Name: measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters
Uploaded: 2017-09-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Författarna vill tacka Daniel Korus grundutbildning för hans hjälp köra Matlab kod och grundutbildning Alex Boettcher för hans hjälp i kör de beteendemässiga experiment. Detta projekt stöds av NSF IOS 1256799 till R.L.M., och av National Institute on Drug Abuse av det nationella Institutes of Health under Award nummer T32DA007234.

alla förfaranden beskrivs här godkändes av den institutionella djur vård och användning kommittén (IACUC) av The University of Minnesota, och i enlighet med The Guide för skötsel och användning av försöksdjur 13 .
 1. djur och kanylering kirurgi <ol><li>Hämta syriska hamstrar från en gemensam djur leverantör till cirka 55 dagar ålder. 
	Obs: Även om ålder på djur varierar på grund av begränsningar av olika experimentella paradigm för sexuel...

<ol>
	<li>Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+brain+microdialysis.">Overview of brain microdialysis.</a> Curr Protoc Neurosci. , (2009).</li><li>Chaurasia, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAPS-FDA+Workshop+white+paper:+Microdialysis+principles,+application+and+regulatory+perspectives.">AAPS-FDA Workshop white paper: Microdialysis principles, application and regulatory perspectives.</a> Pharm Res. 24 (5), 1014-1025 (2007).</li><li>Lindsay, S., Kealey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> High performance liquid chromatography. , (1987).</li><li>Robinson, D. L., Venton, B. J., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+subsecond+dopamine+release+with+fast-scan+cyclic+voltammetry+in+vivo.">Detecting subsecond dopamine release with fast-scan cyclic voltammetry in vivo.</a> Clin Chem. 49 (10), 1763-1773 (2003).</li><li>Hu, Y., Mitchell, K. M., Albahadily, F. N., Michaelis, E. K., Wilson, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+measurement+of+glutamate+release+in+the+brain+using+a+dual+enzyme-based+electrochemical+sensor.">Direct measurement of glutamate release in the brain using a dual enzyme-based electrochemical sensor.</a> Brain Res. 659 (1-2), 117-125 (1994).</li><li>Agnesi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wireless+instantaneous+neurotransmitter+concentration+system-based+amperometric+detection+of+dopamine,+adenosine,+and+glutamate+for+intraoperative+neurochemical+monitoring.">Wireless instantaneous neurotransmitter concentration system-based amperometric detection of dopamine, adenosine, and glutamate for intraoperative neurochemical monitoring.</a> J Neurosurg. 111 (4), 701-711 (2009).</li><li>Erksine, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solicitation+behavior+in+the+estrous+female+rat:+A+review.">Solicitation behavior in the estrous female rat: A review.</a> Horm Beh. 23 (4), 473-502 (1989).</li><li>Weiner, I., Gal, G., Rawlins, J. N., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+involvement+of+the+shell+and+core+subterritories+of+the+nucleus+accumbens+in+latent+inhibition+and+amphetamine-induced+activity.">Differential involvement of the shell and core subterritories of the nucleus accumbens in latent inhibition and amphetamine-induced activity.</a> Behav Brain Res. 81 (1-2), 123-133 (1996).</li><li>Heidbreder, C., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine-induced+neurochemical+and+locomotor+responses+are+expressed+differentially+across+the+anteroposterior+axis+of+the+core+and+shell+subterritories+of+the+nucleus+accumbens.">Amphetamine-induced neurochemical and locomotor responses are expressed differentially across the anteroposterior axis of the core and shell subterritories of the nucleus accumbens.</a> Synapse. 29 (4), 310-322 (1998).</li><li>Pierce, R. C., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine+produces+sensitized+increases+in+locomotion+and+extracellular+dopamine+preferentially+in+the+nucleus+accumbens+shell+of+rats+administered+repeated+cocaine.">Amphetamine produces sensitized increases in locomotion and extracellular dopamine preferentially in the nucleus accumbens shell of rats administered repeated cocaine.</a> J Pharmacol Exp Ther. 275 (2), 1019-1029 (1995).</li><li>Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drive: Molecular and physiological analyses of a simple reproductive behavior. , (1999).</li><li>Carter, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postcopulatory+sexual+receptivity+in+the+female+hamster:+The+role+of+the+ovary+and+the+adrenal.">Postcopulatory sexual receptivity in the female hamster: The role of the ovary and the adrenal.</a> Horm Behav. 3 (3), 261-265 (1972).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. , (2011).</li><li>Meisel, R. L., Camp, D. M., Robinson, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microdialysis+study+of+ventral+striatal+dopamine+during+sexual+behavior+in+female+Syrian+hamsters.">A microdialysis study of ventral striatal dopamine during sexual behavior in female Syrian hamsters.</a> Beh Brain Res. 55 (2), 151-157 (1993).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 4 Channel EEG/EMG/Biosensor Manual V005. , (2012).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play-fighting+differs+from+serious+play+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rats+Rattus+norvegicus.">Play-fighting differs from serious play fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rats Rattus norvegicus.</a> Aggress Behav. 13 (3), 227-242 (1987).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+rates+of+attack,+defense+and+counterattack+during+the+developmental+decrease+in+play+fighting+by+male+and+female+rats.">Differential rates of attack, defense and counterattack during the developmental decrease in play fighting by male and female rats.</a> Dev Psychobiol. 23 (3), 215-231 (1990).</li><li>Pellis, S. M., Hastings, E., Shimizu, T., Kamitakahara, H., Komorowska, J., Forgie, M. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+non-playful+social+contexts.">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and non-playful social contexts.</a> Behav Neurosci. 120 (1), 72-84 (2006).</li><li>Wakabayashi, K. T., Kiyatkin, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+changes+in+extracellular+glutamate+induced+by+natural+arousing+stimuli+and+intravenous+cocaine+in+the+nucleus+accumbens+shell+and+core.">Rapid changes in extracellular glutamate induced by natural arousing stimuli and intravenous cocaine in the nucleus accumbens shell and core.</a> J Neurophysiol. 108 (1), 285-299 (2012).</li><li>Kapelsohn, K. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+for+cutting,+mounting,+and+staining+tissue+for+neural+histology.">Improved methods for cutting, mounting, and staining tissue for neural histology.</a> Protoc Exch. , (2015).</li><li>Siegel, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7:+Male+sexual+behavior.">Chapter 7: Male sexual behavior.</a> The Hamster: Reproduction and Behavior. , (1985).</li><li>Day, J. J., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nucleus+accumbens+and+pavlovian+reward+learning.">The nucleus accumbens and pavlovian reward learning.</a> Neuroscientist. 13 (2), 148-159 (2007).</li><li>Meisel, R. L., Mullins, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+experience+in+female+rodents:+Cellular+mechanisms+and+functional+consequences.">Sexual experience in female rodents: Cellular mechanisms and functional consequences.</a> Brain Res. 1126 (1), 56-65 (2006).</li><li>Meredith, G. E., Pennartz, C. M., Groenewegen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cellular+framework+for+chemical+signaling+in+the+nucleus+accumbens.">The cellular framework for chemical signaling in the nucleus accumbens.</a> Prog Brain Res. 99, 3-24 (1993).</li><li>Hedges, V. L., Staffend, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+mechanisms+of+reproduction+in+females+as+a+predisposing+factor+for+drug+addiction.">Neural mechanisms of reproduction in females as a predisposing factor for drug addiction.</a> Front Neuroendocrinol. 31 (2), 217-231 (2010).</li></ol>

Även om det är relativt enkelt, kan vissa problem uppstå när sysselsätter denna teknik. Första stereotaxic placeringen av sonderna måste vara exakt: till skillnad från mikrodialys som prover en större radie av den extracellulära miljön kring sonden, denna teknik endast tillåter mätning av en signalsubstans som kommer i direkt kontakt med sond. Andra när det gäller kolfiber inspelningen, på grund av små bredden av fiber, brott kan uppstå, och sonden måste införas med avsiktlig omsorg. När det gäller ...

