Name: in vivo tracking of human adipose-derived mesenchymal stem cells in a rat knee osteoarthritis model with fluorescent lipophilic membrane dye
Uploaded: 2017-10-08T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Tracking of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells in a Rat Knee Osteoarthritis Model with Fluorescent Lipophilic Membrane Dye at JoVE.com

वर्तमान अध्ययन शंघाई अभिनव वित्त पोषण (1402H294300) शंघाई नगर पालिका के विज्ञान और प्रौद्योगिकी आयोग (CN) डॉ वेन वांग को द्वारा प्रायोजित द्वारा समर्थित किया गया था । हम इस पांडुलिपि के लिए अपनी तकनीकी सहायता और वैज्ञानिक सलाह के लिए डॉ गुआंग्डोंग झोउ (चीन के नेशनल टिशू इंजीनियरिंग सेंटर) का शुक्रिया अदा करना चाहेंगे । हम भी पशु कल्याण में उनकी मदद के लिए श्री Huitang ज़िया (शंघाई नौवें लोगों के अस्पताल) का शुक्रिया अदा करना चाहूंगा ।

पशु विषयों को शामिल करने वाली प्रक्रियाओं को स्थानीय संस्थागत पशु देखभाल और आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया, जिससे पशु दुख को कम करने के प्रयास किए जा रहे हैं । निम्नलिखित प्रोटोकॉल को संस्थागत ?...

