Name: three-dimensional reconstruction of the vascular architecture of the passive clarity-cleared mouse ovary
Uploaded: 2017-12-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Reconstruction of the Vascular Architecture of the Passive CLARITY-cleared Mouse Ovary at JoVE.com

وأيد هذه الدراسة من المنح المقدمة من "الصندوق الخاص الصيني" عن Postdocs (رقم 2014T70392 إلى يلافن)، مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية (رقم 81673766 إلى يلافن) والصندوق فتيلة المعلم الجديد، زوزو مؤسسة جامعة فودان، وتطوير المشروع الذروة شانغهاي التكاملية تخصصات الطب (20150407).

جميع الإجراءات التي تنطوي على الموضوعات الحيوان يتبع المبادئ التوجيهية "اللجنة الأخلاقيات الحيوان" في شانغهاي كلية الطب، جامعة فودان (الموافقة على رقم 20160225-013).
1-إعداد الماوس شفافة المبيض
<ol><li>
إعداد الحلول
	<ol>
<li>تحضير المحلول الملحي مخزنة الفوسفات (PBS) الحل (1 م، در...

<ol>
	<li>Brown, H. M., Russell, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+and+lymphatic+vasculature+in+the+ovary:+development,+function+and+disease.">Blood and lymphatic vasculature in the ovary: development, function and disease.</a> Hum Reprod Update. 20 (1), 29-39 (2014).</li><li>McFee, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+signal+transduction+blocks+follicle+progression+but+does+not+necessarily+disrupt+vascular+development+in+perinatal+rat+ovaries.">Inhibition of vascular endothelial growth factor receptor signal transduction blocks follicle progression but does not necessarily disrupt vascular development in perinatal rat ovaries.</a> Biol Reprod. 81 (5), 966-977 (2009).</li><li>Coveney, D., Cool, J., Oliver, T., Capel, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Four-dimensional+analysis+of+vascularization+during+primary+development+of+an+organ,+the+gonad.">Four-dimensional analysis of vascularization during primary development of an organ, the gonad.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (20), 7212-7217 (2008).</li><li>Tomer, R., Ye, L., Hsueh, B., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+CLARITY+for+rapid+and+high-resolution+imaging+of+intact+tissues.">Advanced CLARITY for rapid and high-resolution imaging of intact tissues.</a> Nat Protoc. 9 (7), 1682-1697 (2014).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+Open+Source+platform+for+biological+image+analysis.">Fiji: an Open Source platform for biological image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li><li>Cao, G., Fehrenbach, M. L., Williams, J. T., Finklestein, J. M., Zhu, J. X., Delisser, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+in+platelet+endothelial+cell+adhesion+molecule-1-null+mice.">Angiogenesis in platelet endothelial cell adhesion molecule-1-null mice.</a> Am J Pathol. 175 (2), 903-915 (2009).</li><li>Manni, L., Holm&#228;ng, A., Lundeberg, T., Aloe, L., Stener-Victorin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+expression+of+alpha+(1)-+and+beta+(2)-adrenoceptors+and+p75+neurotrophin+receptors+in+rats+with+steroid-induced+polycystic+ovaries.">Ovarian expression of alpha (1)- and beta (2)-adrenoceptors and p75 neurotrophin receptors in rats with steroid-induced polycystic ovaries.</a> Auton Neurosci. 118 (1 - 2), 79-87 (2005).</li><li>Chourasia, T. K., Chaube, R., Singh, V., Joy, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Annual+and+periovulatory+changes+in+tyrosine+hydroxylase+activity+in+the+ovary+of+the+catfish+Heteropneustes+fossilis.">Annual and periovulatory changes in tyrosine hydroxylase activity in the ovary of the catfish Heteropneustes fossilis.</a> Gen Comp Endocrinol. 166 (1), 111-116 (2010).</li><li>Feng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CLARITY+reveals+dynamics+of+ovarian+follicular+architecture+and+vasculature+in+three-dimensions.">CLARITY reveals dynamics of ovarian follicular architecture and vasculature in three-dimensions.</a> Sci Rep. 7, 44810 (2017).</li><li>Tainaka, K., Kuno, A., Kubota, S. I., Murakami, T., Ueda, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+principles+in+tissue+clearing+and+staining+protocols+for+whole-body+cell+profiling.">Chemical principles in tissue clearing and staining protocols for whole-body cell profiling.</a> Annu Rev Cell Dev Biol. 32, 713-741 (2016).</li><li>Liang, H., Schofield, E., Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Serotonergic+Fibers+in+the+Mouse+Spinal+Cord+Using+the+CLARITY/CUBIC+Technique.">Imaging Serotonergic Fibers in the Mouse Spinal Cord Using the CLARITY/CUBIC Technique.</a> J Vis Exp. (108), e53673 (2016).</li><li>Yang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+phenotyping+within+transparent+intact+tissue+through+whole-body+clearing.">Single-cell phenotyping within transparent intact tissue through whole-body clearing.</a> Cell. 158 (4), 945-958 (2014).</li><li>Phillips, J., Laude, A., Lightowlers, R., Morris, C. M., Turnbull, D. M., Lax, N. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+passive+CLARITY+and+immunofluorescent+labelling+of+multiple+proteins+in+human+cerebellum:+understanding+mechanisms+of+neurodegeneration+in+mitochondrial+disease.">Development of passive CLARITY and immunofluorescent labelling of multiple proteins in human cerebellum: understanding mechanisms of neurodegeneration in mitochondrial disease.</a> Sci Rep. 6, 26013 (2016).