Name: phase behavior of charged vesicles under symmetric and asymmetric solution conditions monitored with fluorescence microscopy
Uploaded: 2017-10-24T14:00:00
Duration: 10 min 8 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phase Behavior of Charged Vesicles Under Symmetric and Asymmetric Solution Conditions Monitored with Fluorescence Microscopy at JoVE.com

Ce travail fait partie du consortium MaxSynBio, qui est financé conjointement par le ministère fédéral de l’éducation et de recherche d’Allemagne et de la Société Max Planck.

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Production réussie de GUVs pour les observations d’état de phase dans des conditions de forte salinité symétriques et asymétriques
Les protocoles présentés ici présente une stratégie visant à évaluer l’influence de l’asymétrie de tampon et solution forte salinité sur l’état de phase de membrane de GUVs chargées sur une large gamme de compositions. Un des défis majeurs dans la réalisation de cet objectif était la production de GUVs chargées dans des tampons de forte salinité.
Nous avons réussi à produire GUVs dans une solution de sucrose et tampon haute-saline par une simple approche gonflement spontanée, qui comprend une étape d’hydratation avant du film lipidique déposé et une étape de nuit hydratation final pour la croissance de la vésicule. Il est important de noter que le dépôt lipidique doit être fait sur une plaque PTFE rugueuse pour assurer même lipides propagation pour donner les vésicules unilamellaires. En outre, il est essentiel d’effectuer toutes les étapes lors de préparation de la vésicule à une température où le film lipidique est dans un état de phase homogène et fluide. Sinon, la population de vésicule soient polydispersés en composition et biaiser l’analyse d’état de phase finale de la population. Le protocole spécifique pour le gonflement spontané des rendements GUVs un bouquet de vésicules qui d’une part offre la possibilité de réactiver en petits volumes pour obtenir très concentrée de dispersions de vésicule et fournit d’autre part la solution asymétrique conditions à travers la membrane tout en minimisant la dilution des vésicules8,28. Il est essentiel qu’au cours de la dilution de la vésicule ou solution externe échanger, l’intérieur et extérieur osmolarities restent appariées comme des changements de morphologie causées par la désadaptation de l’osmolarité peuvent induire ou prévenir Lo + Ld phase séparation41 ou, en cas de hypotonique conditions, peut conduire à l’éclatement de la vésicule.
Ici, tentatives d’optimiser les protocoles d’electroformation en solution forte salinité ont débouché sur la production d’aucun GUVs alors que PVA assistée par un gonflement des vésicules multilamellaires. Même si elle exige plus longs temps de préparation et des résultats dans des lots de la vésicule de basse qualité10,17, le succès de la production de vésicules chargées par spontanée gonflement est livré avec des avantages supplémentaires. Il exige un minimum d’effort tout en permettant des rendements suffisants pour les analyses des lots de statistiques et, contrairement à electroformation, aucun matériel sophistiqué ou optimisation ont été requis. En outre, aucun des contaminations par l’oxydation des lipides n’ont été observées42,43. Selon la littérature il n’y a aucune différence entre la composition lipidique des vésicules et les stocks correspondants où elles ont été cultivées7,17. En outre, la formation de vésicules sur un substrat PTFE n’invite pas l’inclusion de toute contamination par opposition aux méthodes gonflements gel assistée où les molécules étrangères peuvent être introduits par le substrat23. Electroformation est livré avec les autres inconvénients associés à dilution de vésicule excessive lors de la création des conditions de solution asymétrique. GUVs produites par electroformation sont habituellement présents sous forme une dispersion homogène (contrairement à la suspension de la vésicule hautement concentré sous la forme d’une touffe formée durant le gonflement spontané). Toute dilution de la solution externe affaiblirait considérablement le nombre de vésicules ainsi. En outre, au cours de ce travail, Qu'on a fait observer que DOPG/eSM/Chol GUVs produites par electroformation en saccharose est devenu instable si dilué dans un tampon forte salinité. Fluorescence de plaques de lipides sur la lame de microscope a indiqué que les vésicules auraient éclaté avant leur inspection visuelle n’a été possible. Cette instabilité peut être attribuée à une tension élevée membrane de vésicules préparé par electroformation par rapport à ceux obtenus par gonflement spontané10.
