Name: measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters
Uploaded: 2017-09-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Forfatterne vil gjerne takke lavere Daniel Korus for hans hjelp kjører Matlab koden og lavere Alex Boettcher for hans hjelp i atferdsmessige eksperimenter som kjører. Prosjektet støttes av NSF IOS 1256799 til R.L.M., og ved National Institute on narkotikamisbruk av National Institutes of Health under prisen nummer T32DA007234.

alle prosedyrene som er beskrevet her ble godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk Committee (IACUC) av The University of Minnesota, og er i samsvar med The Guide og bruk av forsøksdyr 13 .
 1. dyr og Cannulation kirurgi <ol><li>motta syriske hamsters fra en vanlig dyr leverandør på ca 55 dager gammel. 
	Merk: Selv om en alder av dyr vil variere på grunn av begrensninger av ulike eksperimentelle paradigmer, for seksuell atferd er det viktig å få se...

<ol>
	<li>Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+brain+microdialysis.">Overview of brain microdialysis.</a> Curr Protoc Neurosci. , (2009).</li><li>Chaurasia, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAPS-FDA+Workshop+white+paper:+Microdialysis+principles,+application+and+regulatory+perspectives.">AAPS-FDA Workshop white paper: Microdialysis principles, application and regulatory perspectives.</a> Pharm Res. 24 (5), 1014-1025 (2007).</li><li>Lindsay, S., Kealey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> High performance liquid chromatography. , (1987).</li><li>Robinson, D. L., Venton, B. J., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+subsecond+dopamine+release+with+fast-scan+cyclic+voltammetry+in+vivo.">Detecting subsecond dopamine release with fast-scan cyclic voltammetry in vivo.</a> Clin Chem. 49 (10), 1763-1773 (2003).</li><li>Hu, Y., Mitchell, K. M., Albahadily, F. N., Michaelis, E. K., Wilson, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+measurement+of+glutamate+release+in+the+brain+using+a+dual+enzyme-based+electrochemical+sensor.">Direct measurement of glutamate release in the brain using a dual enzyme-based electrochemical sensor.</a> Brain Res. 659 (1-2), 117-125 (1994).</li><li>Agnesi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wireless+instantaneous+neurotransmitter+concentration+system-based+amperometric+detection+of+dopamine,+adenosine,+and+glutamate+for+intraoperative+neurochemical+monitoring.">Wireless instantaneous neurotransmitter concentration system-based amperometric detection of dopamine, adenosine, and glutamate for intraoperative neurochemical monitoring.</a> J Neurosurg. 111 (4), 701-711 (2009).</li><li>Erksine, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solicitation+behavior+in+the+estrous+female+rat:+A+review.">Solicitation behavior in the estrous female rat: A review.</a> Horm Beh. 23 (4), 473-502 (1989).</li><li>Weiner, I., Gal, G., Rawlins, J. N., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+involvement+of+the+shell+and+core+subterritories+of+the+nucleus+accumbens+in+latent+inhibition+and+amphetamine-induced+activity.">Differential involvement of the shell and core subterritories of the nucleus accumbens in latent inhibition and amphetamine-induced activity.</a> Behav Brain Res. 81 (1-2), 123-133 (1996).</li><li>Heidbreder, C., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine-induced+neurochemical+and+locomotor+responses+are+expressed+differentially+across+the+anteroposterior+axis+of+the+core+and+shell+subterritories+of+the+nucleus+accumbens.">Amphetamine-induced neurochemical and locomotor responses are expressed differentially across the anteroposterior axis of the core and shell subterritories of the nucleus accumbens.</a> Synapse. 29 (4), 310-322 (1998).</li><li>Pierce, R. C., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine+produces+sensitized+increases+in+locomotion+and+extracellular+dopamine+preferentially+in+the+nucleus+accumbens+shell+of+rats+administered+repeated+cocaine.">Amphetamine produces sensitized increases in locomotion and extracellular dopamine preferentially in the nucleus accumbens shell of rats administered repeated cocaine.</a> J Pharmacol Exp Ther. 275 (2), 1019-1029 (1995).</li><li>Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drive: Molecular and physiological analyses of a simple reproductive behavior. , (1999).</li><li>Carter, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postcopulatory+sexual+receptivity+in+the+female+hamster:+The+role+of+the+ovary+and+the+adrenal.">Postcopulatory sexual receptivity in the female hamster: The role of the ovary and the adrenal.</a> Horm Behav. 3 (3), 261-265 (1972).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. , (2011).</li><li>Meisel, R. L., Camp, D. M., Robinson, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microdialysis+study+of+ventral+striatal+dopamine+during+sexual+behavior+in+female+Syrian+hamsters.">A microdialysis study of ventral striatal dopamine during sexual behavior in female Syrian hamsters.</a> Beh Brain Res. 55 (2), 151-157 (1993).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 4 Channel EEG/EMG/Biosensor Manual V005. , (2012).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play-fighting+differs+from+serious+play+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rats+Rattus+norvegicus.">Play-fighting differs from serious play fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rats Rattus norvegicus.</a> Aggress Behav. 13 (3), 227-242 (1987).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+rates+of+attack,+defense+and+counterattack+during+the+developmental+decrease+in+play+fighting+by+male+and+female+rats.">Differential rates of attack, defense and counterattack during the developmental decrease in play fighting by male and female rats.</a> Dev Psychobiol. 23 (3), 215-231 (1990).</li><li>Pellis, S. M., Hastings, E., Shimizu, T., Kamitakahara, H., Komorowska, J., Forgie, M. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+non-playful+social+contexts.">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and non-playful social contexts.</a> Behav Neurosci. 120 (1), 72-84 (2006).</li><li>Wakabayashi, K. T., Kiyatkin, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+changes+in+extracellular+glutamate+induced+by+natural+arousing+stimuli+and+intravenous+cocaine+in+the+nucleus+accumbens+shell+and+core.">Rapid changes in extracellular glutamate induced by natural arousing stimuli and intravenous cocaine in the nucleus accumbens shell and core.</a> J Neurophysiol. 108 (1), 285-299 (2012).</li><li>Kapelsohn, K. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+for+cutting,+mounting,+and+staining+tissue+for+neural+histology.">Improved methods for cutting, mounting, and staining tissue for neural histology.</a> Protoc Exch. , (2015).</li><li>Siegel, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7:+Male+sexual+behavior.">Chapter 7: Male sexual behavior.</a> The Hamster: Reproduction and Behavior. , (1985).</li><li>Day, J. J., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nucleus+accumbens+and+pavlovian+reward+learning.">The nucleus accumbens and pavlovian reward learning.</a> Neuroscientist. 13 (2), 148-159 (2007).</li><li>Meisel, R. L., Mullins, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+experience+in+female+rodents:+Cellular+mechanisms+and+functional+consequences.">Sexual experience in female rodents: Cellular mechanisms and functional consequences.</a> Brain Res. 1126 (1), 56-65 (2006).</li><li>Meredith, G. E., Pennartz, C. M., Groenewegen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cellular+framework+for+chemical+signaling+in+the+nucleus+accumbens.">The cellular framework for chemical signaling in the nucleus accumbens.</a> Prog Brain Res. 99, 3-24 (1993).</li><li>Hedges, V. L., Staffend, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+mechanisms+of+reproduction+in+females+as+a+predisposing+factor+for+drug+addiction.">Neural mechanisms of reproduction in females as a predisposing factor for drug addiction.</a> Front Neuroendocrinol. 31 (2), 217-231 (2010).</li></ol>

Selv om det er relativt enkelt, kan noen problemer oppstå når ansette denne teknikken. Først stereotaxic plasseringen av sonder må være nøyaktig: i motsetning til microdialysis som en større radius av ekstracellulære miljøet rundt sonden, denne teknikken kan bare måling av en nevrotransmitter som kommer i direkte kontakt med sonde. Andre, i karbonfiber opptaket, på grunn av liten bredden av fiber, brudd kan oppstå, og proben må settes inn med bevisst omsorg. Ved glutamatergic biosensors, kan enzymatisk degra...

