Name: utilization of capsules for negative staining of viral samples within biocontainment
Uploaded: 2017-07-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Utilization of Capsules for Negative Staining of Viral Samples within Biocontainment at JoVE.com

Vi vil gerne anerkende og takke Dr. John Carra og Rowena Schokman for at tilvejebringe rensede Ebola nano-VLP&#39;er, Dr. Rajini Mudhasani for at levere Chikungunya-virus, og Dr. Charles (Jason) Shoemaker til at tilvejebringe murine leukæmi VLP&#39;er, der udtrykker Ebolavirus-glycoproteiner. Vi vil også gerne takke MAJ Carl Soffler for at lette Summer Internship Programmet (SIP) og Science and Engineering Apprenticeship Programmet (SEAP) og Dr. Catherine Wilhelmsen til laboratorie sikkerhedstræning.

1. Eksperimentforberedelse i et BSL-2 miljø før arbejde med virusprøverne <ol><li> Forbered eller køb Formvar og carbonbelagt TEM kobbergitter, normalt 200-400 mesh. </li><li> Indsæt de coatede TEM-gitter i kapsler. <ol><li> Brug en forstørret linse til at gøre denne proces nem at udføre. Et eller to gitter kan indsættes i hver kapsel. Forlæste kapsler kan købes for at eliminere dette trin, hvis det ønskes. </li></ol></li><li> Overfør kapslerne med indsatte TEM coatede net sammen med andr...

<ol>
	<li>Gentile, M., Gelderblom, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscopy+in+rapid+viral+diagnosis:+an+update.">Electron microscopy in rapid viral diagnosis: an update.</a> New Microbiol. 37 (4), 403-422 (2014).</li><li>Kruger, D. H., Schneck, P., Gelderblom, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Helmut+Ruska+and+the+visualisation+of+viruses.">Helmut Ruska and the visualisation of viruses.</a> Lancet. 355 (9216), 1713-1717 (2000).</li><li>Curry, A., Appleton, H., Dowsett, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+transmission+electron+microscopy+to+the+clinical+study+of+viral+and+bacterial+infections:+present+and+future.">Application of transmission electron microscopy to the clinical study of viral and bacterial infections: present and future.</a> Micron. 37 (2), 91-106 (2006).</li><li>Goldsmith, C. S., Miller, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modern+uses+of+electron+microscopy+for+detection+of+viruses.">Modern uses of electron microscopy for detection of viruses.</a> Clin Microbiol Rev. 22 (4), 552-563 (2009).</li><li>Kiselev, N. A., Sherman, M. B., Tsuprun, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+staining+of+proteins.">Negative staining of proteins.</a> Electron Microsc Rev. 3 (1), 43-72 (1990).</li><li>Brenner, S., Horne, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+negative+staining+method+for+high+resolution+electron+microscopy+of+viruses.">A negative staining method for high resolution electron microscopy of viruses.</a> Biochim Biophys Acta. 34, 103-110 (1959).</li><li>Harris, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+staining+of+thinly+spread+biological+samples.">Negative staining of thinly spread biological samples.</a> Methods Mol Biol. 369, 107-142 (2007).</li><li>Bradley, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructure+of+bacteriophage+and+bacteriocins.">Ultrastructure of bacteriophage and bacteriocins.</a> Bacteriol Rev. 31 (4), 230-314 (1967).</li><li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+two+negative+staining+methods+on+the+Chinese+atypical+rotavirus.">Effects of two negative staining methods on the Chinese atypical rotavirus.</a> Arch Virol. 94 (3-4), 305-308 (1987).</li><li>Benmeradi, N., Payre, B., Goodman, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Easier+and+Safter+Biological+Staining:+High+Contrast+Uranyless+Staining+of+TEM+Grids+using+mPrep/g+Capsules.">Easier and Safter Biological Staining: High Contrast Uranyless Staining of TEM Grids using mPrep/g Capsules.</a> Microsc Microanal. 21, 721 (2015).</li><li>Goodman, S. L., Wendt, K. D., Kostrna, M. S., Radi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capsule-Based+Processing+and+Handling+of+Electron+Microscopy+Specimens+and+Grids.">Capsule-Based Processing and Handling of Electron Microscopy Specimens and Grids.</a> Microscopy Today. 23 (5), 30-37 (2015).</li><li>Goodman, S. L., Kostrna, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+Reagent+Consumption+and+Improving+Efficiency+of+Specimen+Fixation+and+Embedding,+Grid+Staining+and+Archiving+using+mPrep+Capsule+Processing.">Reducing Reagent Consumption and Improving Efficiency of Specimen Fixation and Embedding, Grid Staining and Archiving using mPrep Capsule Processing.</a> Microsc Microanal. 17, 174-175 (2011).</li><li>Monninger, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+viral+samples+within+biocontainment+for+ultrastructural+analysis:+Utilization+of+an+innovative+processing+capsule+for+negative+staining.">Preparation of viral samples within biocontainment for ultrastructural analysis: Utilization of an innovative processing capsule for negative staining.</a> J Virol Methods. 238, 70-76 (2016).</li><li>Rossi, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+ViroCyt(R)+Virus+Counter+for+rapid+filovirus+quantitation.">Evaluation of ViroCyt(R) Virus Counter for rapid filovirus quantitation.</a> Viruses. 7 (3), 857-872 (2015).</li><li>Carra, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+thermostable,+chromatographically+purified+Ebola+nano-VLP+vaccine.">A thermostable, chromatographically purified Ebola nano-VLP vaccine.</a> J Transl Med. 13, 228 (2015).</li><li>Rein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+leukemia+viruses:+objects+and+organisms.">Murine leukemia viruses: objects and organisms.</a> Adv Virol. , 403419 (2011).</li><li>Barland, M., Rojkind, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+staining+with+osmium+tetroxide+vapour.">Negative staining with osmium tetroxide vapour.</a> Nature. 212 (5057), 84-85 (1966).</li></ol>

