Name: preparation of dissociated mouse cortical neuron cultures
Uploaded: 2007-12-19T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Dissociated Mouse Cortical Neuron Cultures at JoVE.com

<p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستعدادات قبل يوم من زراعة : </p><ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير محلول معقم تشريح (DS). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد NBM/B27 (Mediom Neurobasal مع ملاحق B27). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأوتوكلاف DDH <sub>2</sub> O وتعقيم coversilps الزجاج ، وإذا لزم الأمر. </li><li style=";text-al...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>5-Fluoro-2'-deoxyuridine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>F0503</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Chloride</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S9625</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vibraslicer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Campden Instruments Ltd.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassim Chloride</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P4504</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Phosphate Dibasic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0876</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium Phosphate Monobasic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P5379</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hepes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>H3375</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>D (+)-Glucose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G8270</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sucrose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0389</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Poly-D-Lysine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P7280</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>B27 Supplement</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen (Gibco)</td>
<td>17504-044</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobasal Media (NBM)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invirtogen (Gibco)</td>
<td>21103-049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-Amino-5-phosphonopentanoic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A5282</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bovine Albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A7030</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin Inhibitor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>T9253</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Hydroxide, 1N solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>SS266-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Cysteine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C7755</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bacto Agar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Difco</td>
<td>0140-01</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Papain</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Worthington </td>
<td>LS 03126</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile 0.2 &micro;m Syringe Filter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>DDA02025S0</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glass Coverslips, No1, &#216;12mm</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bellco Glass Inc.</td>
<td>1943-00012</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Minimum Essential Media (MEM)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen (Gibco)</td>
<td>11090-081</td>
<td>with Earle's salts
without L-glutamine, needed for growing non-neuronal cultures</td>
</tr>
<tr>
<td>Penicillin/Streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen (Gibco)</td>
<td>15070-063</td>
<td>for non-neuronal culture</td>
</tr>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen (Gibco)</td>
<td>16140-071</td>
<td>needed for non-neuronal cultures</td>
</tr>
<tr>
<td>Nunclon "Triple Flask" Tissue Culture Bottle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>12-565-25</td>
<td>Use for non-neuronal cultures. these flasks are very convenient when producing "conditioned Neurobasal Media/B27", but any other tissue culture flasks or dishes can be used instead.</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass bottom "Imaging dishes"</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MatTek Corp.</td>
<td>P35G-1.5-10-C</td>
<td>Glass bottomed, &#216;35mm culture dishes ideal for Calcium or Sodium Imaging when using an inverted imaging setup. But expensive!</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

preparation of dissociated mouse cortical neuron cultures

<p class="jove_content">وهذا الفيديو دليل لكم من خلال عملية لتوليد الخلايا العصبية الثقافات القشرية من جنين في وقت متأخر ومخ الفأر في وقت مبكر بعد الولادة. ويمكن استخدام هذه الثقافات لمجموعة متنوعة من التطبيقات بما في ذلك كيمياء سيتولوجية مناعية والكيمياء الحيوية والكهربية ، والتصوير الكالسيوم والصوديوم والبروتين و / أو RNA العزلة. هذه الثقافات كما توفر منبرا لدراسة تطوير الخلايا العصبية من الحيوانات المعدلة وراثيا التي تحمل الجنين في وقت متأخر بعد الولادة أو طفرة جينية قاتلة. هذا الإجراء هو نسبيا على التوالي إلى الأمام ، ويتطلب بعض الخبرة في مجال تقنية زراعة الأنسجة ، وينبغي ألا يستغرق وقتا أطول من ساعتين الى ثلاث ساعات إذا كان قد أعد عليك بشكل صحيح. والفصل الدقيق للقشرة القشرية من السبيل المهادي القشري الألياف تقلل من عدد الخلايا العصبية غير المرغوب فيها. لزيادة الغلة من الخلايا العصبية متمزج قطعة من نسيج قشري بلطف بعد خطوة حضانة الانزيم. هذا أمر حتمي لأنه يمنع الاصابة لا لزوم لها على الخلايا المبكرة وموت الخلايا العصبية. لأن الحفاظ على هذه الثقافات في غياب الخلايا الدبقية المغذية ، كما أنها توفر ميزة إضافية للثقافات النمو المخصب في الخلايا العصبية.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Dissociated Mouse Cortical Neuron Cultures at JoVE.com

