Name: solubility of hydrophobic compounds in aqueous solution using combinations of self-assembling peptide and amino acid
Uploaded: 2017-09-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי מוסדות הקנדי למחקר בריאות, הפועלים מעניק מגב-42546 ומגב-119514.

1. הכנה של חומצת אמינו פתרונות <ol><li>הכן ותווית שני 50 מ ל צנטריפוגה חרוט צינורות עבור כל חומצה אמינית (אחד עבור שניהם &#34; נמוכה &#34;, &#34; גבוהה &#34; ריכוזים).</li>
	<li>להכין בקבוקון 2 ל' גדול המכיל מים מטוהרים (18.2 MΩ·cm 25 ° c).</li>
	<li>לחשב את סכום כל חומצה אמינית (בגרמים) כדי להגיע הריכוזים הרצוי, ולשקול את ה...

<ol>
	<li>Holmes, T. C., de Lacalle, S., Su, X., Liu, G., Rich, A., Zhang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+neurite+outgrowth+and+active+synapse+formation+on+self-assembling+peptide+scaffolds.">Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97 (12), 6728-6733 (2000).</li><li>Davis, M. E., Motion, J. P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injectable+self-assembling+peptide+nanofibers+create+intramyocardial+microenvironments+for+endothelial+cells.">Injectable self-assembling peptide nanofibers create intramyocardial microenvironments for endothelial cells.</a> Circulation. 111 (4), 442-450 (2005).</li><li>Matson, J. B., Stupp, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide+scaffolds+for+regenerative+medicine.">Self-assembling peptide scaffolds for regenerative medicine.</a> Chem. Commun. 48 (1), 26-33 (2012).</li><li>Tatman, P. D., Muhonen, E. G., Wickers, S. T., Gee, A. O., Kim, E., Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptides+for+stem+cell+and+tissue+engineering.">Self-assembling peptides for stem cell and tissue engineering.</a> Biomater. Sci. 4 (4), 543-554 (2016).</li><li>Keyes-Baig, C., Duhamel, J., Fung, S. -. Y., Bezaire, J., Chen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide+as+a+potential+carrier+of+hydrophobic+compounds.">Self-assembling peptide as a potential carrier of hydrophobic compounds.</a> J. Am. Chem. Soc. 126 (24), 7522-7532 (2004).</li><li>Kumar, P., Pillay, V., Modi, G., Choonara, Y. E., du Toit, L. C., Naidoo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptides:+implications+for+patenting+in+drug+delivery+and+tissue+engineering.">Self-assembling peptides: implications for patenting in drug delivery and tissue engineering.</a> Recent Pat. Drug Deliv. Formul. 5 (1), 24-51 (2011).</li><li>Wang, H., Yang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short-peptide-based+molecular+hydrogels:+novel+gelation+strategies+and+applications+for+tissue+engineering+and+drug+delivery.">Short-peptide-based molecular hydrogels: novel gelation strategies and applications for tissue engineering and drug delivery.</a> Nanoscale. 4, 5259-5267 (2012).</li><li>French, K. M., Somasuntharam, I., Davis, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide-based+delivery+of+therapeutics+for+myocardial+infarction.">Self-assembling peptide-based delivery of therapeutics for myocardial infarction.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 96, 40-53 (2016).</li><li>Zhang, S., Holmes, T., Lockshin, C., Rich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+assembly+of+a+self-complementary+oligopeptide+to+form+a+stable+macroscopic+membrane.">Spontaneous assembly of a self-complementary oligopeptide to form a stable macroscopic membrane.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90 (8), 3334-3338 (1993).</li><li>Bowerman, C. J., Nilsson, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembly+of+amphipathic+&#946;-sheet+peptides:+insights+and+applications.">Self-assembly of amphipathic &#946;-sheet peptides: insights and applications.</a> Biopolymers. 98 (3), 169-184 (2012).</li><li>Amidon, G., Lennern&#228;s, H., Shah, V., Crison, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+theoretical+basis+for+a+biopharmaceutic+drug+classification:+the+correlation+of+in+vitro+drug+product+dissolution+and+in+vivo+bioavailability.">A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification: the correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability.</a> Pharm. Res. 12 (3), 413-420 (1995).</li><li>Shi, Y., Porter, W., Merdan, T., Li, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+intravenous+delivery+of+poorly+water-soluble+compounds.">Recent advances in intravenous delivery of poorly water-soluble compounds.</a> Expert Opin. Drug Deliv. 6 (12), 1261-1282 (2009).</li><li>Bawa, R., Fung, S. -. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide-based+nanoparticles+enhance+cellular+delivery+of+the+hydrophobic+anticancer+drug+ellipticine+through+caveolae-dependent+endocytosis.">Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance cellular delivery of the hydrophobic anticancer drug ellipticine through caveolae-dependent endocytosis.</a> Nanomedicine. 8 (5), 647-654 (2012).</li><li>Liu, J., Zhang, L., Yang, Z., Zhao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+release+of+paclitaxel+from+a+self-assembling+peptide+hydrogel+formed+in+situ+and+antitumor+study+in+vitro.">Controlled release of paclitaxel from a self-assembling peptide hydrogel formed in situ and antitumor study in vitro.</a> Int. J. Nanomed. 6, 2143-2153 (2011).</li><li>Wu, Y., Sadatmousavi, P., Wang, R., Lu, S., Yuan, Y., Chen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-assembling+peptide-based+nanoparticles+enhance+anticancer+effect+of+ellipticine+in+vitro+and+in+vivo.">Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance anticancer effect of ellipticine in vitro and in vivo.</a> Int. J. Nanomed. 7, 3221-3233 (2012).</li><li>Fung, S. Y., Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-Assembling+Peptide+as+a+Potential+Carrier+for+Hydrophobic+Anticancer+Drug+Ellipticine:+Complexation,+Release+and+In+Vitro+Delivery.">Self-Assembling Peptide as a Potential Carrier for Hydrophobic Anticancer Drug Ellipticine: Complexation, Release and In Vitro Delivery.</a> Adv. Funct. Mater. 19 (1), 74-83 (2009).</li><li>Fung, S. -. Y., Oyaizu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+nanoscale+combinations+of+self-assembling+peptides+and+amino+acids+of+the+Src+tyrosine+kinase+inhibitor+in+acute+lung+injury+therapy.">The potential of nanoscale combinations of self-assembling peptides and amino acids of the Src tyrosine kinase inhibitor in acute lung injury therapy.</a> Biomaterials. 32 (16), 4000-4008 (2011).</li><li>Pacheco, S., Kanou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formulation+of+hydrophobic+therapeutics+with+self-assembling+peptide+and+amino+acid:+A+new+platform+for+intravenous+drug+delivery.">Formulation of hydrophobic therapeutics with self-assembling peptide and amino acid: A new platform for intravenous drug delivery.</a> J. Control. Release. 239, 211-222 (2016).</li></ol>