Negativ farvning er en værdifuld TEM-teknik til evaluering og størrelsen af ​​virus, proteinkomplekser og nanopartikler. Droplet forberedelse af disse prøver ved manuel flytning af gitter fra reagens til negative pletter har været den klassiske protokol i mere end et halvt århundrede. Det er en simpel proces, men kræver ekspertise opnået gennem træning for vellykket gennemførelse. Fremragende negativ farvning betragtes stadig som et avanceret færdighedssæt og meget ønskeligt i mange TEM-laboratorier. Kap...

Transmissionselektronmikroskopi (TEM) er et effektivt redskab til at se morfologi og ultrastruktur af biologiske prøver, der er for små, til at ses med et traditionelt lysmikroskop 1 , 2 , 3 , 4 . TEM&#39;er skyder elektroner gennem en meget tynd prøve, der producerer et højere opløsningsbillede, da elektroner har en meget kortere bølgelængde end lys. Regioner af prøven, der bøjer eller blokkerer elektroner, ser mørke ud, mens områder, der er elektronlucent, fremstår som hvide. Mangel på elektron tæt stof gør viruser vanskelige at se under en TEM, fordi de ikke kan scatter elektroner. Negativ farvning er den mest almindelige metode til at oprette kontrast og se virus med en TEM. Den første negative farvningsprocedure blev foreslået af Brenner og Horne i 1959, baseret på et eksperiment hvor Hall (1955) og Huxley (1957) observeredeVed udseendet af biologiske strukturer i omvendt kontrast, når de nedsænkes i et elektron-tæt stof 5 . Processen med negativ farvning har været stort set uændret i løbet af det sidste halve århundrede. Negativ farvning indebærer kort anvendelse af en tungmetalsaltopløsning på en prøve på et TEM-net i et forsøg på at omslutte virussen med tæt materiale uden at infiltrere viruset 6 . Dette skaber en mørk kant og afslører partikelens form 5 . Denne undersøgelse bruger to reagenser til negativ farvning, uranylacetat (UA) og kaliumphosphotungstic acid (PTA). Begge disse pletter anvendes almindeligt til at plette små biologiske prøver negativt, såsom vira, proteinkomplekser og nanopartikler 7 , 8 , 9 . Den konventionelle negative farvningsteknik er den manuelle dråbe negative farvningsteknologiNique 7 . Denne metode kræver præcis håndtering af små, skrøbelige TEM grids med tang for at anvende små mængder af virusprøve, plet og skylninger. Den typiske fremstillingsprotokol involverer påføring af en dråbe prøveekspension på overfladen af ​​et filmcoatet TEM-gitter ( figur 1A ). Efter tilslutning af prøven til filmoverfladen skylles gitteret for at fjerne ikke-vedhængende vira og farves med enten UA eller PTA i nogle sekunder til et minut afhængigt af typen af ​​prøve. Overskydende væske er ond væk fra gitteret ved at røre et stykke filterpapir til kanten af ​​gitteret. Den manuelle dråbe metode kræver, at hvert gitter skal fremstilles individuelt. Hvis de ikke håndteres omhyggeligt, kan de coatede TEM-net nemt punkteres, bøjes eller forurenes. Behandling af flere prøver kan medføre problemer med at spore nettet og sikre ensartet farvning for hver prøve. Denne manuelle farvningsprocedure er meget mere dEffektive, når det udføres på biosikkerhedsniveau (BSL) -3 