Name: phase behavior of charged vesicles under symmetric and asymmetric solution conditions monitored with fluorescence microscopy
Uploaded: 2017-10-24T14:00:00
Duration: 10 min 8 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Phase Behavior of Charged Vesicles Under Symmetric and Asymmetric Solution Conditions Monitored with Fluorescence Microscopy at JoVE.com

Detta arbete är en del av konsortiet MaxSynBio, som finansieras gemensamt av det federala ministeriet för utbildning och forskning i Tyskland och i Max Planck-sällskapet.

Författarna har något att avslöja.

Framgångsrik produktion av GUVs för fas statens observationer under symmetriska och asymmetriska hög-salthaltsförhållanden
De protokoll som presenteras här introducerar en strategi för att bedöma påverkan av hög-salthalt buffert och lösning asymmetri på membran fas delstaten laddade GUVs över ett brett spektrum av kompositioner. En av de stora utmaningarna för att uppnå detta mål var produktionen av laddade GUVs i hög-salthalt buffertar.
Vi producerade framgångsrikt GUVs i sackaroslösning och hög-saltlösning buffert av en enkel spontana svullnad tillvägagångssätt, som inkluderar en pre hydrering steg av deponerade lipid filmen och en övernattning slutliga återfuktning för vesikler tillväxt. Det är viktigt att notera att lipid nedfall bör göras på en uppruggad PTFE plattan att säkerställa även lipid spridning för att ge unilamellar blåsor. Dessutom är det viktigt att utföra varje steg under vesikler beredning vid en temperatur där lipid filmen är i en homogen och flytande fas. Annars, vesikler befolkningen kan vara polydisperse i komposition och bias slutliga fas staten analysen. Det specifika protokollet för den spontana svullnad av GUVs avkastning en vesikel klump som å ena sidan erbjuder möjligheten att slamma det i små volymer för att få högkoncentrerad vesikler dispersioner, och å andra sidan ger asymmetriska lösning villkor över membranet samtidigt minimera utspädning av blåsor8,28. Det är viktigt att under vesikler spädning eller extern lösning utbyta, insidan och utanför lägre förbli matchade som morfologi förändringar orsakade av osmolaritet missmatchningar kan inducera eller förhindra Lo + Ld fas separation41 eller, vid hypoton villkor, kan leda till vesikler spricker.
Här, resulterade försök att optimera electroformation protokoll i hög-salthalt lösning i produktionen av ingen GUVs medan PVA-assisted svullnad gav multilamellar blåsor. Även om det kräver längre förberedelse gånger och resultat i vesikler partier av lägre kvalitet10,17, framgångsrika produktion av laddade blåsor av spontana kommer svullnad med ytterligare fördelar. Det kräver minimal ansträngning samtidigt som leder till tillräcklig avkastning för statistiska batch analyser, och till skillnad från electroformation, ingen avancerad utrustning eller optimering krävdes. Dessutom observerats inga föroreningar av lipid oxidation42,43. Enligt litteraturen finns det inga skillnader mellan lipid kompositioner av blåsor och de motsvarande bestånd som odlades de7,17. Dessutom frågar inte vesikler bildning på ett PTFE-substrat införandet av eventuella föroreningar i motsats till gel-assisted svullnad metoder där främmande molekyler kan införas av substrat23. Electroformation kommer med ytterligare nackdelar relaterade till överdriven vesikler utspädning när skapa asymmetriska lösning förutsättningar. GUVs produceras av electroformation förekommer oftast som en homogen dispersion (i motsats till den högkoncentrerade vesikler fjädringen i form av en klump som bildas under spontana svullnad). Utspädning av den externa lösningen skulle väsentligen späd antalet blåsor samt. Dessutom, under loppet av detta arbete konstaterades att DOPG/eSM/Chol GUVs producerad av electroformation i sackaros blev instabil om spädning sker i hög-salthalt buffert. Fluorescens från lipid fläckar på objektglas anges att blåsor skulle brista innan deras okulärbesiktning var möjligt. Sådan instabilitet kan tillskrivas en förhöjd membran spänning av blåsor som utarbetats av electroformation jämfört med dem som erhålls genom spontan svullnad10.
Även om vesikler utspädning är en enkel och snabb metod att skapa asymmetriska GUV lösning förutsättningar, det bara åstadkommer en dellösning externa exchange, om än i en hög bråkdel (här: 95%, figur 2), som vid utspädning, spår av den svullnad lösning kommer att förbli. Valet av graden av extern lösning utbyte är en kompromiss mellan pipettering upp den vesikler klump tillsammans med svullnad lösningen (avsnitt 2) och inte späda ut den för mycket. Därför införde vi en alternativ mikroflödessystem strategi diskuteras på annat håll i detalj37 som möjliggör en snabb och komplett extern lösning exchange under GUV fas statens observationer att verifiera fas staten iakttagelser för utspädd blåsor. Observationer av fas staten variationer vid byte från symmetriska till asymmetrisk lösning villkor observerades faktiskt vara överens. Dessutom båda metoder att generera asymmetrisk lösning villkor visas här är comparably snabb (jämför Ref.8) och komma med några kända risker om lokala sammansättningen ändringar (jämför referenser30,31), öka i membran spänning (jämför referens32) eller lokal uppvärmning (jämför referens33), när det gäller alternativa metoder diskuteras i inledningen. Under mikroflödessystem fångst är en osmotisk balans mellan vesikel interiör och exteriör inte bara nödvändigt att undvika fas staten artefakter som nämnts ovan men också deflation orsakas av hyperton lösning villkor kan orsaka de fångade GUVs att glida igenom inläggen efter ett utbyte av extern lösning.
