Name: stereological estimation of dopaminergic neuron number in the mouse substantia nigra using the optical fractionator and standard microscopy equipment
Uploaded: 2017-09-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stereological Estimation of Dopaminergic Neuron Number in the Mouse Substantia Nigra Using the Optical Fractionator and Standard Microscopy Equipment at JoVE.

लेखक अपने विशेषज्ञ तकनीकी सहायता के लिए Keali Röhm, Louisa Frieß, और हाइके Menzel के प्रति कृतज्ञ हैं; पशु देखभाल के लिए हेल्गा Brünner करना; और जनरेशन और ImageJ सॉफ्टवेयर के लिए ऑप्टिकल disector ग्रिड प्लगइन के वितरण के लिए Chistopher एस वार्ड के लिए ।

पशुओं की देखभाल और उपयोग के लिए सभी लागू अंतर्राष्ट्रीय, राष्ट्रीय और/या संस्थागत दिशानिर्देशों का पालन किया गया । प्रोटोकॉल Regierung वॉन Unterfranken, Wuerzburg, जर्मनी में स्थानीय अधिकारियों द्वारा अनुमोदित किया गय...

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	<li>Ip, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAV1/2-induced+overexpression+of+A53T-alpha-synuclein+in+the+substantia+nigra+results+in+degeneration+of+the+nigrostriatal+system+with+Lewy-like+pathology+and+motor+impairment:+a+new+mouse+model+for+Parkinson's+disease.">AAV1/2-induced overexpression of A53T-alpha-synuclein in the substantia nigra results in degeneration of the nigrostriatal system with Lewy-like pathology and motor impairment: a new mouse model for Parkinson's disease.</a> Acta Neuropathol Commun. 5 (1), 11 (2017).</li><li>Ip, C. W., Beck, S. K., Volkmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphocytes+reduce+nigrostriatal+deficits+in+the+6-hydroxydopamine+mouse+model+of+Parkinson's+disease.">Lymphocytes reduce nigrostriatal deficits in the 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson's disease.</a> J Neural Transm (Vienna). 122 (12), 1633-1643 (2015).</li><li>West, M. J., Slomianka, L., Gundersen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unbiased+stereological+estimation+of+the+total+number+of+neurons+in+thesubdivisions+of+the+rat+hippocampus+using+the+optical+fractionator.">Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in thesubdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator.</a> Anat Rec. 231 (4), 482-497 (1991).</li><li>Schmitz, C., Hof, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design-based+stereology+in+neuroscience.">Design-based stereology in neuroscience.</a> Neuroscience. 130 (4), 813-831 (2005).</li><li>Tieu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guide+to+neurotoxic+animal+models+of+Parkinson's+disease.">A guide to neurotoxic animal models of Parkinson's disease.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 1 (1), e009316 (2011).</li><li>Abercrombie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+nuclear+population+from+microtome+sections.">Estimation of nuclear population from microtome sections.</a> Anat Rec. 94, 239-247 (1946).</li><li>Rose, R. D., Rohrlich, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Counting+sectioned+cells+via+mathematical+reconstruction.">Counting sectioned cells via mathematical reconstruction.</a> J Comp Neurol. 263 (3), 365-386 (1987).</li><li>Weibel, E. R., Gomez, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+principle+for+counting+tissue+structures+on+random+sections.">A principle for counting tissue structures on random sections.</a> J Appl Physiol. 17, 343-348 (1962).</li><li>West, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design-based+stereological+methods+for+counting+neurons.">Design-based stereological methods for counting neurons.</a> Prog Brain Res. 135, 43-51 (2002).