Name: in vivo multimodal imaging and analysis of mouse laser-induced choroidal neovascularization model
Uploaded: 2018-01-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить Юлия Наумчук (Университет Лойолы) и Агне Žiniauskaitė (Experimentica ООО) за отличную техническую и видеографическая поддержку. Программа исследований доктор Kaja поддерживается Dr. John P. и Тереза E. Малкахи наделены профессуру в офтальмологии в университете Лойолы.

Все животные рассматривались в соответствии с заявлением Арво для использования животных в глазной и видение исследования и Директива 86/609/EEC для экспериментов на животных, с использованием протоколов утвержденные и контролируется животного эксперимента Совет Финляндии.
<p class="jove_titl...

<ol>
	<li>Dobi, E. T., Puliafito, C. A., Destro, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+model+of+experimental+choroidal+neovascularization+in+the+rat.">A new model of experimental choroidal neovascularization in the rat.</a> Arch. Ophthalmol. Chic. Ill 1960. 107, 264-269 (1989).</li><li>Tobe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+neovascularization+in+mice+with+overexpression+of+vascular+endothelial+growth+factor+in+photoreceptors.">Evolution of neovascularization in mice with overexpression of vascular endothelial growth factor in photoreceptors.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 180-188 (1998).</li><li>Seo, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dramatic+inhibition+of+retinal+and+choroidal+neovascularization+by+oral+administration+of+a+kinase+inhibitor.">Dramatic inhibition of retinal and choroidal neovascularization by oral administration of a kinase inhibitor.</a> Am. J. Pathol. 154, 1743-1753 (1999).</li><li>Grossniklaus, H. E., Kang, S. J., Berglin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+choroidal+and+retinal+neovascularization.">Animal models of choroidal and retinal neovascularization.</a> Prog. Retin. Eye Res. 29, 500-519 (2010).</li><li>Shah, R. S., Soetikno, B. T., Lajko, M., Fawzi, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Mouse+Model+for+Laser-induced+Choroidal+Neovascularization.">A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization.</a> J Vis Exp. (106), e53502 (2015).</li><li>Giani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+evaluation+of+laser-induced+choroidal+neovascularization+using+spectral-domain+optical+coherence+tomography.">In vivo evaluation of laser-induced choroidal neovascularization using spectral-domain optical coherence tomography.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 3880-3887 (2011).</li><li>Gong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+an+Image-Guided+Laser-Induced+Choroidal+Neovascularization+Model+in+Mice.">Optimization of an Image-Guided Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model in Mice.</a> PloS One. 10, e0132643 (2015).</li><li>Sheets, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotectin+D1+attenuates+laser-induced+choroidal+neovascularization+in+mouse.">Neuroprotectin D1 attenuates laser-induced choroidal neovascularization in mouse.</a> Mol. Vis. 16, 320-329 (2010).</li><li>Hoerster, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vivo+and+ex-vivo+characterization+of+laser-induced+choroidal+neovascularization+variability+in+mice.">In-vivo and ex-vivo characterization of laser-induced choroidal neovascularization variability in mice.</a> Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. Albrecht Von Graefes Arch. Klin. Exp. Ophthalmol. 250, 1579-1586 (2012).</li><li>Sulaiman, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Optical+Coherence+Tomography+Quantification+Method+for+Choroidal+Neovascularization.">A Simple Optical Coherence Tomography Quantification Method for Choroidal Neovascularization.</a> J. Ocul. Pharmacol. Ther. Off. J. Assoc. Ocul. Pharmacol. Ther. Off. J. Assoc. Ocul. Pharmacol. 31, 447-454 (2015).</li></ol>

Смешанных изображений предлагает ценные инструменты для оценки CNV патологии. Здесь мы представили изображений протокол, состоящий из Англии, SD-OCT и автоматической сегментации для быстрого, воспроизводимые и надежной оценки CNV патологии. Разрыв мембраны Бруха после лазерной администра?...

