schwinger, W., Crazzolara, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+management+of+mixed+chimerism+after+bone+marrow+transplant+in+beta-thalassemia+major.">Successful management of mixed chimerism after bone marrow transplant in beta-thalassemia major.</a> Am J Hematol. 91, E357-E358 (2016).</li><li>Kimpton, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+DNA+profiling+employing+multiplex+amplification+of+short+tandem+repeat+loci.">Automated DNA profiling employing multiplex amplification of short tandem repeat loci.</a> PCR Methods Appl. 3, 13-22 (1993).</li><li>Centis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+erythroid+expansion+in+determining+the+extent+of+apoptosis+in+erythroid+precursors+in+patients+with+beta-thalassemia+major.">The importance of erythroid expansion in determining the extent of apoptosis in erythroid precursors in patients with beta-thalassemia major.</a> Blood. 96, 3624-3629 (2000).</li><li>Miccio, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+selection+of+genetically+modified+erythroblastic+progenitors+leads+to+long-term+correction+of+beta-thalassemia.">In vivo selection of genetically modified erythroblastic progenitors leads to long-term correction of beta-thalassemia.</a> Proc Natl Acad Sci U.S.A. 105, 10547-10552 (2008).</li></ol>

O objetivo do estudo atual é fornecer ao público uma combinação das duas abordagens para analisar quimerismo doador/beneficiário em eritroide progenitores após TCTH em pacientes tratados para hemoglobinopatias: 1.) classificação de fluorescência-ativado da pilha de células progenitoras hematopoiéticas em amostras de medula óssea, seguidas de análise de repetições curtas em tandem e 2.) unidade formadoras de cultivo de células de medula óssea, a classificação das colônias em vários tipos de progenitor...