</li><li>Keuker, J. I., Vollmann-Honsdorf, G. K., Fuchs, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+use+the+optical+fractionator:+an+example+based+on+the+estimation+of+neurons+in+the+hippocampal+CA1+and+CA3+regions+of+tree+shrews.">How to use the optical fractionator: an example based on the estimation of neurons in the hippocampal CA1 and CA3 regions of tree shrews.</a> Brain Res Brain Res Protoc. 7 (3), 211-221 (2001).</li><li>Mouton, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+age+and+lipopolysaccharide+(LPS)-mediated+peripheral+inflammation+on+numbers+of+central+catecholaminergic+neurons.">The effects of age and lipopolysaccharide (LPS)-mediated peripheral inflammation on numbers of central catecholaminergic neurons.</a> Neurobiol Aging. 33 (2), e427-e436 (2012).</li><li>Barreto, G. E., Sun, X., Xu, L., Giffard, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocyte+proliferation+following+stroke+in+the+mouse+depends+on+distance+from+the+infarct.">Astrocyte proliferation following stroke in the mouse depends on distance from the infarct.</a> PLoS One. 6 (11), e27881 (2011).</li><li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microstructural+and+microglial+changes+after+repetitive+mild+traumatic+brain+injury+in+mice.">Microstructural and microglial changes after repetitive mild traumatic brain injury in mice.</a> J Neurosci Res. 95 (4), 1025-1035 (2017).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2001).</li><li>. Grid_Overlay.java Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.nih.gov/ij/plugins/graphic-overlay.html">https://imagej.nih.gov/ij/plugins/graphic-overlay.html</a> (2010)</li><li>. cell_counter.jar Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html">https://imagej.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html</a> (2010)</li><li>Baquet, Z. C., Williams, D., Brody, J., Smeyne, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+model-based+(2D)+and+design-based+(3D)+stereological+methods+for+estimating+cell+number+in+the+substantia+nigra+pars+compacta+(SNpc)+of+the+C57BL/6J+mouse.">A comparison of model-based (2D) and design-based (3D) stereological methods for estimating cell number in the substantia nigra pars compacta (SNpc) of the C57BL/6J mouse.</a> Neuroscience. 161 (4), 1082-1090 (2009).</li><li>Fu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cytoarchitectonic+and+chemoarchitectonic+analysis+of+the+dopamine+cell+groups+in+the+substantia+nigra,+ventral+tegmental+area,+and+retrorubral+field+in+the+mouse.">A cytoarchitectonic and chemoarchitectonic analysis of the dopamine cell groups in the substantia nigra, ventral tegmental area, and retrorubral field in the mouse.</a> Brain Struct Funct. 217 (2), 591-612 (2012).</li><li>German, D. C., Manaye, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Midbrain+dopaminergic+neurons+(nuclei+A8,+A9,+and+A10):+three-dimensional+reconstruction+in+the+rat.">Midbrain dopaminergic neurons (nuclei A8, A9, and A10): three-dimensional reconstruction in the rat.</a> J Comp Neurol. 331 (3), 297-309 (1993).</li><li>Smeyne, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+Effects+of+MPTP+and+Paraquat+on+Dopaminergic+Neurons+and+Microglia+in+the+Substantia+Nigra+Pars+Compacta+of+C57BL/6+Mice.">Assessment of the Effects of MPTP and Paraquat on Dopaminergic Neurons and Microglia in the Substantia Nigra Pars Compacta of C57BL/6 Mice.</a> PLoS One. 11 (10), e0164094 (2016).</li></ol>

Stereology ऊतक प्रसंस्करण के साथ शुरू होता है । stereological विश्लेषण के दौरान अनुभागों की हानि को रोकने के लिए SN ऊतक का सीरियल कटिंग सावधानीपूर्वक किया जाना चाहिए । साथ ही, stereology प्रदर्शन करते समय बाएं SN से दाईं ओर भेद ?...