Первая успешная попытка имитировать патологии человека CNV грызунов было продемонстрировано почти три десятилетия назад с криптона лазерных в Лонг-Эванс крысы1. После этого криптона лазерных был использован сломать мембраны Бруха в самых популярных мыши напрягаться, C57BL/6J2,3,4. Показатель успеха CNV индукции было проверено с FA и гистологической пятна. Быстрое развитие методов неинвазивной визуализации, например OCT, способствовали росту поля грызунов доклинических моделей. Возможность контролировать морфологические изменения в сетчатке глаза в нескольких точках время тот же глаз значительно способствует сокращению использования животных и увеличивает эффективность в ходе экспериментальных исследований. Гистологическая Оценка CNV поражения довольно прост и требует маркировки ненормальныйа рост сосудов вокруг сайт лазерной администрации, загрузки изображений и площадь/объем оценки с использованием программного обеспечения для анализа изображений. Напротив в естественных условиях визуализации формы внедрить более сложные анализы CNV патологии и его толкования.
Здесь мы представляем простой и относительно быстрый способ индукции класс, прогрессии и регрессии CNV с помощью Англии, SD-Октябрь, и метод автоматической сегментации в мыши лазерно индуцированным CNV модель.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="917">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:275px;">Medetomidine (commercial name Domitor)</td>
			<td style="width:123px;">Orion</td>
			<td style="width:344px;">Vnr 01 56 02</td>
			<td style="width:177px;">Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ketamine</td>
			<td>Intervet</td>
			<td>Vnr 51 14 85</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">0,9% NaCl</td>
			<td>B Braun</td>
			<td>357 0340</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Xylazine (commercial name Rompun vet)</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>vnr 14 89 99</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tropicamide</td>
			<td>Santen</td>
			<td>Vnr 04 12 36</td>
			<td>Mydriatic agent</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Viscotears</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>Vnr 44 54 81</td>
			<td>Lubricant</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Systane</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>&#160;-</td>
			<td>Lubricant</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">5% Fluorescein sodium salt</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F6377-100G</td>
			<td>Fluoresent agent</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Atipamezole (commercial name Antisedane)</td>
			<td>Orion</td>
			<td>Vnr 47 19 53</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo multimodal imaging and analysis of mouse laser-induced choroidal neovascularization model

Лазерно индуцированным хориоидеи неоваскуляризации (CNV) является устоявшейся модель для имитации влажных форме возрастной макулярной дегенерации (AMD). В этом протоколе мы стремимся руководствоваться читателя не просто через технические соображения генерации лазерно индуцированным поражения вызвать неоваскулярной процессы, но скорее сосредоточиться на мощный информацию, которая может быть получена из смешанных продольной в естественных условиях изображений на протяжении всего последующего периода.
Лазерно индуцированным мыши CNV модель была порождена администрации лазерный диод. Методы визуализации смешанных в естественных условиях были использованы для мониторинга CNV индукции, прогрессирование и регрессии. Во-первых, спектральной области оптическая когерентная томография (SD-Окт) была выполнена сразу после лазерная проверка разрыв мембраны Бруха. Последующие в vivo изображений с помощью fluorescein ангиография (ФА) подтвердил успешные повреждение мембраны Бруха от последовательного изображения, полученные на уровне хориоидеи. Продольные последующей CNV распространения и регрессии на 5, 10 и 14 дни после лазерная выполнялось с помощью SD-OCT и Англии. Простой и надежный классификации Дырявый ЦНВ leasions из Англии изображения представлены. Автоматизированный сегментации для измерения толщины всего сетчатки, в сочетании с применением ручной калибр для измерения толщины сетчатки в ЦНВ сайтов, позволяют беспристрастной оценки наличия отеков. Наконец Гистологическая верификация CNV осуществляется с помощью isolectin GS-IB4 окрашивания на хориоидеи flatmounts. Окрашивание показатели, и isolectin позитивных площадь вычисляется с ImageJ.
Этот протокол является особенно полезным в терапии исследований, требующих высокой пропускной способности, как скрининг CNV патологии, как он позволяет быстро, смешанных и надежной классификации CNV патологии и сетчатки отек. Кроме того высоким разрешением SD-OCT позволяет запись других патологических признаков, как накопление субретинальное или Интраретинальные жидкости. Однако этот метод не предоставляет возможность автоматизировать анализ объема CNV от SD-Окт изображения, которая должна быть выполнена вручную.