</li><li>Roberts, D. G., Johnsonbaugh, H. B., Spence, R. D., MacKenzie-Graham, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+clearing+of+the+mouse+central+nervous+system+using+passive+CLARITY.">Optical clearing of the mouse central nervous system using passive CLARITY.</a> J Vis Exp. (112), (2016).</li><li>Woo, J., Lee, M., Seo, J. M., Park, H. S., Cho, Y. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+the+optical+transparency+of+rodent+tissues+by+modified+PACT-based+passive+clearing.">Optimization of the optical transparency of rodent tissues by modified PACT-based passive clearing.</a> Exp Mol Med. 48 (12), e274 (2016).</li><li>Chung, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+molecular+interrogation+of+intact+biological+systems.">Structural and molecular interrogation of intact biological systems.</a> Nature. 497 (7449), 332-337 (2013).</li><li>Chung, A. S., Ferrara, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+and+pathological+angiogenesis.">Developmental and pathological angiogenesis.</a> Annu Rev Cell Dev Biol. 27, 563-584 (2011).</li><li>Rodgers, R. J., Irving-Rodgers, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+the+ovarian+follicular+antrum+and+follicular+fluid.">Formation of the ovarian follicular antrum and follicular fluid.</a> Biol Reprod. 82 (6), 1021-1029 (2010).</li><li>Siu, M. K. Y., Cheng, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+blood-follicle+barrier+(BFB)+in+disease+and+in+ovarian+function.">The blood-follicle barrier (BFB) in disease and in ovarian function.</a> Adv Exp Med Biol. 763, 186-192 (2014).</li><li>Dodt, H. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultramicroscopy:+three-dimensional+visualization+of+neuronal+networks+in+the+whole+mouse+brain.">Ultramicroscopy: three-dimensional visualization of neuronal networks in the whole mouse brain.</a> Nat Methods. 4, 331-336 (2007).</li><li>Hama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scale:+a+chemical+approach+for+fluorescence+imaging+and+reconstruction+of+transparent+mouse+brain.">Scale: a chemical approach for fluorescence imaging and reconstruction of transparent mouse brain.</a> Nat Neurosci. 14, 1481-1488 (2011).</li><li>Erturk, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+imaging+of+solvent-cleared+organs+using+3DISCO.">Three-dimensional imaging of solvent-cleared organs using 3DISCO.</a> Nat Protoc. 7, 1983-1995 (2012).</li><li>Kuwajima, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clear(T):+a+detergent-+and+solvent-free+clearing+method+for+neuronal+and+non-neuronal+tissue.">Clear(T): a detergent- and solvent-free clearing method for neuronal and non-neuronal tissue.</a> Development. 140, 1364-1368 (2013).</li><li>Ke, M. T., Fujimoto, S., Imai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SeeDB:+a+simple+and+morphology-preserving+optical+clearing+agent+for+neuronal+circuit+reconstruction.">SeeDB: a simple and morphology-preserving optical clearing agent for neuronal circuit reconstruction.</a> Nat Neurosci. 16, 1154-1161 (2013).</li><li>Lai, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rationalisation+and+validation+of+an+acrylamide-free+procedure+in+three-dimensional+histological+imaging.">Rationalisation and validation of an acrylamide-free procedure in three-dimensional histological imaging.</a> PLOS ONE. 11, e0158628 (2016).</li><li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-brain+imaging+with+single-cell+resolution+using+chemical+cocktails+and+computational+analysis.">Whole-brain imaging with single-cell resolution using chemical cocktails and computational analysis.</a> Cell. 157, 726-739 (2014).</li><li>Tainaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+imaging+with+single-cell+resolution+by+tissue+decolorization.">Whole-body imaging with single-cell resolution by tissue decolorization.</a> Cell. 159, 911-924 (2014).</li><li>Liu, A. K. L., Lai, H. M., Chang, R. C. C., Gentleman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free-of-acrylamide+SDS-based+tissue+clearing+(FASTClear):+A+novel+protocol+of+tissue+clearing+for+three-dimensional+visualisation+of+human+brain+tissues.">Free-of-acrylamide SDS-based tissue clearing (FASTClear): A novel protocol of tissue clearing for three-dimensional visualisation of human brain tissues.</a> Neuropathol Appl Neurobiol. 43, 346-351 (2016).</li><li>Xu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+free-of-acrylamide+clearing+tissue+(FACT)-an+optimized+new+protocol+for+rapid,+high-resolution+imaging+of+three-dimensional+brain+tissue.">Fast free-of-acrylamide clearing tissue (FACT)-an optimized new protocol for rapid, high-resolution imaging of three-dimensional brain tissue.</a> Sci Rep. 7, 9895 (2017).</li><li>Migone, F. F., Cowan, R. G., Williams, R. M., Gorse, K. J., Zipfel, W. R., Quirk, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+reveals+an+essential+role+of+vasoconstriction+in+rupture+of+the+ovarian+follicle+at+ovulation.">In vivo imaging reveals an essential role of vasoconstriction in rupture of the ovarian follicle at ovulation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 113, 2294-2299 (2016).</li><li>Malki, S., Tharp, M. E., Bortvin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+whole-mount+approach+for+accurate+quantitative+and+spatial+assessment+of+fetal+oocyte+dynamics+in+mice.">A whole-mount approach for accurate quantitative and spatial assessment of fetal oocyte dynamics in mice.</a> Biol Reprod. 93 (113), (2015).</li></ol>

