Name: synthesis of infectious bacteriophages in an e. coli-based cell-free expression system
Uploaded: 2017-08-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System at JoVE.com

Dette materiale er baseret på arbejde støttet af Office of Naval Research award nummer N00014-13-1-0074 (til V.N.), Human Frontier Science Program giver nummer RGP0037/2015 (til V.N.), og binationale Science Foundation giver 2014400 (til V.N.).

NOTE: følgende forstærkning trin og ekstraktion metode er i vid udstrækning generaliserbart for mange dobbelt-strenget DNA phage, fx bacteriophage T7, enterobacteria phage T4 eller enterobacteria phage λ (L). De anvendes hovedsagelig til en phage hvis genom ikke er let tilgængelige for køb fra kommercielle kilder.
 1. phage forstærkning Bemærk: single-plaque, multi-Cycle (SPMC) phage produktionsteknik er godt beskrevet for T4 phage i Chen, et al...

<ol>
	<li>Carlson, E. D., Gan, R., Hodgman, C. E., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+protein+synthesis:+Applications+come+of+age.">Cell-free protein synthesis: Applications come of age.</a> Biotechnol Adv. , (2011).</li><li>Hodgman, C. E., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+synthetic+biology:+Thinking+outside+the+cell.">Cell-free synthetic biology: Thinking outside the cell.</a> Metab Eng. , (2011).</li><li>Caschera, F., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+2.3+mg/mL+of+protein+with+an+all+Escherichia+coli+cell-free+transcription-translation+system.">Synthesis of 2.3 mg/mL of protein with an all Escherichia coli cell-free transcription-translation system.</a> Biochimie. 99, 162-168 (2014).</li><li>Shin, J., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+E.+coli+cell-free+expression+toolbox:+application+to+synthetic+gene+circuits+and+artificial+cells.">An E. coli cell-free expression toolbox: application to synthetic gene circuits and artificial cells.</a> ACS Synth Biol. 1 (1), 29-41 (2012).</li><li>Chemla, Y., Ozer, E., Schlesinger, O., Noireaux, V., Alfonta, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+expanded+cell-free+protein+synthesis+using+endogenous+pyrrolysyl+orthogonal+translation+system.">Genetically expanded cell-free protein synthesis using endogenous pyrrolysyl orthogonal translation system.</a> Biotechnol Bioeng. , (2015).</li><li>Hong, S. H., Kwon, Y. C., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-standard+amino+acid+incorporation+into+proteins+using+Escherichia+coli+cell-free+protein+synthesis.">Non-standard amino acid incorporation into proteins using Escherichia coli cell-free protein synthesis.</a> Frontiers in Chemistry. 2, (2014).</li><li>Noireaux, V., Bar-Ziv, R., Libchaber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+cell-free+genetic+circuit+assembly.">Principles of cell-free genetic circuit assembly.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (22), 12672-12677 (2003).</li><li>Sun, Z. Z., Yeung, E., Hayes, C. A., Noireaux, V., Murray, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linear+DNA+for+Rapid+Prototyping+of+Synthetic+Biological+Circuits+in+an+Escherichia+coli+Based+TX-TL+Cell-Free+System.">Linear DNA for Rapid Prototyping of Synthetic Biological Circuits in an Escherichia coli Based TX-TL Cell-Free System.</a> Acs Synthetic Biology. 3 (6), 387-397 (2014).