Пузыря или кровотечение сразу после лазерная subretinal не всегда видны. Таким образом SD-Окт особенно важно проверить повреждение мембраны Бруха. На рисунке 1 показан пример OCT изображений в разное время точках после лазерной администрации.
<p class="jove_content" fo...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model at JoVE.com

In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model

В естественных условиях Смешанных изображений и анализ мыши лазерно индуцированным хориоидеи неоваскуляризация модели

Здесь мы представляем полезность продольных в vivo изображений в прослеживании морфологические изменения лазерно индуцированным хориоидеи неоваскуляризация мышей.

Laser-induced choroidal neovascularization (CNV) is a well-established model to mimic the wet form of age-related macular degeneration (AMD). In this ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Multimodal Imaging and Analysis of Mouse Laser-Induced Choroidal Neovascularization Model

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

Несколько мыши нейроанатомической Магнитно-резонансная томография

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

Multimodal Imaging of Stem Cell Implantation in the Central Nervous System of Mice

Мультимодальные изображений имплантации стволовых клеток в центральной нервной системе мышей

During the past decade, stem cell transplantation has gained increasing interest as primary or secondary therapeutic modality for a variety of diseases, ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Функциональные нейровизуализации с использованием ультразвуковых Гематоэнцефалический Разрушение барьеров и марганца-МРТ

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Ex vivo Live Imaging of Single Cell Divisions in Mouse Neuroepithelium

Ex vivo Live Imaging of Single Cell Divisions in Mouse Neuroepithelium

Экс естественных Живая съемка Одноместный клеточных делений в мышь нейроэпителия

We developed a system that integrates live imaging of fluorescent markers and culturing slices of embryonic mouse neuroepithelium. We took advantage of ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Лазерно-индуцированное Травма спинного мозга модель для оценки Механизмы дегенерации аксонов в режиме реального времени

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

3-D Imaging and Analysis of Neurons Infected In Vivo with Toxoplasma gondii

3-D Imaging and Analysis of Neurons Infected In Vivo with Toxoplasma gondii

3-D изображений и анализ нейронов Infected<em&gt; В Vivo</em&gt; С<em&gt; Токсоплазма</em

Toxoplasma gondii is an obligate, intracellular parasite with a broad host range, including humans and rodents. In both humans and rodents, Toxoplasma ...

M&#252;ller Glia Cell Activation in a Laser-induced Retinal Degeneration and Regeneration Model in Zebrafish

MÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¼ller Glia Cell Activation in a Laser-induced Retinal Degeneration and Regeneration Model in Zebrafish

Активации клеток глии Мюллер в лазерно индуцированным дегенерации сетчатки и регенерации модель в данио рерио

A fascinating difference between teleost and mammals is the lifelong potential of the teleost retina for retinal neurogenesis and regeneration after ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Лазерная травма головного мозга в моторном кортексе крыс

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Imaging and Analysis of Neurofilament Transport in Excised Mouse Tibial Nerve

Изображение и анализ нейрофиламента транспорта в акцизных мышь Tibial нерва

Neurofilament protein polymers move along axons in the slow component of axonal transport at average speeds of ~0.35-3.5 mm/day. Until recently the study ...

Transpupillary Two-Photon In Vivo Imaging of the Mouse Retina

Транспупиллярная двухфотонная визуализация сетчатки мыши In vivo

The retina transforms light signals from the environment into electrical signals that are propagated to the brain. Diseases of the retina are prevalent ...