Även om spontan svullnad har tillämpats framgångsrikt för att växa oladdade kan blåsor från ett DOPC/eSM/Chol system, i andra fall, avsaknad av avgifter försämra GUV svullnad på grund av resulterande bristen på repulsion mellan de enskilda lipidmonolager44 . Att utvidga perioden före svullnad eller införa skrymmande lipid headgroups kan motverka denna fråga45. Dessutom kan vesikler stabilitet efter deras utspädning i lösningar skiljer sig från den som används för svullnad variera för olika lipid kompositioner och utspädning media, som vi inte har undersökt här. Också har vi inte undersökt möjligheten att trimma den genomsnittliga GUV diametern med den förberedelse metod presenteras här. Men parametrar såsom vesikler sammansättning och svullnad lösning kommer sannolikt att påverka resultaten. Tillämpningen av alternativa metoder46 kan ge större blåsor lipider och lösningar används här, men de kan komma med andra nackdelar som är associerad med metoden. Den ovan beskrivna metoden att producera GUVs i symmetriska och asymmetriska hög-salthaltsförhållanden ger ett potentiellt verktyg för fortsatta studier av blåsor består av olika lipid kompositioner och spridda i olika medier. Så vi inte har undersökt dessa möjligheter, kommer framtida prövningar visar hur allmänt GUV beredning och spädning metoderna kan tillämpas.
Att observera fasseparation vid varierande temperaturer
Det finns olika försöksuppställningar lämplig att studera GUVs vid varierande temperaturer. Medan dessa inställningar inte är vanligen beskrivs i detalj inom litteraturen, presenterar det nuvarande arbetet en grundläggande församling som är tillämpliga för sådana studier.
_Content ”> kontrollmätningar visar temperaturen i detta internt designade och byggde kammare styrs exakt en termostat och temperaturgradienter inne i kammaren inom experimentell temperatur resolutionen. Det säkerställs att de experimentella termiska villkor är förenliga med läsningen av termostaten.
Under bedömningen av GUV fas påstår över ett brett temperaturområde är det viktigt att de observerade blåsor är väl jämviktas efter temperaturen har ändrats. Ett sätt att säkerställa detta är att kontrollera för hysteres. Om hysteres är närvarande, temperatur stegen bör minskas eller Jämviktstiden gånger ökat. Som temperatur upprättas kontroll i detta arbete av en vattenbaserad termostat, spänna av arbetstemperatur är idealiskt begränsad till 0 - 100 ° C. Detta intervall kan utökas genom att använda andra temperatur kontroll vätskor såsom olja eller genom att anställa andra uppställningar, e.g. en Peltier enhet. I praktiken är arbetstemperaturen också begränsat möjligt kondens eller avdunstning. Dessutom för temperaturer långt från rumstemperatur blir förekomsten av en steady-state temperaturlutning över observation kammaren mer sannolikt. Tänkbar utrustning kan också skadas vid extrema temperaturer. För typiska temperaturområden som är lämpliga för lipid vesikler studier (~ 10-50 ° C7,9) observation utrustningen bör övervägas men förväntas normalt inte.
Vesikler domän observation artefakter
Det finns ett antal källor för observation artefakter med wide-fältet fluorescensmikroskopi. Först och främst bör man vara medveten om att den maximala upplösning r för objektet tillämpas för visuell inspektion av vesikler fas staterna bestämmer detektionsgränsen för lipid domäner enligt: 
<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/56034/56034eq2v2.jpg"> där λ är våglängden utsläpp och NA är numerisk bländare av målet. Ett typiskt mål med en 40 x förstoring och en NA 0,6 som upptäcker grön utsläpp ljus omkring 560 nm skulle nå en optisk upplösning på ~0.6 µm. därför studier som jämför fas påstår av blåsor från särskilda lipid blandningar bland olika villkor bör använda samma mål för samma lipid blandningen.
En annan artefakt är förekomsten av lipid domäner till följd av lipid photo-oxidation på grund av en långvarig exponering för magnetisering ljus41. Foto-skador uppstår företrädesvis på omättade kolväten lipid beståndsdelarna. I själva verket för lipid kompositioner, sådan domän bildandet av initialt homogen blåsor observerades här efter en lång period av magnetiseringen ljusexponering (~ 30 s). För att motverka problemet, hölls excitation ljuset fokuserad på ett synfält för bara några sekunder för bedömningen av fas-statligt. DiIC18 var därför lämplig för våra syften. Andra färgämnen, dock kan vara mycket mer känsliga och kan behöva hanteras på lägre excitation stödnivåer och med kortare excitation ljus exponering gånger.
Mekaniska skjuvning stress från pipett överföringen av blåsor blandar potentiellt domäner tillfälligt, och därmed snedvrida skenbara vesikler fas beteende. För vissa partier, olika blåsor visade olika fas beteenden 0 min och 5 min efter pipett överföra på det Mikroskop täckglaset. Skjuvspänningen induceras av strömningen i ultrakalla enheten har också visat sig resultera i domänen blandning47. Blåsor ska lämnas ostört under en tillräckligt lång tid för Jämviktstiden före observation. Inom denna studie var blåsor instängd på mikroflödessystem enheten kvar orörd i 1 h efter vesikler lastning och lösning utbyte innan observation.
Undvika några av de ovannämnda svårigheterna samt de begränsningar som införts av de lätta diffraktionsgränsen, alternativa metoder såsom kärnmagnetisk resonans spektroskopi48 eller super upplösning mikroskopi tekniker49 kunde vara anställd.
Slutsats och outlook
Presenterade arbetet visar en uppsättning metoder som möjliggör analys av påverkan av hög-salthalt symmetriska och asymmetriska lösning villkor på membran fasseparation. Alla metoderna som presenteras är lämplig för andra användningar. Mikroflödessystem enheten ger till exempel en plattform för att studera kinetiken för domänen bildandet och försvinnande vid induktion av lösning asymmetri. Dessutom kunde domän utseende som en funktion av salt koncentration undersökas ditåt. Alla metoder kan också användas för att titta på påverkan på beteendet fas använder några andra lösningar av intresse.