substantia नाइग्रा (SN)1,2के भीतर neurodegeneration के स्तर का निर्धारण करने के लिए पूर्व नैदानिक पार्किंसंस रोग अनुसंधान में न्यूरॉन कोशिका संख्या के ठहराव को निर्णायक है. ब्याज के एक क्षेत्र में सेल संख्या के निष्पक्ष stereological आकलन सोने के मानक3,4,5माना जाता है ।
निष्पक्ष stereology के आगमन से पहले, वर्गों में न्यूरॉन्स की संख्या चर संभावनाओं के लिए सही करने के लिए सेल प्रोफाइल गिना हेरफेर द्वारा मूल्यांकन किया गया था कि न्यूरॉन्स एक अनुभाग में नजर में आते हैं. सबसे अधिक इस्तेमाल किया तरीकों में से एक मात्रा सेल गिनती के सुधार Abercrombie6द्वारा वर्णित किया गया था । इस विधि को ध्यान में रखने का प्रयास किया है कि कोशिकाओं को एक से अधिक मात्रा जा सकता है अगर एक ही कोशिका के टुकड़े आसंन पतले वर्गों में पाए जाते हैं । इसलिए, Abercrombie और अंय लेखकों समीकरण है कि आकार, आकार, और गिने कोशिकाओं7,8के उंमुखीकरण के बारे में मांयताओं की आवश्यकता उत्पंन । हालांकि, इन मांयताओं आमतौर पर महसूस नहीं किया गया और इसलिए व्यवस्थित त्रुटियों और वास्तविक कोशिका संख्या से विचलन के नेतृत्व में (यानी, पूर्वाग्रह) । इसके अलावा, पूर्वाग्रह अतिरिक्त नमूना3से कम नहीं किया जा सकता है ।
कक्ष संख्या ऑप्टिकल fractionator का उपयोग कर के stereological आकलन के लिए, गणितीय सिद्धांतों को सीधे एक परिभाषित, 3 आयामी मात्रा में सीधे सेल संख्या का अनुमान लागू कर रहे हैं । इस विधि का लाभ यह है कि यह आकार, आकार के बारे में अनुमान शामिल नहीं करता है, और कोशिकाओं के उंमुखीकरण गिना जा रहा है । इस प्रकार, अनुमानित सेल संख्या सही मूल्यों के करीब हैं और नमूना आकार बढ़ जाती है के रूप में करीब हो (यानी, निष्पक्ष)3. चूंकि विधि को निष्पक्ष बनाए रखने के लिए stereology का उपयोग करते समय कई नियमों का पालन करना आवश्यक है, इसलिए तैयार करने के लिए उपयोग किया गया वाणिज्यिक stereology सिस्टम विकसित किया गया है (समीक्षा के लिए, Schmitz और Hof, २००५4देखें) । विशेषीकृत stereology प्रणालियों को लागू करने के साथ डिजाइन आधारित stereological तरीके एक प्राथमिकताओं परिभाषित जांच और stereological आकलन है कि आकार, आकार, स्थानिक वितरण से स्वतंत्रता के लिए नेतृत्व के लिए नमूना योजनाओं, और के उंमुखीकरण कोशिकाओं का विश्लेषण किया जा करने के लिए4,9. हालांकि, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध stereology सिस्टम महंगे हैं; इस नए शोध में कार्यांवयन की सीमा हो सकती है ।
इस अध्ययन का उद्देश्य माउस एसएन में dopaminergic कोशिका गिनती के डिजाइन आधारित stereological आकलन के लिए एक प्रयोग करने योग्य तकनीक विकसित करना था, ऑप्टिकल fractionator विधि को रोजगार और मानक माइक्रोस्कोपी उपकरणों का उपयोग (यानी, प्रकाश माइक्रोस्कोप, मानक माइक्रोस्कोप सॉफ्टवेयर, और एक मोटर चालित एक्स, वाई, जेड चरण). इस के लिए, कैसे माउस मस्तिष्क ऊतक की प्रक्रिया पर एक कदम दर कदम गाइड और कैसे का अनुमान SN सेल नंबर डिजाइन आधारित निष्पक्ष stereology का उपयोग कर प्रस्तुत किया है । इसके अलावा, अनुमानित कक्ष संख्याओं और त्रुटि (CE) के गुणांक की गणना के लिए टेम्पलेट्स प्रदान किए जाते हैं.
यहां वर्णित विधि SN के विश्लेषण तक ही सीमित नहीं है, लेकिन माउस या चूहे मस्तिष्क के अंय शारीरिक परिभाषित क्षेत्रों में उपयोग के लिए अनुकूलित किया जा सकता है । उदाहरण के लिए, निष्पक्ष stereology हिप्पोकैंपस10 और लोकस coeruleus11में न्यूरॉन सेल संख्या अनुमान लगाने के लिए इस्तेमाल किया गया है. साथ ही, astrocytes12 और microglia13जैसे न्यूरॉन्स के अलावा कक्ष प्रकार, के रूप में अच्छी तरह से मूल्यांकन किया जा सकता है । इसलिए, यह विधि उन वैज्ञानिकों के लिए उपयोगी हो सकती है जो अपने शोध में निष्पक्ष stereology को लागू करने का इरादा रखते हैं लेकिन एक stereology प्रणाली की खरीद के लिए बहुत सारा पैसा खर्च करने को तैयार नहीं हैं ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1019">
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Paxinos mouse atlas</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:467px;">The Mouse Brain George Paxinos Keith B.J.FranklinCopyright @2001 by Academic Press CD Rom designet &#38; created by Paul Halasz</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">brain matrix slicer mouse</td>
			<td style="width:217px;">Zivic Instruments&#160;</td>
			<td style="width:119px;">BSMAS 001-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">paraformaldehyde</td>
			<td style="width:217px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1040051000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">sucrose /D(+) Saccharose&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Roth</td>
			<td style="width:119px;">4621.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">isopentane</td>
			<td style="width:217px;">Roth</td>
			<td style="width:119px;">3927.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">glycerol</td>
			<td style="width:217px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1040931000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethanol</td>
			<td style="width:217px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">32205-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name</td>
			<td style="width:217px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">phosphate buffered saline ingredients:</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">sodium chloride</td>
