Name: horizontal whole mount: a novel processing and imaging protocol for thick, three-dimensional tissue cross-sections of skin
Uploaded: 2017-08-02T15:00:00
Duration: 8 min 31 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin at JoVE.com

يعترف المؤلفون الرعاية من الحرارية فيشر العلمية وشكرا مركز التصوير نيكون في كلية كينغز لندن للحصول على الدعم أثناء التقاط الصور متحد البؤر.

<ol>
	<li>Plikus, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+dermal+BMP+signalling+regulates+stem+cell+activation+during+hair+regeneration.">Cyclic dermal BMP signalling regulates stem cell activation during hair regeneration.</a> Nature. 451 (7176), 340-344 (2008).</li><li>Zhang, Y. V., Cheong, J., Ciapurin, N., McDermitt, D. J., Tumbar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+self-renewal+and+differentiation+phases+in+the+niche+of+infrequently+dividing+hair+follicle+stem+cells.">Distinct self-renewal and differentiation phases in the niche of infrequently dividing hair follicle stem cells.</a> Cell Stem Cell. 5 (3), 267-278 (2009).</li><li>Jensen, U. B., Lowell, S., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+spatial+relationship+between+stem+cells+and+their+progeny+in+the+basal+layer+of+human+epidermis:+a+new+view+based+on+whole-mount+labelling+and+lineage+analysis.">The spatial relationship between stem cells and their progeny in the basal layer of human epidermis: a new view based on whole-mount labelling and lineage analysis.</a> Development. 126 (11), 2409-2418 (1999).</li><li>Braun, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manipulation+of+stem+cell+proliferation+and+lineage+commitment:+visualisation+of+label-retaining+cells+in+wholemounts+of+mouse+epidermis.">Manipulation of stem cell proliferation and lineage commitment: visualisation of label-retaining cells in wholemounts of mouse epidermis.</a> Development. 130 (21), 5241-5255 (2003).</li><li>Driskell, R. R., Giangreco, A., Jensen, K. B., Mulder, K. W., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox2-positive+dermal+papilla+cells+specify+hair+follicle+type+in+mammalian+epidermis.">Sox2-positive dermal papilla cells specify hair follicle type in mammalian epidermis.</a> Development. 136 (16), 2815-2823 (2009).</li><li>Niculescu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+ablation+of+integrin+alpha-6+in+mouse+epidermis+leads+to+skin+fragility+and+inflammation.">Conditional ablation of integrin alpha-6 in mouse epidermis leads to skin fragility and inflammation.</a> Eur J Cell Biol. 90 (2-3), 270-277 (2011).</li><li>Fujiwara, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+basement+membrane+of+hair+follicle+stem+cells+is+a+muscle+cell+niche.">The basement membrane of hair follicle stem cells is a muscle cell niche.</a> Cell. 144 (4), 577-589 (2011).</li><li>Desciak, E. B., Maloney, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artifacts+in+frozen+section+preparation.">Artifacts in frozen section preparation.</a> Dermatol Surg. 26 (5), 500-504 (2000).</li><li>Driskell, R., Jahoda, C. A., Chuong, C. M., Watt, F., Horsley, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+dermal+adipose+tissue.">Defining dermal adipose tissue.</a> Exp Dermatol. 23 (9), 629-631 (2014).</li><li>Driskell, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+fibroblast+lineages+determine+dermal+architecture+in+skin+development+and+repair.">Distinct fibroblast lineages determine dermal architecture in skin development and repair.</a> Nature. 504 (7479), 277-281 (2013).</li><li>Snippert, H. J., Schepers, A. G., Delconte, G., Siersema, P. D., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Slide+preparation+for+single-cell-resolution+imaging+of+fluorescent+proteins+in+their+three-dimensional+near-native+environment.">Slide preparation for single-cell-resolution imaging of fluorescent proteins in their three-dimensional near-native environment.</a> Nat Protoc. 6 (8), 1221-1228 (2011).</li><li>Sada, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+cellular+lineage+hierarchy+in+the+interfollicular+epidermis+of+adult+skin.">Defining the cellular lineage hierarchy in the interfollicular epidermis of adult skin.</a> Nat Cell Biol. 18 (6), 619-631 (2016).</li><li>Chung, K., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CLARITY+for+mapping+the+nervous+system.">CLARITY for mapping the nervous system.</a> Nat Methods. 10 (6), 508-513 (2013).</li><li>Tetteh, P. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Replacement+of+Lost+Lgr5-Positive+Stem+Cells+through+Plasticity+of+Their+Enterocyte-Lineage+Daughters.">Replacement of Lost Lgr5-Positive Stem Cells through Plasticity of Their Enterocyte-Lineage Daughters.</a> Cell Stem Cell. 18 (2), 203-213 (2016).</li></ol>