Förmågan att mäta neurotransmitterfrigöraren i vaken beter sig djur tillåter forskare att koppla specifika beteenden med rumsliga och tidsmässiga mönster av neurotransmission-ett kraftfullt verktyg för att undersöka mekanismer och kretsar underliggande både naturliga och operant beteenden i realtid. Mikrodialys har historiskt sett varit anställd att mäta både elektriskt reaktiva och reaktiva ämnen i den extracellulära miljön av hjärnan1. Denna teknik använder ett kontinuerligt flöde av en vattenlösning av liknande Joniska sammansättning till den extracellulära vätskan, genom en mikrodialys sonden består av en liten axel med en spets av en semipermeable ihålig fiber membran2. Efter införande av sonden, neurotransmittorer eller andra analyter kan korsa semipermeable membranet genom passiv diffusion innan samlas mellanrum för efterföljande analys av högpresterande vätskekromatografi (HPLC), en Analytisk kemi teknik som ofta används för att separera, identifiera och kvantifiera komponenter i en heterogen blandning3.
Även om mikrodialys är en känslig teknik som kan användas för att mäta valfri analyten sevärdheter, är den temporal upplösningen låg, med maximal samplingsfrekvens storleksordningen minuter till tiotals minuter1,2. Uppfinningen av snabb scan cyklisk voltametri (FSCV), en teknik som bygger på redoxpotential elektroaktiva arter, kan belysa nära momentana koncentrationer av analyten av intresse i den extracellulära vätskan. I korthet (se Robinson et al. 4 för en omfattande översyn), en elektrod används för att höja och sänka spänningen i en triangulär våg mode på en snabb tid skala4. När spänningen är i rätt intervall, sammansatta av intresse upprepade gånger oxideras och reduceras. Denna oxidation och reduktion resulterar i en rörelse av elektroner som skapar en liten växelström. Skanna priser äga rum på under en sekund skala med oxidation och reduktion av föreningar som förekommer i mikrosekunder. Genom att subtrahera bakgrunden nuvarande skapad av sonden från den resulterande nuvarande, kan man generera en spänning vs. aktuella handlingen unik till varje förening. Eftersom tidsskalan för spänning svängningarna är känt, kan uppgifterna användas för att beräkna en tomt på nuvarande som funktion av tiden. De relativa koncentrationerna av substansen kan således bestämmas så länge som antalet elektroner överförs i varje oxidation och reduktionsreaktion kallas4.
Denna kemiska specificitet och hög temporal upplösning gör FSCV en kraftfull teknik för att upptäcka kemiska koncentrationer i vivoförändras. Men trots dessa grenrör fördelar kräver denna teknik omfattande teknisk kompetens och dyr utrustning och installation. Vidare kan inte nonelectroactive signalsubstanser (t.ex., glutamat) mätas med denna teknik. Lyckligtvis, tekniska framstegen i fältet i elektrokemi5, liksom kommersialisering av dessa uppfinningar, har infört en relativt enkel metod att mäta icke-elektroaktiva signalsubstanser i vaken beter sig djur utan att kompromissa med tidsmässiga precision-en teknik som kallas enzymatisk biosensor teknik. Denna teknik använder enzymatisk omvandling av nonelectroactive signalsubstansen sevärdheter till två substrat, varav en är elektroaktiva väteperoxid som identifieras som en amperometrisk oxidation nuvarande genereras av en tillämpad potential5 . Kommersiellt tillgängliga biosensor sonder mäta (se figur 1) selektivt analyter konkurrenskraftigt minska bidraget av endogena interferents. Glutamat, är bidrag till den gemensamma interferens askorbinsyra (AA) konkurrenskraftigt sänkas till den uppmätta nuvarande med samtidig lokalisera AA oxidas på sensorn, konvertera AA till icke-elektroaktiva aktiva enzymatisk yta dihydroascorbate och vatten. Dessutom utesluter ett negativt laddade Nafion polymerskikt närvarande under enzym lager endogen anjon föreningar.
Detta samma biosensor experimentella inställning kan mäta elektroaktiva signalsubstanser som i FSCV, men i stället det sysselsätter en fast-potential inspelning6. I motsats till den oscillerande spänning tillämpas i FSCV, i en fast-potential inspelning hålls spänningen redox potential för analyten sevärdheter. Även om det är mindre kemiskt selektiv än FSCV eftersom flera signalsubstanser kan ha samma redox potential, i hjärnområden som överväldigande skevar mot en signalsubstans, uppväger nyckelfärdiga arten av detta tillvägagångssätt avsaknaden av kemiska specificitet.
Möjligheten att mäta både elektroaktiva och nonelectroactive neurotransmitterfrigöraren i nära realtid och länka till specifika beteendemässiga händelser ger en möjlighet att undersöka konvergerande neurotransmitterfrigöraren. Detta manuskript Detaljer användningen av detta system att förhöra både dopamin och glutamat neurotransmission svar på naturlig belöning i vaken beter sig hamstrar. Syftet med denna uppsats är att beskriva processen med att mäta denna neurotransmitterfrigöraren under sexuellt beteende i kvinnliga hamstrar, med målet att påvisa dess genomförbarhet för att pröva andra beteenden och experimentella paradigm.