Bien que la dilution de la vésicule est une approche simple et rapide de créer des conditions de solution GUV asymétriques, il accomplit seul un échange partiel solution externe, bien qu’à une fraction élevée (ici : 95 %, Figure 2), après dilution, trace de la gonflement des solution restera. Le choix du degré de l’échange de la solution externe est un compromis entre le pipetage jusqu'à la touffe de la vésicule avec la solution de gonflement (section 2) et il dilue ne pas trop. Par conséquent, nous avons introduit une approche alternative microfluidique discutée ailleurs en détail37 qui permet un échange rapide et complet de solution externe lors d’observations de GUV phase État pour vérifier les observations d’état de phase pour dilué vésicules. Les observations de variations d’état de phase lorsqu’on change de symétrique aux conditions de la solution asymétrique ont été observées en effet à être d’accord. En outre, les deux méthodes pour générer des modalités de solution asymétrique indiquées ici sont relativement rapides (Réf.8à comparer) et viennent avec aucun risque connu de modifications de la composition locale (comparer les références30,,31), augmentation de la tension de membrane (Comparez référence32), ou chauffage local (Comparez référence33), en ce qui concerne les méthodes alternatives discutées dans l’Introduction. Durant le piégeage de la microfluidique, un équilibre osmotique entre l’intérieur de la vésicule et l’extérieur n’est pas seulement essentielle pour éviter les artefacts d’état de phase comme mentionné ci-dessus, mais aussi déflation causée par une solution hypertonique conditions pourrait causer les GUVs piégés à glisser à travers les postes après un échange de solution externe.
Même si gonflement spontané a été appliqué avec succès pour se développer sans inculpation des vésicules d’un système DOPC/eSM/Chol, dans d’autres cas, l’absence de charges qui risqueraient de GUV gonflement faute résultant de répulsion entre les bicouches individuels44 . Prolongation de la période pré gonflement ou d’introduire des encombrants lipides polaires peut-être contrer ce numéro45. En outre, la stabilité de la vésicule après leur dilution dans les solutions différentes de celui utilisé pour le gonflement peut être différent pour compositions lipidiques différentes et le milieu de dilution, qui nous n’avons pas étudié ici. Nous n’avons pas aussi exploré la possibilité de régler le diamètre moyen de GUV avec la méthode de préparation présentée ici. Mais les paramètres tels que la composition de la vésicule et le gonflement de solution sont susceptibles d’influencer les résultats. L’application de méthodes alternatives46 peut donner de grandes vésicules pour les lipides et les solutions utilisées ici, cependant, ils peuvent venir avec d’autres inconvénients liés à la méthode. L’approche décrite ci-dessus pour produire GUVs dans des conditions de forte salinité symétriques et asymétriques fournit un outil potentiel pour poursuivre ses études de vésicules constitué de compositions lipidiques différentes et dispersées dans différents milieux. Comme nous n’avons pas exploré ces possibilités, futurs essais montrera comment en général, les méthodes de préparation et de la dilution de GUV peuvent être appliquées.
Séparation des phases d’observation à différentes températures
Il existe différentes configurations expérimentales appropriées étudier GUVs à différentes températures. Alors que ces configurations ne sont pas communément décrites en détail dans la littérature, les travaux en cours présente un assemblage de base applicable à de telles études.
_content "> contrôle mesures montrent que la température interne conçu et construit la chambre est précisément contrôlée par un thermostat et gradients de température à l’intérieur de la chambre sont dans la résolution de la température expérimentale. Il est veillé à ce que les conditions thermiques expérimentale sont conformes à la lecture du thermostat.