Muligheten til å måle nevrotransmitter utgivelse i våken oppfører dyr kan forskere koble spesifikk atferd med romlige og tidsmessige mønstre for neurotransmission-en kraftig verktøy for å undersøke mekanismer og krets underliggende både naturlige og operant atferd i sanntid. Historisk har microdialysis vært ansatt å måle både elektrisk reaktive og nonreactive stoffer i ekstracellulære miljøet av hjernen1. Denne teknikken bruker en kontinuerlig strøm av en vandig løsning av lignende ioniske sammensetning ekstracellulære væsken, gjennom en microdialysis sonde består av en liten aksel med tips av en semipermeable hul fiber membran2. Etter innsetting av sonden, nevrotransmittere eller andre analytter rundt kan krysse semipermeable membran med passiv diffusjon før samles i intervaller på påfølgende analyse av høy ytelse flytende kromatografi (HPLC), en analytisk kjemi teknikk vanligvis benyttes separate, identifisere og kvantifisere komponenter i en heterogen blanding3.
Selv om microdialysis er en følsom teknikk som kan brukes til å måle nesten alle analytt rundt, er timelige oppløsningen lave, med maksimal samplingsfrekvenser på minutter titalls minutter1,2. Oppfinnelsen av rask skanning sykliske voltammetry (FSCV), en teknikk som bruker redoks potensialet av electroactive Art, kan belyse nær øyeblikkelig konsentrasjoner av analytt rundt i ekstracellulære væske. I korte trekk (se Robinson et al. 4 for en omfattende gjennomgang), en elektrode brukes til å heve og senke spenningen i en trekantet bølge mote på raske tid skala4. Når spenningen er i riktig område, er sammensatt av interesse gjentatte ganger oksidert og redusert. Dette oksidering og reduksjon resulterer i en bevegelse av elektroner som skaper en liten vekselstrøm. Skanne priser finner sted på sub-sekunders skala med oksidering og reduksjon av forbindelser forekommer i mikrosekunder. Ved å trekke bakgrunnen gjeldende opprettet av sonden fra resulterende gjeldende, kan man generere en spenning vs gjeldende tomten unike for hver sammensatte. Siden tidsskalaen i spenning svingninger er kjent, kan disse dataene brukes til å beregne en tomt på gjeldende som en funksjon av tid. Dermed bestemmes relative konsentrasjonen av sammensatte antall elektroner overført i hver oksidering og reduksjon reaksjon er kjent4.
Denne kjemiske spesifisitet og tidsmessige høyoppløselig gjør FSCV en kraftig teknikk for å oppdage endrer kjemiske konsentrasjoner i vivo. Men til tross for disse mangfoldige fordelene krever denne teknikken omfattende tekniske ekspertise og dyrt utstyr og oppsett. Videre ikke kan nonelectroactive nevrotransmittere (f.eks, glutamat) måles ved hjelp av denne teknikken. Heldigvis teknologiske fremskritt innen elektrokjemi5, i tillegg til kommersialisering av disse oppfinnelser, har introdusert en relativt enkel tilnærming til å måle ikke-electroactive nevrotransmittere i våken oppfører dyr uten akkord timelige presisjon-en teknikk kjent som enzymatisk biosensor teknologi. Denne teknikken bruker enzymatisk konvertering av nonelectroactive nevrotransmitter rundt i to underlag, hvorav ett er electroactive hydrogenperoksid som gjenkjennes som en amperometric oksidasjon gjeldende generert av en anvendt potensial5 . Tilsvarede biosensor sonder måle (se figur 1) selektivt analytter rundt konkurransedyktig reduserer bidrag av endogene interferents. I tilfelle av glutamat reduseres bidrag av den felles interferent askorbinsyre (AA) konkurransedyktig til målt gjeldende co lokalisere AA oksidase på aktive enzymatisk overflaten av sensoren, konvertere AA til ikke-electroactive dihydroascorbate og vann. I tillegg ekskluderer et negativt ladde Nafion polymer lag tilstede under enzym laget endogene anionic forbindelser.
Denne samme biosensor eksperimentelle oppsett kan måle electroactive signalstoffer som FSCV, men i stedet den benytter en fast potensial opptak6. I motsetning til oscillerende spenningen brukt i FSCV, i en fast potensial innspilling holdes spenningen på av redoks potensial for analytt rundt. Selv om det er mindre kjemisk selektiv enn FSCV som flere nevrotransmittere kan ha den samme redoks potensial, i hjernen områder som overveldende skew mot en nevrotransmitter, oppveier nøkkelferdige natur denne tilnærmingen mangel på kjemisk spesifisitet.
Muligheten til å måle både electroactive og nonelectroactive nevrotransmitter utgivelse i nær sanntid og koble den til spesifikke atferdsmessige hendelser gir en mulighet til å undersøke konvergerende nevrotransmitter-løslate. Dette manuskriptet detaljer bruken av dette systemet kontrollerer både dopamin og glutamat neurotransmission svar på naturlige belønning i våken oppfører hamstere. Målet med denne utredningen er å detalj prosessen med måler denne nevrotransmitter-løslate under seksuell atferd i kvinnelige hamsters, med mål å demonstrere sin mulighetsstudie for å undersøke andre atferd og eksperimentelle paradigmer.