			<td style="width:217px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">31434-1KG-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">potassium dihydrogen phosphate</td>
			<td style="width:217px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1048731000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">di-sodium hydrogen phosphate dihydrate</td>
			<td style="width:217px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1065801000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">potassium chloride</td>
			<td style="width:217px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1049360500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">normal goat serum</td>
			<td style="width:217px;">Dako</td>
			<td style="width:119px;">X0907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">bovine serum albumin</td>
			<td style="width:217px;">Sigma&#160;</td>
			<td style="width:119px;">A4503-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:217px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">X100-100ml</td>
			<td>detergent</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">3,3-Diaminobenzidine-tetrahydrochlorid/DAB tablets 10mg pH 7.0</td>
			<td style="width:217px;">Kem En Tec</td>
			<td style="width:119px;">4170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">H2O2/ Hydrogen peroxide 30%</td>
			<td style="width:217px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1072090250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">avidin/biotin reagent</td>
			<td style="width:217px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">32050</td>
			<td>Standard Ultra Sensitive ABC Staining Kit, 1:100</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">rabbit anti mouse tyrosine hydroxylase antibody</td>
			<td style="width:217px;">abcam</td>
			<td style="width:119px;">Ab112</td>
			<td>1:1000</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">biotinylated goat-anti-rabbit IgG H+L</td>
			<td style="width:217px;">vector laboratories</td>
			<td style="width:119px;">BA-1000</td>
			<td>1:100</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">StereoInvestigator version 11.07</td>
			<td style="width:217px;">MBF</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">BX53 microscope</td>
			<td style="width:217px;">Olympus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Visiview</td>
			<td style="width:217px;">Visitron Systems GmbH</td>
			<td style="width:119px;">3.3.0.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Axiophot2</td>
			<td style="width:217px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ImageJ software</td>
			<td style="width:217px;">NIH</td>
			<td style="width:119px;">Version 4.7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tissue-TEK OCT</td>
			<td style="width:217px;">Sakura</td>
			<td style="width:119px;">4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">dry ice</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">grid overlay plugin</td>
			<td style="width:217px;">Wayne Rasband</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/plugins/graphic-overlay.html</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">cell counter plugin</td>
			<td style="width:217px;">Kurt de Vos</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">optical disector macro</td>
			<td style="width:217px;">Christopher Ward</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">C57Bl/6N male mice</td>
			<td style="width:217px;">Charles River, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">SuperFrost Plus coated object slides</td>
			<td style="width:217px;">Langenbrinck, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">25G needle Microlance 3</td>
			<td style="width:217px;">BD&#160;</td>
			<td align="right" style="width:119px;">300400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">REGLO Analog Infusion pump</td>
			<td style="width:217px;">Ismatec</td>
			<td style="width:119px;">ISM 829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">StereoInvestigator system</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:467px;">StereoInvestigator version 11.07</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">BX53 microscope</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:467px;">BX53 microscope</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">self-assorted stereology</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:467px;">Visiview</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Axiophot2</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:467px;">Axiophot2</td>
		</tr>
	</tbody>
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stereological estimation of dopaminergic neuron number in the mouse substantia nigra using the optical fractionator and standard microscopy equipment

