Name: measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters
Uploaded: 2017-09-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Forfatterne vil gerne takke undergraduate Daniel Korus for hans hjælp køre Matlab kode og bachelor Alex Boettcher for hans hjælp i kører de adfærdsmæssige eksperimenter. Dette projekt er støttet af NSF IOS 1256799 til R.L.M., og National Institute on Drug Abuse af National Institutes of Health under Award nummer T32DA007234.

alle procedurer, der beskrives her blev godkendt af institutionelle Animal Care og brug udvalg (IACUC) af The University of Minnesota, og er i overensstemmelse med den vejledning for pleje og anvendelse af forsøgsdyr 13 .
 1. dyr og Cannulation kirurgi <ol><li>Hent syriske hamstere fra en fælles animalske leverandør til ca. 55 dage med alder. 
	Bemærk: Selv om en alder af dyr vil variere på grund af begrænsninger af forskellige eksperimentelle paradigmer,...

<ol>
	<li>Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+brain+microdialysis.">Overview of brain microdialysis.</a> Curr Protoc Neurosci. , (2009).</li><li>Chaurasia, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAPS-FDA+Workshop+white+paper:+Microdialysis+principles,+application+and+regulatory+perspectives.">AAPS-FDA Workshop white paper: Microdialysis principles, application and regulatory perspectives.</a> Pharm Res. 24 (5), 1014-1025 (2007).</li><li>Lindsay, S., Kealey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> High performance liquid chromatography. , (1987).</li><li>Robinson, D. L., Venton, B. J., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+subsecond+dopamine+release+with+fast-scan+cyclic+voltammetry+in+vivo.">Detecting subsecond dopamine release with fast-scan cyclic voltammetry in vivo.</a> Clin Chem. 49 (10), 1763-1773 (2003).</li><li>Hu, Y., Mitchell, K. M., Albahadily, F. N., Michaelis, E. K., Wilson, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+measurement+of+glutamate+release+in+the+brain+using+a+dual+enzyme-based+electrochemical+sensor.">Direct measurement of glutamate release in the brain using a dual enzyme-based electrochemical sensor.</a> Brain Res. 659 (1-2), 117-125 (1994).</li><li>Agnesi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wireless+instantaneous+neurotransmitter+concentration+system-based+amperometric+detection+of+dopamine,+adenosine,+and+glutamate+for+intraoperative+neurochemical+monitoring.">Wireless instantaneous neurotransmitter concentration system-based amperometric detection of dopamine, adenosine, and glutamate for intraoperative neurochemical monitoring.</a> J Neurosurg. 111 (4), 701-711 (2009).</li><li>Erksine, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solicitation+behavior+in+the+estrous+female+rat:+A+review.">Solicitation behavior in the estrous female rat: A review.</a> Horm Beh. 23 (4), 473-502 (1989).</li><li>Weiner, I., Gal, G., Rawlins, J. N., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+involvement+of+the+shell+and+core+subterritories+of+the+nucleus+accumbens+in+latent+inhibition+and+amphetamine-induced+activity.">Differential involvement of the shell and core subterritories of the nucleus accumbens in latent inhibition and amphetamine-induced activity.</a> Behav Brain Res. 81 (1-2), 123-133 (1996).</li><li>Heidbreder, C., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine-induced+neurochemical+and+locomotor+responses+are+expressed+differentially+across+the+anteroposterior+axis+of+the+core+and+shell+subterritories+of+the+nucleus+accumbens.">Amphetamine-induced neurochemical and locomotor responses are expressed differentially across the anteroposterior axis of the core and shell subterritories of the nucleus accumbens.</a> Synapse. 29 (4), 310-322 (1998).</li><li>Pierce, R. C., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine+produces+sensitized+increases+in+locomotion+and+extracellular+dopamine+preferentially+in+the+nucleus+accumbens+shell+of+rats+administered+repeated+cocaine.">Amphetamine produces sensitized increases in locomotion and extracellular dopamine preferentially in the nucleus accumbens shell of rats administered repeated cocaine.</a> J Pharmacol Exp Ther. 275 (2), 1019-1029 (1995).</li><li>Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drive: Molecular and physiological analyses of a simple reproductive behavior. , (1999).</li><li>Carter, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postcopulatory+sexual+receptivity+in+the+female+hamster:+The+role+of+the+ovary+and+the+adrenal.">Postcopulatory sexual receptivity in the female hamster: The role of the ovary and the adrenal.</a> Horm Behav. 3 (3), 261-265 (1972).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. , (2011).</li><li>Meisel, R. L., Camp, D. M., Robinson, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microdialysis+study+of+ventral+striatal+dopamine+during+sexual+behavior+in+female+Syrian+hamsters.">A microdialysis study of ventral striatal dopamine during sexual behavior in female Syrian hamsters.</a> Beh Brain Res. 55 (2), 151-157 (1993).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 4 Channel EEG/EMG/Biosensor Manual V005. , (2012).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play-fighting+differs+from+serious+play+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rats+Rattus+norvegicus.">Play-fighting differs from serious play fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rats Rattus norvegicus.</a> Aggress Behav. 13 (3), 227-242 (1987).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+rates+of+attack,+defense+and+counterattack+during+the+developmental+decrease+in+play+fighting+by+male+and+female+rats.">Differential rates of attack, defense and counterattack during the developmental decrease in play fighting by male and female rats.</a> Dev Psychobiol. 23 (3), 215-231 (1990).</li><li>Pellis, S. M., Hastings, E., Shimizu, T., Kamitakahara, H., Komorowska, J., Forgie, M. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+non-playful+social+contexts.">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and non-playful social contexts.</a> Behav Neurosci. 120 (1), 72-84 (2006).</li><li>Wakabayashi, K. T., Kiyatkin, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+changes+in+extracellular+glutamate+induced+by+natural+arousing+stimuli+and+intravenous+cocaine+in+the+nucleus+accumbens+shell+and+core.">Rapid changes in extracellular glutamate induced by natural arousing stimuli and intravenous cocaine in the nucleus accumbens shell and core.</a> J Neurophysiol. 108 (1), 285-299 (2012).</li><li>Kapelsohn, K. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+for+cutting,+mounting,+and+staining+tissue+for+neural+histology.">Improved methods for cutting, mounting, and staining tissue for neural histology.</a> Protoc Exch. , (2015).</li><li>Siegel, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7:+Male+sexual+behavior.">Chapter 7: Male sexual behavior.</a> The Hamster: Reproduction and Behavior. , (1985).</li><li>Day, J. J., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nucleus+accumbens+and+pavlovian+reward+learning.">The nucleus accumbens and pavlovian reward learning.</a> Neuroscientist. 13 (2), 148-159 (2007).</li><li>Meisel, R. L., Mullins, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+experience+in+female+rodents:+Cellular+mechanisms+and+functional+consequences.">Sexual experience in female rodents: Cellular mechanisms and functional consequences.</a> Brain Res. 1126 (1), 56-65 (2006).</li><li>Meredith, G. E., Pennartz, C. M., Groenewegen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cellular+framework+for+chemical+signaling+in+the+nucleus+accumbens.">The cellular framework for chemical signaling in the nucleus accumbens.</a> Prog Brain Res. 99, 3-24 (1993).</li><li>Hedges, V. L., Staffend, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+mechanisms+of+reproduction+in+females+as+a+predisposing+factor+for+drug+addiction.">Neural mechanisms of reproduction in females as a predisposing factor for drug addiction.</a> Front Neuroendocrinol. 31 (2), 217-231 (2010).</li></ol>

Selvom relativt ligetil, kan nogle problemer opstå når beskæftiger denne teknik. Først, sonderne stereotaxisk placering skal være præcis: i modsætning til mikrodalyse, der prøver en bredere radius af det ekstracellulære miljø omkring sonden, denne teknik kun tillader måling af en neurotransmitter, der kommer i direkte kontakt med sonden. For det andet for kulfiber-optagelse på grund af den lille bredde af fiber, brud kan opstå, og sonden skal indsættes med bevidst pleje. I tilfælde af glutamatergic biosens...