Lors de l’évaluation des États de phase GUV sur une gamme de température large, il est important que les vésicules observées sont bien équilibrés après que la température a été changé. Une façon possible de s’en assurer est de vérifier pour hystérésis. Si l’hystérésis est présent, les mesures de température devraient être réduites et/ou temps d’établissement a augmenté. Comme la température contrôle dans cet ouvrage est établi par un thermostat à base d’eau, la plage de températures de travail est idéalement limitée à 0 - 100 ° C. Cette gamme peut être étendue à l’aide d’autres liquides de contrôle de température tels que l’huile ou en employant d’autres configurations, par exemple un dispositif Peltier. Dans la pratique, la température d’utilisation est également limitée par la condensation éventuelle ou évaporation. En outre, pour des températures loin de la température ambiante, la présence d’un gradient de température de l’état stationnaire dans l’ensemble de la chambre d’observation devienne plus probable. En outre, l’équipement d’imagerie peut-être être lésé à des températures extrêmes. Pour les plages de température typique appropriés pour les études de vésicules lipidiques (~ 10-50 ° C7,,9) dommage à l’équipement d’observation doit être considérée mais n’est généralement pas attendu.
Artefacts de vésicule domaine d’observation
Il y a un certain nombre de sources pour les artefacts d’observation à l’aide de la microscopie de fluorescence de grand champ. Tout d’abord, il faut être conscient que la résolution maximale r de l’objet appliqué pour l’inspection visuelle des États de phase de vésicule détermine la limite de détection de domaines lipidiques selon : 
<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/56034/56034eq2v2.jpg"> où λ est la longueur d’onde d’émission, et NA est l’ouverture numérique de l’objectif. Un objectif typique avec un 40 x grossissement et un NA de 0,6, ce qui permet de détecter des émissions verte clair environ 560 nm atteindrait une résolution optique de ~0.6 µm. ainsi, les études qui comparent les États de phase de vésicules issus de mélanges de lipide particulier entre les différents conditions doivent utiliser le même objectif pour le même mélange de lipides.
Un autre artefact est la présence de domaines lipidiques suite photo-oxydation des lipides en raison d’une exposition prolongée à l’excitation lumineuse41. Photo-dommage survient préférentiellement sur les fractions lipidiques hydrocarbure insaturé. En effet, pour certaines compositions lipidiques, la telle formation domaine de vésicules initialement homogènes a été observée ici après une longue période d’exposition à la lumière excitation (~ 30 s). Pour contrer ce problème, la lumière d’excitation a été gardée pendant quelques secondes seulement pour l’évaluation d’état de phase focalisée à un champ de vision. DiIC18 était donc convenable pour nos besoins. Autres colorants, cependant, peuvent être beaucoup plus sensibles et devrez peut-être être manipulé à des intensités plus faibles d’excitation et avec des temps d’exposition à la lumière excitation plus courts.
Contrainte de cisaillement mécanique provenant du transfert de la pipette des vésicules mélanges potentiellement domaines temporairement, ainsi fausser le comportement de phase de vésicules apparentes. Pour certains lots, vésicules différents ont montré des comportements différents de phase 0 min et 5 min après la pipette de transfert sur la lamelle de microscope. Aussi la contrainte de cisaillement induite par l’écoulement du fluide dans le dispositif microfluidique s’est avérée de domaine mélange47. Vésicules devraient être laissées intactes pour une durée suffisante pour équilibration avant l’observation. Dans cette étude, vésicules piégés sur le dispositif microfluidique sont restés intacts pendant 1 h après chargement de la vésicule et les échanges de solution avant l’observation.
D’éviter les difficultés susmentionnées ainsi que la restriction imposée par la limite de diffraction de la lumière, des méthodes alternatives telles que la spectroscopie de résonance magnétique nucléaire48 ou super résolution microscopy techniques49 pourraient être employés.
Conclusion et perspectives
Le travail présenté illustre un ensemble de méthodes permettant l’analyse de l’influence des conditions de forte salinité des solution symétrique et asymétrique sur la séparation de phase de membrane. Toutes les méthodes présentées ne conviennent pas pour d’autres applications. Par exemple, le dispositif microfluidique fournit une plate-forme pour étudier la cinétique de formation du domaine et la disparition après l’induction de l’asymétrie de la solution. Aussi, apparition de domaine en fonction de la concentration en sel pourrait être examinée comme ça. Toutes les méthodes pourraient également servir à regarder l’influence sur le comportement de phase en utilisant d’autres solutions d’intérêt.