<ol>
	<li>Loeser, R. F., Goldring, S. R., Scanzello, C. R., Goldring, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis:+a+disease+of+the+joint+as+an+organ.">Osteoarthritis: a disease of the joint as an organ.</a> Arthritis Rheum. 64 (6), 1697-1707 (2012).</li><li>Lane, N. E., Shidara, K., Wise, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+year+in+review+2016:+clinical.">Osteoarthritis year in review 2016: clinical.</a> Osteoarthritis Cartilage. 25 (2), 209-215 (2017).</li><li>Wang, W., Cao, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+osteoarthritis+with+mesenchymal+stem+cells.">Treatment of osteoarthritis with mesenchymal stem cells.</a> Sci China Life Sci. 57 (6), 586-595 (2014).</li><li>Burke, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+mesenchymal+stem+cell+based+therapy+for+osteoarthritis.">Therapeutic potential of mesenchymal stem cell based therapy for osteoarthritis.</a> Clin Transl Med. 5 (1), 27 (2016).</li><li>Bendele, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+osteoarthritis.">Animal models of osteoarthritis.</a> J Musculoskelet Neuronal Interact. 1 (4), 363-376 (2001).</li><li>Gerwin, N., Bendele, A. M., Glasson, S., Carlson, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+OARSI+histopathology+initiative+-+recommendations+for+histological+assessments+of+osteoarthritis+in+the+rat.">The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the rat.</a> Osteoarthritis Cartilage. 18, S24-S34 (2010).</li><li>Janusz, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+osteoarthritis+in+the+rat+by+surgical+tear+of+the+meniscus:+Inhibition+of+joint+damage+by+a+matrix+metalloproteinase+inhibitor.">Induction of osteoarthritis in the rat by surgical tear of the meniscus: Inhibition of joint damage by a matrix metalloproteinase inhibitor.</a> Osteoarthritis Cartilage. 10 (10), 785-791 (2002).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+human+adipose-derived+mesenchymal+stem+cell+tracking+after+intra-articular+delivery+in+a+rat+osteoarthritis+model.">In vivo human adipose-derived mesenchymal stem cell tracking after intra-articular delivery in a rat osteoarthritis model.</a> Stem Cell Res Ther. 7 (1), 160 (2016).</li><li>Zhou, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administering+human+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+to+prevent+and+treat+experimental+arthritis.">Administering human adipose-derived mesenchymal stem cells to prevent and treat experimental arthritis.</a> Clin Immunol. 141 (3), 328-337 (2011).</li><li>Desando, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-articular+delivery+of+adipose+derived+stromal+cells+attenuates+osteoarthritis+progression+in+an+experimental+rabbit+model.">Intra-articular delivery of adipose derived stromal cells attenuates osteoarthritis progression in an experimental rabbit model.</a> Arthritis Res Ther. 15 (1), 22 (2013).</li><li>Riester, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+Studies+for+Use+of+Adipose+Tissue-Derived+Mesenchymal+Stromal/Stem+Cells+in+a+Rabbit+Model+for+Osteoarthritis+to+Support+a+Phase+I+Clinical+Trial.">Safety Studies for Use of Adipose Tissue-Derived Mesenchymal Stromal/Stem Cells in a Rabbit Model for Osteoarthritis to Support a Phase I Clinical Trial.</a> Stem Cells Transl Med. 6 (3), 910-922 (2017).</li><li>Bai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+long-term+survival+of+intramyocardially+delivered+human+adipose+tissue-derived+stem+cells+using+bioluminescence+imaging.">Tracking long-term survival of intramyocardially delivered human adipose tissue-derived stem cells using bioluminescence imaging.</a> Mol Imaging Biol. 13 (4), 633-645 (2011).</li><li>Wolbank, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labelling+of+human+adipose-derived+stem+cells+for+non-invasive+in+vivo+cell+tracking.">Labelling of human adipose-derived stem cells for non-invasive in vivo cell tracking.</a> Cell Tissue Bank. 8 (3), 163-177 (2007).</li><li>Heymer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+oxide+labelling+of+human+mesenchymal+stem+cells+in+collagen+hydrogels+for+articular+cartilage+repair.">Iron oxide labelling of human mesenchymal stem cells in collagen hydrogels for articular cartilage repair.</a> Biomaterials. 29 (10), 1473-1483 (2008).</li><li>Hemmrich, K., Meersch, M., von Heimburg, D., Pallua, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applicability+of+the+dyes+CFSE,+CM-DiI+and+PKH26+for+tracking+of+human+preadipocytes+to+evaluate+adipose+tissue+engineering.">Applicability of the dyes CFSE, CM-DiI and PKH26 for tracking of human preadipocytes to evaluate adipose tissue engineering.