Evnen til at måle neurotransmitter frigivelse i vågen opfører dyr giver forskere at knytte bestemte funktionsmåder med rumlige og tidsmæssige mønstre af neurotransmission-et kraftfuldt værktøj til at undersøge mekanismerne og kredsløb underliggende både naturlige og operant adfærd i realtid. Historisk set har været mikrodalyse ansat til at måle elektrisk reaktive og nonreactive stoffer i det ekstracellulære miljø af hjernen1. Denne teknik bruger en kontinuerlig strøm af en vandig opløsning af lignende ionisk komposition til den ekstracellulære væske, gennem en mikrodalyse sonde består af en lille aksel med tip af en semipermeable hule fiber membran2. Efter indføring af sonden neurotransmittere eller andre analysander interesse kan krydse den semipermeable membran ved passiv diffusion før opsamles med mellemrum til efterfølgende analyse af high-performance væskekromatografi (HPLC), en analytisk kemi teknik almindeligt udnyttet til at adskille, identificere og kvantificere komponenter i en heterogen blanding3.
Selv om mikrodalyse er en følsom teknik, der kan bruges til at måle næsten alle analysand af interesse, er den tidsmæssige opløsning lav, med maksimal prøveudtagning satser på rækkefølgen minutter til snese minutter1,2. Opfindelsen af hurtig scanning cyklisk voltammetry (FSCV), en teknik, der er afhænger af redox potentiale af electroactive arter, kan belyse nær øjeblikkelige koncentrationer af analysand af interesse i den ekstracellulære væske. I korte træk (Se Robinson et al. 4 for en omfattende revision), en elektrode er anvendt til at hæve og sænke spændingen i en trekantet bølge mode på en hurtig tid skala4. Når spændingen er i det korrekte område, er sammensatte af interesse gentagne gange oxideret og reduceret. Denne oxidation og reduktion af resultaterne i en bevægelse af elektroner, der skaber en lille vekselstrøm. Skan satser finder sted på de lynhurtige skala med oxidation og reduktion af forbindelser forekommer i mikrosekunder. Ved at fratrække baggrunden nuværende lavet af sonden fra den resulterende strøm, kan man generere en spænding vs nuværende plot unikke for hvert stof. Da tidsskala af spænding svingninger er kendt, kan disse data bruges til at beregne et plot af strømmen som funktion af tiden. De relative koncentrationer af stoffet kan således bestemmes som antallet elektroner overført i hver oxidation og reduktion reaktionen er kendt4.
Denne kemiske specificitet og høj tidsmæssige opløsning gør FSCV en kraftfuld teknik til påvisning af skiftende kemiske koncentrationer i vivo. Men trods disse mangfoldige fordele, denne teknik kræver omfattende tekniske ekspertise og dyrt udstyr og installation. Yderligere, nonelectroactive neurotransmittere (fx, glutamat) ikke kan måles ved hjælp af denne teknik. Heldigvis, teknologiske fremskridt inden for elektrokemi5, samt kommercialisering af disse opfindelser, har indført en relativt enkel metode at måle ikke-electroactive neurotransmittere i vågen opfører dyr uden at kompromittere tidsmæssige præcision-en teknik kendt som enzymatisk biosensor teknologi. Denne teknik bruger enzymatisk omdannelse af nonelectroactive neurotransmitter af interesse til to substrater, hvoraf den ene er electroactive hydrogenperoxid, som er opdaget som en amperometric oxidation aktuelle genereret af en anvendt potentiale5 . Kommercielt tilgængelige biosensor sonder måle (Se figur 1) selektivt analysander interesse af konkurrencedygtige reduktion af endogene interferents bidrag. I tilfælde af glutamat, er bidrag af den fælles interferent ascorbinsyre (AA) konkurrencedygtige reduceret til den målte aktuelle af co lokalisering AA oxidase aktive enzymatisk overfladen af sensor, konvertere AA til ikke-electroactive dihydroascorbate og vand. Desuden udelukker en negativt ladede Nafion polymer lag findes under laget enzym endogene anioniske stoffer.
Denne samme biosensor eksperimentel opsætning kan måle electroactive neurotransmittere som i FSCV, men i stedet den beskæftiger en fast-potential optagelse6. I modsætning til den oscillerende spænding i FSCV i en fast-potential optagelse holdes spændingen på redox potentiale for analysanden af interesse. Selv om det er mindre kemisk selektiv end FSCV som flere neurotransmittere kan have den samme redox potentiale, i områder i hjernen der overvældende vride i retning af en neurotransmitter, opvejer turn-key arten af denne tilgang manglen på kemiske specificitet.
Evnen til at måle både electroactive og nonelectroactive neurotransmitter frigivelse i nær real-time og knytte den til specifikke adfærdsmæssige begivenheder giver mulighed for at undersøge konvergerende neurotransmitter frigivelse. Dette manuskript detaljer brugen af dette system til at afhøre både dopamin og glutamat neurotransmission reaktion på naturlige belønning i vågen opfører hamstere. Formålet med dette papir er for detaljer processen at måle denne neurotransmitter frigivelse under seksuel adfærd hos kvindelige hamstere, med mål at demonstrere dens gennemførlighed for at undersøge andre adfærd og eksperimenterende paradigmer.