Depuis l’observation des domaines taille micron dans les vésicules de liquide-liquide phases séparées géant unilamellaires (GUVs) par microscopie de fluorescence, GUVs ont été utilisés comme un système modèle pour étudier les lipides radeau hypothèse1,2 , 3 . Comme la zone de leur bicouche autoportantes compris dans une fourchette de celle des cellules biologiques, ils sont adaptés imite des membranes plasmiques mettant en vedette les radeaux hypothétiques. De nombreuses études sur ces GUVs ont été réalisées avec des vésicules entraînés par l’eau pure, saccharose ou des solutions de faible salinité4,5,6,7,8. Ces conditions, cependant, ne reflètent pas physiologiquement pertinente exposition des biomembranes aux environnements de forte salinité et l’asymétrie de solution membranaires comme le sont les conditions pour les cellules.
Dans ce travail et dans une publication précédente du notre groupe9, les États de phase de GUVs multicomposants chargées ont été examinés en fonction de la présence d’une asymétrie de sel et de la solution à travers la membrane. GUVs sont préparés à partir de mélanges de différentes proportions de cholestérol (Chol) dans une solution de saccharose (avec osmolarité de 210 mOsm/kg) ou tampon de forte salinité (100 mM NaCl, 10 mM Tris, pH 7.5, 210, oeuf sphingomyéline (eSM) et dioleoylphosphatidylglycerol (DOPG) mOsm/kg). Le choix des lipides était justifié par les résultats déjà obtenus sur le diagramme de phase de ce mélange6,8.
Un certain nombre de méthodes pour la préparation de GUVs est disponible dans la littérature10,11,12 (noter qu’ici, nous ne considérerons pas ceux impliquant le transfert de lipides d’une base d’huile à une phase aqueuse 13 , 14 en raison du danger inhérent des résidus de pétrole restant dans la membrane qui peut affecter le comportement de phase). La préparation de GUVs dans un tampon de forte salinité est associée à des défis particuliers. Pour des solutions de faible force ionique, l’electroformation méthode15,16 présente une façon rapide de préparer GUVs avec des rendements élevés avec petits défauts10,17. La méthode s’inspire de déposer une couche de lipides sur une surface conductrice (l’électrode), sécher et les hydratant avec une solution aqueuse tout en appliquant un champ AC. Toutefois, cette méthode requiert ajustements si le sel est présent dans la solution aqueuse18,19. Il est supposé que la force motrice pour la croissance de la vésicule par electroformation est électro-osmose16 qui est entravé à conductivité élevée20. Electroswelling de GUVs dans les solutions de forte salinité n’est donc pas une approche directe car elle nécessite optimisation pour différentes concentrations de sels présentes dans la solution de gonflement. Gel-assisted vésicule gonflement21,22 est une alternative possible à electroformation avec des temps de formation encore plus rapides. Cette approche s’appuie sur l’hydratation du film lipidique accrue lorsqu’un gel (agarose ou alcool polyvinylique (PVA)) est utilisé comme substrat. Ces approches, viennent toutefois, avec le risque de contamination de la membrane dans le cas d’agarose gonflement23 et/ou température limites fondées comme dans le cas de gonflement base PVA. De même, un protocole de croître GUVs sur un substrat de papier de cellulose a été récemment établi24. Questions d’ordre générales de cette méthode sont le manque de contrôle sur la pureté du substrat, ainsi que l’utilisation de grandes quantités de lipides. Dans ce travail, nous introduirons et présenter les avantages de la méthode plus traditionnelle de GUV préparation, à savoir la spontanée gonflement méthode25,26. Il se compose d’une couche de lipides sur un substrat lipophobes, il hydratant dans l’atmosphère de vapeur d’eau et gonflement ultérieur dans la solution recherchée de gonflement de séchage (voir Figure 1 et les détails dans la section protocole). Cette méthode n’offre pas de contrôle sur la distribution de taille des vésicules et se traduit par des vésicules dans l’ensemble plus petites par rapport aux méthodes où la production est assistée par champ électrique, support en polymère ou microfluidique :. Cependant, la qualité de la vésicule et la taille est appropriée pour l’examen de l’état de phase de membrane comme exploré ici.