Hamstrar är en idealmodell för användning i elektrokemiska recordings Råttor och möss-modeller har historiskt sett varit anställd i studien av sexuellt beteende. Dessa gnagare engagera sig i en dynamisk copulatory sekvens, som involverar många kvinnliga värvning beteenden som inkluderar hopping, rusa, och örat vickar för att locka hanen att jaga och slutligen montera den kvinnliga7. Montering av hanen (med eller utan vaginal penetration) varar bara några sekunder, under vilken honan bedriver sin sexuella beteende hållning (kallas Lordos) också endast för några sekunder innan återuppta aktivt värvningsförsök beteenden. Detta mönster av beteende, sammansatt av hög aktivitet varvat med korta perioder av orörlighet, är problematiskt för att mäta neurotransmission i beter sig djur. För det första kan det finnas rörelse artefakter i amperometrisk inspelningar som är orelaterade till neural aktivitet. Andra är locomotion associerade med frisättningen av vissa signalsubstanser i vissa regioner av hjärnan. Till exempel har frisättning av dopamin varit kopplad till rörelseaktivitet i rygg- och ventrala striatum8,9, ett konstaterande som utgjorde grunden för mikrodialys mätningar av dopamin efter psykostimulantia administration10. Eftersom de kvinnliga-typiska värvning beteenden i most gnagare involverar höga nivåer av rörelseaktivitet, och representeras av huvuddelen av ett test med 10 minuters i sexuellt beteende, detta gör det svårt att tillskriva explicit komponenterna i sexuellt beteende som kollektivt senaste endast förändringar i neurotransmission minuter.
För att analysera den neurokemiska profilen av kvinnliga sexuella beteende, denna lab uppsökt en art där det finns minimal rörelseaktivitet åtföljer sexuellt beteende. Copulatory sekvensen i syriska hamstrar (Mesocricetus auratus) är idealisk för neurokemiska inspelningar på grund av värvning beteenden typiskt sett råttor och möss11. Följaktligen kommer kvinnliga hamstrar ange och underhålla Lordos kroppshållning för uppemot 9 minuter ur 10 minuters test session12. Med bristen på ovidkommande rörelseapparaten rörelser av den kvinnliga, i vivo kan elektrokemiska inspelningar som kan förknippas med komponenter av sexuella interaktioner med hanen erhållas.
Copulatory skjutningarna i hamstrar Efter införandet av en manlig stimulans djur in i testing kammaren, kommer hanen inledningsvis delta i anogenital undersökning (AI) av honan innan montering hennes (figur 2A). För män att montera, måste honan anta en mottaglig sexuella hållning kallas Lordos, där hon bågar ryggen och avleder sin svans så att montering hanen kan få penis tillgång till hennes vagina. Hanen kommer att montera honan, knäpper fast hennes bakkvartsparter med båda tassar (figur 2B), och börja stötande i ett försök att vinna penis tillträde (figur 2C). Hanen kommer att montera kvinnligt (utan insättning) samt intromit ett antal gånger innan att så småningom uppnå utlösning. Denna sekvens av fästen och intromissioner leder till utlösning kallas en ”copulatory släng”. Män kommer att ha flera copulatory anfall inom en enda session.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1339">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Nembutal</td>
			<td style="width:183px;">Oak Pharmaceuticals Inc.</td>
			<td style="width:323px;">76478-501-50</td>
			<td style="width:504px;">Pentobarbital sodium injection, USP. This lab uses 8.5mg/100g body weight, injected intraperotineally.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Loxicom analgesic&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Norbrook Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:323px;">6451603670</td>
			<td style="width:504px;">NSAID antinflammatory and analgesic used for post-operative pain control. Generic: meloxicam.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:329px;">Enroflox antibiotic&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Norbrook Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:323px;">5552915411</td>
			<td style="width:504px;">Fluoroquinolone antibiotic for post-operative infection prevention. Generic: Enrofloxacin.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:329px;">Beuthanasia-D&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Merck Animal Health</td>
			<td style="width:323px;">00061047305</td>
			<td style="width:504px;">Pentobarbital Sodium, Phenytoin Sodium euthanasia agent.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bone screws</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>8111-16</td>