Hamstere er en ideel model for brug i elektrokemiske optagelser Historisk, har rotter og mus modeller været ansat i studiet af seksuel adfærd. Disse gnaver arter indgå i et dynamisk copulatory sekvens, der involverer mange kvindelige solicitation adfærd, der omfatter hopping, stod og øre wiggling for at lokke den mandlige at jage og i sidste ende montere den kvindelige7. Montering af mandlige (med eller uden vaginal penetration) varer kun et par sekunder, hvorunder kvindelige engagerer sig i sin seksuelle adfærd kropsholdning (betegnes lordosis) også kun i et par sekunder før du genoptager aktive solicitation adfærd. Dette mønster af adfærd, der består af høje niveauer af aktivitet afbrudt med korte perioder med immobilitet, er problematisk for måling neurotransmission i opfører dyr. Først, kan der være bevægelse artefakter i de amperometric optagelser, der er relateret til neurale aktivitet. For det andet er bevægelse forbundet med udgivelsen af særlige neurotransmittere i visse områder af hjernen. For eksempel, har dopamin frigivelse været koblet til bevægeapparatet aktivitet i dorsal og ventral striatum8,9, en konstatering, der dannede grundlag for mikrodalyse målinger af dopamin efter psykostimulanser administration10. Fordi de kvinde-typiske solicitation adfærd i most gnavere indebærer høje niveauer af bevægeapparatet aktivitet, og er repræsenteret af hovedparten af en 10 minutters seksuel adfærd test, det gør det vanskeligt at tillægge de eksplicitte komponenter af seksuel adfærd, der kollektivt vare kun ændringer i neurotransmission minutter.
For at analysere de neurokemiske profil af kvindelige seksuelle adfærd, opsøgte denne øvelse en art, hvor der er minimal bevægeapparatet aktivitet ledsager seksuel adfærd. Den copulatory sekvens i syriske hamstere (Mesocricetus auratus) er ideel til neurokemiske optagelser på grund af manglende solicitation adfærd ses typisk hos rotter og mus11. Som en konsekvens, vil kvindelige hamstere indtaste og vedligeholde lordosis kropsholdning for op til 9 minutter ud af 10 minutters test session12. Med manglen på uvedkommende bevægeapparatet bevægelser af den kvindelige, i vivo kan elektrokemiske optagelser, der kan være forbundet med komponenter af seksuelle interaktioner med mandlige opnås.
Copulatory anfald i hamstere Efter indførelsen af en mandlig stimulus dyr i test kammer, vil hannen i første omgang deltage i anogenitale undersøgelse (AI) af kvindelige før montering hendes (fig. 2A). For at den mandlige at montere, kvindelige må påtage sig en modtagelig seksuel kropsholdning kendt som lordosis, hvori hun buer ryggen og afbøjer sin hale, så at montering mand kan få penis adgang til hendes vagina. Hannen vil montere kvinde, knugede hende bagfjerdinger med begge poter (figur 2B), og begynde frådede i et forsøg på at få penis intromission (figur 2C). Hannen vil montere kvinde (uden indsættelse) samt intromit et antal gange før til sidst at opnå ejakulation. Denne sekvens af mounts og intromissions fører til sædafgang kaldes en "copulatory bout". Mænd vil have flere copulatory anfald inden for en enkelt session.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1339">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Nembutal</td>
			<td style="width:183px;">Oak Pharmaceuticals Inc.</td>
			<td style="width:323px;">76478-501-50</td>
			<td style="width:504px;">Pentobarbital sodium injection, USP. This lab uses 8.5mg/100g body weight, injected intraperotineally.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Loxicom analgesic&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Norbrook Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:323px;">6451603670</td>
			<td style="width:504px;">NSAID antinflammatory and analgesic used for post-operative pain control. Generic: meloxicam.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Enroflox antibiotic&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Norbrook Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:323px;">5552915411</td>
			<td style="width:504px;">Fluoroquinolone antibiotic for post-operative infection prevention. Generic: Enrofloxacin.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:329px;">Beuthanasia-D&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Merck Animal Health</td>
			<td style="width:323px;">00061047305</td>
			<td style="width:504px;">Pentobarbital Sodium, Phenytoin Sodium euthanasia agent.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bone screws</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>8111-16</td>
