Name: culturing in vivo-like murine astrocytes using the fast, simple, and inexpensive awesam protocol
Uploaded: 2018-01-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol at JoVE.com

Wij erkennen dat financiële steun van de European Research Council (KP7/260916), de Alexander von Humboldt-Stiftung (Sofja Kovalevskaja) en de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE1951 en SFB889).

Alle dierproeven die hier beschreven werden uitgevoerd overeenkomstig de richtsnoeren voor de Duitse dierenwelzijn.
Opmerking: De tijdlijn en de belangrijkste stappen van het protocol worden geïllustreerd in Figuur 1.
1. voorbereiding
<ol><li>
De volgende oplossingen voor te bereiden.
	<ol>
<li>Voorbereiden DMEM + veelhoekige MD astrocyten kweken: DMEM met 10% FCS, 100 U penicilline en 100 µg/mL streptomycine.</li>
...

<ol>
	<li>Puschmann, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioactive+3D+cell+culture+system+minimizes+cellular+stress+and+maintains+the+in+vivo-like+morphological+complexity+of+astroglial+cells.">Bioactive 3D cell culture system minimizes cellular stress and maintains the in vivo-like morphological complexity of astroglial cells.</a> Glia. 61 (3), 432-440 (2013).</li><li>Puschmann, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HB-EGF+affects+astrocyte+morphology,+proliferation,+differentiation,+and+the+expression+of+intermediate+filament+proteins.">HB-EGF affects astrocyte morphology, proliferation, differentiation, and the expression of intermediate filament proteins.</a> J Neurochem. 128 (6), 878-889 (2014).</li><li>Foo, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+method+for+the+purification+and+culture+of+rodent+astrocytes.">Development of a method for the purification and culture of rodent astrocytes.</a> Neuron. 71 (5), 799-811 (2011).</li><li>Wolfes, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+culturing+stellate+astrocytes+reveals+spatially+distinct+Ca2++signaling+and+vesicle+recycling+in+astrocytic+processes.">A novel method for culturing stellate astrocytes reveals spatially distinct Ca2+ signaling and vesicle recycling in astrocytic processes.</a> J Gen Physiol. 149 (4), (2016).</li><li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue.">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> J Cell Biol. 85 (3), 890-902 (1980).</li><li>Krencik, R., Zhang, S. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+differentiation+of+functional+astroglial+subtypes+from+human+pluripotent+stem+cells.">Directed differentiation of functional astroglial subtypes from human pluripotent stem cells.</a> Nat Protoc. 6 (11), 1710-1717 (2011).</li><li>Morita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+regulation+of+calcium+oscillation+in+astrocytes+by+growth+factors+and+pro-inflammatory+cytokines+via+the+mitogen-activated+protein+kinase+cascade.">Dual regulation of calcium oscillation in astrocytes by growth factors and pro-inflammatory cytokines via the mitogen-activated protein kinase cascade.</a> J Neurosci. 23 (34), 10944-10952 (2003).</li><li>Saura, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglial+cells+in+astroglial+cultures:+a+cautionary+note.">Microglial cells in astroglial cultures: a cautionary note.</a> J Neuroinflammation. 4, 26 (2007).</li><li>Raponi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100B+expression+defines+a+state+in+which+GFAP-expressing+cells+lose+their+neural+stem+cell+potential+and+acquire+a+more+mature+developmental+stage.">S100B expression defines a state in which GFAP-expressing cells lose their neural stem cell potential and acquire a more mature developmental stage.</a> Glia. 55 (2), 165-177 (2007).</li><li>Royo, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+AAV+serotypes+stably+transduce+primary+hippocampal+and+cortical+cultures+with+high+efficiency+and+low+toxicity.">Specific AAV serotypes stably transduce primary hippocampal and cortical cultures with high efficiency and low toxicity.</a> Brain Res. 1190, 15-22 (2008).</li><li>Malarkey, E. B., Parpura, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+characteristics+of+vesicular+fusion+in+astrocytes:+examination+of+synaptobrevin+2-laden+vesicles+at+single+vesicle+resolution.">Temporal characteristics of vesicular fusion in astrocytes: examination of synaptobrevin 2-laden vesicles at single vesicle resolution.</a> J Physiol. 589, 4271-4300 (2011).</li><li>Zamanian, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+analysis+of+reactive+astrogliosis.">Genomic analysis of reactive astrogliosis.</a> J Neurosci. 2 (18), 6391-6410 (2012).</li><li>Srinivasan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca(2+)+signaling+in+astrocytes+from+Ip3r2(-/-)+mice+in+brain+slices+and+during+startle+responses+in+vivo.">Ca(2+) signaling in astrocytes from Ip3r2(-/-) mice in brain slices and during startle responses in vivo.</a> Nat Neurosci. 18 (5), 708-717 (2015).</li><li>Shigetomi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+calcium+microdomains+within+entire+astrocyte+territories+and+endfeet+with+GCaMPs+expressed+using+adeno-associated+viruses.">Imaging calcium microdomains within entire astrocyte territories and endfeet with GCaMPs expressed using adeno-associated viruses.</a> J Gen Physiol. 141 (5), 633-647 (2013).</li><li>Srinivasan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+Transgenic+Mouse+Lines+for+Selectively+Targeting+Astrocytes+and+Studying+Calcium+Signals+in+Astrocyte+Processes+In+Situ+and+In+Vivo.">New Transgenic Mouse Lines for Selectively Targeting Astrocytes and Studying Calcium Signals in Astrocyte Processes In Situ and In Vivo.</a> Neuron. 92 (6), 1181-1195 (2016).</li><li>Otsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+dynamics+in+astrocyte+processes+during+neurovascular+coupling.">Calcium dynamics in astrocyte processes during neurovascular coupling.</a> Nat Neurosci. 18 (2), 210-218 (2015).</li><li>Agarwal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+Opening+of+the+Mitochondrial+Permeability+Transition+Pore+Induces+Microdomain+Calcium+Transients+in+Astrocyte+Processes.">Transient Opening of the Mitochondrial Permeability Transition Pore Induces Microdomain Calcium Transients in Astrocyte Processes.</a> Neuron. 93 (3), 587-605 (2017).</li></ol>