</a> Cells Tissues Organs. 184 (3-4), 117-127 (2006).</li><li>Shim, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetics+and+in+vivo+fate+of+intra-articularly+transplanted+human+bone+marrow-derived+clonal+mesenchymal+stem+cells.">Pharmacokinetics and in vivo fate of intra-articularly transplanted human bone marrow-derived clonal mesenchymal stem cells.</a> Stem Cells Dev. 24 (9), 1124-1132 (2015).</li><li>Chen, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+safety+study+on+intrathecal+delivery+of+autologous+mesenchymal+stromal+cells+in+rabbits+directly+supporting+Phase+I+human+trials.">A safety study on intrathecal delivery of autologous mesenchymal stromal cells in rabbits directly supporting Phase I human trials.</a> Transfusion. 55 (5), 1013-1020 (2015).</li><li>Chan, M. M., Gray, B. D., Pak, K. Y., Fong, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+in+vivo+imaging+of+arthritis+in+a+collagen-induced+murine+model+with+phosphatidylserine-binding+near-infrared+(NIR)+dye.">Non-invasive in vivo imaging of arthritis in a collagen-induced murine model with phosphatidylserine-binding near-infrared (NIR) dye.</a> Arthritis Res Ther. 17, 50 (2015).</li><li>Texier, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyanine-loaded+lipid+nanoparticles+for+improved+in+vivo+fluorescence+imaging.">Cyanine-loaded lipid nanoparticles for improved in vivo fluorescence imaging.</a> J Biomed Opt. 14 (5), 054005 (2009).</li><li>Honig, M. G., Hume, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+carbocyanine+dyes+allow+living+neurons+of+identified+origin+to+be+studied+in+long-term+cultures.">Fluorescent carbocyanine dyes allow living neurons of identified origin to be studied in long-term cultures.</a> J Cell Biol. 103 (1), 171-187 (1986).</li><li>Rahmati, M., Mobasheri, A., Mozafari, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+mediators+in+osteoarthritis:+A+critical+review+of+the+state-of-the-art,+current+prospects,+and+future+challenges.">Inflammatory mediators in osteoarthritis: A critical review of the state-of-the-art, current prospects, and future challenges.</a> Bone. 85, 81-90 (2016).</li><li>Detante, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+administration+of+99mTc-HMPAO-labeled+human+mesenchymal+stem+cells+after+stroke:+in+vivo+imaging+and+biodistribution.">Intravenous administration of 99mTc-HMPAO-labeled human mesenchymal stem cells after stroke: in vivo imaging and biodistribution.</a> Cell Transplant. 18 (12), 1369-1379 (2009).</li><li>Hu, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+magnetic+resonance+imaging+tracking+of+SPIO-labeled+human+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells.">In vivo magnetic resonance imaging tracking of SPIO-labeled human umbilical cord mesenchymal stem cells.</a> J Cell Biochem. 113 (3), 1005-1012 (2012).</li><li>Xia, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-articular+transplantation+of+atsttrin-transduced+mesenchymal+stem+cells+ameliorate+osteoarthritis+development.">Intra-articular transplantation of atsttrin-transduced mesenchymal stem cells ameliorate osteoarthritis development.</a> Stem Cells Transl Med. 4 (5), 523-531 (2015).</li><li>Jasmin, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+labeling+of+bone+marrow+mesenchymal+cells+with+superparamagnetic+iron+oxide+nanoparticles+and+in+vivo+visualization+by+magnetic+resonance+imaging.">Optimized labeling of bone marrow mesenchymal cells with superparamagnetic iron oxide nanoparticles and in vivo visualization by magnetic resonance imaging.</a> J Nanobiotechnology. 9, 4 (2011).</li><li>Lehmann, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coculture+of+human+nucleus+pulposus+cells+with+multipotent+mesenchymal+stromal+cells+from+human+bone+marrow+reveals+formation+of+tunnelling+nanotubes.">Coculture of human nucleus pulposus cells with multipotent mesenchymal stromal cells from human bone marrow reveals formation of tunnelling nanotubes.</a> Mol Med Rep. 9 (2), 574-582 (2014).</li><li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose-derived+mesenchymal+progenitor+cells+engraft+into+rabbit+articular+cartilage.">Human adipose-derived mesenchymal progenitor cells engraft into rabbit articular cartilage.</a> Int J Mol Sci. 16 (6), 12076-12091 (2015).</li></ol>