			<td style="width:504px;">1/8&#34; bone screw (Pkg. of 16) used to affix skull cap to skull.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Dental acrylic (Bosworth Duz-All)</td>
			<td>Bosworth&#160;</td>
			<td>166261C&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Self curing dental acrylic is used in construction of a skull cap to affix cannula and head mount to skull.</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Hardware biosensor setup&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>8400-K2</td>
			<td style="width:504px;">Pinnacle offers complete hardware kits for new users of our tethered biosensor system for rats. Kits include a commutator, preamplifier, and data conditioning and acquisition system</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">Base video computer package</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>9000-K1</td>
			<td style="width:504px;">The base computer package includes a preconfigured computer with ample hard disk storage, a high-definition monitor, a keyboard and mouse, an uninterruptible power supply, and all necessary cables.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">Video EQ700 EverFocus camera&#160; package</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>&#160;9000-K10&#160;</td>
			<td style="width:504px;">EQ700 night vision capable box camera with independent IR source was obtained as part of Pinnacle video computer package. Dome camera (9000-K9) and HD camera (9000-K11) options are also available.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;">Sirenia Acquisition software</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>Free--available to download from pinnaclet.com</td>
			<td style="width:504px;">Sirenia&#160;Acquisition provides a single platform for recording data from any Pinnacle hardware system. The software features synchronization of all data streams, user-configurable settings, data consolidation, and multiple export options. In addition, the software includes basic review and analysis modules for biosensor recordings. Sirenia&#160;delivers free ll-in-one software that is ideal for data acquisition and review.</td>
		</tr>
		<tr height="147">
			<td height="147" style="height:147px;">Tethered rat&#160;in vitro&#160;calibration kit</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7000-K2-T-BAS&#160;</td>
			<td style="width:504px;">In order to relate the current changes measured by a biosensor to actual changes in analyte concentration, it is necessary to calibrate the biosensor prior to implantation into the animal. The process also confirms the integrity and selectivity of the sensors.&#160;Calibration kit includes 20 mL jacketed beaker (#7058), 1/2&#34; by 1/8&#34; magnetic stir bar (#7059), right angle clamp (#7056), 2 prong single-adjustment clamp (#7055), 4-channel calibration preamplifer (#7053), and calibration holder (#7051).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Stir plate&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>6795-410D</td>
			<td style="width:504px;">Corning digital Stirrer, 5&#34; x 7&#34;, 120 VAC used to spin magnetic stirrer in jacketed beaker during in vitro calibration of glutamate biosensors.</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Water bath capable of closed loop circulation</td>
			<td>PolyScience</td>
			<td>8006A11B</td>
			<td style="width:504px;">PolyScience 8006A11B 6L Standard Digital Heated Circulating Bath, 120VAC water bath was used with plastic tubing to heat jacketed beaker to physiological temperature.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Carbon fiber sensor with BASi rat cannulae</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7002-CFS</td>
			<td style="width:504px;">Carbon fiber electrode used for recording dopamine neurotransmission.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ag/AgCl reference electrode</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7065</td>
			<td style="width:504px;">Necessary for carbon fiber recordings.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Glutamate biosensors&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7001&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Enzymatic biosensor probe used for recording glutamatergic neurotransmission.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BASi guide cannulae</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7030&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Guide cannulae implanted into brain region of interest to guide probe.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BASi cannula plastic headpiece for rats&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7011&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Headmount stabilizes probe and attaches to potentiostat.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters

Evnen til at måle neurotransmitter frigivelse på en hurtig tidsskala giver mønstre af neurotransmission at være knyttet til specifikke adfærd eller manipulationer; et kraftfuldt værktøj i belyse underliggende mekanismer og kredsløb. Mens teknikken med mikrodalyse har været anvendt i årtier til at måle næsten alle analysand af interesse i hjernen, er denne teknik begrænset i tidsmæssig opløsning. Alternativt, hurtig scanning cyklisk voltammetry er både tidsligt præcis og yderst følsomme; men fordi denne teknisk vanskeligt metode bygger på electroactivity af analysand af interesse, mulighed for at opdage nonelectroactive stoffer (fx, neurotransmitteren glutamat) er elimineret. Dette papir beskriver brugen af en turn-key system, der kombinerer fast potentiale amperometry og enzymatisk biosensing at måle både electroactive og nonelectroactive neurotransmittere med tidsmæssige præcision. Parring af disse to kraftfulde teknikker giver mulighed for måling af både tonic og phasic neurotransmission med relativ lethed, og giver mulighed for optagelse af flere neurotransmittere samtidigt. Formålet med dette manuskript er at demonstrere proces til måling dopamin og glutamat neurotransmission i vivo ved hjælp af et naturligt givende adfærd (dvs., seksuel adfærd) i kvindelige hamstere, med det endelige mål at vise den tekniske gennemførlighed af denne analyse for at undersøge andre adfærd og eksperimenterende paradigmer.