ويود المؤلفون أن يكشفوا أن نشر هذه المخطوطة تم تمويله من قبل شركة ثيرمو فيشر العلمية

Here, we present the "horizontal whole mount" technique, which has several advantages over classical frozen sections. One advantage of our technique is that it can easily be performed with standard histology equipment and a confocal microscope. Second, the tissue integrity is preserved in a superior manner when compared to standard cryosections. For example, adipocytes within the hypodermal layer (i.e., dermal white adipocytes (DWAT))9 are severely disrupted in standard cryosections, which makes studying tissues that are adipose-laden impossible. Our technique allows for the full analysis of the adipocytes in this layer and may be adapted to other tissues with high adipocyte contents. Furthermore, this allows for the improved detection of mesenchymal cells in lineage-tracing studies 2,10. 
Standard cryosections, by their very nature, can never reveal the true 3D aspects of a tissue through confocal microscopy. This means that thicker sections are advantageous in the analysis of skin, since hair follicles, as well as their substructures, can traverse a depth that exceeds the standard thickness of 10 &#181;m used in classical crysosections. We are intrigued that other tissues, such as the intestine and brain, for example, possess similar challenges with regard to viewing the tissue as a 3D structure2,7,11,12,13. Intriguingly, our technique has already been shown to be beneficial for use in certain applications in the intestines14. We believe that our horizontal whole-mount protocol has the potential be applied to any other tissue requiring 3D analysis.

