Name: generation of a chronic obstructive pulmonary disease model in mice by repeated ozone exposure
Uploaded: 2017-08-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure at JoVE.com

Авторы хотели бы выразить благодарность г-н Цинь Boyin (Шанхай общественного здравоохранения клинический центр) для оказания технической помощи с µCT оценки в настоящем Протоколе.

Примечание: OE модель создается и используется в сообщалось ранее исследований 30 , , 31 32. Все эксперименты на животных были утверждены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) из Шанхайского университета Цзяотун.</p...

В этом исследовании мы представляем надежный метод для создания новой модели ХОБЛ. По сравнению с другими моделями (т.е., ПЛАСТИНОК или СИЗ модели), эта модель OE резюмирует патологического процесса больных ХОБЛ. Потому что сигаретного дыма является основным опасных материалов, что ?...

Было подсчитано, что ХОБЛ, включая хронический бронхит и эмфизема может быть третьей ведущей причиной смерти в мире в 2020 году1,2. 12,7% мужчин и 8,3% в женщин в течение следующих 40 лет3оценивается потенциальных случаев ХОБЛ в популяции старше 40 лет. В настоящее время нет лекарства доступны вспять прогрессивного ухудшения больных ХОБЛ4. Надежные животных модели ХОБЛ не только требуют имитация болезнь патологического процесса, но также требуют период коротких поколения. Текущие модели ХОБЛ, включая ЛПС или PPE-индуцированной модели, может вызвать симптомы эмфиземы5,6. Единой администрации или недельной вызов ПЛАСТИНОК или СИЗ мышей или крыс результаты в отмеченные нейтрофилия Бронхоальвеолярный лаваж жидкости (BALF), увеличение провоспалительных медиаторов (например, ФНО α и IL-1β) в BALF или сыворотки, производит легких Паренхиматозный уничтожения расширенных воздушные пространства и ограничения потока воздуха5,6,,78,9,10. Однако ПЛАСТИНОК или СИЗ не являются причинами человеческого ХОБЛ и таким образом не имитировать патологического процесса11. Модель CS-индуцированной производится постоянный поток воздуха ограничение, Паренхиматозный уничтожение легких и снижение функциональной дееспособности. Однако традиционные CS протокол требует по крайней мере 3 месяца для создания ХОБЛ модель12,13,14,15. Таким образом важно генерировать новые, более эффективные животных модель, которая отвечает двум требованиям.
Недавно в дополнение к курить сигареты, загрязнения воздуха и подверженностью стали более распространенными причинами ХОБЛ16,17,18. Озон, как один из основных загрязнителей (хотя не основных компонентов загрязнения воздуха), можно непосредственно реагируют с дыхательных путей и повреждение легочной ткани как детей, так и молодые взрослые19,20,21 ,-22,-23,-24,-25. Озона, а также других стимуляторов, включая LPS, СИЗ и CS, участвуют в серьезной биохимических путей легких оксидативного стресса и повреждение ДНК и связаны с инициирование и поощрение ХОБЛ26,27. Еще одним фактором является, что симптомы некоторых больных ХОБЛ ухудшаться после воздействия озона, указав, что озон может нарушить легких функции18,,2829. Таким образом мы создали новую модель ХОБЛ, постоянно подвергая мышей в высоких концентрациях озона за 7 недель; Это привело к воздуха дефекты и повреждения легких Паренхиматозный аналогичны предыдущих расследований30,,3132. Мы расширенный протокол OE для самок мышей в этом исследовании и успешно воспроизведен эмфизема, наблюдается у мышей-самцов в наших предыдущих исследований30,31,32. Потому что ХОБЛ смертность снизилась в мужчин, но увеличение женщин во многих странах33, ХОБЛ модель в женщин необходима для изучения механизмов и разработки терапевтических методов для женщин больных ХОБЛ. Применимость модели OE для всех полов одалживает дальнейшей поддержки его использования в качестве модели ХОБЛ.