Création d’asymétrie entre les solutions à travers la membrane de la vésicule est associé à certains défis aussi bien. Une approche couramment utilisée est la dilution directe de la suspension de vésicules dans la solution externe désirée27,28. Toutefois, cela diminue aussi la densité de distribution de vésicule. Une autre stratégie consiste à échanger lentement la solution externe autour GUVs s’installe au fond d’une cellule d’écoulement qui permet à la solution in - et excrétion. Pour éviter de déranger ou même perdre les vésicules avec le flux, faibles débits sont appliquées8, ce qui rend cette approche temps-inefficace. En outre, aucune de ces approches garantit exchange solution complète externe. Une solution évidente consiste à immobiliser des vésicules afin d’éviter de les perdre lors d’un échange de solution externe. Par exemple, biotinylé GUVs peut être attaché sur une surface streptavidine29. Toutefois, cette approche peut conduire à des variations de compositions à la collés et donc la membrane non-respecté segments de30,31. L’application de magnétique ou les champs électriques pour piéger les résultats de vésicules en imposant la membrane tension32. Employant des pinces optiques pour piéger une vésicule, il faut avoir une poignée attachée (c'est-à-dire une perle), tandis que l’utilisation des traverses optiques peut impliquer des locaux chauffage33. Piégeage de GUVs peut également être réalisé en les élevant sur des fils de platine sans détachement final34. Cela donne toutefois des vésicules qui ne sont pas isolés et qui sont généralement connectés aux câbles ou autres vésicules de tubes minces lipidique (sangles).
Le travail présenté met en évidence des stratégies pour surmonter les limitations susmentionnées. Nous présentons d’abord une description détaillée de la méthode de gonflement spontanée adapté et optimisé pour la production de GUVs dans des tampons de forte salinité. Puis, nous présentons deux approches pour créer efficacement les conditions de la solution asymétrique par simple dilution ou l’utilisation d’un dispositif microfluidique. Parce que notre objectif est l’analyse de l’état de phase de membrane de GUVs dans des conditions différentes solution, les sections suivantes décrivent critères d’analyse statistique réussie et présents conseils pour éviter la catégorisation fausse.
Les analyses ont été effectuées dans des conditions isothermes, ainsi que sous des températures différentes. Alors que c de la températureontrol est couramment employée, détails sur chambres expérimentales de contrôle de température sont rarement décrits. Ici, une configuration interne construite à observer GUVs aux diverses conditions de température est présentée.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1&#39;-rac-glycerol), sodium salt</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>840475C</td>
			<td>abbreviated as DOPG in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chicken egg sphingomyelin</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>860061</td>
			<td>abbreviated as eSM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cholesterol (ovine wool, &#62; 98 %)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>700000</td>
			<td>abbreviated as Chol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,1&#129;&#39;-dioctadecyl-3,3,3&#39;,3&#39;-tetramethylindocarbocyanine perchlorate</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>D-282</td>
			<td>abbreviated as DiIC18</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform, HPLC grade (&#8805; 99.8 %)</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl (&#62; 99.8 %)</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl (37 %)</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris (&#8805; 99.9 %)</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose (&#8805; 99.5 %)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Threaded vial 45x27 mm, 15 mL</td>
			<td>Kimble</td>
			<td></td>
			<td>Soda flat bottom, white screw cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>MP220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmometer</td>
			<td>Gonotec</td>
			<td>Osmomat030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epi-fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Observer D1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal laser scanning microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>TCS SP5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 40x, 0.6 NA</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LD Achroplan</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 40x, 0.75 NA</td>
			<td>Leica</td>
			<td>506174</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 63x, 0.9 NA</td>
			<td>Leica</td>
			<td>506148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slide, 56x26 mm, 0.17 &#177; 0.01 mm</td>
			<td>Menzel-Gl&#228;ser</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip, 22x22 mm, 0.17 &#177; 0.01 mm</td>
			<td>Menzel-Gl&#228;aser</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm &#34;M&#34;</td>
			<td>Bremix Flexible Packaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes, 5 mL, 10 mL</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m syringe filter</td>
			<td>GVS North America</td>
			<td>Cameo 25AS, 1213723</td>
			<td>Acetate, sterile</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phase behavior of charged vesicles under symmetric and asymmetric solution conditions monitored with fluorescence microscopy