בהליך ניסוח, ישנם שלבים קריטיים ונקודות שונות לשקול בפתרון. ראשית, כפי שאנחנו עובדים עם רכיבים שונים ריכוזים, מרובי שלבים מערבולת לאורך כל הפרוטוקול להבטיח כי כל ריכוזי אחידה ונכונה. חלק מהפתרונות חומצת אמינו הידרופוביות, ריכוז גבוה עשוי עדיין לא להיות התפרקה לחלוטין לאחר vortexing, במקרה זה, ?...

אידיוטים הם סוג של biomaterials זה נחקרו בהרחבה ככל פיגומים 3D רפואה רגנרטיבית1,2,3,4. לאחרונה אולם הם נוצלה כמו כלי רכב למסירה של הרפוי עקב שלהם תכונות ביולוגיות ייחודיות5,6,7,8. לטמבלים להרכיב באופן טבעי לתוך nanostructures יציב9, ובכך לספק אמצעי סמים עיטוף והגנה. אידיוטים הם amphipathic, המורכב דפוס מסוים של חומצת אמינו הידרופוביות, הידרופילית חזרה, הנהיגה שלהם הרכבה עצמית9,10 ומאפשר להם לשרת כמדיום בין הידרופובי הידרופילית סביבות. כתוצאה מכך, למסירה קליניים של תרופות הידרופוביות – אשר יש הזמינות הביולוגית נמוכה ביותר וספיגה בגוף עקב חוסר מסיסות סביבות מימית11,12 – לטמבלים מבטיחים כמו משלוח הרכב. יתר על כן, דפוס רצף שלהם מרמז גם כי לטמבלים יכול להיות רציונלי מעוצבים ומתוכננים להגדיל את התאימות עם כל תרופה מסוימת או מורכבים (כלומר, בהתבסס על קבוצות פונקציונליות) ולסייע נוסף מסיסות.
לטמבלים הוחלו כמו רכב משלוח סמים רבים במבחנה ועוד ויוו הגדרות13,14,15,16. הם גם הראו הביו ובטיחות נהדר. עם זאת, בשל osmolarity נמוכה של תכשירים תרופתיים SAP, הם אינם יכולים לשמש עבור זריקות תוך ורידי כמו הגדרות קליניים13. בהתחשב באיפוק זה, פיתחנו לאחרונה אסטרטגיה המשלבת לטמבלים עם חומצת אמינו פתרונות על מנת לצמצם את השימוש ממיסים שיתוף רעילים ולהגדיל את ניסוח osmolarity, ולכן, הרלוונטיות הקלינית. אנחנו בחרה להשתמש חומצות אמינו כפי שהן אבני הבניין של אידיוטים, הן כבר מקובלים מבחינה רפואית, בשילוב עם אידיוטים, הם מגבירים סמים הידרופובי מסיסות תוך הפחתת כמות SAP חובה17,18.
כבר בחנו מקרוב את SAP-AA שילובים כפלטפורמה כללית סמים הידרופובי מסיסות ואספקה הבאים על ידי יצירת צינור רב שלבי סינון, החלתו על החומר המדכא Src, PP2, כמו תרכובת הידרופובי מודל. בתהליך זה, בדקנו את האפקט של שינוי הרכיבים של ניסוח – בסופו של דבר בדיקות 6 לטמבלים שונים, כל 20 חומצות האמינו בריכוזים שונים 2 (נמוך ולא גבוה; נמוך מבוסס על ריכוזים ב קיימים יישומים קליניים, וגבוה ריכוזי היו 2 x, 3 x או 5 x ריכוז קלינית המבוסס על המסיסות המרבי לכל חומצה אמינית במים), 2 ממיסים שיתוף שונים – ואת השילובים שנבחרו solubilized PP2 לצורך ניתוח נוסף. זה ניסוח הסמים הוכיח כיעיל כרכב משלוח סמים תרבית תאים, כמו גם ב- vivo מודלים המשתמשים הממשלים הן intratracheal והן תוך ורידית. כמו כן, העבודה שלנו נגע על צדדיות של SAP-AA צירופי מרובה solubilizing, תרכובות הידרופוביות שונות מבנית בסביבה מימית; באופן ספציפי, תרופות rottlerin, כורכומין18. כתב יד זה מתאר את שיטת ניסוח SAP-AA וניתוח של כורכומין מסיסות כדוגמה הצעד העיקרי בצבר ההקרנה שלנו. פרוטוקול זה מספק דרך פשוטה לשחזור למסך השילובים SAP-AA אופטימלית, אשר להמיס כל המתחם הידרופובי נתון.

<table style="border-collapse:collapse;width:1034pt" width="1379">
	<tbody>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">EAK16-I</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">CanPeptide Inc.</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">Custom peptide</td>
			<td class="xl20" style="width:510pt" width="680">Sequence: AEAKAEAKAEAKAEAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &#62;95% pure by HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">EAK16-II</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">CanPeptide Inc.</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">Custom peptide</td>
			<td class="xl20">Sequence: AEAEAKAKAEAEAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &#62;95% pure by HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">EAK16-IV</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">CanPeptide Inc.</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">Custom peptide</td>
			<td class="xl20">Sequence: AEAEAEAEAKAKAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &#62;95% pure by HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">EFK8-II</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">CanPeptide Inc.</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">Custom peptide</td>
			<td class="xl20">Sequence: FEFEFKFK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &#62;95% pure by HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">A6KE</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">CanPeptide Inc.</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">Custom peptide</td>
			<td class="xl20">Sequence: AAAAAAKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &#62;95% pure by HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">P6KE</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">CanPeptide Inc.</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">Custom peptide</td>
			<td class="xl20">Sequence: PPPPPPPKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, &#62;95% pure by HPLC</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Alanine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">A7469-100G</td>
			<td class="xl20">L-Alanine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Isoleucine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">I7403-100G</td>