<table width="1024">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">BALB/c mice</td>
			<td style="width:217px;">Slac Laboratory Animal,Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:455px;">7-to-9-week-old female BALB/c mice were used in this study.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Individual ventilated cages</td>
			<td style="width:217px;">Suhang, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">Model Number: MU64S7</td>
			<td>The cages were used for housing mice in the animal facility.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Sealing perspex-box</td>
			<td style="width:217px;">Suhang, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">N/A</td>
			<td style="width:455px;">The box was used&#160; to contain the ozone generator. Mice were exposed to ozone within the box.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Electric generator</td>
			<td style="width:217px;">Sander Ozoniser, Uetze-Eltze, Germany</td>
			<td style="width:143px;">Model 500&#160;</td>
			<td>The device was used for generating ozone.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Ozone probe</td>
			<td style="width:217px;">ATi Technologies, Ashton-U-Lyne, Greater Manchester, UK</td>
			<td style="width:143px;">Ozone 300</td>
			<td>The device was used for monitoring and controlling the generation of ozone.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Pelltobarbitalum natricum</td>
			<td style="width:217px;">Sigma, St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:143px;">P3761</td>
			<td style="width:455px;">Mice were anesthetized by intraperitoneal injection of pelltobarbitalum natricum.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Micro-Computed Tomography</td>
			<td style="width:217px;">GE Healthcare, London, ON, Canada</td>
			<td style="width:143px;">RS0800639-0075</td>
			<td>This device was used for acquiring images of the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Micro-view 2.01 ABA software</td>
			<td style="width:217px;">GE Healthcare, London, ON, Canada</td>
			<td style="width:143px;">Micro-view 2.01&#160;</td>
			<td>This device was used for reconstruct the lung and analyze volume, LAA of the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Treadmill machine&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Duanshi, Hangzhou, Zhejiang, China</td>
			<td style="width:143px;">DSPT-208</td>
			<td>This machine was usd for fatigue test.</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="width:211px;height:38px;">Body plethysmograph</td>
			<td style="width:217px;">eSpira&#8482; Forced Manoeuvres System, EMMS, Edinburgh, UK</td>
			<td style="width:143px;">Forced Manoeuvres System</td>
			<td height="80">This device was used to test spirometry pulmonary function.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Ventilator</td>
			<td style="width:217px;">eSpira&#8482; Forced Manoeuvres System, EMMS, Edinburgh, UK</td>
			<td style="width:143px;">Forced Manoeuvres System</td>
			<td height="80">This device was used to test spirometry pulmonary function.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Slide spinner centrifuge</td>
			<td style="width:217px;">Denville Scientific, Holliston, MA, USA</td>
			<td>C1183&#160;</td>
			<td>It was used to spin BALF cells onto slides.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Wright Staining</td>
			<td style="width:217px;">Hanhong, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">RE04000054</td>
			<td>&#160;It was used to staining macrophages, neutrophils in the suspended BALF.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:217px;">Hausser Scientific, Horsham, PA, USA</td>
			<td style="width:143px;">4000</td>
			<td>It was used to count cells.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">IL-1&#946;</td>
			<td style="width:217px;">Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td style="width:143px;">ab100704</td>
			<td height="63">They were used to test the respective factors in serum.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">IL-10</td>
			<td style="width:217px;">Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td style="width:143px;">ab46103</td>
			<td height="63">They were used to test the respective factors in serum.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">TNF-&#945;</td>
			<td style="width:217px;">Abcam, Cambridge, MA, USA</td>
			<td style="width:143px;">ab100747</td>
			<td height="63">They were used to test the respective factors in serum.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Paraformaldehyde&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Sigma, St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:143px;">P6148</td>
			<td>The lung was inflated by 4% paraformaldehyde.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Paraffin</td>
			<td style="width:217px;">Hualing, Shanghai, China</td>
			<td style="width:143px;">56#</td>
			<td>It was used to embed the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Rotary Microtome</td>
			<td style="width:217px;">Leica, Wetzlar,&#160; Hesse, Germany</td>
			<td style="width:143px;">RM2255</td>
			<td>It was used for sectioning the lung.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Hgaematoxylin and Eosin (H&#38;E) staining solution</td>
			<td style="width:217px;">Solarbio, Beijing, China</td>
			<td style="width:143px;">G1120</td>
			<td>H&#38;E staining was done for morphometric analysis.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">Upright bright field microscope</td>
			<td style="width:217px;">Olympus, Center Valley, PA, USA</td>
			<td style="width:143px;">CX41</td>
			<td>It was used to image the H&#38;E staining slides.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:211px;height:21px;">Adobe Photoshop 12</td>
			<td style="width:217px;">Adobe, San Jose, CA, USA</td>
			<td style="width:143px;">Adobe Photoshop 12</td>
			<td>It was used to count the number of alveoli on the H&#38;E stained images.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="width:211px;height:42px;">GraphPad prism 5</td>
			<td style="width:217px;">Graphpad Software Inc., San Diego, CA</td>
			<td style="width:143px;">GraphPad prism 5</td>
			<td>It was used for data analysis and production of figures.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of a chronic obstructive pulmonary disease model in mice by repeated ozone exposure

