Name: technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy
Uploaded: 2017-09-25T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy at JoVE.com

이 작품은 실시간에 스위스 심장 재단의 그랜트 (N ° 32016)에 의해 지원 되었다

남성 C57BL/6J 마우스 (10 주, 25-30 g, n = 60)이이 프로토콜에 사용 됩니다. 동물 받을 인도적인 치료 농업의 고 등 교육 및 연구, 프랑스 내각에 의해 공식화 하는 지침을 준수 하 고 모든 절차는 1986 년 11 월 24 일의 유럽 공동체 위원회 지침에 따라 수행 됩니다 ( 86/609/EEC) 및 프랑스 법률. 프로토콜에 의해 승인 되었다는 &#34; 지역 윤리 위원회 동물 실험 CREMEAS &#34; (#2016092816207606).
 1. ?...

<ol>
	<li>Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiac+cachexia.">Animal models of cardiac cachexia.</a> Int. J. Cardiol. 219 (15), 105-110 (2016).</li><li>Tarnavski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+surgical+models+in+cardiovascular+research.">Mouse surgical models in cardiovascular research.</a> Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).</li><li>Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., Ardehali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction:+a+model+to+study+heart+failure+in+small+animals.">Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals.</a> Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. , 164-169 (2014).</li><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure.+Development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present.</a> Circ. Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).</li><li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy.">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li><li>Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+response+to+pressure+overload+in+129S1/SvImJ+and+C57BL/6J+mice:+temporal-+and+background-dependent+development+of+concentric+left+ventricular+hypertrophy.">Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292 (5), 2119-2130 (2007).</li><li>Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+blood+pressure+and+morphological+traits+in+cardiovascular-related+organs+in+13+different+inbred+mouse+strains.">Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains.</a> J. Appl. Physiol. 97 (1), 369-376 (2004).</li><li>Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction+in+mice.">Transverse aortic constriction in mice.</a> J. Vis. Exp. (38), (2010).</li><li>Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. 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Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (2), 492-500 (2011).</li><li>Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IKK-&#946;+inhibition+prevents+adaptive+left+ventricular+hypertrophy.">IKK-&#946; inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy.</a> J. Surg. Res. 178 (1), 105-109 (2012).</li><li>Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetic+mRNA+profiling+in+a+rat+model+of+left+ventricular+hypertrophy+reveals+early+expression+of+chemokines+and+their+receptors.">Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors.</a> PLoS ONE. 11 (8), 0161273 (2016).</li><li>Liao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+LV+hypertrophy+and+function+in+aortic-banded+mice:+necropsy+validation.">Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (5), 1703-1708 (2002).</li><li>Stansfield, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+model+to+independently+study+regression+of+ventricular+hypertrophy.">Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy.</a> J. Surg. Res. 142 (2), 387-393 (2007).</li><li>Beetz, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ablation+of+biglycan+attenuates+cardiac+hypertrophy+and+fibrosis+after+left+ventricular+pressure+overload.">Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 101, 145-155 (2016).</li></ol>

이 프로토콜의 목표 생쥐에서 최소 침 습 가로 대동맥 수축에 대 한 수술 방법의 단계별 그림을 제시 하는입니다. 마우스에 가로 대동맥 수축의 자세한 기술 설명 다른 저자2,8에 의해 보고 되었습니다. 그러나이 수술을 수행 하는, 삽 관 법 및 동물의 환기. 삽 관 법-환기의 추가 단계를 사용 하 여 복잡성과 전체 절차의 기간은 증가 하 고 글로벌 스트레?...