Hamsters er en ideell modell for bruk i elektrokjemiske innspillinger Historisk har rotte og mus modeller vært ansatt i studiet av seksuell atferd. Disse gnagerarter engasjere seg i en dynamisk copulatory rekkefølge, med mange kvinnelige oppfordring atferd som hopper, darting og øret wiggling å lokke mann jage og til slutt mount kvinnelige7. Montering av mannlige (med eller uten vaginal penetrasjon) varer bare noen få sekunder, hvor kvinnelige engasjerer i henne seksuell atferd holdning (kalt lordosis) også bare for et par sekunder før gjenoppta aktive oppfordring atferd. Dette mønsteret av atferd, består av høye nivåer av aktivitet ispedd korte perioder av ubevegelighet, er problematisk for å måle neurotransmission i oppføre dyr. Først, kan det være bevegelse gjenstander i amperometric opptak som er relatert til nevrale aktivitet. Andre er bevegelse knyttet til utgivelsen av bestemt nevrotransmittere i visse områder av hjernen. For eksempel har dopamin utgivelsen vært kombinert locomotor aktivitet i rygg- og ventrale striatum8,9, et funn som dannet grunnlaget for microdialysis målinger av dopamin etter psykostimulerende administrasjon10. Fordi den kvinnelige-typiske oppfordring atferd i most gnagere involverer høye nivåer av locomotor aktivitet, og representeres av mesteparten av en 10 minutters seksuell atferd, dette gjør det vanskelig å tilskrive endringer i neurotransmission til eksplisitt komponentene i seksuell oppførsel som kollektivt bare varer minutter.
Analysere nevrokjemiske profilen til kvinnelige seksuell atferd, oppsøkte denne lab Art der det er minimal locomotor aktivitet følger seksuell atferd. Den copulatory sekvensen i syrer hamsters (Mesocricetus auratus) er ideell for nevrokjemiske opptak skyldes mangel på oppfordring oppførsel vanligvis sett i rotter og mus11. Som en konsekvens, vil kvinnelige hamstere legge inn og vedlikeholde lordosis stilling i overkant minutter av en 10-minutters testing økt12. Med mangel på uvedkommende locomotor bevegelser av kvinner, i vivo fås elektrokjemiske innspillinger som kan knyttes til komponenter av seksuell interaksjon med mannlige.
Copulatory utbrudd i hamstere Etter innføringen av mannlige stimulans dyr i testing kammeret, vil mannlige utgangspunktet engasjere seg i anogenital undersøkelser (AI) av kvinnelige før montering hennes (figur 2A). For at den mannlige montere, må kvinnelige anta en lyttende seksuell holdning kalles lordosis, der hun buer hun tilbake og deflects henne hale slik at montering mannlige får penile tilgang til hennes vagina. Mannlige vil montere den kvinnelige, slår henne bakfjerding med begge to paws (figur 2B), og begynne stakk i et forsøk på å få penile intromission (figur 2C). Mannlige vil montere kvinnelige (uten innsettingspunkt) samt intromit flere ganger før slutt å oppnå utløsning. Denne aktivitetssekvensen monterer og intromissions fører til utløsning kalles "copulatory bout". Menn vil ha flere copulatory anfall innenfor en enkeltøkt.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1339">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Nembutal</td>
			<td style="width:183px;">Oak Pharmaceuticals Inc.</td>
			<td style="width:323px;">76478-501-50</td>
			<td style="width:504px;">Pentobarbital sodium injection, USP. This lab uses 8.5mg/100g body weight, injected intraperotineally.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Loxicom analgesic&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Norbrook Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:323px;">6451603670</td>
			<td style="width:504px;">NSAID antinflammatory and analgesic used for post-operative pain control. Generic: meloxicam.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Enroflox antibiotic&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Norbrook Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:323px;">5552915411</td>
			<td style="width:504px;">Fluoroquinolone antibiotic for post-operative infection prevention. Generic: Enrofloxacin.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:329px;">Beuthanasia-D&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Merck Animal Health</td>
			<td style="width:323px;">00061047305</td>
			<td style="width:504px;">Pentobarbital Sodium, Phenytoin Sodium euthanasia agent.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bone screws</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>8111-16</td>
			<td style="width:504px;">1/8&#34; bone screw (Pkg. of 16) used to affix skull cap to skull.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Dental acrylic (Bosworth Duz-All)</td>