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) характеризуется стойким воздуха ограничение и легких Паренхиматозный уничтожения. Она имеет очень высокую распространенность в стареющего населения. Текущий обычной терапии для ХОБЛ сосредоточиться главным образом на симптом изменение наркотиков; Таким образом срочно необходима разработка новых методов лечения. Квалифицированных Животные модели ХОБЛ может помочь охарактеризовать основные механизмы и может быть использован для скрининга новых наркотиков. Текущие модели ХОБЛ, таких как липополисахарида (LPS) или свинину Панкреатическая эластаза (СИЗ)-индуцированного эмфиземы модель, генерировать ХОБЛ как поражения в легких и дыхательных путях, но не иначе напоминают патогенеза человека ХОБЛ. Сигаретный дым (CS)-индуцированной модели остается одним из самых популярных, потому что он не только имитирует ХОБЛ как поражения дыхательной системы, но он также основан на одной из главных опасных материалов, которые вызывает ХОБЛ в организме человека. Однако длительным и трудоемким аспекты модели CS-индуцированной резко ограничивают его применение в новых наркотиков скрининг. В этом исследовании мы успешно создала новую модель ХОБЛ, подвергая мышей высокие уровни озона. Эта модель продемонстрировал следующее: 1) уменьшилась принудительного выдоха объем 25, 50 и 75/принудительном жизненной емкости (ОФВ25/FVC, ОФВ50/FVC и FEV75/FVC), указывающее ухудшением функции легких; 2) расширенного легких альвеолы, с легкого Паренхиматозный уничтожения; 3) сокращено время усталость и расстояния; и 4) увеличилась воспаление. Вместе взятые, эти данные показывают, что озонового воздействия (OE) модель является моделью надежный животных, которая похожа на людей, потому что длительное воздействие озона является одним из этиологических факторов ХОБЛ. Кроме того он только взял 6-8 недель, основанный на нашей предыдущей работы, для создания модели OE, в то время как она требует 3-12 месяцев, чтобы побудить модель сигаретный дым, указав, что OE модель может быть хорошим выбором для ХОБЛ исследований.

Примеры изображений 3D µCT каждой группы отображаются на рисунке 1. Воздействию озона мышей были значительно больший объем всего легкого (рис. 1и b) и LAA % (рис. 1c) чем воздействию воздуха управления...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure at JoVE.com

Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

Это исследование описывает успешное поколения новой модели животных хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), постоянно подвергая мышей в высоких концентрациях озона.

Поколение модели хронической обструктивной болезни легких у мышей, воздействие неоднократные озона

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by persistent airflow limitation and lung parenchymal destruction. It has a very high ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Оценка Тератогенные Изменения в модели данио рерио внутриутробного развития плода алкоголь

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Мочевой пузырь Вздутие Вызванные висцеромоторный Ответы в качестве модели для мочевого пузыря боли у мышей

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

Желчного протока Лигирование у мышей Индукция воспалительного печени травматизма и фиброза обструктивной холестаза

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

Repeated Measurement of Respiratory Muscle Activity and Ventilation in Mouse Models of Neuromuscular Disease

Повторные измерения респираторной мышечной активности и вентиляции в мышиных моделях нервно-мышечных заболеваний

Accessory respiratory muscles help to maintain ventilation when diaphragm function is impaired. The following protocol describes a method for repeated ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Изометрические сократимости измерение верхней брыжеечной артерии мыши, с помощью проволоки миография

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

Повторная интубация оротрахии у мышей

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

Модель обратного ремоделирования сосудов при легочной гипертензии из-за болезни левого сердца при деформировании аорты у крыс

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...