Des vésicules de phases séparées géant unilamellaires (GUVs) présentant la coexistence ordonnée liquide et liquide-désordonnée des domaines sont un outil commun et biophysique pour enquêter sur l’hypothèse de radeau lipidique. De nombreuses études, toutefois, négligent l’impact des conditions de solution physiologique. Pour cette raison, les travaux en cours présente l’effet d’asymétrie de solution tampon et membranaires forte salinité sur la séparation des phases liquide-liquide dans GUVs chargées est passées de dioleylphosphatidylglycerol, œuf sphingomyéline et cholestérol. Les effets ont été étudiés dans des conditions de température isotherme et variables.
Nous décrire l’équipement et des stratégies expérimentales applicables pour la surveillance de la stabilité des coexistants domaines liquides dans les vésicules chargées dans des conditions symétriques et asymétriques solution forte salinité. Cela inclut une approche pour préparer chargées GUVs multicomposants à forte salinité tampon à haute température. Le protocole suppose la possibilité d’effectuer un échange partiel de la solution externe en une étape simple dilution tout en minimisant la dilution de la vésicule. Une autre approche est présentée en utilisant un dispositif microfluidique qui permet un échange complet de solution externe. Les effets de la solution sur la séparation de phase ont été également étudiés sous des températures différentes. À cette fin, nous présentons la conception de base et l’utilité d’une chambre de contrôle de température intégré interne. En outre, nous réfléchissons sur l’évaluation de l’état de phase GUV, pièges associé et comment contourner.