지난 년 동안 심장 마비의 연구에서 실시 되었습니다 가능한 동물 모델1. 심장 마비의 대형 동물 모델에 비해, 작은 동물 모델 수많은 잠재적인 이점이 있다. 주택 및 유지 보수 비용 절감, 옆에 작은 동물 모델 때문에 덜 복잡 한 필요 시설2더 많은 연구를 액세스할 수 있습니다.
마우스 심장 마비 모델 쥐 모델과 동일한 이점의 많은 제공합니다. 또한에 감소 된 주택 비용3, 마우스 모델 혜택 관련 유전자 변형 및 녹아웃 (KO) 긴장의 가용성. 셀 형식 관련, 유도할 수 있는 코 또는 유전자 변형 전략의 가능성에서 심장 마비의 병 인을 공부 하 고 새로운 치료 regimens3을 식별 하려고 하는 귀중 한 도구가 마우스를 확인 합니다.
마우스 가운데 심장 마비의 모델에는 현재4사용, 가로 대동맥 수축 (TAC) Rockman5 에 의해 처음으로 설명 하는 압력 과부하 유발 왼쪽된 심 실 비 대 (LVH)1 을 생성 하는 기본 모델 , 3.이 모델의 가장 큰 장점은 LVH2층 리를 수 있도록 하는 기능입니다, 비록 왼쪽 심 실 개장 하는 전술에 대 한 응답에는 다른 마우스 긴장 중 변수. 특히, C57BL/6 마우스 개발 다른 긴장4,,67발생 하지 않을 수 있습니다 전술 후 빠른 LV 팽창 합니다.
전술 원인으로 달성 하는 고혈압의 갑작스런 발병은 약 50% 증가 LV 질량에 2 주 이내 빠르게 변조 LVH4의 개발을 목표로 하는 약리학 또는 분자 개입의 활동을 검사 허용. 전술에 의해 심한 고혈압의 급성 유도 않습니다 정확 하 게 진보적인 왼쪽된 심 실 비 대를 재현 하 고 대동맥 협 착 증 또는 동맥 고혈압의 임상 설정에서 관찰 개장. 그럼에도 불구 하 고,이 모델 많은 조사자에 의해 식별 하 고 심장 마비4소설 치료 목표를 수정 하는 데 사용 됩니다.
마우스에 전술 수행 LVH 및 후속 심장 마비2를 유도 하는 데 사용 하는 다른 기술에 대 한 필요한 것 보다 더 큰 외과 전문을 필요 합니다. 대부분 작성자 intubating 및 환기는 동물2,8, 더 요구 하 고 시간이 걸리는이 절차를이 수행 하 게 하 고 동물에 대 한 수술 부담을 추가 하 여이 절차를 수행 합니다. 몇 가지 조사 수술9,,1011에 대 한 간략 한 참조와 함께 그들의 연구에서 최소한 침략 적 전술을 사용 했습니다.
이 프로토콜의 목표는 단계별로 설명 하는 절차의 중요 한 단계를 강조 하는 쥐의 최소 침 습 가로 대동맥 수축의 단순 하 고 사용 하기 쉬운 기술. 이러한 주요 단계에 따라, 하나 쉽게이 기술을 수행할 수 있습니다.

<table width="556">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:216px;height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td style="width:108px;">Olympus</td>
			<td style="width:171px;">SZX2-TR30</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Razor</td>
			<td>Rowenta</td>
			<td>Nomad TN3650FO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Sutures:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 7/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>BV-1X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 6/0</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>C0862061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Silk 6/0 ligature&#160;</td>
			<td>FST</td>
			<td>18020-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 4/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 5/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Drugs:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ketamin</td>
			<td>Merial</td>
			<td>Imalg&#232;ne 1000, LBM154AD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun 2%, KP09PPC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Buprenorphine</td>
			<td>Ceva</td>
			<td>Vetergesic, 072013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Instruments:&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bone nippers</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>16101-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ligation aid</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>18062-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tying forceps</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>18026-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Needle holder Crile-Wood</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>12003-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery forceps&#160;</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery forceps&#160;</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue forceps</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery needle holder</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>12076-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery scissors</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>91501-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Mayo scissors</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>14511-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">11-blade knife</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>10011-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">RNA extraction and qPCR:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TriReagent</td>
			<td>Euromedex</td>
			<td>TR-118-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rneasy Mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Qubit Fluorimetric RNA assay</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10034622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA 6000 Nano kit</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5067-1511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">High Capacity cDNA kit</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10400745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Master Mix</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10157154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman BNP primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01255770_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:216px;height:20px;">Taqman ANP primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01255747_g1&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman ACE primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00802048_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Col1a1 primers&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00801666_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman TGFb primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01178820_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Gapdh primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm99999915_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ABIPrism&#160; Thermocycler</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>7000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Software:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>Prism 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Animal food</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="width:216px;height:27px;">Complete diet for adult rats/mice</td>
			<td style="width:108px;">Safe</td>
			<td style="width:171px;">UB220610R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy

마우스에 가로 대동맥 수축 (TAC) 왼쪽 심 실 비 대 (LVH) 및 그것의 진행 성을 심장 마비에 압력 과부하 유발 실험 조사를 위한 가장 일반적으로 사용 된 수술 기법 중 하나입니다. 대부분의 보고 된 조사,이 절차는 삽 관 법 및 환기를 요구 하 고 시간이 걸리는 그것을 렌더링 하 고 동물을 수술 부담을 추가 동물의 수행 됩니다. 이 프로토콜의 목표는 삽 관 법 없이 침 습 전술의 단순화 된 기술과 쥐의 환기를 설명 하는. 기술의 중요 한 단계 낮은 사망률과 LVH 유도에 높은 효율을 달성 하기 위하여 강조 된다.
남성 C57BL/6 마우스 (10 주 오래 된, 25-30 g, n = 60) 마 취 제와 xylazine의 혼합물의 단일 복 주사로 마 취 되었다. 자발적 호흡에 다음 3-4 m m 상단 부분 sternotomy 동물 6/0 비단 봉합 결 찰 원조의 눈을 통해 스레드 세그먼트 대동맥 아치 아래에 전달 되었고 무딘된 27 게이지 주사 바늘에 연결. 운영 하는 가짜 동물 수술 같은 수술 준비 대동맥 수축 하지 않고. LVH 유도에 절차의 효능은 심장/몸 무게 비율에 있는 상당한 증가 의해 증명 된다. 이 비율은 3, 7, 14, 28 일 수술 후에 얻은 것입니다 (n = 6-10 각 그룹 및 각 시간 점). 우리의 기술을 사용 하 여, LVH 주 7 일 28 통해에서 가짜 동물에 비해 전술에서 관찰 됩니다. 요원 하 고 늦은 (이상 28 일) mortalities는 둘 다 매우 낮은 1.7%에.
결론적으로, 마우스에 최소한 침략 적 전술의 우리의 비용 효과적인 기술 매우 낮은 수술 및 수술 후 mortalities을 실시 하 고 LVH 유도에 매우 효율적입니다. 그것은 수술 절차를 간소화 하 고 동물에 긴장을 감소 시킨다. 그것은이 프로토콜에서 설명 하는 중요 한 단계를 수행 하 여 쉽게 수행할 수 있습니다.

요원 및 늦은 생존 요원 생존은 매우 높은 전체 시리즈 (전술과 운영 하는 가짜 동물) 98.3% (60 명 중 59). 만 요원 죽음 가짜 작업 이었습니다 마우스에 출혈 합병증 때문 이었다. 28 일의 관찰 기간 동안 수술 생존 또한 98.3% (58 명 중 59) 우수 했다. 단지 늦게 수술 죽음 심장 근원의 아마 날 (D) 16, 전술 마우스에서 발생 했습니다.
<p class="jove_content" fo:keep-together...

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Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

이 프로토콜의 목표는 단계별로 설명 하는 최소 침 습 가로 대동맥 수축 (TAC) 생쥐에서의 기술. 삽 관 법 그리고 일반적으로 사용 되는 표준 절차 필수는 환기의 제거, 최소 침 습 전술 수술 절차를 간소화 하 고 동물에 긴장을 감소 시킨다.

왼쪽된 심 실 비 대의 유도 대 한 생쥐에서 최소 침 습 가로 대동맥 수축의 기술

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure ...