</li><li>Takahashi, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+and+prototyping+genetic+networks+with+cell-free+transcription-translation+reactions.">Characterizing and prototyping genetic networks with cell-free transcription-translation reactions.</a> Methods. , (2015).</li><li>Shin, J., Jardine, P., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+Replication,+Synthesis,+and+Assembly+of+the+Bacteriophage+T7+in+a+Single+Cell-Free+Reaction.">Genome Replication, Synthesis, and Assembly of the Bacteriophage T7 in a Single Cell-Free Reaction.</a> ACS Synthetic Biology. 1 (9), 408-413 (2012).</li><li>Garamella, J., Marshall, R., Rustad, M., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+All+E.+coli+TX-TL+Toolbox+2.0:+A+Platform+for+Cell-Free+Synthetic+Biology.">The All E. coli TX-TL Toolbox 2.0: A Platform for Cell-Free Synthetic Biology.</a> ACS Synth Biol. , (2016).</li><li>Karzbrun, E., Shin, J., Bar-Ziv, R. H., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coarse-grained+dynamics+of+protein+synthesis+in+a+cell-free+system.">Coarse-grained dynamics of protein synthesis in a cell-free system.</a> Phys Rev Lett. 106 (4), 048104 (2011).</li><li>Daube, S. S., Arad, T., Bar-Ziv, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+co-synthesis+of+protein+nanoassemblies:+tubes,+rings,+and+doughnuts.">Cell-free co-synthesis of protein nanoassemblies: tubes, rings, and doughnuts.</a> Nano Lett. 7 (3), 638-641 (2007).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+immunoblot+assay+reveals+that+bacteriophage+T4+thymidylate+synthase+and+dihydrofolate+reductase+are+not+virion+proteins.">An immunoblot assay reveals that bacteriophage T4 thymidylate synthase and dihydrofolate reductase are not virion proteins.</a> J Virol. 69 (4), 2119-2125 (1995).</li><li>Sun, Z. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocols+for+implementing+an+Escherichia+coli+based+TX-TL+cell-free+expression+system+for+synthetic+biology.">Protocols for implementing an Escherichia coli based TX-TL cell-free expression system for synthetic biology.</a> J Vis Exp. (79), e50762 (2013).</li><li>Shin, J. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+cell-free+expression+with+the+endogenous+E.+coli+RNA+polymerase+and+sigma+factor+70.">Efficient cell-free expression with the endogenous E. coli RNA polymerase and sigma factor 70.</a> J Biol Eng. , (2010).</li><li>Caschera, F., Noireaux, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+amino+acid+mixtures+for+cell-free+expression+systems.">Preparation of amino acid mixtures for cell-free expression systems.</a> Biotechniques. 58 (1), 40-43 (2015).</li><li>Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+can+biochemical+reactions+within+cells+differ+from+those+in+test+tubes.">How can biochemical reactions within cells differ from those in test tubes.</a> J Cell Sci. 119, 2863-2869 (2006).</li><li>Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+macromolecular+crowding+for+protein+assembly.">Implications of macromolecular crowding for protein assembly.</a> Curr Opin Struct Biol. 10 (1), 34-39 (2000).</li><li>Zimmerman, S. B., Minton, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macromolecular+crowding:+biochemical,+biophysical,+and+physiological+consequences.">Macromolecular crowding: biochemical, biophysical, and physiological consequences.</a> Annu Rev Biophys Biomol Struct. 22, 27-65 (1993).</li></ol>

