Name: synthesis of infectious bacteriophages in an e. coli-based cell-free expression system
Uploaded: 2017-08-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System at JoVE.com

هذه المواد يستند إلى العمل المدعوم من "مكتب البحوث البحرية" جائزة الرقم N00014-13-1-0074 (ف. ن)، "برنامج العلوم الحدود البشرية" منح رقم RGP0037/2015 (ف. ن)، و "مؤسسة العلوم ثنائية" تمنح 2014400 (ف. ن).

ملاحظة: الخطوات التالية التضخيم وطريقة استخراج قابلة للتعميم إلى حد كبير للعديد من بالعاثية الحمض النووي المزدوج-الذين تقطعت بهم السبل، مثل عاثية T7, enterobacteria بالعاثية T4 أو enterobacteria بالعاثية λ (L). وهي تستخدم أساسا بالعاثية الجينوم التي ليست متاحة بسهولة للشراء من مصادر تجارية-
<p class="jo...

<ol>
	<li>Carlson, E. D., Gan, R., Hodgman, C. E., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+protein+synthesis:+Applications+come+of+age.">Cell-free protein synthesis: Applications come of age.</a> Biotechnol Adv. , (2011).</li><li>Hodgman, C. E., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+synthetic+biology:+Thinking+outside+the+cell.">Cell-free synthetic biology: Thinking outside the cell.</a> Metab Eng. , (2011).</li><li>Caschera, F., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+2.3+mg/mL+of+protein+with+an+all+Escherichia+coli+cell-free+transcription-translation+system.">Synthesis of 2.3 mg/mL of protein with an all Escherichia coli cell-free transcription-translation system.</a> Biochimie. 99, 162-168 (2014).</li><li>Shin, J., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+E.+coli+cell-free+expression+toolbox:+application+to+synthetic+gene+circuits+and+artificial+cells.">An E. coli cell-free expression toolbox: application to synthetic gene circuits and artificial cells.</a> ACS Synth Biol. 1 (1), 29-41 (2012).</li><li>Chemla, Y., Ozer, E., Schlesinger, O., Noireaux, V., Alfonta, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+expanded+cell-free+protein+synthesis+using+endogenous+pyrrolysyl+orthogonal+translation+system.">Genetically expanded cell-free protein synthesis using endogenous pyrrolysyl orthogonal translation system.</a> Biotechnol Bioeng. , (2015).</li><li>Hong, S. H., Kwon, Y. C., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-standard+amino+acid+incorporation+into+proteins+using+Escherichia+coli+cell-free+protein+synthesis.">Non-standard amino acid incorporation into proteins using Escherichia coli cell-free protein synthesis.</a> Frontiers in Chemistry. 2, (2014).</li><li>Noireaux, V., Bar-Ziv, R., Libchaber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+cell-free+genetic+circuit+assembly.">Principles of cell-free genetic circuit assembly.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (22), 12672-12677 (2003).</li><li>Sun, Z. Z., Yeung, E., Hayes, C. A., Noireaux, V., Murray, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linear+DNA+for+Rapid+Prototyping+of+Synthetic+Biological+Circuits+in+an+Escherichia+coli+Based+TX-TL+Cell-Free+System.">Linear DNA for Rapid Prototyping of Synthetic Biological Circuits in an Escherichia coli Based TX-TL Cell-Free System.</a> Acs Synthetic Biology. 3 (6), 387-397 (2014).</li><li>Takahashi, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+and+prototyping+genetic+networks+with+cell-free+transcription-translation+reactions.">Characterizing and prototyping genetic networks with cell-free transcription-translation reactions.