Watch this Scientific Journal Video about Phase Behavior of Charged Vesicles Under Symmetric and Asymmetric Solution Conditions Monitored with Fluorescence Microscopy at JoVE.com

Phase Behavior of Charged Vesicles Under Symmetric and Asymmetric Solution Conditions Monitored with Fluorescence Microscopy

Expériences sur les vésicules unilamellaires géant phase séparée (GUVs) négligent fréquemment des conditions de solution physiologique. Cet ouvrage présente des approches pour étudier l’effet de la forte salinité tampon sur la séparation de phase liquide-liquide dans GUVs multicomposants chargées en fonction de l’asymétrie de solution membranaires et la température.

Comportement de phase des vésicules chargées dans des Conditions de Solution symétrique et asymétrique suivies avec la microscopie en Fluorescence

Phase-separated giant unilamellar vesicles (GUVs) exhibiting coexisting liquid-ordered and liquid-disordered domains are a common biophysical tool to ...

Research

JoVE Journal

Chemistry

Determination of the Gas-phase Acidities of Oligopeptides

Détermination des acidités en phase gazeuse d&#39;oligopeptides

Amino acid residues located at different positions in folded proteins often exhibit different degrees of acidities. For example, a cysteine residue ...

Recherche

Chimie

Particles without a Box: Brush-first Synthesis of Photodegradable PEG Star Polymers under Ambient Conditions

Particules sans boîte: Brush-première synthèse de photodégradables PEG étoiles polymères dans des conditions ambiantes

Convenient methods for the rapid, parallel synthesis of diversely functionalized nanoparticles will enable discovery of novel formulations for drug ...

Mizoroki-Heck Cross-coupling Reactions Catalyzed by Dichloro{bis[1,1',1''-(phosphinetriyl)tripiperidine]}palladium Under Mild Reaction Conditions

Mizoroki-Heck Cross-coupling Reactions Catalyzed by Dichloro{bis[1,1',1''-phosphinetriyltripiperidine]}palladium Under Mild Reaction Conditions

Mizoroki-Heck réactions de couplage croisé catalysées par Dichloro {bis [1,1 &#39;, 1&#39;&#39; - (phosphinetriyl) tripiperidine]} palladium Sous légère réaction Conditions

Dichloro-bis(aminophosphine) complexes of palladium with the general formula of [(P{(NC5H10)3-n(C6H11)n})2Pd(Cl)2] (where n = 0-2), belong to a new family ...

Synthetic Methodology for Asymmetric Ferrocene Derived Bio-conjugate Systems via Solid Phase Resin-based Methodology

Méthodologie synthétique pour asymétrique Ferrocene dérivés Systems Bio-conjugués via solide méthodologie à base de résine de phase

Early detection is a key to successful treatment of most diseases, and is particularly imperative for the diagnosis and treatment of many types of cancer. ...

A Simple Method for the Size Controlled Synthesis of Stable Oligomeric Clusters of Gold Nanoparticles under Ambient Conditions

Une méthode simple pour la Taille synthèse contrôlée de Stable oligomères grappes de nanoparticules d&#39;or dans des conditions ambiantes

Reducing dilute aqueous HAuCl4 with sodium thiocyanate (NaSCN) under alkaline conditions produces 2 to 3 nm diameter nanoparticles. Stable grape-like ...

Construction and Systematical Symmetric Studies of a Series of Supramolecular Clusters with Binary or Ternary Ammonium Triphenylacetates

Construction et Les études systématiques études symétriques d&#39;une série de supramoléculaires Clusters avec binaire ou ternaire Triphenylacetates ammonium

Functions of clusters in nano or sub-nano scale significantly depend on not only kinds of their components but also arrangements, or symmetry, of their ...

A Protocol for Electrochemical Evaluations and State of Charge Diagnostics of a Symmetric Organic Redox Flow Battery

Un protocole pour électrochimiques Evaluations et État de diagnostic charge d&#39;une batterie de flux Redox Symmetric organique

Redox flow batteries have been considered as one of the most promising stationary energy storage solutions for improving the reliability of the power grid ...

Probing the Structure and Dynamics of Interfacial Water with Scanning Tunneling Microscopy and Spectroscopy

Sonder la Structure et la dynamique de l’eau interfaciale avec Scanning Tunneling microscope et spectroscopie

Water/solid interfaces are ubiquitous and play a key role in many environmental, biophysical, and technological processes. Resolving the internal ...

Fabricating High-viscosity Droplets using Microfluidic Capillary Device with Phase-inversion Co-flow Structure

Fabrication des gouttelettes de haute viscosité à l’aide de dispositif microfluidique à capillaire avec Structure de flux de co-inversion de Phase

The generation of monodisperse droplets with high viscosity has always been a challenge in droplet microfluidics. Here, we demonstrate a phase-inversion ...

Solid-phase Synthesis of [4.4] Spirocyclic Oximes

Synthèse en phase solide de [4,4] Spirocyclique Oximes

A convenient synthetic route for spirocyclic heterocycles is well sought after due to the molecule&#39;s potential use in biological systems. By means of ...