في الدراسة الحالية، ونحن نقدم 3D التصوير لتقييم العلاقات بين الشعيرات الدموية والمسام تنامي الفردية. في أعمالنا السابقة باستخدام البروتوكول نفسه 9، قمنا بدراسة أدوار المفرج الكبيرة، والتفاعلات بين المسام، وموقع المسام في المبايض سليمة الماوس. النهج الوضوح السلبي الذي سمح لن...

المسام هي الوحدة الأساسية الهيكلية والوظيفية المبيض، وتطويره عالية تتصل المفرج داخل المبيض. توفير التغذية والهرمونات للمسام الأوعية الدموية وهكذا تلعب أدواراً هامة في نمو ونضج المسام1.
مزيج من التكنولوجيات، بما في ذلك علامات الأوعية الدموية انتقائية ونماذج الماوس المعدلة وراثيا وتطوير الأدوية، ازدادت معرفتنا حول المبيض شبكات الأوعية الدموية والأوعية، ووظيفة الأوعية الدموية في فوليكولوجينيسيس. ومن المعروف المبيض جهازا نشطاً نظراً لأنه يعيد تشكيل مختلف شبكات الأوعية الدموية والأنسجة أثناء فوليكولوجينيسيس والاباضه. هذا يعيد البناء النشطة في حجم وهيكل السفن المطلوب للوظيفة البيولوجية لتطوير وتوظيف المسام.
الأساليب التقليدية في غذائها وهيستومورفوميتريك باستخدام المقاطع المبيض وإيمونولابيلينج من الأوعية الدموية تقتصر على صور ثنائية الأبعاد (2D)2. مع تطوير تكنولوجيات إعادة الإعمار (3D) ثلاثي الأبعاد، يمكن أن تتداخل الصور 2D لشرائح الأنسجة جعل هيكل ثلاثي الأبعاد، ولكن هذا الأسلوب لا يزال لديها بعض القيود – تقطيع الأنسجة يمكن أن تدمر المجهرية، بعض أجزاء الأنسجة غالباً ما تكون مفقودة، وعمالة كبيرة وتشارك في إجراء عمليات إعادة البناء ثلاثي الأبعاد من الصور التي تم الحصول عليها من الشرائح. كل الأنسجة التصوير ثلاثي الأبعاد مع الفحص المجهري [كنفوكل] يمكن التغلب على كثير من هذه القيود، ولكن هذه الأساليب محدودة في تقييم الأوعية في المبيض الجنينية3. يمكن استخدام أنسجة كله تطهير الطرق مثل الوضوح4 زيادة حجم تصور لحل هذه المشاكل في المبيضين بعد الولادة والكبار، ومثل هذه الأساليب تقديم موافقة الضوئية المبيض دون أي تشوهات هيكلية. تصوير بنية ثلاثية الأبعاد من المبيض سليمة توفر قاعدة بيانات صورة دقيقة للبرنامج تحليل الصور، مثل مجموعة إيماريس من البرامج المستخدمة في هذا العمل.
إعادة عرض المبيض طوال مرحلة البلوغ جزء من نظام ديناميكي الفسيولوجية، وهذا يجعل المبيض نموذجا ممتازا لإجراء تحقيقات في تنظيم الأوعية. وعلاوة على ذلك، يمكن دراسة تقييم دور المبيض الأوعية الدموية في ظروف مرضية من الجهاز التناسلي الإناث مثل متلازمة تكيس المبيض أو سرطان المبيض عن طريق تصوير أنسجة المبيض كله. تطوير أسلوب الوضوح السلبي واستعمال برمجيات تحليل الصور المتقدمة قدمت المعلومات المكانية المفصلة عن العلاقات بين هياكل المبيض مثل المسام والأوعية الدموية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1664">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Acrylamide</td>
			<td style="width:189px;">Vetec</td>
			<td style="width:127px;">v900845</td>
			<td style="width:861px;">http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/vetec/v900845</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Alexa Flour 488 (Dilution 1:50)&#160;</td>
			<td style="width:189px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:127px;">A11039</td>
			<td style="width:861px;">https://www.thermofisher.com/antibody/product/Goat-anti-Chicken-IgY-H-L-Secondary-Antibody-Polyclonal/A-11039</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Alexa Flour 594 (Dilution 1:50)</td>
			<td style="width:189px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:127px;">A11012</td>
			<td style="width:861px;">https://www.thermofisher.com/antibody/product/Goat-anti-Rabbit-IgG-H-L-Cross-Adsorbed-Secondary-Antibody-Polyclonal/A-11012</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Bisacrylamide</td>
			<td style="width:189px;">Amresco</td>
			<td style="width:127px;">172</td>
			<td style="width:861px;">http://www.amresco-inc.com/BIS-ACRYLAMIDE-0172.cmsx</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Black wall glass bottom dish (Willco-Dish)</td>