			<td class="xl20">L-Isoleucine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Leucine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">L8912-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Leucine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Methionine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">M5308-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Methionine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Proline</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">P5607-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Proline</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Valine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">V0513-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Valine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Phenylalanine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">P5482-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Phenylalanine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Tryptophan</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">T8941-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Tryptophan</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Tyrosine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">T8566-100G</td>
			<td class="xl20">L-Tyrosine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Glycine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">G8790-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Glycine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Asparagine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">A4159-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Asparagine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Glutamine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">G8540-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Glutamine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Serine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">A7219-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Serine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Threonine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">T8441-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Threonine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Histidine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">H6034-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Histidine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Lysine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl17" style="width:101pt" width="135">L5501-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Lysine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Arginine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">A8094-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Arginine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Aspartic Acid</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">A7219-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Aspartic Acid</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Glutamic Acid</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">G8415-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Glutamic Acid</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Cysteine</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">C7352-100G</td>
			<td class="xl17" style="width:510pt" width="680">L-Cysteine</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Dimethyl Sulfoxide</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">D4540-500ML</td>
			<td class="xl22">DMSO</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl17" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Ethanol</td>
			<td class="xl17" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl25">277649-100ML</td>
			<td class="xl22">Anhydrous</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl22" height="21" style="height:15.75pt">Curcumin</td>
			<td class="xl21" style="width:106pt" width="141">Sigma-Aldrich</td>
			<td class="xl22">08511-10MG</td>
			<td class="xl22">Hydrophobic drug, curcumin</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl22" height="21" style="height:15.75pt">Rottlerin</td>
			<td class="xl21" style="width:106pt" width="141">EMD Millipore</td>
			<td class="xl22">557370-10MG</td>
			<td class="xl22">Hydrophobic drug, rottlerin</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">PP2</td>
			<td class="xl21" style="width:106pt" width="141">Enzo&#160;</td>
			<td class="xl22">BML-EI297-0001</td>
			<td class="xl21" style="width:510pt" width="680">Hydrophobic drug, PP2</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Scintillation Vials</td>
			<td class="xl21" style="width:106pt" width="141">VWR</td>
			<td class="xl21" style="width:101pt" width="135">2650-66022-081</td>
			<td class="xl22">Borosilicate Glass, with Screw Cap, 20 mL. Vials for weighing peptide.</td>
		</tr>
		<tr height="21" style="height:15.75pt">
			<td class="xl21" height="21" style="width:317pt;height:15.75pt" width="423">Falcon 50 mL Conical Centrifugation Tubes</td>
			<td class="xl21" style="width:106pt" width="141">VWR</td>
			<td class="xl23" style="width:101pt" width="135">352070</td>
			<td class="xl22">Polypropylene, Sterile, 50 mL. For amino acid solutions.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