			<td style="width:504px;">1/8&#34; bone screw (Pkg. of 16) used to affix skull cap to skull.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Dental acrylic (Bosworth Duz-All)</td>
			<td>Bosworth&#160;</td>
			<td>166261C&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Self curing dental acrylic is used in construction of a skull cap to affix cannula and head mount to skull.</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Hardware biosensor setup&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>8400-K2</td>
			<td style="width:504px;">Pinnacle offers complete hardware kits for new users of our tethered biosensor system for rats. Kits include a commutator, preamplifier, and data conditioning and acquisition system</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">Base video computer package</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>9000-K1</td>
			<td style="width:504px;">The base computer package includes a preconfigured computer with ample hard disk storage, a high-definition monitor, a keyboard and mouse, an uninterruptible power supply, and all necessary cables.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">Video EQ700 EverFocus camera&#160; package</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>&#160;9000-K10&#160;</td>
			<td style="width:504px;">EQ700 night vision capable box camera with independent IR source was obtained as part of Pinnacle video computer package. Dome camera (9000-K9) and HD camera (9000-K11) options are also available.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;">Sirenia Acquisition software</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>Free--available to download from pinnaclet.com</td>
			<td style="width:504px;">Sirenia&#160;Acquisition provides a single platform for recording data from any Pinnacle hardware system. The software features synchronization of all data streams, user-configurable settings, data consolidation, and multiple export options. In addition, the software includes basic review and analysis modules for biosensor recordings. Sirenia&#160;delivers free ll-in-one software that is ideal for data acquisition and review.</td>
		</tr>
		<tr height="147">
			<td height="147" style="height:147px;">Tethered rat&#160;in vitro&#160;calibration kit</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7000-K2-T-BAS&#160;</td>
			<td style="width:504px;">In order to relate the current changes measured by a biosensor to actual changes in analyte concentration, it is necessary to calibrate the biosensor prior to implantation into the animal. The process also confirms the integrity and selectivity of the sensors.&#160;Calibration kit includes 20 mL jacketed beaker (#7058), 1/2&#34; by 1/8&#34; magnetic stir bar (#7059), right angle clamp (#7056), 2 prong single-adjustment clamp (#7055), 4-channel calibration preamplifer (#7053), and calibration holder (#7051).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Stir plate&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>6795-410D</td>
			<td style="width:504px;">Corning digital Stirrer, 5&#34; x 7&#34;, 120 VAC used to spin magnetic stirrer in jacketed beaker during in vitro calibration of glutamate biosensors.</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Water bath capable of closed loop circulation</td>
			<td>PolyScience</td>
			<td>8006A11B</td>
			<td style="width:504px;">PolyScience 8006A11B 6L Standard Digital Heated Circulating Bath, 120VAC water bath was used with plastic tubing to heat jacketed beaker to physiological temperature.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Carbon fiber sensor with BASi rat cannulae</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7002-CFS</td>
			<td style="width:504px;">Carbon fiber electrode used for recording dopamine neurotransmission.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ag/AgCl reference electrode</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7065</td>
			<td style="width:504px;">Necessary for carbon fiber recordings.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Glutamate biosensors&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technology, Inc.</td>
			<td>7001&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Enzymatic biosensor probe used for recording glutamatergic neurotransmission.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BASi guide cannulae</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7030&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Guide cannulae implanted into brain region of interest to guide probe.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BASi cannula plastic headpiece for rats&#160;</td>
			<td>Pinnacle Technologies, Inc.</td>
			<td>7011&#160;</td>
			<td style="width:504px;">Headmount stabilizes probe and attaches to potentiostat.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters

Förmågan att mäta neurotransmitterfrigöraren på en snabb tidsskala tillåter mönster av neurotransmission kopplas till specifika beteenden eller manipulationer; ett kraftfullt verktyg i belysa underliggande mekanismer och kretsar. Medan tekniken med mikrodialys har använts i årtionden för att mäta nästan varje analyt sevärdheter i hjärnan, är denna teknik begränsad i temporal upplösning. Alternativt, snabb scan cyklisk voltametri är både temporally precisa och extremt känslig; eftersom denna tekniskt svår metod förlitar sig på electroactivity av analyten sevärdheter, elimineras dock möjlighet att upptäcka nonelectroactive ämnen (t.ex., signalsubstansen glutamat). Detta dokument beskriver användning av en turn-key system som kombinerar fast-potential amperometry och enzymatiska biosensing att mäta både elektroaktiva och nonelectroactive signalsubstanser med tidsmässiga precision. Hopkoppling av dessa två kraftfulla tekniker möjliggör mätning av både tonic och phasic neurotransmission med relativ lätthet, och tillåter inspelning av flera signalsubstanser samtidigt. Syftet med detta manuskript är att Visa processen att mäta dopamin och glutamat neurotransmission i vivo med ett naturligt givande beteende (dvs, sexuellt beteende) i kvinnliga hamstrar, med slutmålet att visa den teknisk genomförbarhet av denna analys för att undersöka andra beteenden och experimentella paradigm.