توفر ثورة معدات التصوير المجهري أدوات تصوير متطورة وعالية الدقة. ومع ذلك، عند الحصول على صورة مجهرية من المقطع العرضي الأنسجة ثلاثية الأبعاد كاملة (3D)، وإعداد العينات تحديات كبيرة ويمكن أن يكون العامل المحدد في تحديد جودة الصورة. كل خطوة منفصلة تستحق دراسة متأنية من أجل الحفاظ على مورفولوجيا الأنسجة واستضداد البروتينات المستهدفة، للحد من التحف التي يسببها التصنيع، وتحقيق أقصى قدر من جودة الصورة النهائية. على سبيل المثال، والتحليل التقليدي للجلد يتطلب صورة مع نظرة للبشرة والأدمة، مع بصيلات الشعر التي توجه بشكل صحيح، مما يسمح للتحليل التشريحي للمساهمة مقصورة الخلايا الجذعية في توازن الجلد 1 ، 2 . وهذا يتطلب تركيزا دقيقا على كيفية تضمين الجلد وقسمه. الأهم من ذلك، بصيلات الشعر يمكن أن يكون أكثر سمكامن 100 ميكرون، الذي يفوق كثيرا البارافين القياسية أو سمك القسم المجمدة، مما أدى إلى انخفاض مستوى التحليل مقارنة يتصاعد كله أو سميكة المقاطع العرضية 3 ، 4 ، 5 . مجتمعة، كل خطوة من إعداد العينات للتحليل المجهري هو محدد حاسم من شأنها أن تؤثر على تحليل الصور. هنا، يتم تقديم بروتوكول معالجة الرواية لسميكة، 3D الأنسجة المقطع العرضي التحليل، الذي نسميه &quot;جبل كامل الأفقي،&quot;. بروتوكول يحافظ للغاية مستضد وتمكن من الاستغلال الكامل للأقسام سميكة من الجلد باستخدام معدات التصوير مبائر القياسية. هذا هو دليل كامل لاستخدام الجلد للأنسجة سميكة تجهيز المقطع العرضي والتصوير، بما في ذلك حصاد الأنسجة و بارافورمالدهيد (بفا) - الحفاظ على الحفظ بالتبريد (الخطوة 1)، وتوليد 100 ميكرون سميكة الأنسجة المقاطع العرضية مع ناظم البرد 2)، و إمونوفلورزنت وسم تصاعد (الخطوات 3 و 4). النتائج ممثل مقارنة الصور متحد البؤر من اثنين متميزة تقنيات إعداد النسيجي - كريوسكتيونينغ الكلاسيكية وسميكة، 3D الأنسجة عبر المقسمة تسليط الضوء على مزايا &quot;يتصاعد كله الأفقي&quot; للمستخدم المحتمل لهذا البروتوكول.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="658">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">PBS</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">homemade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Gelatin, from cold water fish skin</td>
			<td style="width:99px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">G7765</td>
			<td>250ML</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:273px;">Glycerol</td>
			<td style="width:99px;">BDH Laboratory Supplies</td>
			<td style="width:119px;">444482V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">O.C.T. compound</td>
			<td style="width:99px;">VWR chemicals</td>
			<td style="width:119px;">361603E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Peel-A-Way embedding molds</td>
			<td style="width:99px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">E6032-1CS</td>
			<td>Square S-22</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Non-Fat Powdered Milk</td>
			<td style="width:99px;">Bio Basic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">NB0669</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:99px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T9284</td>
			<td>500ML</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">4&#8242;,6-Diamidino-2-phenylindole, dilactate (DAPI)</td>
			<td style="width:99px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">D3571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">FITC Rat Anti-Human CD49f</td>
			<td style="width:99px;">BD Pharmingen</td>
			<td style="width:119px;">555735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Mouse/Rat Integrin alpha 8 Antibody</td>
			<td style="width:99px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">AF4076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">Alexa Fluor 488 donkey anti-rat IgG</td>
			<td style="width:99px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">A21208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">Alexa Fluor 555 donkey anti-goat IgG</td>
			<td style="width:99px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">A21432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:273px;">CryoStar NX70</td>
			<td style="width:99px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">100mm Culture dishes</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">Disposable scalpels</td>
			<td style="width:99px;">Swann-Morton</td>
			<td style="width:119px;">Ref 0501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">pointed metal forceps</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">1.5 ml microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:99px;">VWR</td>
			<td dir="LTR">211-2130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">12 Well plates</td>
			<td style="width:99px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">CLS3513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Dissecting microscope</td>
			<td style="width:99px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">20 ul and 1000 ul Pipette</td>
			<td style="width:99px;">Gilson</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;">1000&#181;l XL Graduated TipOne Filter Tip (Sterile)</td>
			<td style="width:99px;">Star Lab</td>
			<td dir="LTR">S1122-1830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td dir="LTR" height="21" style="height:21px;">20&#181;l Bevelled TipOne Filter Tip (Sterile)</td>
			<td style="width:99px;">Star Lab</td>
			<td>S1120-1810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Rocking shaker plate</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">Microscope slides, menzel Glaeser</td>
			<td style="width:99px;">Thermos Scientific</td>
			<td style="width:119px;">631-9483</td>
			<td>Superfrost Plus</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:273px;">Cover Glasses, Menzel Glaeser</td>
			<td style="width:99px;">Thermos Scientific</td>
			<td style="width:119px;">MENZBB024060AB</td>
			<td>24 x 60 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:273px;">Confocal microscope</td>
			<td style="width:99px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

horizontal whole mount: a novel processing and imaging protocol for thick, three-dimensional tissue cross-sections of skin

يمكن أن يكون تجهيز الأنسجة ذات الاهتمام لتوليد صورة المجهرية التي تدعم حجة علمية تحديا. الحصول على الصور المجهرية عالية الجودة لا تعتمد اعتمادا كليا على نوعية المجهر، ولكن أيضا على أساليب معالجة الأنسجة، والتي غالبا ما تنطوي على إجراءات حاسمة متعددة أو خطوات. وعلاوة على ذلك، أنواع الخلايا الوسيطة في الجلد والأنسجة الأخرى تمثل تحديا جديدا لإعداد الأنسجة والتصوير. هنا، نقدم عملية كاملة، من حصاد الأنسجة إلى المجهري. تقنية لدينا، ودعا &quot;جبل كامل الأفقي،&quot; هو أن المبتدئين يمكن أن تصبح بسرعة يتقن في والتي تسمح للحفاظ على مستضد والكشف في 60-300 ميكرون سميكة أقسام قطع مع ناظم البرد. أقسام من هذا سمك توفر تصور معزز من الأنسجة المعمارية المصغرة في بيئة ثلاثية الأبعاد. وبالإضافة إلى ذلك، بروتوكول يحفظ خلايا الوسيطة بطريقة تعزز جودة الصورة عندمامقارنة مع ناظم البرد القياسية أو أقسام البارافين، وبالتالي زيادة فعالية وموثوقية المناعية. ونحن نعتقد أن هذا البروتوكول سوف تستفيد جميع المختبرات التي تصور الجلد، وربما الأنسجة والأعضاء الأخرى.