Ved hjælp af elektrokemiske og adfærdsmæssige kodning metode beskrevet ovenfor, begyndt denne lab at karakterisere både tonic og phasic udsving i både dopamin og glutamat under i vivo optagelser af seksuel adfærd. På grund af de tidsmæssigt præcise måde af denne metode, kan vi mere præcist beskrive neurotransmission under seksuel adfærd; samt tilskrive specifikke ændringer i version mønstre til tilsvarende tonic ændringer under parring anfald, og tilsvarende forbig...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Dette papir beskriver brugen af faste potentiale amperometric optagelser ved hjælp af kulfiber elektroder og enzymatiske biosensor teknologi til at måle frigivelsen af dopamin og glutamat med høj tidsmæssige opløsning under naturlige givende adfærd i den kvinde hamster.

Måling In Vivo ændringer i ekstracellulær neurotransmittere under naturligt belønne adfærd i kvindelige syriske hamstere

The ability to measure neurotransmitter release on a rapid time scale allows patterns of neurotransmission to be linked to specific behaviors or ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

Neurons communicate with other cells via axons and dendrites, slender membrane extensions that contain pre- or post-synaptic specializations. If a neuron ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograd fluorescensmærkning Tillader Målrettet Extracellular Single-unit Optagelse fra Identificerede Neuroner<em&gt; In vivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funktionel Neuroimaging Med Ultrasonic blod-hjerne barrieren forstyrrelser og mangan-forstærket MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dobbelte Elektrofysiologiske Optagelser af synaptisk-evoked astrogliale og Neuronal respons i Akut hippocampusskiver

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In vivo to-foton billedbehandling af oplevelsesbaseret afhængige molekylære ændringer i kortikal neuroner

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

Measuring Changes in Tactile Sensitivity in the Hind Paw of Mice Using an Electronic von Frey Apparatus

Måling Ændringer i taktil følsomhed i bagpoten af ​​mus bruger en elektronisk von Frey Apparatus

Measuring inflammation-induced changes in thresholds of hind paw withdrawal from mechanical pressure is a useful technique to assess changes in pain ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex vivo Tilberedninger af den intakte Vomeronasal orgel og tilbehør lugtekolben

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

En enkel og billig metode til bestemmelse Kolde Følsomhed og tilpasning i mus

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidige<em&gt; Ex vivo</em&gt; Functional Test af to nethinder af<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogrammet System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...