og -4 biokonduktionslaboratorier, på grund af det krævede personlige værnemiddel (PPE), der kræves for disse miljøer. PPE er besværligt, og biokonduktionsmiljøet er meget mere turbulent sammenlignet med et almindeligt laboratorium. Personale i BSL-3 biokonduktionslaboratorier skal have 2 par handsker og arbejde i et biosikkerhedsskabe (BSC). Dette dobbeltlag af handsker reducerer taktil følsomhed og begrænser finmotor bevægelse. Luftstrømmen af ​​BSC, der beskytter brugeren og hjælper med at forhindre prøveforurening kan medføre, at prøverne og pletterne tørrer for hurtigt og dermed påvirker pletkvaliteten. Den stærke turbulente luftstrøm i BSC kan også hurtigt blæse væk et gitter, der ikke er godt sikret. I BSL-4 biokonduktionslaboratorier er der yderligere sikkerhedskrav. Personale skal have en positiv trykdragt, som yderligere begrænser fysisk bevægelse og evnen til at se og manipulere klartUlate grids. Teknikeren, der arbejder i BSL-4, bærer også mindst 2 par handsker, hvor det ydre par er en tyk handske, der i høj grad reducerer fingerfærdighed og taktil følelse. Endelig er de tang, der bruges til at håndtere TEM-gitter, skarpe og derved udgør en risiko for teknikeren på grund af deres evne til at punktere handsker. Med kapsler, der indeholder gitter, er tænger ikke nødvendige, hvilket giver et sikkert, tangfrit alternativ til manipulation af gitter i biokontainering. Endelig tilvejebringer kapslerne også en effektiv måde at lagre gitter under behandling, osmiumdampdekontaminering og under opbevaring; Hvorved netene organiseres og sikres mod skader. I denne rapport introducerer vi en ny metode til negativ farvning af TEM-net i biokonduktionslaboratorier, der anvender mPrep / g kapsler, en kapselbaseret enhed til nethåndtering og farvning 10 , 11 , 12 . Kapslen accomModificerer to TEM-net, minimerer direkte håndtering og reducerer potentialet for netskader. Kapslen føjes direkte til en enkelt- eller flerkanalspipette på samme måde som en pipettespids, hvilket tillader anvendelse af forskellige væsker til gitter indeholdt i. Dette muliggør samtidig forberedelse af flere prøver med dubletter ( figur 1B ). Til negativ plet med kapsler aspireres virusprøven ind i kapslen og holdes i 10 minutter for at lade virusserne adsorbere på gitterfladerne. Gitterene med adsorberet virus vaskes efterfølgende med deioniseret (dI) vand og farves med enten UA eller PTA i nogle få sekunder til 1 min. Denne proces bruger de samme protokolstrin og reagenser som den manuelle dråbe metode; Forskellen er, at alt arbejde sker inden i kapslen uden fysisk håndtering af gitterene. ( Fig. 1C , 1D ). Formålet med denne undersøgelse var at evaluere kapsler somEn ny metode til negativ farvning af virusprøver i biokonduktionsmiljøer. Denne undersøgelse undersøgte også kvaliteten af ​​TEM-billeder fremstillet ved to forskellige virusinaktiveringsprocedurer: 1) hurtig inaktivering med 1% osmiumtetroxiddamp og 2) 24 timers inaktivering med 2% glutaraldehyd. Begge disse blev udført under anvendelse af kapslerne. Endelig vurderede vi to almindeligt anvendte negative pletter, UA og PTA, til brug i kapslen. 13

