Name: intratracheal inoculation of fischer 344 rats with francisella tularensis
Uploaded: 2017-09-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי את ההגנה איום הפחתת סוכנות (DTRA) תחת חוזה HDTRA1-14-C-0116, ואת המרכז למצוינות גנומיקה זיהום (משרד ההגנה #W911NF-11-1-0136 מקלדת).

עבודה זו בוצעה בהתאמה קפדנית עם ההמלצות במדריך על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה של מכוני הבריאות הלאומיים. פרוטוקולים בעלי חיים המערבים מכרסמים אושרו על ידי אוניברסיטת טקסס סן אנטוניו מוסדיים חיה על עצמך ועל שימוש הוועדה (IACUC) תחת פרוטוקול MU009(RA).
 1. להכין קטטר לקנה מחוון, פ t...

<ol>
	<li>Ellis, J., Oyston, P. C. F., Green, M., Titball, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tularemia.">Tularemia.</a> Clin Microbiol Rev. 15 (4), 631-646 (2002).</li><li>Lyons, C. R., Wu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+Francisella+tularensis+infection.">Animal models of Francisella tularensis infection.</a> Ann N Y Acad Sci. 1105, (2007).</li><li>Hutt, J. A., Lovchik, J. A., Dekonenko, A., Hahn, A. C., Wu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Natural+History+of+Pneumonic+Tularemia+in+Female+Fischer+344+Rats+after+Inhalational+Exposure+to+Aerosolized+Francisella+tularensis+subspecies+tularensis+Strain+Schu+S4.">The Natural History of Pneumonic Tularemia in Female Fischer 344 Rats after Inhalational Exposure to Aerosolized Francisella tularensis subspecies tularensis Strain Schu S4.</a> Am J Pathol. 187 (2), 252-267 (2017).</li><li>Ray, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Fischer+344+rat+reflects+human+susceptibility+to+Francisella+pulmonary+challenge+and+provides+a+new+platform+for+virulence+and+protection+studies.">The Fischer 344 rat reflects human susceptibility to Francisella pulmonary challenge and provides a new platform for virulence and protection studies.</a> PloS one. 5, e9952 (2010).</li><li>Jemski, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+tularemia:+comparison+of+selected+routes+of+vaccination+in+Fischer+344+rats.">Respiratory tularemia: comparison of selected routes of vaccination in Fischer 344 rats.</a> Infect Immun. 34 (3), 766-772 (1981).</li><li>Wu, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vaccination+of+Fischer+344+rats+against+pulmonary+infections+by+Francisella+tularensis+type+A+strains.">Vaccination of Fischer 344 rats against pulmonary infections by Francisella tularensis type A strains.</a> Vaccine. 27 (34), 4684-4693 (2009).</li><li>Mara-Koosham, G., Hutt, J. A., Lyons, C. R., Wu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+contribute+to+effective+vaccination+against+respiratory+infection+by+type+A+Francisella+tularensis+strains.">Antibodies contribute to effective vaccination against respiratory infection by type A Francisella tularensis strains.</a> Infect Immun. 79 (4), 1770-1778 (2011).</li><li>Oyston, P. C., Sjostedt, A., Titball, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tularaemia:+bioterrorism+defence+renews+interest+in+Francisella+tularensis.">Tularaemia: bioterrorism defence renews interest in Francisella tularensis.</a> Nat Rev Microbiol. 2 (12), 967-978 (2004).</li><li>Kingry, L. C., Petersen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+review+of+Francisella+tularensis+and+Francisella+novicida.">Comparative review of Francisella tularensis and Francisella novicida.</a> Front Cell Infect Microbiol. 4, 35 (2014).</li><li>Rohmer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Francisella+tularensis+genomes+reveals+evolutionary+events+associated+with+the+emergence+of+human+pathogenic+strains.">Comparison of Francisella tularensis genomes reveals evolutionary events associated with the emergence of human pathogenic strains.</a> Genome Biol. 8 (6), R102 (2007).</li><li>Chu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+attenuated+Francisella+novicida+vaccine+protects+against+Francisella+tularensis+pulmonary+challenge+in+rats+and+non-human+primates.">Live attenuated Francisella novicida vaccine protects against Francisella tularensis pulmonary challenge in rats and non-human primates.</a> PLoS Pathog. 10 (10), e1004439 (2014).</li><li>Signarovitz, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mucosal+Immunization+with+Live+Attenuated+Francisella+novicida+U112&#916;iglB+Protects+against+Pulmonary+F.+tularensis+SCHU+S4+in+the+Fischer+344+Rat+Model.">Mucosal Immunization with Live Attenuated Francisella novicida U112&#916;iglB Protects against Pulmonary F. tularensis SCHU S4 in the Fischer 344 Rat Model.</a> PloS one. 7 (10), e47639 (2012).</li><li>Cunningham, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+vaccine+efficacy+by+expression+of+a+TLR5+ligand+in+the+defined+live+attenuated+Francisella+tularensis+subsp.+novicida+strain+U112DiglB::fljB.">Enhancement of vaccine efficacy by expression of a TLR5 ligand in the defined live attenuated Francisella tularensis subsp. novicida strain U112DiglB::fljB.</a> Vaccine. 32 (40), 5234-5240 (2014).</li></ol>