</a> Methods. , (2015).</li><li>Shin, J., Jardine, P., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+Replication,+Synthesis,+and+Assembly+of+the+Bacteriophage+T7+in+a+Single+Cell-Free+Reaction.">Genome Replication, Synthesis, and Assembly of the Bacteriophage T7 in a Single Cell-Free Reaction.</a> ACS Synthetic Biology. 1 (9), 408-413 (2012).</li><li>Garamella, J., Marshall, R., Rustad, M., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+All+E.+coli+TX-TL+Toolbox+2.0:+A+Platform+for+Cell-Free+Synthetic+Biology.">The All E. coli TX-TL Toolbox 2.0: A Platform for Cell-Free Synthetic Biology.</a> ACS Synth Biol. , (2016).</li><li>Karzbrun, E., Shin, J., Bar-Ziv, R. H., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coarse-grained+dynamics+of+protein+synthesis+in+a+cell-free+system.">Coarse-grained dynamics of protein synthesis in a cell-free system.</a> Phys Rev Lett. 106 (4), 048104 (2011).</li><li>Daube, S. S., Arad, T., Bar-Ziv, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+co-synthesis+of+protein+nanoassemblies:+tubes,+rings,+and+doughnuts.">Cell-free co-synthesis of protein nanoassemblies: tubes, rings, and doughnuts.</a> Nano Lett. 7 (3), 638-641 (2007).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+immunoblot+assay+reveals+that+bacteriophage+T4+thymidylate+synthase+and+dihydrofolate+reductase+are+not+virion+proteins.">An immunoblot assay reveals that bacteriophage T4 thymidylate synthase and dihydrofolate reductase are not virion proteins.</a> J Virol. 69 (4), 2119-2125 (1995).</li><li>Sun, Z. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocols+for+implementing+an+Escherichia+coli+based+TX-TL+cell-free+expression+system+for+synthetic+biology.">Protocols for implementing an Escherichia coli based TX-TL cell-free expression system for synthetic biology.</a> J Vis Exp. (79), e50762 (2013).</li><li>Shin, J. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+cell-free+expression+with+the+endogenous+E.+coli+RNA+polymerase+and+sigma+factor+70.">Efficient cell-free expression with the endogenous E. coli RNA polymerase and sigma factor 70.</a> J Biol Eng. , (2010).</li><li>Caschera, F., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+amino+acid+mixtures+for+cell-free+expression+systems.">Preparation of amino acid mixtures for cell-free expression systems.</a> Biotechniques. 58 (1), 40-43 (2015).</li><li>Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+can+biochemical+reactions+within+cells+differ+from+those+in+test+tubes.">How can biochemical reactions within cells differ from those in test tubes.</a> J Cell Sci. 119, 2863-2869 (2006).</li><li>Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+macromolecular+crowding+for+protein+assembly.">Implications of macromolecular crowding for protein assembly.</a> Curr Opin Struct Biol. 10 (1), 34-39 (2000).</li><li>Zimmerman, S. B., Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macromolecular+crowding:+biochemical,+biophysical,+and+physiological+consequences.">Macromolecular crowding: biochemical, biophysical, and physiological consequences.</a> Annu Rev Biophys Biomol Struct. 22, 27-65 (1993).</li></ol>