सुरक्षा मानकों और स्टेम सेल थेरेपी के वितरण के अध्ययन की तत्काल जरूरत है इससे पहले कि हम पीठ से बेडसाइड के लिए कोाा के लिए अपक्षयी स्टेम सेल उपचार ला सकते हैं । हालांकि, रोग पर्यावरण के हठ और प्रत्यारोप?...

घुटने पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (कोाा) एक अपक्षयी जोड़दार उपास्थि हानि और प्रगतिशील सूजन है, जो दुनिया भर के बुजुर्गों में एक बड़ी पुरानी बीमारी बन गया है के परिणामस्वरूप विकार है1। हालांकि, वर्तमान चिकित्सा विरोधी भड़काऊ दवाओं का उपयोग, शारीरिक खुराक, और शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं केवल रोगसूचक दर्द के लिए अस्थायी राहत प्रदान कर सकते हैं2.
मानव वसा-व्युत्पंन mesenchymal स्टेम सेल (haMSCs) घुटने पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के लिए एक होनहार reअपक्षयी उपाय बन गए हैं, उपास्थि पुनर्जनन और इम्यूनोमॉड्यूलेटरी गुण के लिए उनके multipotent भेदभाव क्षमता के कारण3, 4. vivo मेंकार्रवाई के तंत्र की जांच करने के लिए औषधीय मार्गों के साथ तुलना में, छोटे कोाा पशु मॉडल में लाइव haMSCs ट्रैकिंग वर्तमान में नैदानिक आवेदन करने से पहले haMSC थेरेपी के लिए औचित्य और व्यवहार्यता स्थापित करने के लिए शिक्षाप्रद है । नैदानिक परीक्षण के लिए, औसत दर्जे का meniscectomy (मिमी) संयुक्त के यांत्रिक लोड स्थिर करने के लिए चूहों में कोाा प्रेरित है, जो लगातार reproducibility के साथ एक अपेक्षाकृत व्यवहार्य मॉडल प्रदान करता है5. MM द्वारा प्रेरित कोाा की शुरुआत पूर्वकाल cruciate बंधन अकेले transection या आंशिक औसत दर्जे का meniscectomy6के साथ संयुक्त से पहले है । इसलिए, कोाा के रोग microenvironment के साथ इंजेक्शन haMSCs के बीच दीर्घकालिक बातचीत अक्सर मिमी7,8से प्रेरित चूहों में मूल्यांकन कर रहे हैं.
हालांकि haMSCs की चिकित्सीय प्रभावकारिता बड़े पैमाने पर सूचित किया गया है, इंट्रा जोड़दार (IA) इंजेक्शन के माध्यम से प्रत्यारोपित haMSCs के वीवो में पर प्रासंगिक ज्ञान9,10दुर्लभ है । इसलिए, विभिंन सेलुलर लेबलिंग तरीकों immunohistology11, luciferase12, ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन13 अभिकर्मक, चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के लिए आयरन ऑक्साइड लेबलिंग (एमआरआई) सहित विकसित किया गया है14 , और कई फ्लोरोसेंट सेल रंजक8,15,16. श्रम के साथ तुलना में गहन प्रोटोकॉल विश्लेषण, vivo में गैर इनवेसिव इमेजिंग वास्तविक समय वितरण और फ्लोरोसेंट संकेतों के साथ लेबल कोशिकाओं की गतिशीलता का पता लगाने के लिए ऑप्टिकल उपकरणों को रोजगार10,17. कार्यात्मक लाइव सेल इमेजिंग के लिए, cytocompatible फ्लोरोसेंट लेबलिंग एक परिष्कृत रेडियोधर्मी मुक्त ट्रैकिंग तकनीक स्टेम सेल ट्रांसप्लांटेशन18के बाद सेलुलर गतिविधियों को प्रकट करने के लिए है । इसके अलावा, बहुरंगा फ्लोरोसेंट lipophilic रंजक अमीनो-प्रतिक्रियाशील हाइड्रोफिलिक रंजक या फ्लोरोसेंट प्रोटीन उनके बेहतर सेल पारगम्यता और बढ़ाया प्रतिदीप्ति क्वांटम पैदावार19सहित, पर लाभ के अधिकारी ।
इस प्रकार, प्रोटोकॉल यहां शामिल एक लाल लेजर का उपयोग करने lipophilic carbocyanines के साथ लेबल कोशिकाओं उत्तेजित (DilC18(5)) है, जो एक दूर लाल फ्लोरोसेंट दिल (dialkylcarbocyanines) एनालॉग20है । लाल उत्तेजना और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा के परिवर्तन किया है फ्लोरोसेंट हस्तक्षेप से बचा जाता है और जीवित पशुओं में समय की एक लंबी अवधि में गहरी ऊतक इमेजिंग की अनुमति देता है8। किया था के साथ लेबल vivo में कोशिकाओं पर नज़र रखने की यह विधि की निगरानी के लिए मान्य है स्टेम सेल, ऐसे haMSCs के रूप में, पशु मॉडल में, जो समझने के लिए आवश्यक है और वर्तमान स्टेम कोशिका अपक्षयी चिकित्सा में सुधार.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Matrx VMR animal anesthesia system</td>
			<td>Midmark</td>
			<td>VIP3000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture</td>
			<td>Shanghai Jinhuan</td>
			<td>KC439</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor</td>
			<td>Pritech</td>
			<td>LD-9987</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Zhejiang Jindakang Animal Health Product Co., Ltd.</td>
			<td>None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium chloride solution</td>
			<td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>H43020455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin</td>
			<td>Shanghai Kangfu chemical pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Tianjin Pharmaceutical Research Institute Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>16005</td>
			<td>Dilute to final concentration of 10% in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td>Dilute to final concentration of 20% in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1% Hematoxylin Solution, Mayer&#8217;s</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MHS16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5% Eosin Y solution, alcoholic</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT110116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S8884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F7258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Excelsior ESTM Tissue Processor</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A78400006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Histocentre&#8482; 3 Tissue Embedding Center</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>B64100010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fully Automated Rotary Microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DiD</td>
			<td>Molecular Probes, Life 
			Technologies</td>
			<td>V-22887</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-MEM High Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D5648</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>GIBCO, Life Technologies</td>
			<td>14190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25% Trypsin-EDTA</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25200-114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 cm Petri Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>V118877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>Optima MAX-TL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.4% Trypan Blue solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>93595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titetamme</td>
			<td>Virbac (Zoletil 50)</td>
			<td>1000000188</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zolazepam</td>
			<td>Virbac (Zoletil 50)</td>
			<td>1000000188</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile hyposermic syringe for single use 26G</td>
			<td>Shanghai Misawa Medical Industry</td>
			<td>None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Spectrum In Vivo Imaging System</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>124262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Imaging 4.0 software</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>None</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo tracking of human adipose-derived mesenchymal stem cells in a rat knee osteoarthritis model with fluorescent lipophilic membrane dye