للتأكيد على مزايا تقنية لدينا، قارنا لدينا سميكة، 3D الأنسجة عبر المقطع تقنية، &quot;جبل كله الأفقي&quot;، إلى أقسام المجمدة الكلاسيكية. تم قطع المقاطع الكلاسيكية المجمدة كما هو موضح سابقا 5 . لتوفير بنية بصرية للبشرة في الصور المجهرية تي، ونحن إمونوستيند ل إنتغرين ألفا -6 (Itga6)، وهو عنصر يرسى خلايا البشرة إلى الغشاء القاعدي الكامنة 6 . ونحن أيضا وصفت العضلات مقف البيلي (APM)، وهي المسؤولة عن انتصاب الشعر (المعروف أيضا باسم &quot;صرخة الرعب&quot;)، مع إنتغرين ألفا 8 7. في المقاطع المجمدة الكلاسيكية، معظم بصيلات الشعر تصور مع Itga6 لم مقطوع على طول كامل، وتوليد بصيلات الشعر غير مكتملة في الغالب في القسم، بالمقارنة مع يتصاعد كله الأفقي ( الشكل 4A -4d </strong&gt;). المقاطع العرضية الأنسجة سميكة تجعل من الممكن الحصول على المزيد من طبقات Z مكدس مقارنة مع التقليدية 10 ميكرون المقاطع، مما يسمح للصورة 3D أكثر اكتمالا. هذا يصبح أكثر وضوحا عند دراسة سلامة أبمز، التي ترتبط مع بصيلات الشعر والغشاء السفلي المغطي. في كريوسكتيونس الكلاسيكية، كان جزء كبير من أبمس مجزأة ( الشكل 4A -4 د ). بالإضافة إلى ذلك، يتم الحفاظ على سلامة الأنسجة من حجرة تحت الجلد في يتصاعد كله الأفقي، بالمقارنة مع تدمير الخلايا الشحمية عندما تعلق كريوسكتيونس إلى الشرائح الزجاجية الدافئة، وهو قطعة أثرية تجميد ذوبان معروفة ( الشكل 4A -b ، مقارنة تحت الجلد المناطق) 8 . <img alt="الشكل 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56106/56106fig4.jpg" /> الشكل 4. موا أفقي كلهنت بالمقارنة مع كريوسكتيون الكلاسيكية. ( أ ) تم الحصول عليها بشكل كلاسيكي الجلد كريوسكتيونس 10 ميكرون سميكة و ( ب ) وصفت 100 ميكرون سميكة الأنسجة 3D المقاطع العرضية مع إنتغرين ألفا -6 (Itga6) و إنتغرين ألفا -8 (Itga8) لتصور مقصورة البشرة وعضلات المشيمة بيلي ، على التوالي. يتم تمثيل الصور من المقاطع العرضية الأنسجة سميكة كما الإسقاطات القصوى من كومة Z كبيرة. وتشير الأطر البيضاء إلى المناطق التي يتم تكبيرها، وعرضها في ( ج ) المقاطع الكلاسيكية و ( د ) الأفقي جبل كامل. ( ه ) تم تحديد بصيلات الشعر سليمة و ( و ) سليمة عضلات أركتور بيلي في كل من الكلاسيكية والأفقية كامل جبل أجزاء. وتشير الحانات مقياس 100 ميكرون. تم تمثيل البيانات كمتوسط ​​± خطأ قياسي للمتوسط ​​(سيم). وقد تم تحديد جزء واحد لكل تكرار بيولوجي ( ن = 3). اختبار t بدون اختبار * P &lt;0.05، *** P &lt;0.0005. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56106/56106fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin at JoVE.com

Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin

أفقي جبل كامل: A معالجة الرواية والتصوير بروتوكول للثدي، ثلاثة-- الأبعاد الأنسجة عبر-- أقسام الجلد

يقدم هذا العمل معالجة جديدة وبروتوكول التصوير لسميكة، ثلاثي الأبعاد الأنسجة المقطع العرضي التحليل الذي يتيح الاستغلال الكامل للطرائق التصوير متحد البؤر. هذا البروتوكول يحافظ على المستضد ويمثل نظاما قويا لتحليل الأنسجة الجلد وأنواع الأنسجة الأخرى يحتمل أن تكون.

Processing a tissue of interest to generate a microscopic image that supports a scientific argument can be challenging. The acquisition of high-quality ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

استخدام الموجات فوق الصوتية عالية التردد ثلاثي الأبعاد رواية لتوصيف الحمل المبكر في الماوس

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Visualizing Multiciliated Cells in the Zebrafish Through a Combined Protocol of Whole Mount Fluorescent In Situ Hybridization and Immunofluorescence

Visualizing Multiciliated Cells in the Zebrafish Through a Combined Protocol of Whole Mount Fluorescent In Situ Hybridization and Immunofluorescence

تصور الخلايا مولتيسيلياتيد في الزرد من خلال بروتوكول مجتمعة في الموقع كله جبل فلوري التهجين والفلوره

In recent years, the zebrafish embryo has emerged as a popular model to study developmental biology due to traits such as ex utero embryo development and ...

Whole-mount Clearing and Staining of Arabidopsis Flower Organs and Siliques

Whole-mount Clearing and Staining of Arabidopsis Flower Organs and Siliques

مركز الجامعة-جبل وتلطيخ نبات زهرة الأجهزة وسيليكويس

Due to its formidable tools for molecular genetic studies, Arabidopsis thaliana is one of the most prominent model species in plant biology and, ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

تحليل كمي الجامع-جبل الفلورة السكان السلف القلب في الأجنة الماوس

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks

التقديم ثلاثي الأبعاد وتحليل إيمونولابيليد، أوضح البشري شبكات الأوعية الدموية فيلوس المشيمية

Nutrient and gas exchange between mother and fetus occurs at the interface of the maternal intervillous blood and the vast villous capillary network that ...

Three-dimensional Inflammatory Human Tissue Equivalents of Gingiva

مكافئات الأنسجة البشرية التحريضية ثلاثية الأبعاد للثة

Periodontal diseases (such as gingivitis and periodontitis) are the leading causes of tooth loss in adults. Inflammation in gingiva is the fundamental ...

Whole-mount Confocal Microscopy for Adult Ear Skin: A Model System to Study Neuro-vascular Branching Morphogenesis and Immune Cell Distribution

الجامعة-جبل [كنفوكل] الفحص المجهري للجلد الإذن الكبار: نظام نموذجي لدراسة Morphogenesis المتفرعة العصبية والأوعية الدموية وتوزيع الخلايا المناعية

Here, we present a protocol of a whole-mount adult ear skin imaging technique to study comprehensive three-dimensional neuro-vascular branching ...

Three-dimensional Organotypic Cultures of Vestibular and Auditory Sensory Organs

الثقافات أورجانوتيبيك ثلاثي الأبعاد للأجهزة الحسية السمعية والدهليزيه

The sensory organs of the inner ear are challenging to study in mammals due to their inaccessibility to experimental manipulation and optical observation. ...

Whole Mount Immunofluorescence and Follicle Quantification of Cultured Mouse Ovaries

كله جبل الفلورة وتقدير جريب المبايض الماوس مثقف

Research in the field of mammalian reproductive biology often involves evaluating the overall health of ovaries and testes. Specifically, in females, ...

A Simplified and Efficient Method to Isolate Primary Human Keratinocytes from Adult Skin Tissue

أسلوب مبسط وفعال لعزل الخلايا الكيراتينيه البشرية الأولية من أنسجة الجلد الكبار

Primary human keratinocytes isolated from fresh skin tissues and their expansion in vitro have been widely used for laboratory research and for clinical ...