Ända sedan observationen av micron stora domäner i vätska-vätska fas-separerad giant unilamellar blåsor (GUVs) av fluorescensmikroskopi, har GUVs använts som ett modellsystem för att undersöka lipidsänkande flotte hypotes1,2 , 3 . Området i sin fristående lipidens ligger i intervallet som från biologiska celler, är de lämpliga härmar av plasma membran med hypotetisk flottar. Ett flertal studier på sådana GUVs har utförts med blåsor spridda i rent vatten, sackaros eller låg-salthalt lösningar4,5,6,7,8. Dessa förhållanden återspeglar dock inte fysiologiskt relevant exponering för biomembranes hög-salthalt miljöer och trans-membran lösning asymmetri som är förutsättningarna för celler.
I detta arbete och i en tidigare publikation från vår grupp9undersöktes fas påstår av laddade flerkomponents GUVs som en funktion av förekomsten av salt och lösning asymmetri över membranet. GUVs utarbetades av blandningar av olika nyckeltal av dioleoylphosphatidylglycerol (DOPG), ägg ceramidas (eSM) och kolesterol (Chol) i antingen sackaroslösning (med osmolaritet 210 mOsm/kg) eller hög-salthalt buffert (100 mM NaCl, 10 mM Tris, pH 7.5, 210 mOsm/kg). Lipid valet motiverades av de uppgifter som redan erhållits på arrangera gradvisdiagrammet av denna blandning6,8.
Det finns ett antal metoder för beredning av GUVs i litteratur10,11,12 (Observera att här, kommer vi inte att överväga de som rör överföring av lipider från en oljebaserad till en vattenfas 13 , 14 på grund av den inneboende faran med de återstående oljerester i membranet vilket kan påverka beteendet fas). Utarbetandet av GUVs i hög-salthalt buffert är associerade med specifika utmaningar. Den electroformation metod15,16 presenterar för lösningar av låg jonstyrka, ett snabbt sätt att förbereda GUVs i hög avkastning med små defekter10,17. Metoden är baserad på deponerar ett lager av lipider på en ledande yta (elektroden), torka dem och återfuktande dem med en vattenlösning samtidigt som ett AC-fält. Denna metod kräver dock justeringar om salt förekommer i vattenlösning18,19. Det antas att drivkraften för vesikler tillväxt av electroformation är electroosmosis16 som hindras vid hög konduktivitet20. Electroswelling av GUVs i hög-salthalt lösningar är därför inte en okomplicerad metod eftersom det kräver optimering för olika salt koncentrationer svullnad lösningen i. Gel-assisted vesikler svullnad21,22 är en potentiella alternativ till electroformation med ännu snabbare bildandet gånger. Denna strategi bygger på förbättrad lipid film hydratisering när en gel (agaros eller polyvinylalkohol (PVA)) används som substrat. Dessa metoder, har dock risken för membran kontaminering vid agaros-baserade svullnad23 och/eller temperatur gränser som i fallet med PVA-baserade svullnad. Likaså har ett protokoll att växa GUVs på cellulosa papper substrat nyligen etablerade24. Allmänna problem med denna metod är bristen på kontroll över substrat renhet samt användning av stora mängder lipid. I detta arbete, vi införa och presentera fördelarna med den mest traditionella metoden för GUV, nämligen den spontana svullnad metoden25,26. Den består av torkning ett lipidskikt på ett lipophobic substrat, återfuktande det i vattenånga atmosfär och efterföljande svullnad i önskad svullnad lösningen (se figur 1 och detaljer i avsnittet protokoll). Denna metod erbjuder inte kontroll över fördelningen av vesikler storlek och resulterar i totalt sett mindre blåsor jämfört med metoder där produktionen biträds av elektriskt fält, polymer substrat eller mikroflödessystem innebär. Men är vesikler kvalitet och storlek lämpligt för att undersöka tillståndet membran fas som utforskas här.
Skapa asymmetri mellan lösningarna över vesikler membran är associerade med vissa utmaningar också. En vanligt förekommande metod är direkt utspädning av vesikler suspensionen i önskad extern lösning27,28. Detta minskar dock också vesikler distribution tätheten. En annan strategi är att långsamt byta den externa lösningen runt GUVs bosatte sig på botten av ett flöde-cell som möjliggör lösning i - och datorkraft. För att undvika störande eller ens förlora blåsor med flödet, är låga flöden tillämpad8, vilket gör denna metod tid-ineffektiv. Dessutom, ingen av dessa metoder garanterar fullständig extern lösning utbyte. En uppenbar lösning är att immobilisera blåsor för att undvika att förlora dem