			<td>Bosworth&#160;</td>
			<td>166261C&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Self curing dental acrylic is used in construction of a skull cap to affix cannula and head mount to skull.</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Hardware biosensor setup&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>8400-K2</td>
			<td style="width:504px;">Pinnacle offers complete hardware kits for new users of our tethered biosensor system for rats. Kits include a commutator, preamplifier, and data conditioning and acquisition system</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">Base video computer package</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>9000-K1</td>
			<td style="width:504px;">The base computer package includes a preconfigured computer with ample hard disk storage, a high-definition monitor, a keyboard and mouse, an uninterruptible power supply, and all necessary cables.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">Video EQ700 EverFocus camera&#160; package</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>&#160;9000-K10&#160;</td>
			<td style="width:504px;">EQ700 night vision capable box camera with independent IR source was obtained as part of Pinnacle video computer package. Dome camera (9000-K9) and HD camera (9000-K11) options are also available.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;">Sirenia Acquisition software</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>Free--available to download from pinnaclet.com</td>
			<td style="width:504px;">Sirenia&#160;Acquisition provides a single platform for recording data from any Pinnacle hardware system. The software features synchronization of all data streams, user-configurable settings, data consolidation, and multiple export options. In addition, the software includes basic review and analysis modules for biosensor recordings. Sirenia&#160;delivers free ll-in-one software that is ideal for data acquisition and review.</td>
		</tr>
		<tr height="147">
			<td height="147" style="height:147px;">Tethered rat&#160;in vitro&#160;calibration kit</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7000-K2-T-BAS&#160;</td>
			<td style="width:504px;">In order to relate the current changes measured by a biosensor to actual changes in analyte concentration, it is necessary to calibrate the biosensor prior to implantation into the animal. The process also confirms the integrity and selectivity of the sensors.&#160;Calibration kit includes 20 mL jacketed beaker (#7058), 1/2&#34; by 1/8&#34; magnetic stir bar (#7059), right angle clamp (#7056), 2 prong single-adjustment clamp (#7055), 4-channel calibration preamplifer (#7053), and calibration holder (#7051).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Stir plate&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>6795-410D</td>
			<td style="width:504px;">Corning digital Stirrer, 5&#34; x 7&#34;, 120 VAC used to spin magnetic stirrer in jacketed beaker during in vitro calibration of glutamate biosensors.</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Water bath capable of closed loop circulation</td>
			<td>PolyScience</td>
			<td>8006A11B</td>
			<td style="width:504px;">PolyScience 8006A11B 6L Standard Digital Heated Circulating Bath, 120VAC water bath was used with plastic tubing to heat jacketed beaker to physiological temperature.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Carbon fiber sensor with BASi rat cannulae</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7002-CFS</td>
			<td style="width:504px;">Carbon fiber electrode used for recording dopamine neurotransmission.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ag/AgCl reference electrode</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7065</td>
			<td style="width:504px;">Necessary for carbon fiber recordings.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Glutamate biosensors&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7001&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Enzymatic biosensor probe used for recording glutamatergic neurotransmission.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BASi guide cannulae</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7030&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Guide cannulae implanted into brain region of interest to guide probe.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BASi cannula plastic headpiece for rats&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7011&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Headmount stabilizes probe and attaches to potentiostat.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters

Muligheten til å måle nevrotransmitter utgivelse på en rask tidsskala kan mønstre av neurotransmission skal kobles til spesifikk atferd eller manipulasjoner; et kraftig verktøy i Klargjørende underliggende mekanismer og kretser. Mens teknikken av microdialysis har blitt brukt i flere tiår for å måle nesten alle analytt rundt i hjernen, er denne teknikken begrenset i midlertidig løsning. Alternativt, rask skanning syklisk voltammetry er både tidsmessig presis og ekstremt følsom; men fordi denne teknisk vanskelig metoden er avhengig av electroactivity av analytt rundt, er muligheten til å oppdage nonelectroactive stoffer (f.eks, signalstoffet glutamat) eliminert. Dette papiret viser bruk av en nøkkelferdig system som kombinerer fast potensial amperometry og enzymatiske biosensing å måle både electroactive og nonelectroactive nevrotransmittere med timelige presisjon. Sammenkoblingen av disse to kraftige teknikker kan for måling av både tonic og phasic neurotransmission med relativ letthet, og tillater registrering av flere nevrotransmittere samtidig. Målet med dette manuskriptet er å vise prosessen med måler dopamin og glutamat neurotransmission i vivo bruker en naturlig givende atferd (dvs., seksuell atferd) i kvinnelige hamsters, med det endelige mål å vise den teknisk gjennomførbarhet av denne analysen for å undersøke andre atferd og eksperimentelle paradigmer.