Efter teknik i Chen, et al. 14 for SPMC, en kritisk trin er nået ved fastsættelsen af de rette betingelser for superinfektion. Den parameter, der mest tæt styrer en vært stamme evne til at modstå superinfektion er ofte den oprindelige koncentration af det inficerer phage. Værtsceller skal være i logaritmisk vækstfase før første infektion med en meget lille mængde af phage. Til sidst, phage vil også nå logaritmisk vækst og målet er at tillade phage numre til hurtigt overgå ...

I det sidste årti, er celle-fri udtryk technology manipuleret til adresse roman applikationer i emergent tværfaglig forskning områder relateret til syntetiske og kvantitative biologi. Oprindeligt brugt til at udtrykke proteiner uafhængigt af en levende organisme, er nye celle-fri TXTL systemer udviklet til både grundlæggende og anvendt videnskab1,2, udvide anvendelsesområdet for denne teknologi betydeligt. Den nye generation af TXTL platforme er designet til at være brugervenligt, mere effektiv (nå 2 mg/mL af proteinsyntesen i batch mode3), mere alsidige på niveau med transskription4og modulære for at nemt integrere roman naturlige eller syntetiske funktioner, der udvider funktionerne i eksisterende biologiske systemer5,6. Især er celle-fri TXTL systemer blevet handy for rapid prototyping af genetiske programmer som regulerende elementer eller små genetiske kredsløb7,8,9, ved at reducere design-build-testen Gennemløb og Skift til et par dage. Bemærkelsesværdigt, de nye TXTL systemer er også kan behandle store DNA programmer såsom komplet syntesen af coliphages10,11, demonstrere stærk nok forestillinger for at støtte rekonstituering af aktive genomisk DNA kodet levende enheder.
TXTL systemer præsentere mange tekniske fordele sammenlignet med traditionelle in vitro- konstruktiv biokemiske assays. Celle-fri TXTL links proces af genekspression for det endelige produkt i en reduceret og åbent miljø, i modsætning til den komplekse cytoplasma af en levende celle. TXTL bruger DNA til at rekonstruere biokemiske systemer i vitro, som med moderne DNA forsamling teknikker, er overkommelige og hurtig ud over ikke kræver kræsen protein oprensning trin. Celle-fri udtryk giver direkte adgang til de fleste af komponenterne i de biokemiske reaktioner, hvilket giver en dybere dissektion af molekylære interaktioner12. I en TXTL reaktion, kan man ændre indstillingerne biokemiske og biofysiske efter behag, som er næsten umuligt i en levende celle. I betragtning af disse fordele og de seneste forbedringer, bliver TXTL teknologien mere og mere populær som en alternativ platform for syntetisk og kvantitative biologi. Mens Fællesskabets forskning ved hjælp af TXTL er hastigt voksende og TXTL er ved at blive en standard teknologi i bioteknologi, er det vigtigt at forstå, hvordan at bruge sådanne platforme for at udvikle passende praksis relateret til udførelse af TXTL reaktioner og til den fortolkning af resultaterne.
I denne artikel vil vi beskrive hvordan en alle E. coli TXTL system til at syntetisere Bakteriofager fra deres genom11, såsom MS2 i one-pot reaktioner, (RNA, 3.4 kb), ΦΧ174 (ssDNA, 5.4 kb), og T7 (dsDNA, 40 kb). Vi viser, hvordan mængden af phages syntetiseret ændringer med hensyn til nogle af indstillingerne biokemiske reaktioner (magnesium og kalium koncentrationer). Molekylær fortrængning, emuleret gennem en vifte af PIND 8000 koncentrationer, har en dramatisk effekt på phage syntese over flere størrelsesordener. Realiseringen af sådanne store biokemiske systemer i enkelt reagensglas reaktioner, at sammenfatte sideløbende processer af transskription, translation, og samlesæt, er interessant for grundlæggende spørgsmål i forbindelse med biologi og Biofysik 10 (genregulering, samlesæt), samt for udvikling af applikationer, såsom nyorientering phage funktioner til at bygge nye nanostrukturer13. Ud over en praktisk på TXTL leverer vi metoder til phage forstærkning, genom ekstraktion og oprensning og phage kvantificering af plaque assay. De metoder, der præsenteres i dette håndskrift er passende for forskere, der anvender E. coli ekstrakt baseret celle-fri systemer og er interesseret i Bakteriofager.
De protokoller, der præsenteres i dette arbejde kan opsummeres som følger: 1) Phage forstærkning (dag 1: forberede podning celler, dag 2: indre plaque, flere phage vækst, og koncentration og dag 3: rensning af phage), 2) dobbelt-strenget genom DNA-ekstraktion (fenol/chloroform udvinding), og 3) celle-fri phage reaktion og titer eksperiment (dag 1: plade værtsceller og lave agar plader, dag 2: cell-free reaktion og vært celle før kultur, og dag 3: vært celle kultur og phage titer).