Vier stappen in het protocol zijn van cruciaal belang: 1) voorbereiding van de concentratie van de HBEGF tot precies 5 ng/mL, aangezien kleine stijging van de concentratie tot onvolwassen culturen, bijvoorbeeld leiden kunnen10 ng/mL HBEGF-zal onderscheiden astrocyten4; 2) vermijden bubbels in de oplossingen die bevatten van weefsels of cellen, die kunnen veranderen van de pH en belemmeren Astrocyt gezondheid; 3) vooraf zo media om de optimale pH en temperatuur voor de teelt van gezonde as...

Astrocyten beïnvloeden hersenfunctie door trofische ondersteuning, doorbloeding, synaptic signaling en plasticiteit en intercellulaire communicatie - die allemaal mechanismen die centrum rond de dunne astrocytic processen. Het protocol van de AWESAM die hier worden beschreven kunt de studie van deze processen zonder inmenging van neuronen en andere glia, die nuttige bv, omdat de expressie van veel eiwitten en zelfs Ca2 + signalering overlappen in verschillende hersenen cel typen. Verder is deze methode overwint beperkingen van de voorheen beschikbare technieken. In het bijzonder onze protocol voorziet in vivo-zoals morfologie (Notti astrocyten met dunne processen) en genexpressie in een snelle, gemakkelijk, en goedkope wijze.
Cel morfologie, genuitdrukking en vele andere regelgevende processen worden rechtstreeks beïnvloed door het milieu. In een cultuur schotel verwijst dit naar de factoren die zijn vrijgegeven door de omringende cellen, maar ook het medium waarin de cellen worden gekweekt. Voor astrocyten, HBEGF voorheen werd gerapporteerd voor het opwekken van een Notti morfologie1 maar ook om te-onderscheiden astrocyten2werd gevonden. Echter lagere concentraties van HBEGF werden later gebruikt voor het genereren van meer in-vivo-evenals de astrocyten geïdentificeerd met behulp van RNA sequencing in twee verschillende protocollen3,4. Bovendien Astrocyt morfologie verandert met de middellange samenstelling, ongeacht het protocol4: Neurobasal medium met een lage concentratie van HBEGF is optimaal voor het kweken van Notti astrocyten, terwijl andere middellange composities (b.v. serum-bevattende DMEM) produceren veelhoekige cellen (zelfs in astrocyten vers geïsoleerd door immunopanning).
Het AWESAM-protocol overwint nadelen van vorige technieken voor het kweken van Astrocyt monoculturen4. Vorige technieken voor het kweken van Astrocyt monoculturen hebben de volgende nadelen: veelhoekige morfologie, die ongebruikelijk van Notti astrocyten in vivo (methode MD)5; de lengte en kosten van protocol (voorbereiding van astrocyten van geïnduceerde pluripotente stamcellen duurt drie maanden en vereist veel reagentia, met inbegrip van dure groeifactoren)6; de lage hoeveelheid materiaal (methode immunopanning)3; de ambtshalve differentiatie van astrocyten en eis van een 3D matrix (Puschmann et al.) 1 , 2. daarentegen het AWESAM-protocol biedt: in vivo-graag morfologie (Notti astrocyten met dunne processen); een snel, eenvoudig, en goedkope methode; grote hoeveelheden materiaal; en het meest in vivo-graag genexpressie vergeleken met immunopanned en MD astrocyten. Bovendien, 2D cultuur zorgt voor de studie van Ca2 + signalering en vesikel recycling in dunne processen, en in gebeurtenissen dichtbij het membraan (b.v.TIRF microscopie is niet mogelijk in 3D culturen).
De MD-methode werd uitvoerig gebruikt sinds haarbekendmaking in 19805, biedt een eenvoudige en snelle techniek voor veelhoekige Astrocyt monoculturen. Kortom, de MD-methode met zich meebrengt groeiende gemengde hersencellen in foetaal kalfsserum (FCS)-bevattende DMEM, gevolgd door schudden van de stappen die verrijken voor astrocyten (als alle andere hersenen cel typen van de schotel loskoppelen) en verder cultuur in hetzelfde medium. DMEM aangevuld met FCS wordt gebruikt voor veel andere celtypen, variërend van fibroblasten en adipocytes tot verschillende kanker cellijnen, die allemaal de veelhoekige morfologie tentoongesteld door MD astrocyten bij cultuur delen. Tot de vroege 2000s7, weinig gedachte hadden gegeven aan media op maat van astrocyten, specifiek om de gunst van hun typische Notti morfologie gevonden in vivo. Één protocol gepubliceerd in 2011 het bereiken van dergelijke Notti morfologie: de immunopanning-methode aangeroepen, er werken serumvrij medium geoptimaliseerd voor het kweken van astrocyten3. Met behulp van deze methode, worden vers geïsoleerde hersencellen blootgesteld aan een aantal gerechten bekleed met antilichamen die gericht zijn op cel type-specifieke cel-oppervlakte eiwitten, te verrijken voor de astrocyten. Ondanks de meer in-vivo-net als morfologie en expressie profiel van immunopanned astrocyten, de meerderheid van in vitro studies nog steeds beroepen op de MD Astrocyt methode. De MD-methode is eenvoudig en snel, terwijl de immunopanning methode meer complexe en tijdrovende stappen op de eerste dag van cultuur omvat (zoals spijsvertering voor langere enzym, zorgvuldige gelaagdheid van oplossingen van verschillende dichtheid, immunopanning zelf, en verschillende centrifugeren stappen - allemaal voordat plating). Met behulp van meer gespecialiseerde medium, de AWESAM-methode biedt echter zowel de snelheid van de MD-methode en de in-vivo-graag morfologie van het immunopanning-protocol.