Bruker den elektrokjemiske og atferdsmessige koding metodikk beskrevet ovenfor, har dette laboratoriet begynt å karakterisere både tonic og phasic svingninger i både dopamin og glutamat under i vivo opptak av seksuell atferd. På grunn av tidsmessig presis måte av denne metoden, kan vi mer nøyaktig karakterisere neurotransmission under seksuell oppførsel; samt tillegge bestemte endringer i utgivelsen mønstre tilsvarende tonic endringer under parring utbrudd, og tilsvarende...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Dette papiret viser bruk av fast potensial amperometric opptak med karbonfiber elektroder og enzymatiske biosensor teknologi for å måle utgivelsen av dopamin og glutamat med timelige høyoppløselig under naturlige givende atferd i den kvinnelig hamster.

Måler i Vivo endringer i ekstracellulære nevrotransmittere under naturlig givende atferd i kvinnelige syrer Hamsters

The ability to measure neurotransmitter release on a rapid time scale allows patterns of neurotransmission to be linked to specific behaviors or ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

Neurons communicate with other cells via axons and dendrites, slender membrane extensions that contain pre- or post-synaptic specializations. If a neuron ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Merking Tillater målrettet Ekstracellulær Single-enhet Opptak fra Identifiserte Nerveceller<em&gt; In vivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funksjonell Bildediagnostiske Bruke Ultrasonic blod-hjerne barrieren avbrudd og mangan forbedret MR

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dual Elektrofysiologiske Opptak av Synaptically-fremkalt Astroglial og Neuronal Responses i akutt hippocampus Slices

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

I Vivo to-foton avbildning av erfaring-avhengige molekylære endringer i kortikale Neurons

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

Measuring Changes in Tactile Sensitivity in the Hind Paw of Mice Using an Electronic von Frey Apparatus

Measuring inflammation-induced changes in thresholds of hind paw withdrawal from mechanical pressure is a useful technique to assess changes in pain ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex vivo tilbe Intakt Vomeronasal orgel og tilbehør luktelappen

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

En enkel og rimelig metode for å bestemme Cold Følsomhet og Adaptation i Mus

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidig<em&gt; Ex vivo</em&gt; Funksjonell testing av to netthinne etter<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogrammet System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...