under en extern lösning utbyte. Biotinylerade GUVs kan exempelvis vara bundna till en streptividin-belagd yta29. Men denna metod kan leda till kompositionella variationer på den klibbade och därmed icke-följs membranet segment30,31. Ansökan av magnetiska eller elektriska fält att fälla blåsor resultat i införande av membran spänning32. Anställa optisk pincett att fälla en vesikel kräver att ha ett handtag fäst (dvs. en pärla), medan användning av optiska bårar kan innebära lokal uppvärmning33. Svällning av GUVs kan också åstadkommas genom att odla dem på platina ledningar utan sista avlossning34. Detta ger emellertid blåsor som inte är isolerade och som vanligtvis är anslutna till ledningar eller andra blåsor med tunn lipid rör (tjuder).
Presenterade arbetet belyser strategier för att övervinna de ovannämnda begränsningarna. Först presenterar vi en detaljerad beskrivning av den spontana svullna metod anpassad och optimerad för produktionen av GUVs i hög-salthalt buffertar. Sedan introducerar vi två metoder för att effektivt skapa asymmetriska lösning villkor av enkel spädning eller utnyttjande av en mikroflödessystem enhet. Eftersom vårt mål är analysen av membran fas delstaten GUVs i olika lösning villkor, beskriver efterföljande avsnitten kriterier för lyckad statistisk analys och aktuella tips för att undvika falska kategorisering.
Analyserna utfördes under isotermiska förhållanden samt under varierande temperaturer. Medan temperatur control används vanligen, detaljer om experimentell temperaturkontroll chambers sällan beskrivs. Här presenteras en egen inbyggd installation att iaktta GUVs vid olika temperaturförhållanden.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1&#39;-rac-glycerol), sodium salt</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>840475C</td>
			<td>abbreviated as DOPG in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chicken egg sphingomyelin</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>860061</td>
			<td>abbreviated as eSM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cholesterol (ovine wool, &#62; 98 %)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>700000</td>
			<td>abbreviated as Chol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,1&#129;&#39;-dioctadecyl-3,3,3&#39;,3&#39;-tetramethylindocarbocyanine perchlorate</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>D-282</td>
			<td>abbreviated as DiIC18</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform, HPLC grade (&#8805; 99.8 %)</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl (&#62; 99.8 %)</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl (37 %)</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris (&#8805; 99.9 %)</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose (&#8805; 99.5 %)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Threaded vial 45x27 mm, 15 mL</td>
			<td>Kimble</td>
			<td></td>
			<td>Soda flat bottom, white screw cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>MP220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmometer</td>
			<td>Gonotec</td>
			<td>Osmomat030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epi-fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Observer D1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal laser scanning microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>TCS SP5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 40x, 0.6 NA</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LD Achroplan</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 40x, 0.75 NA</td>
			<td>Leica</td>
			<td>506174</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objective 63x, 0.9 NA</td>
			<td>Leica</td>
			<td>506148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slide, 56x26 mm, 0.17 &#177; 0.01 mm</td>
			<td>Menzel-Gl&#228;ser</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip, 22x22 mm, 0.17 &#177; 0.01 mm</td>
			<td>Menzel-Gl&#228;aser</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm &#34;M&#34;</td>
			<td>Bremix Flexible Packaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes, 5 mL, 10 mL</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m syringe filter</td>
			<td>GVS North America</td>
			<td>Cameo 25AS, 1213723</td>
			<td>Acetate, sterile</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