solubility of hydrophobic compounds in aqueous solution using combinations of self-assembling peptide and amino acid

פפטידים וההספק עצמית (לטמבלים) הם מבטיחים רכב למסירה של הרפוי הידרופובי ליישומים קליניים; תכונותיהם amphipathic מאפשרים להם להתמוסס תרכובות הידרופוביות בסביבה מימית של הגוף האנושי. עם זאת, פתרונות פפטיד וההספק עצמית יש תאימות דם לקויה (למשל, osmolarity נמוך), הפרעה היישום הקליני שלהם באמצעות מינהלות תוך ורידי. לאחרונה פיתחנו פלטפורמה מוכללת עבור משלוח סמים הידרופוביות, המשלב לטמבלים עם חומצת אמינו פתרונות (SAP-AA) כדי לשפר את מסיסות סמים ולהגביר ניסוח osmolarity להשיג את הדרישות עבור שימושים קליניים. אסטרטגיה זו ניסוח נבחנה ביסודיות בהקשר של שלוש תרכובות הידרופוביות שונות מבנית – PP2, rottlerin, ו כורכומין – כדי להדגים צדדיות שלה. יתר על כן, נבחנו ההשפעות של שינוי ניסוח מרכיבים על-ידי ניתוח לטמבלים שונים 6, 20 חומצות אמינו הקיימת באופן טבעי בריכוזים נמוכים וגבוהים, ואת שני ממיסים שיתוף שונים דימתיל סולפוקסיד (דימתיל סולפוקסיד) אתנול. האסטרטגיה שלנו הוכיח כיעיל אופטימיזציה של רכיבים עבור סמים הידרופובי נתון ו פונקציה טיפולית של המדכא ניסח, PP2, נצפתה גם בתוך vitro וגם ויוו. כתב יד זה מתאר שיטת ניסוח מוכללת שלנו באמצעות שילובים SAP-AA עבור תרכובות הידרופוביות, וניתוח של מסיסות כצעד ראשון לקראת להשתמש הפוטנציאל של ניסוחים אלה במחקרים יותר פונקציונלי. אנו כוללים נציג מסיסות תוצאות ניסוח הכורכומין במתחם, הידרופובי, ולדון כמה המתודולוגיה שלנו משמש כפלטפורמה עבור מחקרים ביולוגיים עתידיים ומודלים המחלה.