<table width="899">
	<colgroup>
		<col style="width:162pt" width="216" />
		<col style="width:168pt" width="224" />
		<col style="width:219pt" width="292" />
		<col style="width:125pt" width="167" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="width:162pt;height:15.75pt" width="216">Ultracentrifugation tubes</td>
			<td class="xl21" style="width:168pt" width="224">Beckman Coulter</td>
			<td class="xl21" style="width:219pt" width="292">344057</td>
			<td class="xl20" style="width:125pt" width="167"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Conical tubes</td>
			<td class="xl22" style="width:168pt" width="224">Falcon</td>
			<td class="xl21">352070</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Gradient maker</td>
			<td class="xl21">BioComp Gradient Master</td>
			<td class="xl22" style="width:219pt" width="292">see Anal Biochem. 1985 Jul;148(1):254-9.</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Syringe and Blunt Cannula</td>
			<td class="xl21">Monoject</td>
			<td class="xl21">8881513918 and 888202017</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Wide-bore pipette tips</td>
			<td class="xl21">Fischerbrand</td>
			<td class="xl21">02-707-134</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Plaque counter</td>
			<td class="xl21">New Brunswik Scientific</td>
			<td class="xl21">Colony Counter Model C-110</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Culture tubes</td>
			<td class="xl22" style="width:168pt" width="224">Fischerbrand</td>
			<td class="xl21">14-961-33</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="height:15.75pt">Cell-free system</td>
			<td class="xl22" style="width:168pt" width="224">Mycroarray Inc</td>
			<td class="xl22" style="width:219pt" width="292">Mytxtl</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:162pt;height:15.75pt" width="216">BioComp Gradient Master</td>
			<td class="xl17" style="width:168pt" width="224">BioComp Instruments</td>
			<td class="xl17" style="width:219pt" width="292">Model 105ME</td>
			<td class="xl20"></td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:162pt;height:15.75pt" width="216">LB agar plate recipe</td>
			<td class="xl20"></td>
			<td class="xl20"></td>
			<td class="xl24" style="width:512pt" width="683">25 g/L Luria-Bertani medium (LB Broth, Miller - Fisher BioReagents product number BP1426) and 15 g/L Bacto-Agar solid (Brenton, Dickenson and Company - product number 214010).</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of infectious bacteriophages in an e. coli-based cell-free expression system

En ny generation af celle-fri transskription-oversættelse (TXTL) systemer, manipuleret til at have en større alsidighed og modularitet, leverer nye kapaciteter til at udføre grundlæggende og anvendt videnskab i reagensglas reaktioner. I det sidste årti, er celle-fri TXTL blevet en kraftfuld teknik til en bred vifte af roman tværfaglig forskning områder relateret til kvantitative og syntetisk biologi. De nye TXTL platforme er især nyttig til at konstruere og afhøre biokemiske systemer gennem udførelse af syntetisk eller naturlig gen kredsløb. In vitro TXTL har vist sig praktisk at hurtigt prototype regulerende elementer og biologiske netværk samt at sammenfatte molekylære samlesæt mekanismer findes i levende systemer. I denne artikel vil vi beskrive, hvordan smitsomme Bakteriofager, såsom MS2 (RNA), ΦΧ174 (ssDNA), og T7 (dsDNA), er helt syntetiseret fra deres genom i en-pot reaktioner ved hjælp af en alle Escherichia coli, celle-fri TXTL system. Syntese af de tre coliphages kvantificeres ved hjælp af plaque assay. Vi viser, hvordan udbyttet af syntetiserede phage afhænger af indstillingerne biokemiske reaktioner. Molekylær fortrængning, emuleret gennem en kontrolleret koncentration af PLØK 8000, påvirker mængden af syntetiserede phages af ordrer af størrelser. Vi beskriver også, hvordan til at forstærke phages og hvordan til at rense deres genomer. Sæt protokoller og resultaterne præsenteres i dette arbejde bør være af interesse for tværfagligt forskere involveret i celle-fri syntetisk biologi og bioteknologi.

Vi viser fire repræsentative resultater. I figur 1, præsenterer vi en række negative kontroller at sikre, at celle-fri TXTL system og phage DNA bestande ikke er forurenet med levende E. coli celler. Vi kontrollere, at celle-fri TXTL systemet er gratis af intakt E. coli celle kontaminering af plating både en ikke-rugede og rugede reaktion løsning blottet for genomisk DNA (figur 1A og <strong...

Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System at JoVE.com

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Syntese af smitsomme Bakteriofager i en E. coli -baseret celle-gratis Expression System

En ny generation af platforme, celle-fri transskription-oversættelse er blevet manipuleret til at konstruere biokemiske systemer i vitro gennem udførelse af genet kredsløb. I denne artikel beskriver vi, hvordan Bakteriofager, MS2, ΦΧ174 og T7, er syntetiseret fra deres genom ved hjælp af en alle E. coli celle-fri TXTL system.

A new generation of cell-free transcription-translation (TXTL) systems, engineered to have a greater versatility and modularity, provide novel ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Bacterial Detection &amp; Identification Using Electrochemical Sensors

Bacterial Detection & Identification Using Electrochemical Sensors

Bakteriel Detection og identifikation Brug elektrokemiske sensorer

Electrochemical  sensors are widely used for rapid and accurate measurement of blood glucose and  can be adapted for detection of a wide variety of ...

Synthesis of an Intein-mediated Artificial Protein Hydrogel

Syntese af en Intein-medieret Kunstig Protein Hydrogel

We present the synthesis of a highly stable protein hydrogel mediated by a split-intein-catalyzed protein trans-splicing reaction. The building blocks of ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

en<em&gt; In vitro</em&gt; Orgel Kultur Model af muse diskusprolaps

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

An Orbital Shaking Culture of Mammalian Cells in O-shaped Vessels to Produce Uniform Aggregates

En Orbital ryster kultur i pattedyrsceller i O-formede fartøjer til at producere Uniform aggregeringer

Suspension cultures of mammalian cell aggregates are required for various applications in medical and biotechnological fields. The disposable bag-based ...

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

En ny kirurgisk teknik som et fundament for In Vivo delvis lever ingeniør i rotten

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

Live Cell Analysis of Shear Stress on Pseudomonas aeruginosa Using an Automated Higher-Throughput Microfluidic System

Live Cell Analysis of Shear Stress on Pseudomonas aeruginosa Using an Automated Higher-Throughput Microfluidic System

Live celle analyse af Shear Stress på Pseudomonas aeruginosa ved hjælp af en automatiseret højere overførselshastighed mikrofluid System

A higher-throughput microfluidic in vitro bioreactor coupled with fluorescence microscopy has been used to study bacterial biofilm growth and morphology, ...

Cell-free Protein Expression Using the Rapidly Growing Bacterium Vibrio natriegens

Cell-free Protein Expression Using the Rapidly Growing Bacterium Vibrio natriegens

Celle-fri Protein udtryk ved hjælp af hurtigt voksende bakterie Vibrio natriegens

The marine bacterium Vibrio natriegens has garnered considerable attention as an emerging microbial host for biotechnology due to its fast growth rate. A ...

A Multilayer Microfluidic Platform for the Conduction of Prolonged Cell-Free Gene Expression

En Mikrofluidic-platform med flere lag til overledning af forlænget celle frit genekspression

The limitations of cell-based synthetic biology are becoming increasingly apparent as researchers aim to develop larger and more complex synthetic genetic ...

High-Throughput Identification of Resistance to Pseudomonas syringae pv. Tomato in Tomato using Seedling Flood Assay

High-Throughput Identification of Resistance to Pseudomonas syringae pv. Tomato in Tomato using Seedling Flood Assay

High-Throughput Identifikation af resistens over for Pseudomonas syringae pv. Tomat i tomat ved hjælp af sætteplante Oversvømmelse Assay

Tomato is an agronomically important crop that can be infected by Pseudomonas syringae, a Gram-negative bacterium, resulting in bacterial speck disease. ...

An In vitro System to Gauge the Thrombolytic Efficacy of Histotripsy and a Lytic Drug

Et In vitro-system til at måle den trombolytiske effekt af histotripsi og et lytisk lægemiddel

Deep vein thrombosis (DVT) is a global health concern. The primary approach to achieve vessel recanalization for critical obstructions is ...