आदेश में मानव वसा-व्युत्पंन mesenchymal स्टेम सेल (haMSC) घुटने पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (कोाा) के लिए चिकित्सा के नैदानिक आवेदन का समर्थन करने के लिए, हम सेल हठ और पशु मॉडल में haMSCs के वितरण की प्रभावकारिता की जांच की । हम lipophilic फ्लोरोसेंट डाई के साथ haMSCs के सेल झिल्ली लेबल करने के लिए एक विधि का प्रदर्शन किया । बाद में, शल्य चिकित्सा प्रेरित कोाा के साथ चूहों में लेबल कोशिकाओं के इंट्रा जोड़दार इंजेक्शन गतिशील रूप से एक vivo इमेजिंग प्रणाली द्वारा निगरानी की गई । हम lipophilic carbocyanines (DilC18 (5)), एक सुदूर लाल फ्लोरोसेंट दिल (dialkylcarbocyanines) अनुरूप है, जो एक लाल लेजर का उपयोग करने के ऊतकों के आसपास से प्राकृतिक हरी उत्तेजना के autofluorescence से बचने के कार्यरत हैं । इसके अलावा, लाल के उत्सर्जन स्पेक्ट्रा के जीवित पशुओं में डीप ऊतक इमेजिंग की अनुमति दी और लेबलिंग प्रक्रिया कोई साइटोटोक्सिक प्रभाव या haMSCs को कार्यात्मक क्षति का कारण बना । यह दृष्टिकोण एक चूहे कोाा मॉडल में haMSCs के लिए एक कुशल ट्रैकिंग विधि होना दिखाया गया है । इस विधि के आवेदन भी पूर्व नैदानिक अध्ययन में अन्य स्रोतों से इष्टतम प्रशासन मार्ग और MSCs की खुराक निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

आदेश में कोाा मॉडल प्रेरित करने के लिए, मिमी एसडी चूहों (चित्रा 3) के सही घुटने के संयुक्त में प्रदर्शन किया गया था । आठ सप्ताह सर्जरी के बाद, चूहों की बलि दी गई और घुटने के जोड़ों के...