העכברוש פישר 344 הופך להיות מודל חשוב עבור פיתוח חיסון tularemia3. חשיפה tularensis פ דרך המסלול ריאתי הוא קריטי עבור הוכחת יעילות כנגד צורות שהוסבה לכלי נשק של tularensis פ, כי אלה יימסרו אירוסולים. חיסון Intratracheal של העכברוש מקלה על חשיפה של הריאות עכברוש tularensis פ ללא צורך גדול, יק...

פ tularensis (Ft) גורם המחלה האנושית, tularemia. כאשר החיידק נרכשים דרך המסלול ריאתי, זה מוביל tularemia pneumonic, אשר יש תחלואה גבוהה התמותה1. פ tularensis נחשב סוכן biothreat בשל הסכנה הקשורים לטפסים שידורה, ויש כיום אין חיסון שאושרו לשימוש בני אדם בארה ב מאמץ אינטנסיבי נמצא בעיצומו בימים אלה לפתח חיסונים, צעדים טיפוליים נגד tularemia pneumonic, כדי להגן על האוכלוסייה האנושית נגד השימוש הפסול הזה biothreat חיידקי
רוב המחקר tularemia התמקדה המודל העכבר, בשל הרגישות של עכברים לזיהום פ tularensis , השכיחות של נוגדנים. עם זאת, עכברים הוכיחו להיות דוגמנית קשה לפיתוח חיסון, בשל הקושי של הוכחת יעילות החיסון זה מודל2. לאחרונה, העכברוש פישר 344 פותחה כמודל עבור פיתוח חיסון tularemia3. הרגישות של החולדה פישר 344 תת השונים פ tularensis מחקה רגישות אנושית4, חולדות יכול להיות מוגן נגד אתגר ריאתי פ tularensis על ידי חיסון באמצעות זן תרכיב חי ידוע של הגנה בני5,6,7. כי החולדה פישר 344 מודלים תכונות מסוימות של זיהום פ tularensis של בני אדם, זה יכול להיות מודל מאוד שימושי עבור הפיתוח של חיסון המגן מפני ריאתי tularensis פ חשיפה.
חיסון יעיל צריך להגן. על בני האדם מפני חשיפה ריאתי tularensis פ. החשיפה ריאתי סביר של שהוסבה לכלי נשק tularensis פ יהיה aerosolized חיידקים בשאיפה לתוך הריאות8. עם זאת, תרסיס מהדור tularensis פ הוא מסוכן ובלתי מסורבלת, דורש ציוד מיוחד הבלימה. מסלול חלופי של חשיפה ריאתי בחולדה שהוא אולי יותר להתאמה עבור מספר מעבדות חסר ציוד מיוחד היא דרך חיסון intratracheal6. טכניקה זו מנצל laryngoscope את המיקום הנכון של צנתר בתוך קנה הנשימה של עכברוש anesthetized. מיקומה בתוך קנה הנשימה, יותר מאשר את הוושט, מאומת על ידי מכשיר פשוט מדמיין זרימת האוויר מהריאות. פ tularensis מועברת לאחר מכן לריאות דרך הצנתר על ידי המינהל עם מזרק, ואחריו החדרת אוויר לתוך הצנתר על מנת להבטיח משלוח ריאתי של החיידקים. לעומת זאת, Jemski5 דיווח בעבר כי tularensis פ מחוסן לתוך פישר 344 חולדות דרך המסלול תוך-אפי יכול לא להיות תרבותי מן הריאות עד 3 ימים לאחר חיסון, המציין את חיסון תוך-אפי בחולדות אינה לא תוצאה ישירה של חיידקים לתוך הריאות.
הסוכן בחר צורות של tularensis פ (פ tularensis subsp. tularensis, subsp. tularensis פ holarctica) מחייבים הליכים הבלימה אבטחה ברמה 3 (BSL3), אשר תמנע צילום וידאו. עם זאת, פ novicida (Fn) פטור הסוכן בחר מצב עקב שלה avirulence בבני אדם בריאים, יכול להיות מנוצל בבטחה תחת אבטחה ברמה 2 (BSL2) תנאים9,10. יתר על כן, Fn משמש כבסיס עבור חיסונים הקלוש בשידור חי יכול להגן מפני חשיפה ריאתי tularensis פ כאשר מתבצעת דרך חיסון intratracheal11,12,13. הטכניקה המובאת כאן מאפשר הלימוד של זיהומים המתרחשים דרך המסלול ריאתי ניצול חולדות כמודל לבני. טכניקה זו יכולה להתבצע ללא צורך ציוד מניבות תרסיס מיוחד. Fn שימש את הטכניקות הבוליוודי.