पूर्व में नैदानिक पार्किंसंस रोग अनुसंधान, nigrostriatal पथ का विश्लेषण, substantia नाइग्रा के भीतर dopaminergic ंयूरॉन नुकसान के ठहराव सहित, आवश्यक है । कुल dopaminergic ंयूरॉन संख्या का अनुमान लगाने के लिए, ऑप्टिकल fractionator विधि का उपयोग कर निष्पक्ष stereology वर्तमान में सोने के मानक माना जाता है । क्योंकि ऑप्टिकल fractionator विधि के पीछे सिद्धांत जटिल है और क्योंकि stereology विशेष उपकरणों के बिना प्राप्त करने के लिए मुश्किल है, कई व्यावसायिक रूप से उपलब्ध पूरा stereology सिस्टम है कि आवश्यक सॉफ्टवेयर शामिल हैं, शुद्ध रूप से मौजूद है सेल गिनती कारणों के लिए । क्रय के बाद से एक विशेष stereology सेटअप हमेशा संभव नहीं है, कई कारणों के लिए, इस रिपोर्ट के stereological आकलन के लिए एक विधि का वर्णन करता है dopaminergic न्यूरॉन सेल मानक माइक्रोस्कोपी उपकरणों का उपयोग कर गिना जाता है, एक प्रकाश माइक्रोस्कोप सहित, एक इमेजिंग सॉफ्टवेयर के साथ मोटर चालित वस्तु तालिका (एक्स, वाई, जेड विमान), और विश्लेषण के लिए एक कंप्यूटर. एक चरण दर चरण विवरण ऑप्टिकल fractionator विधि का उपयोग कर stereological ठहराव निष्पादित करने के लिए पर दिया जाता है, और अनुमानित कक्ष गणना की गणना के लिए पूर्व-क्रमादेशित फ़ाइलें प्रदान किए जाते हैं । इस विधि की सटीकता का आकलन करने के लिए, एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध stereology उपकरण से प्राप्त डेटा की तुलना की गई थी । तुलनीय सेल संख्या इस प्रोटोकॉल और stereology डिवाइस का उपयोग कर पाया गया, इस प्रकार निष्पक्ष stereology के लिए इस प्रोटोकॉल की परिशुद्धता का प्रदर्शन ।