اتباع هذا الأسلوب في تشن, et al. 14 للشركة، هو التوصل إلى خطوة حاسمة عند تحديد الشروط المناسبة لعدوى إضافية. المعلمة التي يتحكم أوثق سلالة المضيف القدرة على الصمود في وجه عدوى إضافية هي كثيرا ما تركيز بالعاثية إصابة الأولية. يجب أن تكون الخلايا المضيفة في مرحلة النمو لوغاريت?...

على مدى العقد الماضي، قد تم تصميم تكنولوجيا الخلية الحرة التعبير بعنوان تطبيقات جديدة في بحوث متعددة التخصصات الناشئة مجالات البيولوجيا المتصلة الاصطناعية والكمية. المستخدمة في الأصل للتعبير عن البروتينات مستقلة عن كائن حي، وضعت نظم تكستل خالية من خلية جديدة لكل العلوم الأساسية والتطبيقية1،2، توسيع نطاق هذه التكنولوجيا إلى حد كبير. تم تصميم الجيل الجديد من منصات تكستل لتكون سهلة الاستعمال، أكثر كفاءة (تصل إلى 2 ملغ/مل البروتين في الوضع الدفعي3)، أكثر تنوعاً على مستوى النسخ4، ووحدات ذلك لأن الاندماج بسهولة في الرواية الطبيعية أو الوظائف التركيبية التي توسيع قدرات النظم البيولوجية الموجودة5،6. على وجه الخصوص، أصبحت خالية من خلية نظم تكستل مفيد للنماذج الأولية السريعة للبرامج الوراثية، مثل العناصر التنظيمية أو الدوائر الصغيرة الوراثية7،،من89، بتقليل التصميم-البناء-الاختبار دورة لبضعة أيام. بشكل ملحوظ، نظم تكستل الجديدة أيضا قادرة على تجهيز البرامج الحمض النووي الكبيرة مثل التوليف كاملة من كوليفاجيس10،11، إثبات قوية الأداء ما يكفي لدعم إعادة تشكيل نشط الجينوم الحمض النووي ترميز الكيانات الحية.
نظم تكستل يقدم العديد من المزايا التقنية مقارنة بالتقليدية في المختبر فحوصات الكيمياء الحيوية البناءة. الخلية الحرة تكستل يربط عملية التعبير الجيني للمنتج النهائي في بيئة مفتوحة وانخفاض، بدلاً من السيتوبلازم تعقيداً من خلية حية. تكستل يستخدم الحمض النووي لإعادة بناء النظم البيوكيميائية في المختبر، مع التقنيات الحديثة من الجمعية الحمض النووي، وأسعار معقولة وسريعة بالإضافة إلى لا تتطلب خطوات تنقية البروتين نيقة. الخلية الحرة التعبير يوفر الوصول المباشر إلى معظم العناصر في التفاعلات الكيميائية الحيوية، وبالتالي السماح تشريح أعمق من التفاعلات الجزيئية12. في رد فعل تكستل، أحد تغيير إعدادات البيوكيميائية والفيزيائية في الإرادة، ويكاد يكون مستحيلاً في خلية حية. ونظرا لهذه المزايا والتحسينات الأخيرة، تكستل التكنولوجيا أصبحت أكثر وأكثر شعبية كمنصة بديلة للبيولوجيا التركيبية والكمية. بينما الأوساط البحثية باستخدام تكستل تنمو بسرعة وأصبحت تكستل تقنية قياسية في الهندسة الحيوية، من الضروري لفهم كيفية استخدام هذه المنصات لتطوير الممارسات الملائمة ذات الصلة بتنفيذ تكستل ردود فعل وإلى تفسير للنتائج.
في هذه المقالة، نحن تصف كيفية استخدام نظام تكستل كولاي جميع توليف، في وعاء واحد من ردود الفعل، باكتيريوفاجيس من على الجينوم11، مثل MS2 (الجيش الملكي النيبالي، 3.4 كيلو بايت)، ΦΧ174 (سدنا، 5.4 كيلو بايت)، و T7 (دسدنا، 40 كيلو بايت). علينا إظهار كيفية توليفها مبلغ فاجيس تغييرات فيما يتعلق ببعض الإعدادات البيوكيميائية من ردود الفعل (تركيزات المغنيسيوم والبوتاسيوم). مزاحمة الجزيئية، محاكاة عن طريق تركيزات تتراوح من شماعة 8000، له تأثير كبير على توليف بالعاثية على عدة أوامر من ضخامة. تحقيق مثل هذه النظم البيوكيميائية الكبيرة في أنبوب اختبار واحد ردود الفعل أن الخص في الوقت نفسه عمليات النسخ، الترجمة، والتجميع الذاتي، من المثير للاهتمام لمعالجة المسائل الأساسية المتعلقة بعلم الأحياء والفيزياء الحيوية 10 (تنظيم الجينات، التجميع الذاتي)، فضلا عن تطوير التطبيقات، مثل repurposing بالعاثية مهام بناء جديد النانو13. بالإضافة إلى عملي في تكستل، نحن نقدم أساليب التضخيم بالعاثية الجينوم استخراج وتنقية والكمي بالعاثية بمقايسة اللوحة. الأساليب التي عرضت في هذه المخطوطة المناسبة للباحثين الذين يستخدمون نظم خالية من الخلية على أساس استخراج كولاي ومهتمون ب bacteriophages.
البروتوكولات المقدمة في هذا العمل يمكن تلخيصها كما يلي: 1) بالعاثية التضخيم (يوم 1: إعداد تلقيح الخلايا، يوم 2: واحد البلاك ومتعددة بالعاثية النمو، والتركيز، ويوم 3: تنقية بالعاثية)، 2) استخراج الحمض النووي الجينوم مزدوج-الذين تقطعت بهم السبل (الفينول/كلوروفورم الاستخراج)، و 3) رد فعل بالعاثية خالية من الخلية والتجربة عيار (1 يوم: لوحة الخلايا المضيفة وجعل لوحات أجار، يوم 2: رد فعل الخلية الحرة والمضيف الخلية 3 الثقافة السابقة، واليوم: عيار الثقافة وبالعاثيه الخلية المضيفة).