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="590">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Formvar/carbon coated TEM grids</td>
			<td style="width:71px;">SPI</td>
			<td style="width:119px;">3420C-MB</td>
			<td style="width:167px;">200 mesh Cu Pk/100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">mPrep/g capsules</td>
			<td style="width:71px;">EMS</td>
			<td style="width:119px;">85010-01</td>
			<td>box</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">mPrep/g couplers</td>
			<td style="width:71px;">EMS</td>
			<td style="width:119px;">85010-11</td>
			<td>standard 16/Pk</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">glutaraldehdyde</td>
			<td style="width:71px;">EMS</td>
			<td style="width:119px;">16320</td>
			<td>50% solution, EM grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Osmium Tetroxide</td>
			<td style="width:71px;">EMS</td>
			<td style="width:119px;">19190</td>
			<td>4% aqueous solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Uranyl Acetate</td>
			<td style="width:71px;">EMS</td>
			<td style="width:119px;">22400</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Potassium phosphotungstic acid</td>
			<td style="width:71px;">EMS</td>
			<td style="width:119px;">19500</td>
			<td>powder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">filter paper</td>
			<td style="width:71px;">Whatman</td>
			<td style="width:119px;">1450-090</td>
			<td>size 50</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Tranmission Electron Microscope</td>
			<td style="width:71px;">JEOL</td>
			<td style="width:119px;">JEM-1011</td>
			<td>TEM</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

utilization of capsules for negative staining of viral samples within biocontainment

Transmissionselektronmikroskopi (TEM) bruges til at observere ultrastrukturen af ​​vira og andre mikrobielle patogener med nanometeropløsning. De fleste biologiske materialer indeholder ikke tætte elementer, der er i stand til at sprede elektroner for at skabe et billede; Derfor kræves en negativ plet, som placerer tætte tungmetalsalte rundt om prøven. For at visualisere virus i suspension under TEM skal de påføres små rister, der er belagt med en gennemsigtig overflade, kun nanometer tyk. På grund af deres lille størrelse og skrøbelighed er disse grids vanskelige at håndtere og let flyttes af luftstrømme. Den tynde overflade er let beskadiget, hvilket giver prøven svært eller umuligt billede. Infektiøse vira skal håndteres i et biosikkerhedsskabe (BSC), og nogle kræver et biokonduktiv laboratoriemiljø. Farvevirus i biosikkerhedsniveauer (BSL) -3 og -4 er særligt udfordrende, fordi disse miljøer er mere turbulente og teknikere er påkrævet tO Brug personlige værnemidler (PPE), hvilket reducerer fingerfrekvensen. I denne undersøgelse vurderede vi en ny enhed til at hjælpe med negative farvningsvirus i biokontainering. Enheden er en kapsel, der fungerer som en special pipettespids. Når rister er fyldt ind i kapslen, aspirerer brugeren simpelthen reagenser ind i kapslen for at aflevere virussen og pletterne til det indkapslede gitter, hvilket eliminerer brugerhåndtering af gitter. Selvom denne teknik er designet specielt til brug i BSL-3 eller -4-biokonduktion, kan det lette prøveforberedelsen i ethvert laboratoriemiljø ved at muliggøre let negativ farvning af virus. Denne samme metode kan også anvendes til fremstilling af negative farvede TEM-prøver af nanopartikler, makromolekyler og lignende prøver.