प्रस्तुत विधि का उपयोग करना, गु + dopaminergic न्यूरॉन्स के अधिकार sn में अनुमानित संख्या ७,३६३ और ७,९८७ कोशिकाओं के बीच में और, बाएँ sn में ७,४४६ और ७,९०४ कोशिकाओं के बीच की दूरी पर । इस प्रकार, dopaminergic न्यूर?...

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Stereological Estimation of Dopaminergic Neuron Number in the Mouse Substantia Nigra Using the Optical Fractionator and Standard Microscopy Equipment

यह काम माउस substantia नाइग्रा मानक माइक्रोस्कोपी उपकरण (यानी, एक प्रकाश माइक्रोस्कोप, एक मोटर चालित वस्तु तालिका (एक्स, वाई, जेड का उपयोग कर में dopaminergic ंयूरॉन कोशिका संख्या के निष्पक्ष stereological आकलन के लिए एक कदम दर कदम प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है विमान), और डिजिटल छवि विश्लेषण के लिए सार्वजनिक डोमेन सॉफ्टवेयर ।

माउस Substantia नाइग्रा में Dopaminergic ंयूरॉन संख्या का Stereological आकलन ऑप्टिकल Fractionator और मानक माइक्रोस्कोपी उपकरण का उपयोग

In pre-clinical Parkinson&#39;s disease research, analysis of the nigrostriatal tract, including quantification of dopaminergic neuron loss within the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Imaging Odor-Evoked Activities in the Mouse Olfactory Bulb using Optical Reflectance and Autofluorescence Signals

माउस घ्राण बल्ब में इमेजिंग - गंध पैदा क्रियाएँ ऑप्टिकल reflectance और Autofluorescence सिग्नल का प्रयोग

In the brain, sensory stimulation activates distributed populations of neurons among functional modules which participate to the coding of the stimulus. ...

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

चिकी midbrain डोपामिनर्जिक न्यूरॉन विकास में जीन समारोह के अध्ययन के लिए ओवो electroporation में

Dopaminergic neurons located in the ventral midbrain control movement, emotional behavior, and reward mechanisms1-3. The dysfunction of ventral midbrain ...

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

Substantia nigra और ventral Tegmental क्षेत्र के में Dopamine विनियमन के व्यापक रूपरेखा

Dopamine is a vigorously studied neurotransmitter in the CNS. Indeed, its involvement in locomotor activity and reward-related behaviour has fostered five ...

Directed Dopaminergic Neuron Differentiation from Human Pluripotent Stem Cells

मानव pluripotent स्टेम सेल से डोपामिनर्जिक न्यूरॉन भेदभाव निर्देशित

Dopaminergic (DA) neurons in the substantia nigra pars compacta  (also known as A9 DA neurons) are the specific cell type that is lost in ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Neuromuscular जंक्शन: माप Synapse आकार, confocal प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग Synaptic प्रोटीन घनत्व में विखंडन और परिवर्तन

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Optical Control of a Neuronal Protein Using a Genetically Encoded Unnatural Amino Acid in Neurons

एक neuronal प्रोटीन न्यूरॉन्स में एक आनुवंशिक रूप से इनकोडिंग अप्राकृतिक एमिनो एसिड का उपयोग की ऑप्टिकल नियंत्रण

Photostimulation is a noninvasive way to control biological events with excellent spatial and temporal resolution. New methods are desired to ...

Assay to Measure Nucleocytoplasmic Transport in Real Time within Motor Neuron-like NSC-34 Cells

मोटर न्यूरॉन की तरह एनएससी -34 कक्षों के अंदर रीयल टाइम में न्यूक्लूसियोप्लास्मेक ट्रांसपोर्ट को मापने के लिए परख

Nucleocytoplasmic transport refers to the import and export of large molecules from the cell nucleus. Recently, a number of studies have shown a ...

The Optical Fractionator Technique to Estimate Cell Numbers in a Rat Model of Electroconvulsive Therapy

ऑप्टिकल फ्रेक्चरेटर तकनीक, इलेक्ट्रोकोनिवल्सी थेरेपी के चूहा मॉडल में सेल नंबर का अनुमान लगाने के लिए

Stereological methods are designed to describe quantitative parameters without making assumptions about size, shape, orientation and distribution of cells ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

माउस प्राथमिक हाइपोथैलेमस ंयूरॉंस में GLUT4 प्रोटीन की तस्करी की लाइव छवियां Deconvolution माइक्रोस्कोपी का उपयोग

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...

A Microbiomechanical System for Studying Varicosity Formation and Recovery in Central Neuron Axons

मध्य ंयूरॉन Axons में अध्ययन Varicosity गठन और वसूली के लिए एक Microbiomechanical प्रणाली

Axonal varicosities are enlarged structures along the shafts of axons with a high degree of heterogeneity. They are present not only in brains with ...