<table width="899">
	<colgroup>
		<col style="width:162pt" width="216" />
		<col style="width:168pt" width="224" />
		<col style="width:219pt" width="292" />
		<col style="width:125pt" width="167" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="width:162pt;height:15.75pt" width="216">Ultracentrifugation tubes</td>
			<td class="xl21" style="width:168pt" width="224">Beckman Coulter</td>
			<td class="xl21" style="width:219pt" width="292">344057</td>
			<td class="xl20" style="width:125pt" width="167"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Conical tubes</td>
			<td class="xl22" style="width:168pt" width="224">Falcon</td>
			<td class="xl21">352070</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Gradient maker</td>
			<td class="xl21">BioComp Gradient Master</td>
			<td class="xl22" style="width:219pt" width="292">see Anal Biochem. 1985 Jul;148(1):254-9.</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Syringe and Blunt Cannula</td>
			<td class="xl21">Monoject</td>
			<td class="xl21">8881513918 and 888202017</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Wide-bore pipette tips</td>
			<td class="xl21">Fischerbrand</td>
			<td class="xl21">02-707-134</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Plaque counter</td>
			<td class="xl21">New Brunswik Scientific</td>
			<td class="xl21">Colony Counter Model C-110</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Culture tubes</td>
			<td class="xl22" style="width:168pt" width="224">Fischerbrand</td>
			<td class="xl21">14-961-33</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Cell-free system</td>
			<td class="xl22" style="width:168pt" width="224">Mycroarray Inc</td>
			<td class="xl22" style="width:219pt" width="292">Mytxtl</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:162pt;height:15.75pt" width="216">BioComp Gradient Master</td>
			<td class="xl17" style="width:168pt" width="224">BioComp Instruments</td>
			<td class="xl17" style="width:219pt" width="292">Model 105ME</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:162pt;height:15.75pt" width="216">LB agar plate recipe</td>
			<td class="xl20"></td>
			<td class="xl20"></td>
			<td class="xl24" style="width:512pt" width="683">25 g/L Luria-Bertani medium (LB Broth, Miller - Fisher BioReagents product number BP1426) and 15 g/L Bacto-Agar solid (Brenton, Dickenson and Company - product number 214010).</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of infectious bacteriophages in an e. coli-based cell-free expression system

جيل جديد من نظم خالية من الخلية النسخ الترجمة (تكستل)، إجراء هندسة عكسية لبراعة أكبر ونمطية، توفير قدرات جديدة لأداء العلوم الأساسية والتطبيقية في أنبوب اختبار ردود الفعل. على مدى العقد الماضي، أصبحت خالية من الخلية تكستل تقنية قوية لمجموعة واسعة من البحوث المتعددة التخصصات رواية مجالات البيولوجيا المتعلقة بالكمية والاصطناعية. منصات تكستل جديدة مفيدة بشكل خاص لبناء واستجواب نظم الكيمياء الحيوية من خلال تنفيذ الدوائر الجينات الطبيعية أو الاصطناعية. في المختبر تكستل ثبت مريحة لسرعة النموذج العناصر التنظيمية والشبكات البيولوجية، وكذلك فيما يتعلق بالخص الجزيئية التجميع الذاتي الآليات الموجودة في النظم الحية. في هذه المقالة، يصف لنا كيف المعدية bacteriophages، مثل MS2 (الرنا)، ΦΧ174 (سدنا)، و T7 (dsDNA)، يتم توليفها تماما من على الجينوم في وعاء واحد ردود فعل استخدام جميع الإشريكيّة القولونية، خالية من خلية النظام تكستل. توليف كوليفاجيس ثلاثة هو كمياً باستخدام مقايسة البلاك. علينا إظهار كيف غلة بالعاثية تجميعي يعتمد على إعدادات البيوكيميائية من ردود الفعل. مزاحمة الجزيئية، محاكاة عن طريق تركيز الخاضعة لربط 8000، يؤثر على مقدار فاجيس المركب بأوامر مقادير. كما يصف لنا كيفية تضخيم في phages وكيفية تنقية الجينوم. ينبغي أن يكون المجموعة من البروتوكولات والنتائج المعروضة في هذا العمل من اهتمام الباحثين متعددة التخصصات تشارك في البيولوجيا التركيبية خالية من الخلية والهندسة الحيوية.