Transplante de células-tronco hematopoéticas alogênico (TCTH) é a abordagem curativa disponível apenas para uma variedade de desordens genéticas inatas do sistema hematopoiético, conseguindo taxas de sobrevida livre de doença de mais de 90% para outra forma altamente comprometida e vida útil limitada pacientes1. A eficácia desta importante ferramenta terapêutica foi otimizada ao limitar a toxicidade de pré- e pós-transplante de regimes2, mas também por intervenções destinadas a sustentar a função estável do enxerto, que é quantificada pelo acompanhamento atento da células de doador-derivado de4,3,5.
Em geral, o quimerismo completo (CC) implica a substituição total do compartimento lymphohematopoietic pelo doador-derivado de células, enquanto o termo misturado quimerismo (MC) é usado quando o doador e receptor derivada de células estão presentes simultaneamente em vários proporções. Quimerismo Split (SC) denota a coexistência de quimerismo misto observada em linhagens de célula única, tal como no compartimento eritroide. Determinação rápida do status de quimerismo após TCTH é fundamental, como pode ajudar a identificar os pacientes suscetíveis para recidiva da doença e estratégias de iniciar immunomodulatory subsequentes, como infusões de linfócitos do doador ou redução de imunossupressores terapias6.
Vários métodos foram desenvolvidos para o monitoramento de enxertia após TCTH. Segundo de imunoglobulinas e análise citogenética tem sensibilidade pobre e são limitados em sua capacidade de detectar o polimorfismo7,8. A introdução de hibridação fluorescente em situ (FISH) pode aumentar a sensibilidade no acompanhamento de quimerismo após TCTH, mas é restrita ao sexo-incompatíveis aloenxertos9. Atualmente, a reação em cadeia da polimerase (PCR) é o mais difundido método usado para detectar quimerismo e baseia-se na electroforese do gel de agarose-acrilamida convencional das repetições em tandem de número variável (alelos) ou repetições de curta em tandem (STRs). Usada rotineiramente o PCR quantitativo é capaz de detectar uma extremamente pequena proporção de células de doador residual após TCTH. A grande limitação dos estudos até agora é que MC deteção é quase exclusivamente limitada a presença de células nucleadas, ao invés de eritrócitos maduros, ou seja, as células que é funcionalmente crucial para os pacientes afetados por hemoglobinopatias. Em pacientes com diferentes grupos de sangue, vale lembrar que a análise cytofluorometric é capaz de identificar quimerismo em glóbulos vermelhos, utilizando anticorpos monoclonais dirigidos eritrócitos antígenos ABO e C, c, D, E e e10 , 11. um meio diferente, mas muito interessante de avaliar quimerismo na linhagem eritroide é a combinação de fluxo cytometric classificação dos progenitores eritroide e seleção de vários tipos de progenitor eritroide pelo cultivo em ensaios de clonogenic, seguido de análise de STR12. Esta abordagem é capaz de quantificar as proporções relativas de quimerismo doador-versus-receptor no compartimento eritroide e pode ser utilizada na estratégia para sustentar o enxerto de medula óssea.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="980">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ficoll-Paque</td>
			<td style="width:252px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:215px;">GE17-1440-02&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Remove RBC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">50 mL conical tubes</td>
			<td style="width:252px;">Falcon</td>
			<td style="width:215px;">14-432-22</td>
			<td style="width:183px;">Sample preparation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">12 x 75 mm flow tubes</td>
			<td style="width:252px;">Falcon</td>
			<td style="width:215px;">352002</td>
			<td style="width:183px;">FACS sorting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">10010023</td>
			<td style="width:183px;">PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Fetal calf serum</td>
			<td style="width:252px;">Invitrogen Inc.</td>
			<td style="width:215px;">16000-044</td>
			<td style="width:183px;">FCS (heat-inactivated)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">CD34 APC</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">561209</td>
			<td style="width:183px;">FACS-Ab</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">CD36 FITC</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">555454</td>
			<td style="width:183px;">FACS-Ab</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">CD45 V450</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">642275</td>
			<td style="width:183px;">FACS-Ab</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Trypan blue</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">15250061</td>
			<td style="width:183px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:252px;">Invitrogen Inc.</td>
			<td style="width:215px;">C10227</td>
			<td style="width:183px;">Automatic cell counting</td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:331px;">Hank&#8217;s Balanced Salt Solution</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">14025092</td>
			<td style="width:183px;">Suspension buffer in FACS analysis</td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:331px;">HEPES</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">15630080</td>
			<td style="width:183px;">Component of suspension buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">FcR</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">564220</td>
			<td style="width:183px;">Block FCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">FACS Aria I</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">23-11539-00</td>
			<td style="width:183px;">FACS Sorter</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Recombinant&#160; human erythropoietin</td>
			<td style="width:252px;">Affimetrix eBioscience</td>
			<td style="width:215px;">14-8992-80</td>
			<td style="width:183px;">EPO</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Isocove&#8217;s Modified Dulbecco&#8217;s Medium</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">12440053</td>
			<td style="width:183px;">IMDM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">L-Glutamine</td>
			<td style="width:252px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:215px;">25030-081</td>
			<td style="width:183px;">Component of Culture Medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">CD34+ magnetic beads</td>
			<td style="width:252px;">Milteny Biotech</td>
			<td style="width:215px;">130-046-702</td>
			<td style="width:183px;">CD34+ purification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Recombinant&#160; human G-CSF</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">PHC2031</td>
			<td style="width:183px;">CFU-Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Recombinant&#160; human SCF</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">CTP2113</td>
			<td style="width:183px;">CFU-Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Recombinant&#160; human GM-CSF</td>
			<td style="width:252px;">Gibco</td>
			<td style="width:215px;">PHC2015</td>
			<td style="width:183px;">CFU-Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Recombinant&#160; human IL-3</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">554604</td>
			<td style="width:183px;">CFU-Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Recombinant&#160; human IL-6</td>
			<td style="width:252px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">550071</td>
			<td style="width:183px;">CFU-Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Methocult H4434 Medium</td>
			<td style="width:252px;">Stemcell Technologies</td>
			<td style="width:215px;">4444</td>
			<td style="width:183px;">CFU-Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">QiAmp DNA Blood extraction kit</td>
			<td style="width:252px;">Qiagen</td>
			<td style="width:215px;">51306</td>
			<td style="width:183px;">DNA Isolation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Nanodrop ND-1000 spectra photometer</td>
			<td style="width:252px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:215px;">ND 1000</td>
			<td style="width:183px;">DNA Quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">DNAase free H2O</td>
			<td style="width:252px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:215px;">FEREN0521</td>
			<td style="width:183px;">DNA Preparation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">AmplTaq Gold DNA Polymerase</td>
			<td style="width:252px;">Applied Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">N8080240</td>
			<td style="width:183px;">PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Eppendorf mastercycler gradient</td>
			<td style="width:252px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:215px;">6321000019</td>
			<td style="width:183px;">PCR&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Hi-Di Formamid</td>
			<td style="width:252px;">Applied Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">4311320</td>
			<td style="width:183px;">PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">GeneScan 500 ROX Size Standard</td>
			<td style="width:252px;">Applied Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">4310361</td>
			<td style="width:183px;">PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">3130 Genetic Analyzer</td>
			<td style="width:252px;">Applied Bioscience</td>
			<td style="width:215px;">313001R</td>
			<td style="width:183px;">PCR</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of residual donor erythroid progenitor cells after hematopoietic stem cell transplantation for patients with hemoglobinopathies