עבור התרופה הידרופוביות, כורכומין, שהפקנו ניסוחים באמצעות כל 20 באופן טבעי קיימות חומצות אמינו בריכוזים נמוכים, בשילוב עם SAP אחד בלבד, EAK16-II, בתור הוכחה-של-עיקרון. בדקנו גם ניסוחים באמצעות דימתיל סולפוקסיד והן אתנול כמו ממיסים משותף. בסך הכל, זה הפיק 40 ניסוחים כורכומין, שכל א...

Watch this Scientific Journal Video about Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid at JoVE.com

Solubility of Hydrophobic Compounds in Aqueous Solution Using Combinations of Self-assembling Peptide and Amino Acid

מסיסות של תרכובות הידרופוביות בתמיסה המימית באמצעות שילובים של הרכבה עצמית פפטיד ושל חומצות אמינו

פרוטוקול זה מתאר אמצעי ישים קלינית המסת תרכובות הידרופוביות סביבה מימית באמצעות שילובים של הרכבה עצמית פפטיד ופתרונות חומצת אמינו. השיטה שלנו פותר מגבלה עיקרית של הרפוי הידרופוביות, שחסרה אמצעי בטוחה ויעילה, המסיסות ושיטות משלוח לתוך הגדרות קליניים.

Self-assembling peptides (SAPs) are promising vehicles for the delivery of hydrophobic therapeutics for clinical applications; their amphipathic ...

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Organic Chemistry

Medicine

Unit 1

Covalent Bonding and Structure

SCIENTISTS IN ACTION

Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

Assessment of Gastric Emptying in Non-obese Diabetic Mice Using a [13C]-octanoic Acid Breath Test

הערכה של ריקון קיבה בעכברים סוכרתיים ללא שימוש בשמנים [<sup&gt; 13</sup&gt; C]-octanoic בדיקת נשימת חומצה

Gastric emptying studies in mice have been limited by the inability to follow gastric emptying changes in the same animal since the most commonly used ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

שימוש סינרגטי של תאים עצביים מבשר ופפטידים עצמי הרכבה בפגיעה בחוט השדרה הניסויית צוואר הרחם

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Using Multi-fluorinated Bile Acids and In Vivo Magnetic Resonance Imaging to Measure Bile Acid Transport

Using Multi-fluorinated Bile Acids and In Vivo Magnetic Resonance Imaging to Measure Bile Acid Transport

שימוש רב-פלואור מרת חומצות<em&gt; In vivo</em&gt; דימות תהודה מגנטית כדי למדוד חומצות מרה התחבורה

Along with their traditional role as detergents that facilitate fat absorption, emerging literature indicates that bile acids are potent signaling ...

Estimation of Nephron Number in Whole Kidney using the Acid Maceration Method

הערכה של מספר נפרורון בכליה שלמה באמצעות שיטת השימוש באסיד

Nephron endowment refers to the total number of nephrons an individual is born with, as nephrogenesis in humans is completed by 36 weeks of gestation and ...

Rapid Evaluation of Toxicity of Chemical Compounds Using Zebrafish Embryos

הערכה מהירה של רעילות של תרכובות כימיות באמצעות עוברי הדגים Zebrafish

The zebrafish is a widely used vertebrate model organism for the disease and phenotype-based drug discovery. The zebrafish generates many offspring, has ...

Using a Chemical Biopsy for Graft Quality Assessment

שימוש בביופסיה כימית להערכת איכות השתל

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated ...

On-Site Sampling and Extraction of Brain Tumors for Metabolomics and Lipidomics Analysis

באתר דגימה וחילוץ של גידולים במוח עבור מטבולומיקה וניתוח Lipidomics

Despite the variety of tools available for cancer diagnosis and classification, methods that enable fast and simple characterization of tumors are still ...

Preparation of Naringenin Solution for In Vivo Application

Preparation of Naringenin Solution for In Vivo Application

הכנת פתרון נרינגנין ליישום In Vivo

The preparation of a compound (phytochemical) solution is an overlooked but critical step prior to its application in studies such as drug screening. The ...

Evaluation of Amino Acid Consumption in Cultured Bone Cells and Isolated Bone Shafts

הערכת צריכת חומצות אמינו בתאי עצם מתורבתים ובצירי עצם מבודדים

Bone development and homeostasis is dependent upon the differentiation and activity of bone forming osteoblasts. Osteoblast differentiation is ...

Visualizing and Quantifying Pharmaceutical Compounds within Skin using Coherent Raman Scattering Imaging

הדמיה וכימות של תרכובות פרמצבטיות בתוך העור באמצעות הדמיית פיזור ראמן קוהרנטית

Cutaneous pharmacokinetics (cPK) after topical formulation application has been a research area of particular interest for regulatory and drug development ...