Preparation of Dissociated Mouse Cortical Neuron Cultures

<p class="jove_content">هذا الفيديو يظهر الداخلي لتوليد الخلايا العصبية من الثقافات الجنين في وقت متأخر وأوائل القشرة الماوس بعد الولادة. ويمكن استخدام هذه الثقافات للكيمياء سيتولوجية مناعية ، والكيمياء الحيوية ، الفيزيولوجيا الكهربية والكالسيوم والصوديوم والتصوير ، وتوفير منبر لدراسة تطور الخلايا العصبية من الحيوانات المعدلة وراثيا التي تحمل بعدها طفرة جينية قاتلة.</p>

التحضير للثقافات ماوس العصبية القشرية نأت

This video will guide you through the process for generating cortical neuronal cultures from late embryo and early postnatal mouse brain. These cultures ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

التحضير للثقافات متعلق بالخلايا العصبية من أجنة ذبابة الفاكهة المرحلة Midgastrula

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell EPI-NCSC Cultures

الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات

EPI-NCSC are remnants of the embryonic neural crest in an adult location, the bulge of hair follicles. They are multipotent stem cells that have the ...

Primary Dissociated Midbrain Dopamine Cell Cultures from Rodent Neonates

الدماغ المتوسط ​​الدوبامين الابتدائي الثقافات خلية ينفصل عن الولدان القوارض

The ability to create primary cell cultures of dopamine neurons allows for the study of the presynaptic characteristics of dopamine neurons in isolation ...

Preparation of 2-dGuo-Treated Thymus Organ Cultures

إعداد 2 - dGuo المعاملة الثقافات الجهاز الغدة الصعترية

In the thymus, interactions between developing T-cell precursors and stromal cells that include cortical and medullary epithelial cells are known to play ...

Preparation and Maintenance of Dorsal Root Ganglia Neurons in Compartmented Cultures

إعداد وصيانة الخلايا العصبية العقد الجذرية الظهرية في الثقافات Compartmented

Neurons extend axonal processes that are far removed from the cell body to innervate target tissues, where target-derived growth factors are required for ...

Isolation and Culture of Post-Natal Mouse Cerebellar Granule Neuron Progenitor Cells and Neurons 

العزلة وثقافة ما بعد الولادة ماوس مخيخي الخلايا الحبيبية السلف الخلية العصبية والخلايا العصبية

The cerebellar cortex is a well described structure that provides unique opportunities for studying neuronal properties and development1,2. Of the ...

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

التحضير لزراعة الخلايا المكونة للدم الابتدائية من نخاع عظام الفئران لElectroporation

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Preparation of Rat Brain Aggregate Cultures for Neuron and Glia Development Studies

التحضير للثقافات الجرذ الحصى الدماغ العصبية للتنمية والدراسات الدبقية

An in vitro system that recapitulates the development and differentiation of progenitors into mature neurons and glia in the central nervous system (CNS) ...

Preparation of <em>Aplysia</em> Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

Preparation of Aplysia Sensory-motor Neuronal Cell Cultures

إعداد<em> Aplysia</em> الحسية والحركية الثقافات الخلية متعلق بالخلايا العصبية

The nervous system of the marine mollusk Aplysia californica is relatively simple, consisting of approximately 20,000 neurons.  The neurons are large (up ...

Intranuclear Microinjection of DNA into Dissociated Adult Mammalian Neurons

Intranuclear Microinjection من الحمض النووي في الخلايا العصبية فصل الثدييات الكبار

Primary neuronal cell cultures are valuable tools to study protein function since they represent a more biologically relevant system compared to ...