نعرض أربع نتائج تمثيلية. في الشكل 1، نقدم مجموعة من عناصر سلبية لضمان أن نظام تكستل خالية من الخلية ومخزونات الحمض النووي بالعاثية غير ملوثة بالمعيشة كولاي الخلايا. علينا التحقق من أن النظام تكستل خالية من الخلية خالية من سليمة كولاي الخلية التل...

Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System at JoVE.com

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

توليف "باكتيريوفاجيس المعدية" في كولاي-استناداً إلى "نظام التعبير" الخلية الحرة

قد تم تصميم جيل جديد من المنصات ترجمة النسخ خالية من الخلية لبناء النظم البيوكيميائية في المختبر من خلال تنفيذ الدوائر الجينات. في هذه المقالة، يصف لنا كيف bacteriophages، مثل MS2 و ΦΧ174 و T7، يتم توليفها من الجينوم استخدام نظام تكستل كولاي كل خلية خالية.

A new generation of cell-free transcription-translation (TXTL) systems, engineered to have a greater versatility and modularity, provide novel ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Bacterial Detection &amp; Identification Using Electrochemical Sensors

Bacterial Detection & Identification Using Electrochemical Sensors

كشف البكتيرية والاستدلال باستخدام مجسات الكهروكيميائية

Electrochemical  sensors are widely used for rapid and accurate measurement of blood glucose and  can be adapted for detection of a wide variety of ...

Synthesis of an Intein-mediated Artificial Protein Hydrogel

التوليف من البروتين الاصطناعي Intein بوساطة هيدروجيل

We present the synthesis of a highly stable protein hydrogel mediated by a split-intein-catalyzed protein trans-splicing reaction. The building blocks of ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

ل<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج الثقافة الجهاز من الفئران فقرات القرص

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

An Orbital Shaking Culture of Mammalian Cells in O-shaped Vessels to Produce Uniform Aggregates

المداري تهز ثقافة خلايا الثدييات في السفن على شكل س لإنتاج المجاميع الموحدة

Suspension cultures of mammalian cell aggregates are required for various applications in medical and biotechnological fields. The disposable bag-based ...

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

رواية تقنية جراحية كأساس في فيفو جزئي الهندسة الكبد في الفئران

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

Live Cell Analysis of Shear Stress on Pseudomonas aeruginosa Using an Automated Higher-Throughput Microfluidic System

Live Cell Analysis of Shear Stress on Pseudomonas aeruginosa Using an Automated Higher-Throughput Microfluidic System

يعيش "خلية التحليل من إجهاد القص" على الزائفة الزّنجاريّة باستخدام نظام موائع جزيئية العالي الإنتاجية الآلي

A higher-throughput microfluidic in vitro bioreactor coupled with fluorescence microscopy has been used to study bacterial biofilm growth and morphology, ...

Cell-free Protein Expression Using the Rapidly Growing Bacterium Vibrio natriegens

Cell-free Protein Expression Using the Rapidly Growing Bacterium Vibrio natriegens

الخلية الحرة "استخدام تعبير البروتين" "سرعة نمو بكتيريا" الضمة ناتريجينس

The marine bacterium Vibrio natriegens has garnered considerable attention as an emerging microbial host for biotechnology due to its fast growth rate. A ...

A Multilayer Microfluidic Platform for the Conduction of Prolonged Cell-Free Gene Expression

منصة ميكروفلويدريك متعددة الطبقات لتوصيل التعبير الجيني الخالي من الخلايا لفترات طويلة

The limitations of cell-based synthetic biology are becoming increasingly apparent as researchers aim to develop larger and more complex synthetic genetic ...

High-Throughput Identification of Resistance to Pseudomonas syringae pv. Tomato in Tomato using Seedling Flood Assay

High-Throughput Identification of Resistance to Pseudomonas syringae pv. Tomato in Tomato using Seedling Flood Assay

تعريف عالي الإنتاجية للمقاومة لـ Pseudomonas syringae pv. الطماطم في الطماطم باستخدام الشتلات الفيضانات أساي

Tomato is an agronomically important crop that can be infected by Pseudomonas syringae, a Gram-negative bacterium, resulting in bacterial speck disease. ...

An In vitro System to Gauge the Thrombolytic Efficacy of Histotripsy and a Lytic Drug

نظام في المختبر لقياس فعالية الجلطات من الهستوتريبوسي ودواء لاتيك

Deep vein thrombosis (DVT) is a global health concern. The primary approach to achieve vessel recanalization for critical obstructions is ...