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In Vivo Tracking of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells in a Rat Knee Osteoarthritis Model with Fluorescent Lipophilic Membrane Dye

Vivo में मानव वसा की ट्रैकिंग-व्युत्पंन Mesenchymal फ्लोरोसेंट Lipophilic झिल्ली डाई के साथ एक चूहे घुटने पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस मॉडल में स्टेम कोशिकाओं

इस प्रोटोकॉल एक कुशल तरीका कोशिका हठ और मानव वसा-व्युत्पंन mesenchymal स्टेम सेल द्वारा (haMSCs) की निगरानी के लिए एक चूहा घुटने पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (कोाा) मॉडल के माध्यम से इंट्रा-जोड़दार (IA) इंजेक्शन में लाल प्रतिदीप्ति लेबलिंग का वर्णन करता है ।

In order to support the clinical application of human adipose-derived mesenchymal stem cell (haMSC) therapy for knee osteoarthritis (KOA), we examined the ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

In Vivo Tracking of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells in a Rat Knee Osteoarthritis Model with Fluorescent Lipophilic Membrane Dye

Isolation and Enrichment of Human Adipose-derived Stromal Cells for Enhanced Osteogenesis

अलगाव और मानव का संवर्धन बढ़ी अस्थिजनन के लिए stromal कोशिकाओं वसा व्युत्पन्न

Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) are considered the gold standard for stem cell-based tissue engineering applications. However, the ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

इवांस नीले रंग की डाई के साथ zebrafish लार्वा कंकाल की मांसपेशी वफ़ादारी का विश्लेषण

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Differentiation of Adipose-Derived Stem Cells from Porcine Subcutaneous Adipose Tissues

अलगाव और वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं के भेदभाव सुअर चमड़े के नीचे वसा ऊतकों से

Obesity is an unconstrained worldwide epidemic. Unraveling molecular controls in adipose tissue development holds promise to treat obesity or diabetes. ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

वसा डिपो विशेष Sca1 की immunomagnetic पृथक्करण<sup&gt; उच्च</sup&gt; वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (ASCs)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue

अलगाव और mesenchymal स्टेम का विस्तार / stromal कोशिकाओं मानव प्लेसेंटा ऊतकों से निकाली गई

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose ...

Chondrogenic Differentiation Induction of Adipose-derived Stem Cells by Centrifugal Gravity

केन्द्रापसारक गुरुत्वाकर्षण से वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं के Chondrogenic भेदभाव प्रेरण

Impaired cartilage cannot heal naturally. Currently, the most advanced therapy for defects in cartilage is the transplantation of chondrocytes ...

Rapid Isolation of BMPR-IB+ Adipose-Derived Stromal Cells for Use in a Calvarial Defect Healing Model

BMPR-आईबी + का तेजी से अलगाव एक calvarial दोष हीलिंग मॉडल में वसा व्युत्पन्न उपयोग के लिए stromal कोशिकाओं

Invasive cancers, major injuries, and infection can cause bone defects that are too large to be reconstructed with preexisting bone from the patient's own ...

Directed Differentiation of Primitive and Definitive Hematopoietic Progenitors from Human Pluripotent Stem Cells

मानव Pluripotent स्टेम सेल से आदिम और निश्चित टेम Progenitors के विभेद का निर्देशन

One of the major goals for regenerative medicine is the generation and maintenance of hematopoietic stem cells (HSCs) derived from human pluripotent stem ...

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

इन विट्रो में कार्यात्मक Cardiomyocyte की तरह कोशिकाओं में मानव Mesenchymal स्टेम कोशिकाओं के भेदभाव

Myocardial infarction and the subsequent ischemic cascade result in the extensive loss of cardiomyocytes, leading to congestive heart failure, the leading ...

Culturing of Retinal Pigment Epithelial Cells on an Ex Vivo Model of Aged Human Bruch's Membrane

Culturing of Retinal Pigment Epithelial Cells on an Ex Vivo Model of Aged Human Bruch's Membrane

वृद्ध मानव Bruch की झिल्ली के एक पूर्व Vivo मॉडल पर रेटिना वर्णक उपकला कोशिकाओं के संवर्धन

Aside from vitamins and antioxidants recommended by the Age-Related Eye Disease Study, there is no effective therapy for &#34;dry,&#34;&#160;or atrophic ...