Kapselmetoden producerer god kvalitet negativ farvning til TEM-billeddannelse: For det første vurderede vi kvaliteten af ​​billeder genereret ved at bruge både manuel dråbe metode og kapsel metoder til negativ farvning Zaire ebolavirus. Ebolaviruser er medlemmer af Filoviridae- familien sammen med Marburg-virus. Ebolavirus er typisk 80 til 100 nm i diameter og kan være over 1000 nm i længden. Ebolavirus skal hå...

Watch this Scientific Journal Video about Utilization of Capsules for Negative Staining of Viral Samples within Biocontainment at JoVE.com

Utilization of Capsules for Negative Staining of Viral Samples within Biocontainment

Denne protokol giver vejledning til negative farvningsvirusprøver, der let kan bruges i BSL-2, -3 eller -4-laboratorier. Det omfatter brugen af ​​en innovativ behandlingskapsel, som beskytter transmissionselektronmikroskopi nettet og giver brugeren nemmere håndtering i de mere turbulente miljøer inden for biokonduktion.

Anvendelse af kapsler til negativ farvning af virale prøver inden for biokonduktion

Transmission electron microscopy (TEM) is used to observe the ultrastructure of viruses and other microbial pathogens with nanometer resolution. Most ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Development of a Negative Selectable Marker for Entamoeba histolytica

Development of a Negative Selectable Marker for Entamoeba histolytica

Entamoeba histolytica is the causative agent of amebiasis and infects up to 10% of the world's population. The molecular techniques that have enabled the ...

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

The diagnosis of viral causes of many infectious diseases is difficult due to the inherent sequence diversity of viruses as well as the ongoing emergence ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cells Within Murine Aortas

Atherosclerosis is a chronic inflammatory process of medium and large size vessels that is characterized by the formation of plaques consisting of foam ...

Isolation of Fidelity Variants of RNA Viruses and Characterization of Virus Mutation Frequency

RNA viruses use RNA dependent RNA polymerases to replicate their genomes. The intrinsically high error rate of these enzymes is a large contributor to the ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Etablering af en Liquid-dækket kultur Polarized humane luftveje Epitelial Calu-3-celler til at studere Host celle respons på luftvejspatogener<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Rapid Identification of Gram Negative Bacteria from Blood Culture Broth Using MALDI-TOF Mass Spectrometry

Rapid Identifikation af Gram-negative bakterier fra Blood kulturvæsken Brug MALDI-TOF-massespektrometri

An important role of the clinical microbiology laboratory is to provide rapid identification of bacteria causing bloodstream infection. Traditional ...

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

Udviklingen af ​​Frysetørret Loop-medierede Isotermiske Amplification reagenser til påvisning af<em&gt; Coxiella burnetii</em

Coxiella burnetii, the agent causing Q fever, is an obligate intracellular bacterium. PCR based diagnostic assays have been developed for detecting C. ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

Swab Sampling metode til påvisning af menneskelige Norovirus på overflader

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

Rensning af Viral DNA til identifikation af tilknyttede Viral og cellulær proteiner

The goal of this protocol is to isolate herpes simplex virus type 1 (HSV-1) DNA from infected cells for the identification of associated viral and ...

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluering af Zika Virus-specifikke T-celle respons i Immunoprivileged organer af inficerede Ifnar1- / - mus

The Zika virus (ZIKV) can induce inflammation in immunoprivileged organs (e.g., the brain and testis), leading to the Guillain-Barr&#233; syndrome and ...