			<td style="width:189px;">Ted Pella</td>
			<td style="width:127px;">14032</td>
			<td style="width:861px;">http://www.tedpella.com/section_html/706dish.htm#black_wall</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Boric acid</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">10004818</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=10004818</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:487px;">Disodium hydrogen phosphate dodecahydrate (Na2HPO4 12H2O)</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">10020318</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=10020318</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">FocusClear</td>
			<td style="width:189px;">Celexplorer</td>
			<td style="width:127px;">FC-102</td>
			<td style="width:861px;">http://www.celexplorer.com/product_list.asp?MainType=107&#38;BRDarea=1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Parafilm</td>
			<td style="width:189px;">Bemis</td>
			<td style="width:127px;">PM996</td>
			<td style="width:861px;">http://www.parafilm.com/products</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">80096618</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=80096618</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">PECAM1/CD31, platelet-endothelial cell adhesion molecule 1 (Dilution 1:10)</td>
			<td style="width:189px;">Abcam</td>
			<td style="width:127px;">ab28364</td>
			<td style="width:861px;">http://www.abcam.com/cd31-antibody-ab28364.html</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Photoinitiator VA044</td>
			<td style="width:189px;">Wako</td>
			<td style="width:127px;">va-044/225-02111</td>
			<td style="width:861px;">http://www.wako-chem.co.jp/specialty/waterazo/VA-044.htm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Sodium azide</td>
			<td style="width:189px;">Sigma</td>
			<td style="width:127px;">S2002</td>
			<td style="width:861px;">http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/s2002?lang=en&#38;region=US</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">10019318</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=10019318</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:487px;">Sodium dihydrogen phosphate dihydrate (NaH2PO4 2H2O)</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">20040718</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=20040718</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Sodium dodecyl sulfate</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">30166428</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=30166428</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">10019718</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=10019718</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:487px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:189px;">Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td style="width:127px;">30188928</td>
			<td style="width:861px;">http://en.reagent.com.cn/enshowproduct.jsp?id=30188928</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:487px;">Tyrosine hydroxylase (TH, Dilution 1:50)</td>
			<td style="width:189px;">Abcam</td>
			<td style="width:127px;">ab76442</td>
			<td style="width:861px;">http://www.abcam.com/tyrosine-hydroxylase-phospho-s40-antibody-ab51206.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three-dimensional reconstruction of the vascular architecture of the passive clarity-cleared mouse ovary