phase behavior of charged vesicles under symmetric and asymmetric solution conditions monitored with fluorescence microscopy

Fas-separerad giant unilamellar blåsor (GUVs) uppvisar samexisterar vätska-beställde och vätska-disordered domäner är ett gemensamt biofysiska verktyg att undersöka lipid flotte hypotesen. Många studier, försumma dock effekterna av fysiologisk lösning villkor. På kontot presenterar det nuvarande arbetet effekten av hög-salthalt buffert och trans-membran lösning asymmetri på vätska-vätska fasseparation i laddade GUVs vuxit från dioleylphosphatidylglycerol, ägg ceramidas och kolesterol. Effekterna studerades under isotermiska och varierande temperaturförhållanden.
Vi beskriver utrustning och experimentella strategier tillämpas för att övervaka stabiliteten i samtidiga flytande domäner i laddade blåsor symmetriska och asymmetriska hög-salthalt lösning villkor. Detta innefattar en strategi för att förbereda laddade flerkomponents GUVs i hög-salthalt buffert vid höga temperaturer. Protokollet innebär möjlighet att utföra en partiell utbyte av den externa lösningen för en enkel utspädningssteg samtidigt minimera vesikler utspädning. En alternativ metod presenteras utnyttja en mikroflödessystem enhet som möjliggör en komplett extern lösning utbyte. Lösning effekterna på fasseparation studerades även under varierande temperaturer. Därför presenterar vi grundläggande design och nyttan av en egen inbyggd temperatur kontroll kammare. Dessutom vi reflektera över bedömningen av GUV fas staten, fallgropar i samband med det och hur att kringgå dem..

Watch this Scientific Journal Video about Phase Behavior of Charged Vesicles Under Symmetric and Asymmetric Solution Conditions Monitored with Fluorescence Microscopy at JoVE.com

Phase Behavior of Charged Vesicles Under Symmetric and Asymmetric Solution Conditions Monitored with Fluorescence Microscopy

Experiment på fas separerade giant unilamellar blåsor (GUVs) ofta försumma fysiologisk lösning villkoren. Detta arbete presenterar metoder för att studera effekten av hög-salthalt buffert på vätska-vätska fasseparation i laddade flerkomponents GUVs som en funktion av trans-membran lösning asymmetri och temperatur.