Globaal, het AWESAM-protocol is handig voor studeren meer in-vivo-graag astrocyten in 2D monoculturen geïsoleerd van neuronen en andere glia (als eerder gekarakteriseerd4 door immunostainings en immunoblots RNA sequencing). Het voorziet in de studie van dunne astrocytic processen, en biedt grote toegankelijkheid voor het visualiseren van spontane Ca2 + signalering en evenementen dichtbij het membraan (bvbeeld door TIRF microscopie).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="898">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">0.05% trypsin-EDTA</td>
			<td style="width:171px;">Gibco</td>
			<td style="width:344px;">25300054</td>
			<td style="width:167px;">warm in 37 &#186;C waterbath before use</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">0.25% trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td>warm in 37 &#186;C waterbath before use</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">B-27 supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-044</td>
			<td>50X stock</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Glutamax</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>100X stock</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Penicillin / streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070-063</td>
			<td>50 stock; penicillin: 5000 U/ml; streptomycin: 5000 &#181;g/ml</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td>without L-glutamine</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>41966029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HBEGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>4643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14170112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">FCS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10437028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010049</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">100 &#956;m nylon cell strainer</td>
			<td>BD</td>
			<td style="width:344px;">352360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypan Blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cell culture incubator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Hera Cell 240i cell culture incubator</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Laboratory shaker</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>Rotamax 120&#160;</td>
			<td>use inside cell culture incubator</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810 R&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

culturing in vivo-like murine astrocytes using the fast, simple, and inexpensive awesam protocol

De AWESAM (een low-kosten eRoe stellate eenstrocyte method) protocol leidt tot een snelle, eenvoudige en goedkope manier voor het genereren van grote hoeveelheden van in-vivo-muis en rat Astrocyt monoculturen zoals : De hersencellen kunnen worden geïsoleerd uit verschillende hersengebieden, en na een week van celkweek, niet-astrocytic cellen zijn afgeschud door het plaatsen van de gerechten van de cultuur in een roteerapparaat gedurende 6 uur in de incubator. De resterende astrocyten zijn vervolgens gepasseerd in nieuwe platen met een Astrocyt-specifieke medium (zogenaamde NB + H). NB + H bevat lage concentraties van heparine-bindende EGF-achtige groeifactor (HBEGF), die wordt gebruikt in plaats van serum in medium. Na een groei in NB + H, hebben AWESAM astrocyten een Notti morfologie en functie prima processen. Bovendien, deze astrocyten hebben meer in-vivo-graag genexpressie dan astrocyten gegenereerd door eerder gepubliceerde methoden. CA2 + imaging, blaasje dynamiek en andere gebeurtenissen dichtbij het membraan kunnen dus worden bestudeerd in de fijne astrocytic processen in vitro, bijvoorbeeldmet behulp van levende cellen confocal of TIRF microscopie. Met name vertonen AWESAM astrocyten ook spontane Ca2 + signalering vergelijkbaar met de astrocyten in vivo.