Med hjälp av elektrokemiska och beteendemässiga kodning metoder som beskrivs ovan, har denna lab börjat att karakterisera både tonic och phasic fluktuationer i både dopamin och glutamat under i vivo inspelningar av sexuellt beteende. På grund av det temporally-exakt sättet av denna metod, kan vi mer noggrant karakterisera neurotransmission under sexuellt beteende; samt specifika förändringar i release mönster tillskriver under parning anfall, och motsvarande övergåend...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Detta dokument beskriver användningen av fast-potential amperometrisk inspelningar med kolfiber elektroder och enzymatisk biosensor teknik för att mäta frisättningen av dopamin och glutamat med hög temporal upplösning under naturliga givande beteende i den kvinnliga hamster.

Mäta In Vivo förändringar i extracellulär signalsubstanser under naturligt belönande beteenden i kvinnliga syriska hamstrar

The ability to measure neurotransmitter release on a rapid time scale allows patterns of neurotransmission to be linked to specific behaviors or ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfektion av Mouse retinal ganglion celler genom att In vivo Elektroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

In vivo Laser Axotomy i C. elegans

Neurons communicate with other cells via axons and dendrites, slender membrane extensions that contain pre- or post-synaptic specializations. If a neuron ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Bakåtsträvande Fluorescerande märkning Tillåter Riktade Extracellular Single-enhet Inspelning från identifierade nervceller<em&gt; In vivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funktionell hjärnavbildning med ultraljud Blod-hjärnbarriären störningar och mangan-förstärkt MRT

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dubbla Elektrofysiologiska Inspelningar av synaptiskt-framkallade astrogliala och neuronala svar i akut hippocampus skivor

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In vivo Två-foton avbildning av erfarenhet beroende molekylära förändringar i kortikala neuron

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

Measuring Changes in Tactile Sensitivity in the Hind Paw of Mice Using an Electronic von Frey Apparatus

Att mäta förändringar i Taktil känslighet i baktassen av möss med en elektronisk von Frey Apparatus

Measuring inflammation-induced changes in thresholds of hind paw withdrawal from mechanical pressure is a useful technique to assess changes in pain ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex vivo Beredningar av den Intakt vomeronasala orgel och tillbehör luktbulben

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

En enkel och billig metod för bestämning Cold Känslighet och anpassning hos möss

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidig<em&gt; Ex vivo</em&gt; Funktionstest av två näthinnor efter<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...