A presença de quimerismo incompleta é observada em uma grande proporção de pacientes após transplante de medula óssea para a talassemia major ou doença falciforme. Esta observação tem implicações tremendas, como estratégias de imunomodulação terapêutica subsequente podem melhorar os resultados clínicos. Convencionalmente, a análise baseada em reação em cadeia da polimerase de repetições curtas em tandem é usada para identificar o quimerismo em células de sangue de doadores-derivado. No entanto, esse método é restrito às células nucleadas e não conseguem distinguir entre linhagens de célula única dissociadas. Aplicamos a análise das repetições curtas em tandem para fluxo de células progenitoras hematopoiéticas cytometric-classificados e comparou-o com a análise de repetições curtas em tandem de unidades formadoras de estouro selecionada - eritroide colônias, ambos coletados do osso medula. Com este método... somos capazes de demonstrar as diferente proliferação e diferenciação das células do doador no compartimento eritroide. Esta técnica é elegível para completar o monitoramento atual de quimerismo em definindo o transplante de células estaminais e, portanto, pode ser aplicados estudos clínicos no futuro, investigação em células estaminais e design dos julgamentos de terapia de gene.

Separação dos progenitores lymphohematopoietic classificando FACS celular
Demonstramos aqui os resultados da classificação as populações de células necessárias para a análise de STR a jusante. Células da medula óssea foram coradas com V450-conjugado anti-CD45, anti-CD36 conjugado FITC e APC-conjugado anti-CD34. A população de interesse é as megacariócito eritroide progenitores (MEP), nucleated as ...

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Detection of Residual Donor Erythroid Progenitor Cells after Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Patients with Hemoglobinopathies

Quantificação de doador-derivado de células é necessária para monitorar a enxertia após transplante de células-tronco em pacientes com hemoglobinopatias. Uma combinação de classificação de celulares baseados em citometria de fluxo, ensaio de formação de colônia e posterior análise do tandem curta repetições podem ser utilizadas para avaliar a proliferação e diferenciação dos progenitores no compartimento eritroide.

Deteção de doador Residual eritroide progenitoras após transplante de células-tronco hematopoéticas para pacientes com hemoglobinopatias

The presence of incomplete chimerism is noted in a large proportion of patients following bone marrow transplant for thalassemia major or sickle cell ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Derivation of Cardiac Progenitor Cells from Embryonic Stem Cells

Derivação de Cardiac células progenitoras de células estaminais embrionárias

Cardiac progenitor cells (CPCs) have the capacity to differentiate into cardiomyocytes, smooth muscle cells (SMC), and endothelial cells and hold great ...

Biologia do Desenvolvimento

Direct Induction of Human Neural Stem Cells from Peripheral Blood Hematopoietic Progenitor Cells

Indução direta de Neurais Human células-tronco de sangue periférico células progenitoras hematopoéticas

Human disease specific neuronal cultures are essential for generating in vitro models for human neurological diseases. However, the lack of access to ...

Competitive Transplants to Evaluate Hematopoietic Stem Cell Fitness

Transplantes competitivos para avaliar hematopoéticas aptidão Stem Cell

The gold standard definition of a hematopoietic stem cell (HSC) is a cell that when transferred into an irradiated recipient will have the ability to ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Uma nova técnica de transplante de almofada de gordura mamária para visualizar a geração de vasos de células vasculares endoteliais vasculares

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Development of an In Vitro Assay to Quantitate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells (HSPCs) in Developing Zebrafish Embryos

Development of an In Vitro Assay to Quantitate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells HSPCs in Developing Zebrafish Embryos

Desenvolvimento de um ensaio In Vitro para dosar o Progenitor e Hematopoietic Stem Cells (HSPCs) no desenvolvimento de embriões de peixe-zebra

Hematopoiesis is an essential cellular process in which hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) differentiate into the multitude of different cell ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Photoconversion de célula única no Zebrafish intacta vida

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome

Uso de transplante de células-tronco hematopoiéticas para avaliar a origem da síndrome mielodisplásica

Myelodysplastic syndromes (MDS) are a diverse group of hematopoietic stem cell disorders that are defined by ineffective hematopoiesis, peripheral blood ...

Efficient Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Liver Cells

Diferenciação eficiente de células-tronco pluripotentes humanas em células hepáticas

The liver detoxifies harmful substances, secretes vital proteins, and executes key metabolic activities, thus sustaining life. Consequently, liver ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Na geração de Vitro do Somite derivados de humanos induzida por células tronco pluripotentes

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells

Modelo de impacto cortical controlado da lesão cerebral do rato com transplantação terapêutica de células neurais pluripotentes induzidas humanas da pilha de haste

Traumatic brain injury (TBI) is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. Disease pathology due to TBI progresses from the primary mechanical ...