The overall goal of this protocol is to establish minimally invasive transverse aortic constriction in mice. This method can help answer key questions about implementing transverse aortic constriction in mice, such as how to create a passage under the aortic arch. The main advantages of this technique are that it is simple, user-friendly, and that it eliminates the need for intubating and ventilating the mice.I will be demonstrating the procedure with our postdoc Simona Nemska who will be performing the presurgical animal preparation and postoperative surveillance steps. On the day of the procedure, shave the neck and chest of an anesthetized mouse and disinfect the exposed skin with 70%ethanol. After confirming the appropriate level of sedation by toe pinch, secure the animal in the supine position onto a clean cork working pad.Next, use a number 11 knife blade to make a 10 millimeter longitudinal midline cervical incision from the suprasternal notch to the mid chest to expose the sternum. Using a Crile-Wood needle holder, pass a 4-0 monofilament polypropylene stay suture to retract the thyroid. And tape the suture to the working pad.Then move the working pad under a surgical microscope and use microsurgical forceps to bluntly separate the pretracheal muscles to uncover the trachea. Gently slide the closed tips of a pair of curved microsurgical forceps over the trachea and behind the sternum and carefully open and close the curved forceps to bluntly dissect the pleura. Use the straight microsurgical forceps to grasp the right supraclavicular muscles and gently pull up on the chest.Sliding the inferior tip of the bone nipper under the sternum, perform a three to four millimeter upper partial sternotomy, directing the lower part of the mini sternotomy slightly toward the left. Using a microsurgical needle holder, pass a 7-0 monofilament polypropylene stay suture from the inside to the outside of the second intercostal space on each side of the mini sternotomy. Use 7-0 monofilament polypropylene stay sutures to spread the sternal edges on each side.And use the curved forceps to gently move the pretracheal muscles, mediastinal fat, and thymus aside to visualize the aortic arch under low power magnification. To expose the soft tissue under the aortic arch, insert tying forceps under the arch with the tips closed and gently open the forceps. Use a second tying forceps to make a tunnel in the soft tissue under the aortic arch by gently opening and closing the forceps in the soft tissue.Then pass a piece of 6-0 silk ligature threaded through the eye of a ligation aid under the aortic arch, using a tying forceps to retrieve the suture from between the origin of the right innominate and left common carotid arteries. The singular most difficult step of the procedure is inserting the suture under the aortic arch. Taking adequate care while creating the tunnel under the arch will make the subsequent suture placement easier.Now use the straight forceps to position a blunted 27 gauge needle next to the aortic arch and use the two tying forceps to tie the suture snugly around the needle and the aorta between the right innominate and left common carotid arteries. When the suture has been secured, quickly but gently remove the needle to achieve a 0.4 millimeter diameter narrowing and a reproducible transverse 65 to 70%aortic constriction. After confirming hemostasis, remove the 7-0 monofilament polypropylene stay sutures used for spreading the sternal edges.Use a microsurgical needle holder to pass a simple 6-0 monofilament polypropylene suture from the outside to the inside of the left second intercostal space and from the inside to the outside of the right second intercostal space. Use the Crile-Wood needle holder to bring the sternal edges together with a 6-0 monofilament polypropylene suture. And close the skin with a 5-0 monofilament polypropylene running suture in one layer with a Crile-Wood needle holder.Then place the animal back in its cage in the prone position under warming with monitoring until full recovery. The efficacy of the left ventricular hypertrophy induction can be validated by comparing the heart weight to body weight ratios of the sham animals to that of the experimental animals at days three, seven, 14, and 28 postsurgery. The ratio significantly increases in the banded animals compared to the sham groups from postoperative day seven on, remaining significantly higher in the constricted animals up through day 28 postsurgery.The observed increase in the heart to body weight ratios is due solely to a rise in the left ventricle body weight ratio as the right ventricle body weight ratio remains comparable between the transverse aortic constriction and the sham operated animals over the entire observation period. In addition, the mRNA expression of the brain natriuretic peptide, a positive control for cardiac hypertrophy in the left ventricles, is significantly higher in the aortic banded animals compared to the control sham operated animals at day 14, further validating the efficiency of the technique. Once mastered, this technique can be completed in 20 minutes if it is performed properly.While attempting this procedure, it is important to use a ligation aid and tying forceps similar to those used in our protocol. After its development, this technique provided a reliable and simplified model for exploring the mechanisms involved in the genesis of pressure overload induced left ventricular hypertrophy. After watching this video, you should have a good understanding of how to perform minimally invasive transverse aortic constriction in mice with a special emphasis on the passage under the aortic arch.Don't forget that creating the passage under the aortic arch is the most critical step of the procedure, and using a ligation aid and tying forceps considerably reduces the risk of injury to the arch.

Research

JoVE Journal

Medicine

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

압력 과부하 심장 비대 모델의 창조를위한 쥐의 대동맥 수축 오름차순

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

연구

의학

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

심 초음파 이미징에 의해 가로 대동맥 수축의 마우스 모델에서 심장 형태 학적 평가 및 기능 변경

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

마우스의 최소 침습 가로 대동맥 수축

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

Endochondral 골절 표준화 된 Biomechanical 조건 하에서 쥐에서 치유를 분석 하는 최소 침 습 모델

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

마우스에 가로 대동맥 수축 유도를 폐쇄 가슴 모델

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

설치류에서 대동맥 탈밴드에 의해 왼쪽 심실 역 리모델링 공부

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

마우스에 있는 우심실 시스템 및 저산소증 유도된 폐 동맥 고혈압을 위한 침략적인 혈역학 평가

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

재건 미세 수술에서 허혈 재관류 손상의 연구를위한 전 임상 쥐 모델

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

과도 심근 비대증을 얻기 위해 흡수 가능한 봉합사와 횡단 대동맥 수축 을 작동

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate ...

Echocardiographic Characterization of Left Ventricular Structure, Function, and Coronary Flow in Neonate Mice

신생아 마우스의 좌심실 구조, 기능 및 관상 동맥 흐름의 심 초음파 특성

Echocardiography is a non-invasive procedure that enables the evaluation of structural and functional parameters in animal models of cardiovascular ...