<table width="1062">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="width:376px;height:40px;">GreenLine fiber optic blade size 0</td>
			<td style="width:175px;">Carefusion</td>
			<td style="width:344px;">5-5231-00</td>
			<td style="width:167px;">Macintosh American profile</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">GreenLight system laryngoscope handle</td>
			<td>Carefusion</td>
			<td>4559GSP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Exel International Safelet I.V. Catheter</td>
			<td>EXEL INTERNATIONAL</td>
			<td>26743</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Slip Tip Sterile Syringes 1ml</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Broad Point Dressing Thumb Forceps</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>76-302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">200ul barrier tip</td>
			<td>GeneseeScientific</td>
			<td>24-142</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1000ul pipette tip</td>
			<td>Olympus Plastics</td>
			<td>24-173</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Dremel 3000-2/28 Rotary tool kit</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>3000228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Rodent Intubation Stand</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RIS 200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:175px;">Butler Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Rodent anesthesia machine</td>
			<td>Surgivet</td>
			<td>VTC302 Classic T3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Rodent Anesthesia chamber</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>AB 1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intratracheal inoculation of fischer 344 rats with francisella tularensis

זיהום ריאתי עם החיידק Francisella tularensis יכול לגרום למחלה רצינית וקטלניים, tularemia, אצל בני אדם. עקב המחסור הנוכחי חיסון tularemia שאושרו עבור בני אדם, המחקר מתמקדת פיתוח החיסון ניצול מודלים בעלי חיים המתאימים. העכברוש פישר 344 התפתחה מודל זה משקף את הרגישות האנושית tularensis פ זיהום, ובכך הוא מודל אטרקטיבי עבור פיתוח החיסון tularemia. חיסון Intratracheal של העכברוש 344 פישר עם פ tularensis מחקה חשיפה ריאתי אצל בני אדם. שילוח מוצלח לתוך קנה הנשימה עכברוש הוא קריטי עבור משלוח ריאתי. Laryngoscope עם תאורה משמש לצנרר כראוי את tracheae של מרדימים חולדות; המיקום הנכון בתוך קנה הנשימה נקבעת על ידי מכשיר פשוט לזהות את הנשימה. בעקבות צנרור, התרבות tularensis פ מועבר ב מנה נמדד באמצעות מזרק. טכניקה זו המשקלל ריאתי מסירת tularensis פ בתוך קנה הנשימה העכברושים להעריך את יעילות החיסון.

תגובת חיסון intratracheal של tularensis פ בחולדה ההורמונאלית יכול להיקבע על ידי מקושרים-אנזים immunosorbent assay (אליסה) נגד חיידקים UV-לא פעיל, כפי שתואר לעיל11. סה כ אימונוגלובולין G (IgG) בתגובה של פישר 344 חולדות לא מופעל כל התא חיידקים היה חיסון המוערך פוסט-intratracheal עם זן הקלוש...