المبيض هو الجهاز الرئيسي للجهاز التناسلي الإناث، وهو أمر أساسي لإنتاج الأمشاج الإناث ومراقبة النظام الغدد الصماء، ولكن العلاقات الهيكلية المعقدة وأبنية المفرج ثلاثي الأبعاد (3D) المبيض ليست وصفاً جيدا. من أجل تصور اتصالات ثلاثية الأبعاد والهندسة المعمارية من الأوعية الدموية في المبيض سليمة، الخطوة الهامة الأولى جعل المبيض واضح بصريا. تفاديا لانكماش الأنسجة، استخدمنا المائية الوضوح السلبي القائم على التثبيت (مسح الدهن-وتبادل جامدة تهجين الاكريلاميد "المائية الأنسجة" التصوير/إيمونوستينينج/في الموقع-التهجين-متوافق مع) البروتوكول طريقة لمسح مبيض سليمة . ثم استخدمت Immunostaining ومتقدمة مولتيفوتون المجهري [كنفوكل]، والصورة ثلاثية الأبعاد-عمليات إعادة البناء للتصور من سفن المبيض وجرابي الشعيرات الدموية. باستخدام هذا النهج، واظهرنا ارتباط إيجابي كبير (ف < 0.01) بين طول الشعيرات الدموية جرابي وحجم الجدار الحبيبي.