Astrocyten die mede gekweekt met neuronen en geteeld in NB + medium weergegeven Notti na 2 weken van cultuur (Figuur 2). Naast NB + medium, de mede gekweekte astrocyten ook blootgesteld aan onbekende neuron-afgeleide factoren die waarschijnlijk aan hun voortbestaan en morfologie bijdragen. In tegenstelling, verschijnen MD astrocyten gegroeid in DMEM + als monoculturen (na het afschudden van andere celtypes voor passage) veelhoekige na 2 weken. AWESAM astrocyt...

Watch this Scientific Journal Video about Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol at JoVE.com

Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol

Het AWESAM protocol beschreven hier is optimaal voor het kweken van lymfkliertest astrocyten los van andere hersencellen in een snelle, eenvoudige en goedkope manier. AWESAM astrocyten vertonen spontane Ca2 + signalering, morfologie en gene expressieprofielen vergelijkbaar met de astrocyten in vivo.

Kweken In Vivo-graag lymfkliertest astrocyten met behulp van de snelle, eenvoudige en goedkope AWESAM-Protocol

The AWESAM (a low-cost easy stellate astrocyte method) protocol entails a fast, simple, and inexpensive way to generate large quantities of in vivo-like ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Culturing In Vivo-like Murine Astrocytes Using the Fast, Simple, and Inexpensive AWESAM Protocol

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

Snel Micro-iontoforese van glutamaat en GABA: een nuttig instrument om Synaptic Integratie Onderzoek

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

Consensus Brain-derived Protein, Extraction Protocol for the Study of Human and Murine Brain Proteome Using Both 2D-DIGE and Mini 2DE Immunoblotting

Consensus Brain-afgeleide eiwit, Extraction Protocol voor de studie van mensen en muizen Brain Proteome behulp Zowel 2D-DIGE en Mini 2DE Immunoblotting

Two-dimensional gel electrophoresis (2DE) is a powerful tool to uncover proteome modifications potentially related to different physiological or ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Een eenvoudige en goedkope methode voor het bepalen Koude Gevoeligheid en aanpassing in Muizen

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Protocol for Three-dimensional Confocal Morphometric Analysis of Astrocytes

Protocol voor drie-dimensionale confocale Morfometrische Analyse van Astrocytes

As glial cells in the brain, astrocytes have diverse functional roles in the central nervous system. In the presence of harmful stimuli, astrocytes modify ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

Een eenvoudige manier om Veranderingen Meet in Reward-zoekend gedrag Met behulp<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

Een eenvoudige één stap Dissection protocol voor Whole-mount voorbereiding van Adult<em&gt; Drosophila</em&gt; Brains

There is an increasing interest in using Drosophila to model human brain degenerative diseases, map neuronal circuitries in adult brains, and study the ...

Analyzing the Size, Shape, and Directionality of Networks of Coupled Astrocytes

Analyseren van de grootte, de vorm en de directionaliteit van netwerken van gekoppelde astrocyten

It has become increasingly clear that astrocytes modulate neuronal function not only at the synaptic and single-cell levels, but also at the network ...

Visualizing and Analyzing Intracellular Transport of Organelles and Other Cargos in Astrocytes

Visualisering en analyse van intracellulair transport van organellen en andere Cargo's in astrocyten

Astrocytes are among the most abundant cell types in the adult brain, where they play key roles in a multiplicity of functions. As a central player in ...

An Emerging Target Paradigm to Evoke Fast Visuomotor Responses on Human Upper Limb Muscles

Een opkomende doel paradigma op te roepen snelle visuomotorische reacties op humane bovenste ledematen spieren

To reach towards a seen object, visual information has to be transformed into motor commands. Visual information such as the object&#8217;s color, shape, ...

In vitro Modeling for Neurological Diseases using Direct Conversion from Fibroblasts to Neuronal Progenitor Cells and Differentiation into Astrocytes

In vitro modellering voor neurologische ziekten met behulp van directe conversie van fibroblasten naar neuronale voorlopercellen en differentiatie in astrocyten

Research on neurological disorders focuses primarily on the impact of neurons on disease mechanisms. Limited availability of animal models severely ...