Watch this Scientific Journal Video about Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis at JoVE.com

Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis

פרוטוקול זה מתאר intratracheal ההזרקות של פישר 344 חולדות עם Francisella tularensis. הליך זה מחקה ריאתי החשיפה של בני אדם סוכן biothreat פוטנציאל זה יכול לשמש כדי לבדוק את החיסון והיעילות הטיפולית נגד tularemia ריאתי.

Intratracheal חיסון של פישר 344 חולדות עם Francisella tularensis

Pulmonary infection with the bacterium Francisella tularensis can lead to the serious and potentially fatal disease, tularemia, in humans. Due to the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

Composite tissue allotransplantation (CTA) now represents a valid therapeutic option after the loss of a hand, forearm or digits and has become a novel ...

Non-surgical Intratracheal Instillation of Mice with Analysis of Lungs and Lung Draining Lymph Nodes by Flow Cytometry

לא ניתוחי Intratracheal החדרה של עכברים עם ניתוח ריאות וניקוז ריאות בלוטות הלימפה על ידי זרימת cytometry

Phagocytic cells such as alveolar macrophages and lung dendritic cells (LDCs) continuously sample antigens from the alveolar spaces in the 
lungs. LDCs, ...

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

הפרוטוקולים עבור הרכבת חיסון וגינלי אוסף דוגמאות במודל ניסיוני של עכבר קנדידה דלקת הנרתיק

Vulvovaginal candidiasis (VVC), caused by Candida species, is a fungal infection of the lower female genital tract that affects approximately 75% of ...

Procedures for Identifying Infectious Prions After Passage Through the Digestive System of an Avian Species

נהלים לזיהוי פריוני זיהומיות לאחר המעבר דרך מערכת העיכול של מינים עופות

Infectious prion (PrPRes) material is likely the cause of fatal, neurodegenerative transmissible spongiform encephalopathy (TSE) diseases1. Transmission ...

The Utilization of Oropharyngeal Intratracheal PAMP Administration and Bronchoalveolar Lavage to Evaluate the Host Immune Response in Mice

הניצול של לוע התחתון Intratracheal PAMP מנהל ושטיפה ברונכואלוואולרית כדי להעריך את תגובת מארח חיסון של עכברים

The host immune response to pathogens is a complex biological process. The majority of in vivo studies classically employed to characterize host-pathogen ...

Complete Thymectomy in Adult Rats with Non-invasive Endotracheal Intubation

Thymectomy מלא בחולדות מבוגרות עם לא פולשני endotracheal אינטובציה

Thymectomy in neonatal rodents is an established and reliable procedure for immunological studies. However, in adult rats, complications of hemorrhage and ...

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

Analysis of Lymphocyte Extravasation Using an In Vitro Model of the Human Blood-brain Barrier

ניתוח של לימפוציטים extravasation שימוש<em&gt; במבחנה</em&gt; דגם של מחסום אנושי דם-מוח

Lymphocyte extravasation into the central nervous system (CNS) is critical for immune surveillance. Disease-related alterations of lymphocyte ...

Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro

ניתוח של הטיה הנוצרות על-ידי זרימת נדידה של תאי B מאתר אזור שולי במבחנה

Marginal zone B cells (MZBs) are a population of B cells that reside in the mouse splenic marginal zones that envelop follicles. To reach the follicles, ...

Application of Consistent Massage-Like Perturbations on Mouse Calves and Monitoring the Resulting Intramuscular Pressure Changes

יישום של רטבאליות העיסוי העקבי של העכבר וניטור השינויים הנובעים בלחץ שרירי

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of ...

Disclosing Hemolymph Collection and Inoculation of Metarhizium Blastospores into Rhipicephalus Microplus Ticks Towards Invertebrate Pathology Studies

Disclosing Hemolymph Collection and Inoculation of Metarhizium Blastospores into Rhipicephalus Microplus Ticks Towards Invertebrate Pathology Studies

בגילוי המוליל אוסף והחיסונים של מטרהיזיפיאוס לתוך ריפיקו מיקרופלוס קרציות לקראת לימודי חסרי חוליות פתולוגיה

Ticks are obligate hematophagous ectoparasites and Rhipicephalus microplus has great importance in veterinary medicine because it causes anemia, weight ...