علينا تكييف أسلوب الوضوح السلبي إلى طريقة سريعة وبسيطة المبيض الخامل المقاصة مع الحفاظ على الهيكل الحبيبي والأوعية الدموية والحصول على إشارة الفلورية أعلى من علامات المسمى السفن والمسام. هندسة 3D المفرج جرابي تحددها إيمونوستينينج ل CD31، علامة لخلايا بطانية6...

Watch this Scientific Journal Video about Three-dimensional Reconstruction of the Vascular Architecture of the Passive CLARITY-cleared Mouse Ovary at JoVE.com

Three-dimensional Reconstruction of the Vascular Architecture of the Passive CLARITY-cleared Mouse Ovary

نقدم هنا لتكيف من الوضوح السلبي وأسلوب إعادة البناء ثلاثي الأبعاد للتصور المفرج المبيض وجرابي الشعيرات الدموية في المبايض سليمة الماوس.

إعادة البناء ثلاثي الأبعاد بنية الأوعية الدموية المبيض الماوس مسح الوضوح السلبي

The ovary is the main organ of the female reproductive system and is essential for the production of female gametes and for controlling the endocrine ...

Research

JoVE Journal

Biology

Microfabrication of Chip-sized Scaffolds for Three-dimensional Cell cultivation

التصنيع الدقيق للرقاقة الحجم السقالات لزراعة الخلايا ثلاثي الأبعاد

Using microfabrication technologies is a prerequisite to create scaffolds of reproducible geometry and constant quality for three-dimensional cell ...

Hi-C: A Method to Study the Three-dimensional Architecture of Genomes.

مرحبا - C : طريقة لدراسة الهندسة المعمارية ثلاثي الأبعاد للخريطة جينوم.

The three-dimensional folding of chromosomes compartmentalizes the genome and and can bring distant functional elements, such as promoters and enhancers, ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

جيل من الفئران المستمدة من الخلايا الجذعية المحفزة المستحثة

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

An Analytical Tool that Quantifies Cellular Morphology Changes from Three-dimensional Fluorescence Images

أداة تحليلية يحدد مقدار التغييرات الخلوية الصرف من التقاط صور ثلاثية الأبعاد الإسفار

The most common software analysis tools available for measuring fluorescence images are for two-dimensional (2D) data that rely on manual settings for ...

Using High Resolution Computed Tomography to Visualize the Three Dimensional Structure and Function of Plant Vasculature

باستخدام التصوير المقطعي عالي الدقة لتصور البنية الثلاثية وظيفة الأوعية الدموية النباتية

High resolution x-ray computed tomography (HRCT) is a non-destructive diagnostic imaging technique with sub-micron resolution capability that is now being ...

Slide Preparation Method to Preserve Three-dimensional Chromatin Architecture of Testicular Germ Cells

طريقة إعداد الشرائح للحفاظ على هندسة الكروماتين ثلاثية الأبعاد للخلايا الجرثومية الخصية

During testicular germ cell differentiation, the structure of nuclear chromatin dynamically changes. The following describes a method designed to preserve ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

العزلة والثقافة الابتدائية من خلايا الفأر الأورطي غشائي

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

عزل الفئران التاجي الأوعية الدموية خلايا العضلات الملساء

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

FRET Imaging in Three-dimensional Hydrogels

الحنق التصوير في الهلاميات المائية ثلاثية الأبعاد

Imaging of F&#246;rster resonance energy transfer (FRET)&#160;is a powerful tool for examining cell biology in real-time. Studies utilizing FRET commonly ...

Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue

أديبو--واضحة: منديل مسح طريقة لتصوير ثلاثي الأبعاد للأنسجة الدهنية

Adipose tissue plays a central role in energy homeostasis and thermoregulation. It is composed of different types of adipocytes, as well as adipocyte ...