Fas beteende av laddade blåsor Under symmetriska och asymmetriska lösning förhållanden övervakas med fluorescensmikroskopi

Phase-separated giant unilamellar vesicles (GUVs) exhibiting coexisting liquid-ordered and liquid-disordered domains are a common biophysical tool to ...

Research

JoVE Journal

Chemistry

Determination of the Gas-phase Acidities of Oligopeptides

Fastställande av gasfas Acidities av Oligopeptider

Amino acid residues located at different positions in folded proteins often exhibit different degrees of acidities. For example, a cysteine residue ...

Particles without a Box: Brush-first Synthesis of Photodegradable PEG Star Polymers under Ambient Conditions

Partiklar utan Box: Brush-första syntes av fotodegraderbara PEG Star Polymers under normala förhållanden

Convenient methods for the rapid, parallel synthesis of diversely functionalized nanoparticles will enable discovery of novel formulations for drug ...

Mizoroki-Heck Cross-coupling Reactions Catalyzed by Dichloro{bis[1,1',1''-(phosphinetriyl)tripiperidine]}palladium Under Mild Reaction Conditions

Mizoroki-Heck Cross-coupling Reactions Catalyzed by Dichloro{bis[1,1',1''-phosphinetriyltripiperidine]}palladium Under Mild Reaction Conditions

Mizoroki-Heck-Arg-kopplingsreaktioner katalyserade av diklor {bis [1,1 &#39;, 1&#39;&#39; - (phosphinetriyl) tripiperidine]} palladium under milda reaktionsbetingelser

Dichloro-bis(aminophosphine) complexes of palladium with the general formula of [(P{(NC5H10)3-n(C6H11)n})2Pd(Cl)2] (where n = 0-2), belong to a new family ...

Synthetic Methodology for Asymmetric Ferrocene Derived Bio-conjugate Systems via Solid Phase Resin-based Methodology

Syntetisk Metodik för Asymmetric Ferrocen Härledda Bio-konjugerade system via Solid Phase Harts-metodik

Early detection is a key to successful treatment of most diseases, and is particularly imperative for the diagnosis and treatment of many types of cancer. ...

A Simple Method for the Size Controlled Synthesis of Stable Oligomeric Clusters of Gold Nanoparticles under Ambient Conditions

En enkel metod för storleken Kontrollerad Syntes av stabila Oligomera Kluster av guld nanopartiklar under normala förhållanden

Reducing dilute aqueous HAuCl4 with sodium thiocyanate (NaSCN) under alkaline conditions produces 2 to 3 nm diameter nanoparticles. Stable grape-like ...

Construction and Systematical Symmetric Studies of a Series of Supramolecular Clusters with Binary or Ternary Ammonium Triphenylacetates

Konstruktion och Systematiska Symmetrisk Studier av en serie av Supramolecular Clusters med binära eller ternära Ammonium Triphenylacetates

Functions of clusters in nano or sub-nano scale significantly depend on not only kinds of their components but also arrangements, or symmetry, of their ...

A Protocol for Electrochemical Evaluations and State of Charge Diagnostics of a Symmetric Organic Redox Flow Battery

Ett protokoll för Elektro Utvärderingar och laddningstillstånd Diagnostik av en Symmetrisk Organic Redox Flow Batteri

Redox flow batteries have been considered as one of the most promising stationary energy storage solutions for improving the reliability of the power grid ...

Probing the Structure and Dynamics of Interfacial Water with Scanning Tunneling Microscopy and Spectroscopy

Sondera strukturen och dynamiken i gränsskiktspänning vatten med Scanning Tunneling mikroskopi och spektroskopi

Water/solid interfaces are ubiquitous and play a key role in many environmental, biophysical, and technological processes. Resolving the internal ...

Fabricating High-viscosity Droplets using Microfluidic Capillary Device with Phase-inversion Co-flow Structure

Fabricera High-viscosity droppar använder mikroflödessystem kapillär enhet med fas-inversion samtidig flöde struktur

The generation of monodisperse droplets with high viscosity has always been a challenge in droplet microfluidics. Here, we demonstrate a phase-inversion ...

Solid-phase Synthesis of [4.4] Spirocyclic Oximes

Fasta fasen syntes av [4.4] gröna Oximes

A convenient synthetic route for spirocyclic heterocycles is well sought after due to the molecule&#39;s potential use in biological systems. By means of ...